醇沉和大孔树脂联用精制定志小丸的实验研究

目的:对古方"定志小丸"提取物进行纯化工艺进行了研究。方法:以总多糖含量和总皂苷含量为指标对醇沉和大孔树脂纯化的工艺参数进行了优选。结果:定志小丸的最佳纯化工艺为:先醇沉再过大孔树脂。最佳醇沉条件为浓度1g生药/mL的药液用95醇沉至75,冷藏12h;大孔树脂参数为收集蒸馏水部分3BV,30乙醇洗脱部分3BV弃去,收集60乙醇洗脱部分4BV。结论:采用上述方法纯化的提取物,有效成分含量纯度高、药理实验证明效果显著。     

六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺优选

目的:优化六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺,为该制剂的开发提供参考。方法:以粗多糖质量为指标,采用正交试验考察醇沉浓度、醇沉时间、药液相对密度对总多糖醇沉工艺的影响。在单因素试验基础上,以蛋白质清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,采用正交试验优化三氯乙酸(TCA)-正丁醇法脱蛋白工艺。以色素清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,利用正交试验优化活性炭除色素工艺。结果:最佳醇沉工艺为醇沉浓度85%,醇沉时间6 h,药液相对密度1.05;粗多糖质量8.92 mg。最佳脱蛋白工艺为粗多糖溶液与TCA-正丁醇体积比1∶2,TCA-正丁醇(1∶15),振荡时间20 min,静置时间0.5 h;蛋白质清除率80.23%,总多糖保存率85.45%。最佳除色素工艺为脱色温度40℃,活性炭加入量6%,脱色时间40 min;色素清除率74.84%,总多糖保存率78.69%。结论:优选的精制工艺稳定可行,适用于六味地黄生物制剂总多糖保健产品的开发。     

大孔树脂纯化大蒜总皂苷的工艺优选

目的:优选大蒜总皂苷的大孔树脂纯化工艺.方法:以总皂苷转移率为指标,采用单因素试验考察树脂型号、吸附性能(吸附容量、上样液质量浓度、pH、吸附速度)、洗脱性能(洗脱剂浓度、流速、体积),优选大蒜总皂苷纯化工艺.结果:优选的纯化工艺条件为采用AB-8型大孔树脂,树脂-生药1∶1.3,上样液质量浓度0.8 g·mL-1,pH 7,吸附速度2 BV·h-1,加30％乙醇3 BV除杂,95％乙醇5 BV洗脱,洗脱速度3 BV·h-1,大蒜总皂苷纯度＞65％.结论:AB-8型大孔树脂可用于纯化大蒜提取物中总皂苷,优选的纯化工艺稳定可行.     

土贝母总皂苷大孔树脂分离纯化工艺优选

目的:优选大孔树脂分离纯化土贝母总皂苷的工艺条件.方法:以吸附量和解吸率为考察指标,通过静态和动态试验比较不同型号大孔树脂对土贝母总皂苷的分离纯化性能,选出最佳树脂并对其纯化工艺进行优选.结果:HPD-750型树脂对土贝母总皂苷有较好的吸附分离性能,最佳工艺条件为树脂径高比为1∶5,上样液质量浓度1.6 g·mL-1,最大上样量为13 mL,1 BV水洗除杂,8 BV 95％乙醇洗脱,吸附和洗脱流速均为1 mL· min-1,收集洗脱液,回收乙醇至干,采用紫外分光光度法检测总皂苷质量分数为63.53％.结论:该优选工艺简单易行,能较好地分离纯化土贝母总皂苷.     

西洋参总皂苷的分离纯化工艺

目的:研究大孔吸附树脂法纯化西洋参总皂苷的工艺条件及参数.方法:以西洋参总皂苷含量为指标,考察上样液质量浓度、洗脱溶媒及其用量、除杂溶媒及其用量等条件,优选大孔树脂纯化工艺条件.结果:西洋参总皂苷最佳纯化工艺为0.8 BV上样液(0.5 g·mL-1)通过HPD-300大孔树脂,4 BV水洗,3 BV 10％乙醇洗脱,5 BV 70％乙醇洗脱,收集70％乙醇洗脱液,以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re计总皂苷纯度为50.83％.结论:采用该优选方法可较好地分离、纯化西洋参总皂苷.     

蒺藜总皂苷提取工艺研究

目的:确定合理的蒺藜总皂苷的提取纯化的方法.方法:以分光光度法测定蒺藜总皂苷的含量为指标,采用正交试验设计,对蒺藜水提醇沉液用大孔吸附树脂法富集的工艺进行优选.结果:经多种树脂的比较,AB-8树脂对蒺藜总皂苷有较高的吸附容量,同时采用正交试验,确定AB-8树脂的最佳实验条件.结论:采用AB-8树脂分离纯化蒺藜总皂苷方法可行,确定最佳工艺条件为药液浓度0.500g/mL,流速1.44BV/h;径高比1∶40.     

远志总皂苷大孔吸附树脂纯化工艺研究

目的:优选远志总皂苷大孔树脂纯化工艺。方法:在以细叶远志皂苷的纯度为指标,考察多种型号大孔树脂纯化远志总皂苷的吸附及洗脱条件。结果:HPD-100型大孔吸附树脂为最佳纯化远志总皂苷的大孔树脂。最佳纯化工艺为上样液细叶远志皂苷的质量浓度为0.5 g/ml,以蒸馏水3 BV、30%乙醇、70%乙醇各4 BV以1 BV/h速度依次洗脱,收集70%乙醇洗脱部位。结论:该法工艺可较好地纯化远志总皂苷且稳定可行,为新药研发提供了一定的依据。     

黄花草木犀总皂苷提取纯化工艺优选

目的:优选黄花草木犀总皂苷最佳提取纯化工艺.方法:以黄花草木犀总皂苷含量为考察指标,采用正交试验,研究黄花草木犀最佳提取和纯化工艺.结果:最佳提取工艺为加14倍量70％乙醇提取3次,每次1h;最佳纯化工艺为浓缩浸膏上D101型大孔树脂柱,洗脱剂70％乙醇,吸附流速1 mL·min-1,洗脱流速3 mL·min -,洗脱体积6 BV.结论:黄花草木犀总皂苷优选的提取纯化工艺简便、稳定、可靠.     

大孔树脂对黄芪总皂苷的分离纯化研究

目的:优化黄芪中黄芪总皂苷的分离和纯化工艺。方法:以总皂苷为指标,考察5种商品化大孔树脂(D101、AB-8、HPD300、HPD600、DM130)在静态和动态情况下对黄芪总皂苷的吸附和解吸性能。结果:HPD300树脂纯化效果最好,当按上柱生药量∶树脂量=2∶1的吸附量吸附,4 BV 70%乙醇洗脱时,分离纯化效果最佳。黄芪甲苷的洗脱率达86.5%,纯度为33.8%。结论:优化后的大孔树脂纯化工艺稳定,适于黄芪总皂苷的分离和纯化。     

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊醇提物大孔树脂纯化工艺优选

目的:优选抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊醇提物大孔树脂纯化工艺.方法:以总皂苷、总黄酮和总木脂素含量为指标,考察树脂的吸附和解吸能力,筛选大孔树脂型号,采用单因素试验对最大上样量、上样流速、洗脱溶剂等进行考察.结果:非极性D101型大孔树脂效果最佳,优选的纯化工艺条件为醇提液生药质量浓度0.5 g·mL-1,药材-湿树脂量1∶4,吸附流速2 BV·h-1,3 BV水洗除杂,4 BV 70％乙醇洗脱.在此工艺条件下,总皂苷、总黄酮和总木脂素纯度分别由5.36％,0.3％,2.26％提高到53.82％,3.01％,22.87％.结论:D101型大孔树脂纯化抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊醇提物,方法简便可行,纯化效果好,可推广使用.     

乙醇回流提取黄芪总黄酮最佳温度考察

目的:筛选黄芪总黄酮的最佳回流提取温度。方法:以芦丁的收率为指标,采用平行试验法对黄芪总黄酮提取温度进行优选。结果:乙醇回流提取黄芪总黄酮的最佳温度为80℃。结论:该提取温度符合大生产的要求,可为黄芪总黄酮的提取工艺研究提供科学依据。     

不同包装储藏法对黄芪品质和保质期的影响

目的:采用不同方法包装鲜、干黄芪,以期探寻经济实用的黄芪优质储藏方法.方法:采用单因素完全随机设计,以传统堆放不包装为对照,在储藏过程中观察测定其性状、质量、浸出物和多糖等指标.结果:若对黄芪长期储藏,应选择干燥黄芪清洗真空袋抽气包装储藏,质量损耗小,浸出物和多糖含量高;若对鲜黄芪保鲜储藏,高粱酒清洗真空抽气包装结合低温储藏是较理想的选择,质量损耗较小,保鲜期长,但从多糖和浸出物含量综合考虑,应采用干燥黄芪药材储藏为宜.结论:干燥黄芪长期储藏应采用水清洗真空袋抽气包装,鲜黄芪保鲜储藏应采用高粱酒清洗真空袋抽气包装尽可能低温储藏.     

黄芪对人淋巴细胞,小鼠巨噬细胞和中性粒细胞直接活化作用的研究

采用噻唑蓝(MTT)比色法研究黄芪多糖如黄芪注液液对人淋巴细胞、小鼠巨噬细胞和中性粒细胞直接活化作用。结果表明,黄芪多糖对上述3种细胞无毒性,但直接活化作用不明显;黄芪注射液对3种细胞直接活化作用显著。     

基于位点特异性PCR的黄芪与红芪鉴别方法研究

研究黄芪与红芪药材之间的DNA分子鉴别方法。采集不同产地的黄芪药材30份、红芪28份,所有样品进行总DNA的提取,通过对黄芪及红芪药材trnL-trnF片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物。并对位点特异性PCR方法进行条件优化。通过使用特异性引物对所有样品进行PCR扩增,发现黄芪可扩增出136 bp 片段,红芪可以扩增出323 bp片段。黄芪中掺入10% 以上红芪可以扩增出红芪特异鉴别条带。通过位点特异性PCR的方法实现了黄芪与红芪药材的快速、准确鉴别。     

复方一枝蒿速释微丸的提取工艺优选

目的:优选复方一枝蒿速释微丸的提取工艺.方法:采用正交试验设计,以(R,S)-告依春含量和浸膏得率的综合评分为指标,优选板蓝根和大青叶水提取工艺;以一枝蒿酮酸含量和浸膏得率为评价指标,优选一枝蒿醇提取工艺.采用体外抗病毒药效学试验对优选工艺与原工艺进行对比研究.结果:板蓝根、大青叶的最佳提取工艺为板蓝根加8倍量水浸泡48 h,加人大青叶,提取3次,每次0.5h;一枝蒿最佳提取工艺为加8倍量70％乙醇提取2次,每次1.0h.体外药效学试验表明,优选的提取工艺抗病毒作用效果优于原工艺.结论:优选的提取工艺稳定可行,能较好保留药效成分.     

黄芪提取物对结肠腺癌Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响

目的:探讨黄芪提取物对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响,并探讨其作用机制。方法:采用系统溶剂法提取黄芪各部位,以Caco-2细胞为研究对象,设立空白组和黄芪各提取部位组(乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇4个部位组)。以荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)做为光学探针检测黄芪各提取部位对Caco-2细胞葡萄糖吸收能力的影响。筛选出黄芪中促进Caco-2细胞葡萄糖吸收的药效部位后,对这一药效部位有效作用浓度进行考察。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)法测定Caco-2细胞钠依赖葡萄糖转运蛋白(SGLT1)和2型葡萄糖转运蛋白(GLUT2)蛋白表达。结果:黄芪正丁醇提取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,与空白组比较,黄芪正丁醇提取部位100,150 mg·L-1组Caco-2细胞葡萄糖含量升高(P0.05,P0.01);且黄芪正丁醇部位可以上调Caco-2细胞GLUT2和SGLT1蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:黄芪正丁醇萃取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,这一作用机制可能与SGLT1和GLUT2蛋白的调节有关。     

不同提取方法对黄芪总皂苷含量的影响

目的：优选黄芪总皂苷的提取方法。方法：采用平行试验法,以黄芪甲苷为指标,测定用HPLC-ELSD法测试乙醇回流法和水提醇沉法提取的总皂苷中黄芪甲苷的含量。结果：乙醇回流法比水提醇沉法提取的总皂苷中黄芪甲苷含量高出约40%。结论：乙醇回流法较水提醇沉法提取率高,是黄芪总皂苷的最佳提取工艺。     

寒痹贴的提取工艺优选

目的:优选寒痹贴的最佳提取工艺。方法:草乌以总生物碱的提取量为考察指标,采用正交试验优选醇提工艺;赤芍等6味中药以芍药苷的提取量为考察指标,采用正交试验优选水煎工艺。结果:寒痹贴的最佳提取工艺为草乌加70%乙醇6倍,回流2次,每次2 h;赤芍等药材加水8倍量,煎煮3次,每次1 h。结论:优选出的提取工艺合理、可行,为其生产提供了科学依据。     

超高压提取黄芪甲苷工艺研究

 目的研究超高压提取黄芪药材中皂苷类成分的最佳工艺。方法以黄芪甲苷含量为指标,蒸发光散射检测器(ELSD)进行高效液相色谱检测,正交设计法对提取压力(100,300,500MPa),溶剂中乙醇浓度(50%,70%,90%),溶剂与原料比(10:1,15:1,20:1)以及提取时间(1,3,5min)等影响因素进行考察,确定最优提取条件,并同热回流提取作比较。结果超高压提取黄芪皂苷类成分的最佳工艺为:压力300MPa,溶剂乙醇体积分数70%,溶剂原料比20:1(mL·g^-1),提取时间5min。超高压提取的效率优于热回流提取。结论同热回流方法比较,超高压提取黄芪中皂苷类成分,具有效率高、时间短和能耗低等优点。     

正交设计法优选六月青多糖胶囊提取及醇沉工艺

目的:优选六月青多糖胶囊提取、醇沉工艺条件。方法:以多糖含量为指标,采用正交试验考察料液比、煎煮次数及煎煮时间对六月青多糖胶囊提取工艺的影响;以多糖含量及多糖收率为综合评价指标,选取醇沉时间、醇沉次数、加醇量及醇沉浓度为考察因素,通过正交试验优选醇沉工艺;采用苯酚-浓硫酸法测定总多糖含量。结果:六月青多糖胶囊最佳提取工艺为加10倍量水煎煮3次,每次煎煮2 h。最佳醇沉条件为水提液过滤后浓缩至0.5 g.mL-1,加7倍量95%乙醇沉淀12h,沉淀1次。醇沉后多糖纯度达71.05%,收率6.83%。结论:优选的提取及醇沉工艺条件稳定合理,可为六月青多糖胶囊的生产提供实验依据。