朱砂灌胃给药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的研究

目的:观察中药朱砂ig给药对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性影响。方法:SD雄性大鼠连续ig给药6周后与连续给药2周的雌性交配。每天ig给予朱砂1 000,300,100 mg.kg-13个剂量。雄性给药至交配全部结束。雌性给药至妊娠第6 d。雄性大鼠交配后处死,雌性大鼠妊娠第15 d处死,计算黄体数、着床数、活胎数等,进行血液、生化、尿液及组织病理学检查,并与阴性对照组比较。结果:①雌性大鼠朱砂高剂量组着床前胚胎流失率升高,平均活胎数下降,具有统计意义。雄性大鼠给药组睾丸,附睾,前列腺,精囊腺质量减轻,病理学检查睾丸、附睾和精囊腺萎缩,个别睾丸附睾中无成熟精子。②血液学检查表明,雄性大鼠给药组的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积低于阴性对照组,呈明显的量效关系,具统计意义。③血液生化学检查表明,雄性大鼠组的给药组ALT,AST,TP,ALB,GLO低于阴性对照组,呈明显的量效关系,具统计意义。④雄性大鼠给药组随着朱砂剂量的增加,肝脏质量和脏器系数也随之增加。结论:朱砂可能对雄性大鼠生育力和雌鼠着床与胎仔发育具有一定的毒性反应。朱砂长期给药可抑制雄性大鼠造血功能和可能损伤肝功能。     

丹酚酸B的胚胎-胎仔发育毒性与遗传毒性

目的研究丹酚酸B的生殖毒性及遗传毒性。方法从生殖毒性方面研究丹酚酸B对SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性的影响,于SD大鼠妊娠第6～15天连续灌胃给予(100,300,1200 mg·kg-1·d-1),于妊娠第20天剖检,分析其生殖毒性。分别采用Ames试验、中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验、小鼠骨髓微核试验,观察丹酚酸B的遗传毒性。结果胚胎-胎仔发育毒性试验中,丹酚酸B高剂量组的孕鼠出现毒性反应,中、高剂量的丹酚酸B会影响胎鼠发育。遗传毒性的Ames试验、CHL试验和微核试验均为阴性。结论 300 mg·kg-1及以下剂量的丹酚酸B对SD怀孕大鼠无母体毒性作用。100 mg·kg-1的丹酚酸B对胚胎-胎仔发育无毒性;丹酚酸B未见明显遗传毒性。     

桑叶水提液的急性毒性和遗传毒性研究

目的初步评价桑叶水提液安全性。方法通过小鼠急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌试验(Ames试验)、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,考察桑叶水提液急性毒性和遗传毒性。结果桑叶水提液40 g/kg小鼠灌胃给药未出现死亡,体质量与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。经Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验、小鼠微核试验,桑叶水提液的结果均为阴性。结论本实验条件下,桑叶水提液的小鼠灌胃给药最大给药剂量为40 g/kg,且未表现出遗传毒性。     

辅酶Q10软胶囊的急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性研究

目的:研究辅酶Q10软胶囊的急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性。方法:按《保健食品检验与评价技术规范》2003年版要求进行小鼠急性经口毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验及大鼠灌胃给药30 d的亚急性毒性观察。结果:该辅酶Q10软胶囊对雌雄小鼠LD50均大于20 000 mg·kg-1;Ames试验中受试物各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验中各剂量组微核率、精子畸形率与阴性对照组之间无显著性差异,为阴性。在30 d灌胃给药的亚急性毒性试验期内各实验组动物生长发育良好,体重增重、食物利用率、脏器质量和脏器系数等各项指标均在本实验室正常值范围内。实验组血常规及血生化各指标均在本实验室正常值范围内。病理组织学检查实验组被检脏器未见有意义的病理改变。结论:该辅酶Q10软胶囊为无毒级物质,在所测剂量及检测指标范围内未见明显遗传毒性和亚急性毒性。     

甘肃产艾叶挥发油的化学成分及遗传毒性研究

目的:分析甘肃产艾叶挥发油的主要化学成分,探讨其对小鼠的遗传毒性.方法:①成分分析:用气相色谱-质谱法分析艾叶挥发油的化学成分,用归一化法测定各组分的相对百分含量.②微核试验:选用昆明种孕鼠30只,随机分为5组:正常对照组,ig给予等容积花生油;艾叶油2,1,0.5 mL·kg-1组,ig给予艾叶油;阳性对照组,ip给予环磷酰胺(CP)40 mg·kg-1.正常对照组和艾叶油组自孕第12天开始ig给药,连续5d.阳性对照组于孕第15天ip给予CP,连续2d.各组孕鼠均于孕第16天用药后处死,取小鼠骨髓细胞和胎鼠肝脏做微核试验.③精子畸形试验:昆明种小鼠雄性40只,随机分为5组,各组用药剂量及给药方式同微核试验,均连续5d.首次给药后35 d处死,取出其附睾制片,读取精子畸形率.结果:从甘肃产艾叶挥发油分离出72个峰,其中鉴定了56个成分,占挥发油色谱峰面积的90.83％.艾叶挥发油灌胃剂量2 mL·kg-1时,孕鼠和雄鼠诱发的骨髓微核率、胚胎肝微核率和精于畸形率均较阴性对照组显著升高(P＜0.05).剂量为1 mL·kg-1时,诱发的胚胎肝微核率较阴性对照组显著升高(P＜0.05),骨髓微核率与精子畸形率与阴性对照组相比,无显著性差异.剂量为0.5mL·kg-时,诱发的骨髓微核率、胚胎肝微核率、精子畸形率与阴性对照组相比,均无显著性差异.结论:甘肃产艾叶挥发油的主要成分为桉叶素(20.45％)、蒿醇(12.12％)、樟脑(6.99％)、青蒿酮(5.85％)、左旋龙脑(4.27％)等;一定剂量的艾叶挥发油对小鼠具有潜在的遗传毒性,并呈剂量-反应关系.     

艾叶油对小鼠的遗传毒理学研究

目的:探讨艾叶油对成年小鼠及胚胎鼠的遗传毒性。方法:采用一次性小鼠灌胃急性毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠胚胎肝转移微核试验、小鼠精子畸形试验。结果:艾叶油经小鼠口灌胃给药LD50为4.11ml/kg;艾叶油灌胃剂量2ml/kg时,孕鼠和雄鼠诱发的胚胎肝微核率、骨髓微核率和精子畸形率均较对照组显著升高(P<0.05)。艾叶油灌胃剂量为1ml/kg时,诱发的胚胎肝微核率较对照组显著升高(P<0.05),骨髓微核率与精子畸形率与对照组相比无显著性差异。艾叶油灌胃剂量为0.5ml/kg时,诱发的胚胎肝微核率、骨髓微核率、精子畸形率与对照组相比均无显著性差异。结论:一定剂量的艾叶挥发油对小鼠具有潜在的遗传毒性,并呈剂量-反应关系。     

参力汁保健饮料安全性研究

目的对参力汁的急性毒性、遗传毒性及长期毒性进行研究,评价保健饮料参力汁的安全性。方法用最大耐受量试验(MTD)测定急性毒性;用Ames试验、小鼠精子畸形试验及小鼠骨髓细胞微核试验测定遗传毒性;用大鼠30天喂养试验测定长期毒性。结果最大耐受量试验结果表明,小鼠最大耐受剂量大于22.34 g·kg-1,属于无毒级物质;Ames试验、小鼠精子畸形试验及小鼠骨髓细胞微核试验3项遗传毒性试验结果均为阴性;大鼠30天喂养试验表明,各剂量组动物体重增加、食物利用率、血常规、血清生化指标及脏体比与对照组比较均无显着性差异(P0.05),病理组织学检查主要脏器未发现与样品相关的病理性改变。结论保健饮料参力汁在该实验剂量范围内无毒副作用,无致突变作用,安全性较高,可长期服用。     

黎药经验方的致突变试验研究

目的:考察黎药经验方的遗传毒性。方法:致突变试验采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验)、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸型试验等三项试验。Ames试验:设受试物5个剂量组(即5.000、1.000、0.200、0.040、0.008mg/皿),另设未处理对照组、溶剂对照组和阳性对照组;微核试验:小鼠50只,雌雄各半,设10、5.0、2.5 g/kg·bw剂量组,另设溶剂对照和阳性对照组;精子畸型率试验:昆明种小鼠雄性25只,分组同微核实验,检测精子畸形率。结果:Ames试验中,加或不加S9的情况下,受试物对TA97、TA98、TA100和TA102菌株均未显示致突变作用。与溶剂对照组比较,高、中、低3个剂量的受试物组雄性、雌性小鼠微核试验、小鼠精子畸变率差异无统计学意义(P0.05)。结论:综合考虑前期试验结果及相关研究,在本次实验条件下,在一定剂量范围内,Ames试验、微核试验和小鼠精子畸变试验结果显示阴性,认为该黎药经验方具有遗传毒性的可能性较小。     

高丽红参毒理学研究

目的:观察高丽红参急性毒性、遗传毒性及长期毒性,评价其食用安全性。方法:急性毒性试验采用最大耐受量试验(MTD);遗传毒性试验采用Ames试验、小鼠精子畸形试验及小鼠骨髓细胞微核试验;长期毒性试验灌胃给予大鼠高、中、低(6.0,3.0,1.5g·kg-1)3个剂量高丽红参,每日2次,连续30d,可逆性观察2周。灌服30d及逆性观察2周后,进行血液学、血液生化、脏器系数、组织病理学检查。结果:急性毒性试验未见明显中毒症状,雌、雄大鼠经口最大耐受剂量(MTD)均>12.0g·kg-1。3项遗传毒性试验结果均为阴性。在大鼠30d喂养试验中,6.0,3.0,1.5g·kg-13个剂量组的实验动物均生长发育正常,体质量、进食量、饮水量、血液学、血液生化学、脏器系数及病理组织学相关指标均未见异常变化。结论:高丽红参属于实际无毒物,未见遗传毒性,长期服用是安全的。     

雄黄灌胃给药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的研究

目的观察中药雄黄灌胃(ig)给药对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性影响。方法 SD雌雄大鼠分为阴性对照组,雄黄低、中、高剂量组4组,雄性大鼠连续ig给药6周后与连续给药2周的雌鼠交配,每天ig给予批号为H2007052401雄黄250、125和50 mg.kg-13个剂量。雄性给药至交配全部结束,雌性给药至妊娠第6天。雄鼠交配后处死,雌鼠妊娠第15天处死,计算黄体数、着床数、活胎数等,并与阴性对照组比较。结果雄黄各剂量组动物的交配率、受孕率、活胎率、着床前后丢失率、黄体数、着床数以及生殖脏器方面与阴性对照组比较均未有显著差异;病理组织学方面:所有高剂量组及对照组动物的睾丸、附睾、卵巢未见明显异常。结论批号为H2007052401雄黄在本实验中对大鼠生育力和早期胚胎发育没有明显的毒性作用。     

利眠口服液中异秦皮定薄层扫描测定

用薄层扫描法测定了利眠口服液中刺五加有效成分异秦皮定的含量。测定条件为λ＿ｓ３５０ｎｍ，λ＿Ｒ５００ｎｍ，狭缝１．２ｍｍ×１．２ｍｍ；Ｓ＿ｘ＝３，反射式锯齿扫描。加样回收率为９８．６％，ＲＳＤ＝２．１６％，方法比较可靠。     

菊苣药材中菊苣多糖的含量测定研究

目的:建立菊苣多糖的含量测定方法.方法:采用紫外-可见分光光度法测定菊苣总糖、菊苣还原糖含量,计算得菊苣多糖的含量.结果:菊苣总糖含量测定中,果糖在0.006-0.016 mg/mL范围呈良好的线性关系,回归方程为Y=6.108X-0.026 6(r=0.999 1);菊苣还原糖含量测定中,果糖在0.06～0.11 mg/mL范围呈良好的线性关系,回归方程为Y=1.515 2X-0.258 9(r=0.999 2).结论:本方法能简便有效的定量研究菊苣多糖,可用于完善菊苣药材的质量标准.     

晕痛定胶囊中阿魏酸的含量测定

目的：建立高效液相色谱法测定晕痛定胶囊的含量测定方法。方法：色谱柱为Zorbaxl C18,流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液（1783）,检测波长316 nm,流速为1.0 mL/min。结果：阿魏酸进样量在2.407-24.070 mg/L,范围内线性关系良好（r=0.999 9,n=6）。阿魏酸的平均回收率为99.68%,RSD为0.27%（n=6）。结论：本法简便、准确,重现性好,可作为晕痛定胶囊的质量控制方法。     

荧光标记分析及其在中药材中的应用

论述了荧光分析原理及中药材的荧光特性，阐述了荧光标记分析在中药中的应用概况     

薄层扫描法对癃闭舒胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定

目的：测定癃闭舒胶囊(补骨脂，益母草，琥珀，山慈菇，金钱草和海金沙)中补骨脂素和异补骨脂素的含量。方法：薄层扫描法。结果：测定方法补骨脂素的平均加样回收率为97．4％，RSD=3．06％。异补骨脂素的平均加样回收率为97．6％，RSD=2．72％。结论：本法可以用于该药的质量控制。     

野牡丹中槲皮素的测定

目的:建立野牡丹主要成分的含量测定方法。方法:样品加入甲醇-25%盐酸溶液(4∶1)混合溶液进行水解,采用RP-HPLC方法测定水解后产生的槲皮素。色谱柱为Shimpack VP-ODS(4.6 mm×150 mm,5μm)C18,以甲醇-0.4%磷酸水溶液(50∶50)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为360 nm。结果:槲皮素在21.2～169.6μg·mL-1线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为96.3%,RSD 1.54%。结论:方法简便、准确,可靠,可用于野牡丹中槲皮素的含量测定。     

强力天麻杜仲胶囊含量测定方法的改进

目的：建立高效液相色谱法测定强力天麻杜仲胶囊中天麻素含量的方法。方法：色谱柱为KromasilC18（250.0 mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（3：97）,检测波长：220 nm;流速为1.0 mL/min。结果：天麻素进样量在0.025-0.152μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.15%,RSD为0.55%（n=6）。结论：该方法具有简便、快速、准确,重现性好,与标准法比较无显著性差别,适合于强力天麻杜仲胶囊含量的测定。     

元胡止痛系列制剂中5种有效成分定量测定的研究

目的研究建立元胡止痛系列制剂中(延胡索、白芷)有效成分定量测定的方法,分析各成分之间的关系,比较不同剂型间差异。方法采用HPLC法,固定相C18,乙腈-0.03 mol/L乙酸铵溶液(用冰醋酸调pH6.0)梯度洗脱的方法,测定去氢延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索甲素3种生物碱类,欧前胡素、异欧前胡素两种香豆素类成分。通过对制剂中各成分含有量比值与药材中相应成分含有量比值之间的关系的比较,建立定量测定标准。结果建立的元胡止痛系列制剂中5种有效成分定量测定的方法表明不同剂型间各成分含有量差异明显,但欧前胡素和异欧前胡素比例相对稳定。结论对元胡止痛系列制剂质量监控应测定去氢延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索甲素和欧前胡素。     

Cytotoxicity of Artemisinin,a Dimer of Dihydroartemisinin,Artemisitene and Eupatoriopicrin as Evaluated by the MTT and Clonogenic Assay

Artemisinin and its derivatives possess an endoperoxide bridge, which is thought to lead to the production of free-radical species. The cytotoxicity of some of these agents to a murine Ehrlich ascites (EN19) and a human HeLa S3 cancer cell line was determined using the MTT and the clonogenic assay. The MTT assay cannot distinguish between growth inhibition and cell killing, while the clonogenic assay detects actual cell death. The use of both assays to test a certain drug may give information on the mode of its cytotoxicity (i.e. growth inhibition versus cell killing). The endoperoxides artemisinin and the dimer of dihydroartemisinin showed much higher cytotoxicity in the MTT assay compared with the clonogenic assay. Thus these drugs mainly induced growth inhibition. For artemisitene and eupatoriopicrin, which possess an exocyclic methylene with alkylating properties, both tests yielded comparable results. For these compounds the MTT assay merely determined cell killing. For the reference drugs cisplatin and doxorubicin the MTT assay showed lower cytotoxicity than the clonogenic assay. This may be explained by the metabolic activity of cells that were clonogenically dead. Moreover, our experiments have shown that the MTT assay may lead to misinterpretations concerning the mode of action of certain drugs, when it is used as a substitute for the clonogenic assay.     

中药生物效应鉴定法探索——脑神经系统抑制性递质受体γ-氨基丁酸受体中药活性成分研究

将受体学理论和实验技术引用到中药鉴定研究领域,从受体角度,从中药生物效应入手,提出了中药生物效应鉴定法。即“在中医药理论指导下,以中药的归经、功能主治为线索,通过高效液相、液—质联用、气—质联用等现代分离分析手段和放射性配体-受体结合分析法研究中药活性成分对机体生物分子(受体)的作用,在此基础上建立国际承认的中药质量评价、控制方法,方法的表征体现为有效成分含量或有效成分半数有效浓度EC50值、半效抑制浓度IC50值、表观解离常数Ki值”。本文是继2002年本刊第3期“受体技术与中药研究”一文之后,以脑神经系统抑制性递质受体γ-氨基丁酸受体中药活性成分为研究对象,进一步就中药生物效应鉴定法的技术路线及实验操作进行介绍。