组织工程心脏瓣膜的体内实验

组织工程心脏瓣膜(TEHV)体内实验是TEHV研究的必经阶段。只有通过体内研究才能客观评价瓣膜功能，瓣膜支架降解及炎症反应情况，为将来应用于临床打下基础。本文对目前的研究成果和进展作一综述。     

组织工程心脏瓣膜的体内实验

组织工程心脏瓣膜(TEHV)体内实验是TEHV研究的必经阶段.只有通过体内研究才能客观评价瓣膜功能,瓣膜支架降解及炎症反应情况,为将来应用于临床打下基础.本文对目前的研究成果和进展作一综述.     

组织工程心脏瓣膜的研究进展

心脏瓣膜置换术是治疗心脏瓣膜病的有效方法。目前临床上应用的瓣膜替代物各有缺点:机械瓣需终身抗凝,易致出血、血栓栓塞及感染;生物瓣易退行性变,10~15年需再次手术;而非生长性是以上瓣膜共有的缺陷。随着组织工程技术的发展,运用组织工程学原理构建的组织工程心脏瓣膜(tissu     

心脏瓣膜组织工程研究新进展

瓣膜置换术是目前临床上治疗心脏瓣膜病的最终手段。但临床应用的各种人工心脏瓣膜在持久性和远期疗效上,都存在着难以克服的缺陷。而随着组织工程技术的发展,组织工程瓣膜以良好的组织相容性、经久耐用且具有生物活性等多方面的优势而成为近年来心脏外科领域的研究热点之一。现综述了近年来国外组织工程心脏瓣膜在瓣膜材料、培养方式及种子细胞等方面的最新进展并展望了该领域的研究未来。     

组织工程心脏瓣膜构建的机遇与挑战

随着组织工程学的发展，构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)的研究已取得初步进展，当前TEHV研究的方向主要集中于三个方面：种子细胞、生物材料及组织构建。本文就种子细胞的来源、分离、培养和鉴定，生物材料的种类、要求，TEHV的构建方法和构建环境，和TE-HV的动物实验和临床应用方面的研究进展做一概述。     

组织工程心脏瓣膜研究近况

目前临床使用的人工心脏瓣膜不论是机械瓣还是生物瓣 ,都有其自身无法克服的缺点 ,因而影响了瓣膜的耐久性和远期疗效。随着组织工程学的兴起 ,构建组织工程心脏瓣膜的研究已取得了初步进展。本文综述近年来组织工程心脏瓣膜研究进展情况 ,并从基质材料、种植细胞及动物实验各方面探讨构建组织工程心脏瓣膜的必要性、可行性及前景。     

组织工程心脏瓣膜研究回顾与展望

心脏瓣膜置换是治疗瓣膜性心脏病的有效手段。当前临床应用的心脏瓣膜存在诸多缺点,机械瓣需要抗凝防止血栓形成,同种和异种瓣容易钙化和衰败,在小儿心脏手术中应用明显的受到限制。因此,研制理想的心脏瓣膜是当前心脏外科研究领域中的迫切课题。     

去细胞支架材料构建组织工程心脏瓣膜研究进展

当前所有生物瓣，包括无支架生物瓣共同致命弱点是易钙化、衰坏。提高生物瓣的耐久性是当前研制生物瓣的根本方向。随着组织工程技术的发展，组织工程瓣成为提高生物瓣耐久性新尝试。组织工程心脏瓣膜是应用组织工程学制造出的一种具有细胞活性的新型生物瓣，其原理是利用可吸收的聚合物为支架，再种植细胞包裹瓣叶。因为理想的组织工程瓣膜具有以下特点：组织相容性好、无免疫原性、有活力、耐久性强，并有一定的增长能力和修复能力，所以有着广阔的临床应用前景。如何构建一种良好的组织工程瓣膜，是当前心血管研究领域的热点与前沿。近年来，组织工程瓣，特别是以去细胞基质为支架材料的组织工程瓣的研究取得了一定的进展。     

组织工程心脏瓣膜的研究进展

心脏瓣膜置换术仍然是当前治疗心脏瓣膜病最有效的治疗方法,但目前临床应用的人工心脏瓣膜疗效却不尽如人意。随着组织工程学的兴起与发展,组织工程心脏瓣膜的研究越来越受到关注并成为研究的热点。现对组织工程心脏瓣膜研究在种子细胞的选择、支架材料的选择、瓣膜体外构建方法、动物实验与临床应用等方面取得的进展,进行综述。     

心瓣膜组织工程中种子细胞原代联合培养的实验研究

目的：探讨体外原代联合培养、扩增,鉴定同一来源的人血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞的方法,为组织工程心脏瓣膜的构建提供理想的种子细胞。方法：无菌条件下取冠状动脉旁路移植术中剩余大隐静脉3cm～8cm,组织块培养法原代培养混合血管细胞,DMEM培养液培养、扩增混合血管细胞。倒置显微镜、免疫组化方法对内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞进行鉴定。结果：倒置显微镜显示原代细胞及经传代培养后的细胞,呈现内皮样细胞、成纤维样细胞混合生长的特征。免疫细胞化学检测示内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤维细胞纤维连接蛋白相关抗原呈阳性反应。细胞经3～4次传代,细胞数量可增殖达到8×10~6～10×10~6。结论：使用组织块法原代培养可获得内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞,三种细胞经体外联合培养、传代可以达到组织工程心脏瓣膜种子细胞的足够数量。     

In vivo cellularization of a cross-linked matrix by intraperitoneal implantation: a new tool in heart valve tissue engineering.

AIM: To use in vivo instead of in vitro cell seeding in heart valve tissue engineering. METHODS AND RESULTS: Intraperitoneally preseeded, photo-oxidized bovine pericardial pulmonary valve constructs (group 1) were compared with non-preseeded constructs (group 2) implanted in sheep. All valves functioned normally and were macroscopically intact at explantation [1 week (n = 6) and 1 month (n = 6) in each group], except for one thrombosed leaflet in a group-2 valve at 1 month. Almost 10-fold higher neomatrix deposition and doubling of the leaflet thickness were found in group 1 vs. 2 (P < 0.05). A concomitant significant decrease in leaflet length (15%) was found at 1 month in group 1. The total cross-sectional surface and total amount of collagen of the original matrix remained unchanged in both groups at all times. Immunohistochemistry showed a low immune response, stem/progenitor cell infiltration, appropriated differentiation, and spontaneous endothelialization of the valves. Significantly, increased re-cellularization was found after IP preseeding compared with spontaneous seeding: cell coverage of the leaflet was 71-100 vs. 8-26% (P < 0.05), respectively. CONCLUSION: Complete re-cellularization can be obtained by IP preseeding of an acellularized cross-linked matrix. Well-functioning valve constructs show cellularization and differentiation into myofibroblast phenotype and concomitant neomatrix deposition.     

不同预处理对去细胞瓣细胞黏附率的影响

目的:探讨不同预处理对去细胞瓣细胞黏附率的影响。方法:取新鲜猪主动脉瓣,用胰蛋白酶加TritonX100去除细胞,分别给予磷酸缓冲液(PBS)、多聚赖氨酸(PLL)和未灭活胎牛血清(FBS)包被处理瓣膜。然后种植大鼠主动脉肌成纤维细胞,甲基噻唑基四唑试验检测瓣膜细胞黏附率,并苏木精-伊红染色和扫描电镜形态学观察。结果:FBS处理组的细胞黏附率高于其他两组,光镜和扫描电镜显示肌成纤维细胞在去细胞瓣表面形成连续的细胞层。结论:FBS预处理能较好地改善去细胞瓣的细胞黏附。     

应用犬骨髓间充质干细胞体外构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

目的:将犬骨髓间充质干细胞（BMSCs）分离、自然扩增后,体外与去细胞猪主动脉瓣复合构成组织工程瓣膜（TEHV）,观察其生长情况,以评价其作为组织工程心脏瓣膜种子细胞的可行性。方法:采用密度梯度离心及贴壁筛选法分离犬的BMSCs,培养扩增,用免疫组化的方法进行鉴定;采用本实验室方法构建的生物材料———去细胞猪主动脉瓣为支架,种植犬的BMSCs,静态培养710 d;进行组织学切片及扫描、透射电镜观察,并进行机械力学性能检测。结果:分离的BMSCs细胞免疫组化显示SH2、V im entin、α-SMA（+）,CD34、VIII因子、Lam in in（-）,生长扩增能力强,2周内经3代培养即可扩增到（5.57±0.34）×107细胞数量级;组织工程瓣组织学示活组织和细胞外基质（extracellu larm atrix,ECM）形成;扫描电镜见细胞贴附均匀,透射电镜可见分泌活性的肌纤维细胞样细胞（含actin/myosin纤维、胶原纤维、弹性蛋白）;机械力学性能得到保留。结论:使用本方法可以构建成功组织工程心脏瓣膜;BMSCs与去细胞猪主动脉瓣的相容性良好,可以作为种子细胞之一。     

组织工程心脏瓣叶体外研究瓣叶基质的检测

目的　初步探讨组织工程心脏瓣叶体外生成基质的检测。方法　杂种猪 4只 ,取主动脉。分离并培养、扩增内皮与成纤维、平滑肌细胞 ,将细胞种植在湿化处理后的支架材料上 (聚羟基烷酸酯 ,PHA)。以首次种植成纤维、平滑肌细胞为起点 ,培养 2 8d ,使用氯胺 T法检测样本的羟脯氨酸含量 ,并行扫描电镜检测。结果　氯胺 T法检测羟脯氨酸 ,方法简便 ,准确性高 ,经测定组织工程心脏瓣叶羟脯氨酸含量为 (10 93± 2 89) μg/g(材料重量 )。扫描电镜检测显示细胞表面可见基质的形成。结论　氯胺 T法可精确测定体外培养的组织工程心脏瓣叶胶原含量 ,结合扫描电镜可有效检测基质的生成     

心脏瓣膜置换术后生存质量的多因素分析

目的:探讨心脏瓣膜置换(HVR)术后患的生存质量及影响因素.方法:对聊城市城乡122例HVR术后患的生存质量进行流行病学调查和分析.结果:提取了反映HVR术后生存质量的两个公因子, 测得与生存质量有较大相关的变量为术前病史长短,心功能分级,是否联合瓣膜病变,术后强心利尿药的使用,有无抗凝并发症或其他疾病,结论:HVR术后患生存质量主要受上述因素影响.改善病人的心理状态,选择合适的手术机会有利于患的康复.     

老年心脏瓣膜病变的外科治疗体会

目的 总结老年心脏瓣膜病变的外科治疗经验.方法 回顾性分析160例老年心脏瓣膜病变外科治疗患者的临床资料.行二尖瓣置换（MVR）65例,主动脉瓣置换（AVR）45例,双瓣置换50例;同期行三尖瓣成形术108例,冠状动脉搭桥术19例,左房折叠术4例.结果 手术早期死亡6例,死亡率为3.9%.随访140例,随访时间6个月至8年,死亡2例,其余138例术后随诊复查人工瓣膜功能良好,左心室射血分数（LVEF）提高,心功能均提高1～2级,无瓣周漏、人工瓣膜心内膜炎及心脏血栓形成,没有因瓣膜原因而再次手术者.结论 术前充分调整心功能,选择适当的手术时机,加强术中心肌保护,不断改进和提高手术技巧,加强围术期管理,是提高老年心脏瓣膜病变患者手术成功率的关键因素.     

重症心脏瓣膜置换术的体外循环管理

目的探讨重症瓣膜疾病瓣膜置换术的体外循环方法及效果。方法均采用中低温26℃～31℃体外循环方法。选用膜式氧合器,大剂量胶体预充,冷或温氧合血持续灌注。结果本组体外循环时间为45～223min,心肌阻断时间为21～151min,心脏自动复跳率为85%,死亡2例,约占4%,余康复出院,随访生活质量满意。结论良好的体外循环管理可提高重症心脏瓣膜疾病救治率。     

The design and development of a stented tissue mitral and aortic heart valve replacement for human implantation

A study was conducted into the development of a mitral and aortic heart valve replacement that caters for patients having suffered valve damage due to stenosis or rheumatic fever. The appeal of the valve is that it is constituted from a solid frame housing pericardial tissue leaflets, and allows the patient freedom from post-operative blood-thinning medication. The valve is designed to appeal to patients in developing areas of the world, as it features a clip-in mechanism to secure the valve assembly into the sewing ring, which is stitched in independently of the frame and leaflets. Re-operative valve replacement would then be made possible when the pericardial leaflets began to calcify. Novel aspects of the design added value to the science of heart valve replacements, through the use of sintered chrome cobalt in the valve components, the insights gained into mechanical testing of pericardium, and the patient benefits offered by the complete design. Further work is planned to fatigue test the assembly, undergo animal trials and make the valve available for commercial use.