Rho/Rho激酶信号通路在缺氧性肺血管收缩中的机制

目的 探讨15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)致大鼠肺动脉收缩的信号转导途径,阐明15-HETE引起慢性缺氧性肺动脉收缩作用的可能机制.方法 采用组织浴槽血管环方法测量15-HETE对缺氧模型组、正常组大鼠血管收缩作用,并观察加入Rho激酶抑制剂Y-27632后肺动脉环收缩强度的改变,明确Rho/Rho激酶信号转导途径在15-HETE收缩肺动脉中的作用.结果 15-HETE对正常组、缺氧模型组大鼠血管环均有收缩作用,当加入Rho激酶抑制剂Y-27632可明显阻断15-HETE对缺氧大鼠肺动脉的收缩作用(P＜0.05).结论 15-HETE通过Rho/Rho激酶信号转导途径收缩慢性缺氧性大鼠肺动脉.     

PI3K/Akt信号通路在缺氧性肺血管收缩中的机制

目的：探讨15-羟基二十碳四烯酸（15-HETE）致大鼠肺动脉收缩的信号转导途径,阐明15-HETE引起慢性缺氧性肺动脉收缩作用的可能机制。方法：采用组织浴槽血管环方法观察15-HETE对缺氧和正常组大鼠血管收缩的作用,同时观察PI3K/Akt抑制剂LY294002对肺动脉环收缩强度的改变,明确PI3K/Akt信号转导途径在15-HETE收缩肺动脉中的作用。结果：15-HETE对正常组和缺氧模型组大鼠血管环均有收缩作用,加入AKT抑制剂LY294002可明显阻断15-HETE对缺氧大鼠肺动脉的收缩作用（P〈0.05）。结论：15-HETE通过AKT信号转导途径收缩慢性缺氧性大鼠肺动脉。     

缺氧性脑动脉收缩中15-羟二十碳四烯酸对Kv2.1的作用

目的 研究在缺氧性脑动脉收缩中15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetrienoic acid,15-HETE)对Kv2.1通道的表达是否具有调控作用.方法 24只健康Wistar大鼠随机分为3组(n=8):A组为对照组,吸大气,FiO2(氧浓度)为21％;B组为缺氧组,将大鼠置于FiO2为12％的缺氧箱中;C组为15-HETE组,吸大气,FiO2为21％.9天后将大鼠全部处死,游离直径为0.5～1.0 mm的脑动脉;将游离的脑动脉于恒温浴槽中水浴2h,C组浴液中加入15-HETE,使其浓度为10-6 mol/L.分别采用RT-PCR和Western blot技术检测脑动脉上Kv2.1通道mRNA和蛋白质的表达情况.结果 ①缺氧组及15-HETE组脑动脉上Kv2.1通道mRNA的表达明显低于对照组(P＜0.05);②缺氧组及15-HETE组脑动脉上Kv2.1通道蛋白质的表达明显低于对照组(P＜0.05).结论 缺氧可能是通过15-HETE这一介导因子抑制Kv2.1通道,减少脑动脉上功能性Kv2.1通道的数量,导致脑动脉收缩.     

长期吸入一氧化氮对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的影响及毒副作用观察

目的探讨长期吸入一氧化氮(NO)对慢性缺氧性肺动脉高压的影响及其毒副反应.方法从54只Wistar大鼠(雌雄各半)中随机取6只作为正常对照组,其余48只常压缺氧两周复制成慢性缺氧性肺动脉高压模型后分为缺氧组每日继续缺氧6小时;吸入NO组继续缺氧同时每日吸入40ppm(40/106)NO1小时,于第8、15、22、29天分别观察肺动脉压力、右心室肥厚指标、血高铁血红蛋白含量以及肺组织病理学改变.结果(1)缺氧组大鼠肺动脉平均压明显升高,右心室肥厚显著(P均<0.01),而吸入NO组肺动脉压降低,右心室肥厚减轻;(2)吸入NO不同时间组血高铁血红蛋白含量与缺氧组同时间及正常对照组比较无明显升高,且吸入NO各时段组间比较亦无明显差异(P均>0.05);(3)光镜下,缺氧组腺泡内肌型肺动脉增多、无肌肺动脉明显减少,与正常对照组及吸入NO组比较,有显著差异(P<0.01);吸入NO组明显改善三型血管比例失调,阻抑慢性缺氧所造成的腺泡内肺动脉肌化和肌型小动脉中膜增厚,未见明显肺泡水肿、渗出、细胞浸润等NO损伤性改变.结论长期吸入40ppmNO可以减轻大鼠慢性缺氧性肺动脉高压、右心室肥厚以及肺小血管肌化程度,且未见明显毒副作用.     

15-KETE对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钾离子通道的作用

目的 观察15-酮基二十碳四烯酸(15-ketoeicosatetraenoic acid,15-KETE)对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth cells,PASMCs)膜电压门控钾离子通道的活性的影响.方法 将12只雄性SD大鼠随机分成对照组和缺氧组,每组6只.采用急性酶分...     

内源性NO介导肾上腺髓质素对家兔离体缺氧性肺动脉的舒张作用

目的探讨肾上腺髓质素在缺氧性肺血管收缩中的作用及其与内源性NO的关系。方法将制备的离体兔肺动脉环分为单纯缺氧对照组、ADM孵育组、ADM L～NNA孵育组。用离体血管环技术观察肺动脉环收缩张力的变化。结果在常氧条件下 ,经ADM孵育30min后肺动脉环对NA的预收缩反应张力较正常对照组降低21.9 % ;ADM L～NNA共同孵育后的肺动脉环对NA的预收缩张力 (3.07±0.65克·张力/毫克·湿重 )明显高于ADM孵育组 (P<0 01) ,但与正常对照组比较 ,差异无显著性意义 (P>0 05)。NA预收缩的肺动脉环在急性缺氧介质中立即出现明显的缺氧性收缩峰 ,其收缩张力变化为0.44±0.11克·张力 /毫克·湿重 ;经ADM孵育30min的肺动脉环NA预收缩后缺氧性收缩峰的幅度较单纯NA预收缩的肺动脉环降低了36.4 % (P<0 05) ;而ADM L～NNA共同孵育30min的肺动脉环NA预收缩后的缺氧性收缩张力与单纯缺氧组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论在离体条件下 ,ADM可致NA预收缩的肺动脉环缺氧性收缩反应降低 ,L～NNA可逆转ADM降低肺动脉缺氧性收缩反应的作用 ,这种作用可部分是由NO介导的。     

Na+/H+交换器在缺氧性肺动脉高压中的作用

目的:探讨Na+/H+交换器(NHE)在缺氧性肺动脉高压大鼠模型肺动脉平滑肌细胞中的表达.方法:30只Wistar大鼠,随机分为3组,分别为:正常对照组,缺氧3周组和缺氧8周组.分离肺动脉平滑肌,测定细胞内pH(pHi),并提取总RNA,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,比较各组中NHE-1 mRNA的表达.结果:缺氧组肺动脉平滑肌细胞pHi较正常对照组显著增高(P<0.01),NHE-1 mRNA表达也显著高于正常对照组(P<0.01),缺氧两组间差异不显著.结论:Na+/H+交换器参与调节肺动脉平滑肌细胞pHi,从而在缺氧性肺动脉高压形成和发展中可能起重要的作用.     

葛根素对缺氧性肺动脉高压大鼠的保护作用

目的:研究葛根素对缺氧性肺动脉高压的治疗作用及作用机制。方法:采用常压低氧培养箱建立大鼠的缺氧性肺动脉高压模型;60只清洁级SD大鼠,随机分成正常对照组、模型组、葛根素组,各组造模前30 min进行腹腔注射,葛根素组注射葛根素注射液20 mg/kg,正常对照组、模型组注射等体积0.9%Na Cl溶液。正常对照组于实验室正常环境下培养,模型组、葛根素组于缺氧环境下培养3 d、7 d、14 d、21 d后进行检测。测定包括肺动脉平均压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:在常压低氧培养箱中进行大鼠的缺氧性肺动脉高压模型成功建立;模型组mPAP、RVHI、MDA含量显著高于正常对照组,SOD活性明显低于正常对照组(P0.05,P0.01)。与模型组比较,14 d、21 d时葛根素组mPAP、RVHI、MDA含量明显降低,SOD活性明显升高(P0.05,P0.01)。结论:葛根素能有效抑制缺氧导致的肺动脉平均压力增加及氧自由基增加,减轻其肺血管重构的程度,对缺氧性肺动脉高压具有一定的防治作用。     

用肺组织条作缺氧性肺血管收缩反应研究的探索

目的　探索由急性缺氧所致肺组织条张力变化与肺动脉和气管张力变化的关系 ,以探讨用肺组织条研究缺氧性肺血管反应的可行性。方法　因为肺组织条中可收缩的部分主要是血管和气管 ,所以分别做肺组织条、肺动脉、气管的张力实验。纵向剪取Wistar大鼠肺组织条以及肺动脉环 (肺动脉三级分支制成的肺动脉环 )和肺内段气管条悬挂于张力传感器上 ,记录张力变化。结果　急性缺氧使肺组织条及肺动脉环张力增加 ,而气管条张力下降 ,在加入消炎痛阻断前列腺素生成后 ,肺组织条缺氧性收缩反应增强 ,肺血管环缺氧反应也增加 ,而对肺内气管条的缺氧反应无明显影响 ;在加入L -NAME阻断一氧化氮生成后 ,肺组织条和肺血管环缺氧性收缩反应均增强 ,而对肺内气管条的缺氧反应无明显影响 ;在加入 4-AP阻断电压门控钾通道后 ,肺组织条与肺血管环缺氧性收缩反应均下降 ,气管缺氧性舒张反应减弱。结论　必要时可用肺组织条作缺氧性肺血管反应性研究     

缺氧致大鼠心肺组织中apelin的表达降低

目的观察缺氧大鼠心肺组织中新发现的小分子活性肽apelin的变化,探讨其在缺氧性肺动脉高压发生发展中的病理生理学意义.方法雄性SD大鼠20只,分为对照组和缺氧组(9%～11% O2,9 h/d,6 d).导管法测定平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP),称重法测定右心室与左心室加室间隔重量比(RV/LV S).放免法测定血浆、右室心肌及肺组织匀浆apelin水平,RT-PCR检测右室心肌及肺组织apelin mRNA表达的变化.结果①缺氧组大鼠mPAP较对照组高26.06%(P<0.05),RV/LV S较对照组高10.83%(P<0.01).mCAP两组间差异无统计学意义.②缺氧组大鼠右心室肌、肺组织apelin浓度(pg/mg)较对照组分别低16.33%(P<0.05)和14.10%(P<0.01),血浆apelin浓度(pg/ml)两组间差异无统计学意义.③缺氧组大鼠心肌和肺组织apelin mRNA 表达水平较对照组分别低22.95%和22.82%(均P<0.05). 结论缺氧大鼠右室心肌及肺组织局部apelin蛋白和基因表达的显著下降,可能是导致大鼠缺氧性肺动脉高压发生、发展的重要因素之一.     

降落PCR扩增人类常染色体STR D15S128

目的优化PCR程序,尝试用降落PCR扩增人类常染色体STRD15S128。方法用普通PCR和降落PCR扩增人类常染色体STRD15S128。结果普通PCR扩增产物有非特异带,降落PCR无非特异带。结论降落PCR简化了普通PCR中摸索最适退火温度的过程,可以一步找到人类常染色体STRD15S128的退火温度,是一种高效率的PCR方法。     

慢性充血性心力衰竭患者血清生长分化因子-15测定的临床意义

目的探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清生长分化因子-15(GDF-15)水平的变化,并探讨其临床意义。方法选择CHF患者60例,测定血清GDF-15水平变化,并与30名健康对对照组进行比较。结果 CHD患者左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、心胸比值和血清GDF-15明显高于健康对照组,左室射血分数(LVEF)明显低于健康对照组(P<0.01);随着NYHA分级的增高,CHF患者血清GDF-15水平相应提高(P<0.05或0.01);血清GDF-15和LVEF呈负相关(γ=-0.658,P<0.01),和LVEDD、LVESD和心胸比值呈正相关(γ=0.588,0.596,0.621,P<0.01)。结论血清GDF-15可反映心功能的状态,并对CHF的诊断和病情判定有重要意义,有望成为CHF的新生标志物。     

STR基因座D1S518、D4S2639、D15S817汉族人群遗传多态性调查

目的分析武汉地区汉族人群D1S518、D4S2639、D15S8173个短串联重复序列（STR）基因座遗传多态性，探讨其在法医学检验中的应用价值。方法应用PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及银染显带等技术，对各样品进行3个STR基因座分型，调查武汉地区汉族人群3个STR基因座遗传多态性基因频率分布。结果D1S518基因座观察到8个等位基因，24个基因型；D4S2639基因座观察到9个等位基因，32个基因型；D15s817基因座观察到7个等位基因，18个基因型，3个STR基因座的杂合度分别为0．7547、0．8165、0．7602；多态性信息含量分别为0．7290、0．7568、0．7222。结论DIS518、D4S2639、D15S8173个STR基因座基因频率分布与Hardy-Weinberg平衡吻合良好，在武汉地区汉族人群中呈现较高的遗传多态性，属于高信息度遗传标记。     

急性胰腺炎患者血清sTNF-1R和IL-15的变化意义

目的:探讨白细胞介素-15(IL-15)和可溶性肿瘤坏死因子受体-1(sTNF-1R)在急性胰腺炎(AP)发病机制中的作用。方法:采用ELISA法检测19例轻型急性胰腺炎(MAP)患者和7例重症急性胰腺炎(SAP)患者血清IL-15和sTNF-1R的浓度,分析他们之间的相关性。结果:血清IL-15和sTNF-1R的表达在SAP组明显高于MAP组,两组差异显著:IL-15(42.17ng/L±19.15 ng/L vs 5.88 ng/L±2.01 ng/L)(P<0.01);sTNF-1R(6326.94ng/L±3654.73 ng/L vs 832.20 ng/L±329.38 ng/L)(P<0.01)。血清sTNF-1R和IL-15在MAP组及SAP组均呈显著正相关(P<0.01)。结论:血清IL-15和sTNF-1R参与了急性胰腺炎的炎症反应过程,可能是预测急性胰腺炎严重程度的指标。     

NO调控剂(S,S)-ZX-5及其对映体对血管内皮细胞NO释放及eNOS酶活性影响研究

目的：考察（S，S）-ZX-5及其对映体对血管内皮细胞一氧化氮（NO）释放和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性的影响，为开发通过增加NO释放而选择性改善脉络膜血流的药物提供理论依据。方法：采用细胞培齐技术和硝酸还原酶法在体外测定NO的释放量，用同位素方法测定[H^3]L-Arg催化生成[H3]L-Cit量的变化来反映eNOS活性．结果：（S，S）．ZX-5使NO生成显著增加，并与（S，S）-ZX-5的浓度相关，（R，R）-ZX-5对NO生成增加影响不显著；（S，S）-ZX-5显著提高了eNOS酶活性，（R，R）-ZX-5对eNOS酶活性影响不显著。结论：（S，S）-ZX-5改善脉络膜血流的机制可能是通过增强eNOS酶活性，促进细胞内NO释放增加而完成的。     

人IL-15cDNA真核表达载体的构建及其在BEL-7402细胞中的表达

目的：构建人白细胞介素-15（hIL-15）真核表达载体并在肝癌细胞BEL-7402中表达，为进一步研究IL-15的功能及临床应用奠定基础。方法：采用RT-PCR方法自正常成人外周血单核细胞中扩增出hIL-15 cDNA，将其克隆至T-vector中，经测序确证后，将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1hisB中，脂质体法转染BEL-7402细胞进行表达，鉴定表达产物的生物学活性。结果：测序结果与已报道hIL-15cDNA序列一致。脂质体转染后获得6个BEL-7402细胞阳性克隆，IL-15活性测定为156-252u/ml。结论：成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1hisB-IL-15，IL-15cDNA转导的人BEL-7402肝癌细胞可表达有生物活性的IL-15。     

NM21S治疗痛证30例临床观察

笔者自2001年11月～2002年2月，以NM(21)S治疗临床常见的脊柱四肢痛性疾病30例，临床疗效显示，NM(21)S对多种急、慢性痛症有显著的止痛效果，且对某些痛证的原发疾病有确切的治愈作用，现报告如下： 1 临床资料 30例中，门诊患者16例，住院患者14例；男性14例，女性16例；年龄18～60岁，其中18～30岁5例，31～40岁7例，41～50岁10例，51～60岁8例；风湿性关节炎10例，急性扭挫伤9例，腰椎……     

抗变形链球菌IgY抑制变链菌产酸的实验研究

目的：探索抗变链IgY抗体对变链菌的影响及其防龋的机制。方法：通过产酸试验观察各组IgY使用后对变链菌不同菌株产酸的影响。结果：抗变链IgY抗体对C型、G型及C＋G混合变链菌的产酸量的均有影响，随着IgY抗体浓度的升高，其抑制效果逐渐上升（P＜0.05），各组间pH值逐渐增大，最佳抑制浓度为1：2,当IgY抗体的浓度达1：32时，基本无抑制作用（P＞0.05）。结论：抗变链IgY可以抑制变链菌产酸。     

抗变形链球菌鸡卵黄抗体抑制变形链球菌产酸能力研究

目的通过对抗变形链球菌Ⅰ、Ⅲ型鸡卵黄抗体(IgY)影响变形链球菌产酸能力的实验研究,探索抗变形链球菌鸡卵黄抗体防龋的机制。方法用含不同浓度抗变形链球菌鸡卵黄抗体TS培养基厌氧培养变形链球菌S.mutans MT6R(血清C型、遗传Ⅰ型)、远缘链球菌S.Sobrinus 6715(血清g型,遗传Ⅲ型)及其混合菌株,用数值式酸度计检测培养基上清液的pH值。数据作方差分析。结果抗变形链球菌Ⅰ、Ⅲ型鸡卵黄抗体能抑制各实验组细菌培养基pH值的下降,经方差分析,实验组pH值随着特异抗体浓度的增加而上升,其最佳抑制浓度为1:2,此时与对照组比较有非常显著的差异;当抗体浓度为1:32时,其pH值与对照组无显著差异(P>0.05)。结论抗变形链球菌鸡卵黄抗体可以有效抑制变形链球菌利用糖产酸的能力。     

大骨节病区粮水对恒河猴致软骨硫代谢的损害作用

用大骨节病区粮水喂养18个月的恒河猴,出现明显的软骨对硫的利用代谢障碍。表现为软骨中硫酸软骨素对产[~(35)S]的摄取能力下降,尿液氨基多糖中[~(35)S]掺入的比放射性降低,其中以病水组动物表现尤为明显。同时,病理形态学检查猴关节软骨和髓板软骨都出现大骨节病样的软骨细胞坏死。上述猴的硫代谢紊乱性质与以前报告的大白鼠硫代谢变化规律完全相同。