广东首次从患者血清、大白鼠肺分离出两株流行性出血热病毒的鉴定研究

1990年初广州市某医科大学附属医院显微外科工作人员中,在4天之内先后发生3例流行性出血热(EHF)病人。从病人急性期血清及实验大白鼠肺分离获得两株EHFA(GL、GRL_(10))应用北京病毒所EHV病毒MCAB分型试剂检测,GL、GRL_(10)毒株具有EHF组及家鼠型特异性,属家鼠型病毒。同时从三例患者双份血清检测到恢复期血清抗体滴度有4倍或4倍以上升高;在实验大白鼠也查到EHF抗体。证实是由实验大白鼠引起的EHF爆发。从病人血清及大白鼠肺分离到两株EHF病毒,在广东尚属首次,为广州市EHF监测提供佐证,同时也表明EHF病毒MCAB试剂对分型的鉴别诊断有实用价值。     

长爪沙鼠肾原代细胞的特性和应用

据报道对EHFV敏感的正常动物细胞有黑线姬鼠肺细胞,大白鼠肺细胞,金黄地鼠肾细胞和鸡胚细胞等。我站曾证明长爪沙鼠肾细胞对EHFV敏感,本文重点介绍沙鼠肾细胞(MK)的特性以及在流行性出血热病毒研究中的应用。材料和方法一、病毒株,浙_(10)株自EHF病人血清分离,浙_3、浙_7株自黑线姬鼠肺分离,76118株自南朝鲜黑线姬鼠肺分离,     

广州市实验大白鼠及其接触人员感染流行性出血热的调查

作者于1990年2～6月,对广州实验大白鼠及其接触者进行了EHF感染调查。在25个单位采集了实验大白鼠423只,EHFV抗原阳性率11.8%(50/423),抗体阳性率12.5%(58/463),总感染率12.0%(59/491)。11份EHFV抗原阳性实验大白鼠肺组织,有1份分离出EHFV。在大白鼠饲养室周围捕捉褐家鼠9只,EHFV感染率22.2%(2/9)。在21个单位采集实验大自鼠接触者血清标本89份。EHFV抗体阳性率19.1%(17/89),发病率6.7%(6/17)。其中实验室人员感染率为14.6%(7/48),发病率为8.3%(4/48);饲养员感染率为24.4%(7/48),发病率为4.8%(2/41)。从3份病人血清中1份分离到EHFV。     

汉中地区病人血清分离出流行性出血热病毒

用Vero—E_6细胞直接从陕西汉中地区EHF 患者急性期血清中分离到89-L 株病毒。分离的病毒能在Vero-E_6细胞连续稳定传代,检测10份EHF 病人双份血清抗体滴度均有4倍以上升高,兔抗KHFV-76-118株免疫血清能阻断89-L 株抗原同EHF McAb 4E_7的免疫反应,抗呼肠弧病毒Ⅰ～Ⅲ型免疫血清、抗类环状病毒免疫血清、抗CMV 免疫血清和抗HSV 免疫血清均无此阻断作用;McAb 型别鉴定试验证实为EHF 野鼠型毒株。从陕西汉中地区EHF 患者急性期血清中分离出EHF 病毒,表明该地区是EHF 的又一流行区。     

家鼠型EHFV台41株在沙鼠肾原代细胞上产生血凝素的研究

本文用长爪沙鼠从野、家鼠混合型流行性出血热(EHF)疫区病人血液中分离到的台41株EHFV经陈伯权单克隆抗体及免疫血清血凝抑制抗体分型,属家鼠型EHF病毒;最近我们将该毒株应用于长爪沙鼠肾原代单层细胞(简称沙鼠肾细胞),并对其产生血凝素的特征作了研究。     

流行性出血热病毒(EHFV)感染家猪的实验研究

本实验首次证明家猪为流行性出血热病毒(EHFV)的敏感实验动物,对从啮齿动物和 EHF 患者分离的 EHFV 动物源株和人源毒株均敏感,EHFV 可在猪体内许多组织中复制增殖。家猪接种 EHFV 后第6—9天有一个短暂的发烧期呈现病毒血症。动物源株 R_(22)和人源株 HB55于接种后的第7—11天和7—20天可在组织中,特别是脾和肺中,用直接免疫光技术可检出特异性荧光抗原,并显示不同来源毒株在猪体中维持时间似有差异。亦可在血中检出 EHFV 抗体。家猪感染 EHFV 后的病毒分离也很容易。因此,乳猪可做为 EHFV 的分离和增殖以及疫苗试验的新动物模型。也提示家猪在 EHF 流行病学上的意义不可忽视。     

山东省莒南县流行性出血热病人血清分型及宿主动物的调查研究

本文报道了山东省莒南县流行性出血热(EHF)病人血清分型及宿主动物的调查研究结果。用血凝抑制试验(HI)对262例EHF病人进行血清分型,结果230例为家鼠型病人(87.78%),29例为野鼠型(11.07%),未定型3例(1.15%)。检测该地11种动物的肺组织或血清,从7种动物的肺中检测出EHF病毒抗原,主要是黑线姬鼠、大仓鼠、褐家鼠、猪、羊、家兔和黄鼬等,前4种还同时查出血清抗体。进一步证实鼠类是主要传染源。猪的感染可能与发病有关,但尚待进一步证实。     

从病人血液中分离到流行性出血热病毒毒力的研究

我们用长爪沙鼠从流行性出血热(EHF)住院病人外周静脉血中分离到5株EHF病毒;其中4株是野鼠型EHFV,1株是家鼠型E-HFV。为了分析不同患者分离到不同型别病毒株的毒力情况,探讨病毒毒力与临床病型的关系,我们将5株病毒在乳小白鼠脑内进行了连续传代和半数致死量(LD_(50))等测定,现将结果报告如下: 1 材料与方法 1.1 病毒株来源:见参考文献,5株病毒在长爪沙鼠体内分别传1—3代后,取肺用20％小牛血清Eagle's液研磨制成10％肺悬液作为乳小白鼠脑内接种用病毒标本。     

广州市流行性出血热流行病学调查

1983~84年广州地区共出现了24名血清学证实的EHF病例。调查发现褐家鼠和实验大白鼠均带有EHF抗原,抗原阳性率褐家鼠两年分别为8.6%与11.1%,大白鼠为6.1%,并且从褐家鼠中分离到EHF病毒;带病毒鼠分布在全市各区及郊区、县;人群EHF抗体水平较低,存在着流行的危险性。     

广东省首次从褐家鼠分离出流行性出血热病毒的研究

用Vero E—6纯系细胞,接种EHF病毒相关抗原阳性的褐家鼠(Rattusnorvegicus)肺13份,从中分离得5株可在Vero E—6细胞中连续传代的病原因子,分离阳性率为38.5%。通过以其中一株分离物G9感染的第五代Vero E—6细胞制作抗原片,检测EHF患者恢复期血清12份中有11份免疫荧光阳性(91.7%),而12份非EHF病人血清全部阴性;20例EHF患者双相血清抗体滴度均呈4倍以上增长;与呼肠弧Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒抗血清免疫荧光阴性;G_9病毒与国内已知EHF病毒16、62、S_3、R_1株抗血清有高滴度交叉,并且,可被16、R_1抗血清完全中和其感染性,证明G9等分离物是EHF病毒。另外,G9病毒对5—I UDR不敏感、不耐热(56℃1小时)、不耐酸(PH3.0)、对脂溶剂乙醚敏感,这些理化特性也与EHF病毒完全相符。广东省一九八三年证实存在流行性出血热(EHF)疫源地,并从主要储存宿主褐家鼠(Rattus’norvegicus)肺脏检出EHF病毒相关抗原,其阳性率高达8.6%,但未进行病毒分离。一九八四年二月至六月,我们应用Vero E—6纯系细胞,选择EHF病毒相关抗原阳性的褐家鼠为标本,直接分离EHF病毒获得成功。对其中一株分离物G9进行了较全面的鉴定,本文介绍病毒分离及鉴定结果。     

家鼠型出血热监测的研究

1984年春末夏初,我们随机检测了新安县家鼠型疫区274名正常人的EHFV抗体,3月IgG检出率为11.3%,IgM为0;7月IgG检出率为16.4%,IgM为0.7%。其间GMT无明显变化,抗体阳转者未见EHF感染症状。同时同地对褐家鼠鼠群EHFV带病毒率、抗体阳性率、GMT及其分布变化的逐月监测表明,鼠群在此期间发生了EHFV感染和播散的自限性变化。鼠群EHFV感染的季节性突增,可能与其交配繁殖中广泛、密切的接触有关,这与当地人群EHF流行的季节性变化有一定关系。发现疫区附近家兔和猪的EHFV抗体阳性率分别为5.65%和6.13%,从2只家兔脾中检出了EHFV抗原。     

家猪作为EHF传染源的研究

用ＰＣＲ扩增技术从自然感染ＥＨＦＶ的家猪肺、心、肝、脾、肾和血液、尿液、粪便中检测到ＥＨＦＶ－ＲＮＡ．并分离到ＥＨＦＶ。提示家猪不但可自然感染ＥＨＦＶ，还可能经尿液和粪便将ＥＨＦＶ排出体外。与家猪有密切接触史人群的ＥＨＦ隐性感染率显著高于无密切接触史的人群，提示家猪不但有可能作为Ｅ－ＨＦＶ的宿主动物，还可能作为人群感染ＥＨＦ的传染源。     

江汉平原鼠间流行性出血热感染研究

为了解湖北省江汉平原流行性出血热（ＥＨＦ）疫区鼠间感染状况，采用挖洞法捕鼠，鉴定鼠种、性别和年龄，检查有无皮肤破伤，检测ＥＨＦＶ抗原抗体。结果，黑线姬鼠和褐家鼠占所捕鼠的６９．７％和２３．６％，其ＥＨＦＶ感染率分别为２１．８％和３０．９％。鼠间ＥＨＦＶ感染，成年鼠显著高于亚成年鼠和幼年鼠，感染率分别为４０．８％、１７．０％和１２．４％；皮肤破伤鼠感染率４５．９％，显著高于非皮肤破伤鼠的１３．９％。感染鼠以窝为单位具有明显的窝聚集性，而感染鼠窝在地理空间上则随机分布。感染鼠血清分型，黑线姬鼠以野鼠型为主，少数为未定型；褐家鼠以家鼠型为主，亦有少数未定型。这表明，江汉平原ＥＨＦ疫区是以黑线姬鼠和褐家鼠为主要宿主动物的家野混合型疫区；年龄、皮肤破伤和密切接触是该疫区鼠间ＥＨＦＶ传播的重要因素。     

Complexity of Pseudomonas aeruginosa infection in cystic fibrosis: combined results from esterase electrophoresis and rDNA restriction fragment length polymorphism analysis.

Esterase electrophoretic typing and restriction fragment length polymorphism of ribosomal DNA regions (ribotyping) were used to differentiate 102 Pseudomonas aeruginosa clinical isolates obtained from chronic lung infection in 23 patients with cystic fibrosis (CF) and two reference strains (including the type strain ATCC 10145). Twenty-five zymotypes were obtained with the former method and 16 ribotypes with the latter. Combination of the two typing systems led to the finding of 30 different types. Our data highlights the physiopathological complexity of P. aeruginosa infection in CF as, in six individual cases, several types were found among isolates from a given patient. On the other hand, two unique types were found in two and three patients respectively, raising the possibility of cross-infections.     

河南省开封县啮齿动物分布特征及自然感染EHFV的调查

目的掌握河南省开封县鼠类分布特征,了解鼠类自然感染肾综合征出血热病毒(EHFV)现状,为控制人类出血热疫情提供依据。方法用布夹法开展鼠密度调查,用直接免疫荧光技术进行鼠肺带毒检查。结果共有效布放鼠夹3451夹次,捕获鼠886只,鼠密度为25.67%。带毒50只,鼠类带毒率为5.64%。捕获鼠种有大家鼠、小家鼠、黑线姬鼠、大仓鼠和小仓鼠。结论证实河南省开封县存在肾综合征出血热病毒的自然循环,应采取有效措施控制流行性出血热疫情。     

甘肃省2006-2009年细菌性痢疾耐药谱及脉冲场凝胶电泳分析

目的 对中国甘肃省2006-2009年细菌性痢疾监测点分离到的志贺菌进行耐药谱和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型研究,探讨甘肃省细菌性痢疾的分子流行病学特征.方法 对2006-2009年甘肃省细菌性痢疾监测点分离到的473株志贺菌进行血清型及耐药性分析;采用限制性内切酶对2009年分离的166株志贺菌进行PFGE分型...     

海南省1999年登革热疫区人、畜血清学调查

目的 :加强登革热的监测 ,调查疫区内登革热的流行状况。方法 :采集发热病人及疫区内羊、猪血清 ,应用间接免疫荧光试验检测血清中特异性抗登革热IgG和IgM抗体。 结果 :儋州市采集的发热病人血清IgG抗体阳性率为 41.1% ,IgM抗体阳性率为8.9% ;儋州市、澄迈县采集的羊、猪血清IgG阳性率分别为42 .2 %和 2 3 .3 %。结论 :健康人群中存在隐性感染者 ,是引起暴发流行的重要隐患 ,该地区存在登革热流行的潜在危险。     

广东省食品中单核细胞增多性李斯特菌脉冲场凝胶电泳技术分子分型的研究

目的应用脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）对广东省食品中分离的单核细胞增多性李斯特菌（Lm）进行分子分型,并建立PFGE数据库。方法参照美国PulseNet的Lm PFGE分子分型标准方法进行检测。应用BioNumerics软件对不同食物种类、时间和地点的分离株进行比对,分析菌株之间的相关性。结果107株Lm分成41个PFGE型,型别较为分散;从鸡肉中分离的菌株数最多（37株）,PFGE分型也最多（19个）;冷藏和冷冻食品的分离率较高,其中有26株菌仅存在1-2个电泳条带的差异,相似度极高;韶关和惠州地区分离的Lm存在着地区特异性;随时间变迁,部分菌株仍存在不同程度的相关性。结论广东省食品中分离的Lm在整体上表现出较大的遗传多样性,但部分菌株有不同程度的相关性。     

外斐氏OXk试验在恙虫病暴发调查的价值

目的证实河南省发生的不明原因发热、头痛、皮疹病人的病因。方法对可疑病人进行流行病学调查、用血清学、套式PCR方法检测病人血清抗体滴度、血清型及立克次体特异性基因片段。结果恢复期病人血清外斐氏OXk阳性率100%。11例病人的双份血清抗体呈4倍升高;恙虫病立克次体IFA检测lgM和lgG抗体,20份均为阳性,最高达1∶2560;恙虫病血清学分型G illiam 4例,Karp 6例,Kato 8例。套式PCR检测病人血标本中特异性R tDNA片段,3份阳性;结论外斐氏OXk试验简便、易行,适用于暴发疫情的定性。值得注意的是病人第1周阳性率较低,对高度怀疑恙虫病患者在第1周内OXk阴性,在第(2、3)周再作OXk试验,可以得到明确诊断。     

Listeriosis associated with gorgonzola (Italian blue-veined cheese)

We describe a case of listeriosis in Italy associated with the consumption of cheese. Opened samples of two brands of gorgonzola (Italian blue-veined cheese; referred to as brands "B" and "C") were collected from the patient's refrigerator. Unopened samples of the brand suspected to be the source of infection (brand B) were taken from the store where the cheese had been purchased, other local stores, and the production plant. Listeria monocytogenes serotype 1/2b was isolated from the patient and from the opened and unopened cheese samples. The contamination level varied from <100 to 1,200 cfu g(-1). Molecular typing of the isolates, using both randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), demonstrated that the isolates from the patient's refrigerator, food stores, and production-plant samples were indistinguishable from the clinical isolate. Molecular typing verified the peristence of closely related L. monocytogenes isolates in the production plant B for 5 months. The results stress the importance of developing a code of hygienic practice for preventing, limiting, and where possible, eliminating this pathogen in processed foods and of educating at-risk persons on foods likely to be contaminated.