人类胚胎超快速冷冻保存的初步研究

198 7年 ,Ｔｒｏｕｓｏｎ等[1] 最先用鼠胚建立了胚胎的超快速冷冻方法 ,并认为可获得与常规的慢速冷冻方法相似的冻存效果 ,同时具有耗时短、易操作和花费低等优点。到 1990年才有人类胚胎利用相同冷冻技术保存获得妊娠的报道[2 ] 。我室于 1996年开始在部分因不孕症行体外受精 胚胎移植(ＩＶＦ ＥＴ)者中 ,开展人类胚胎超快速冷冻的研究 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1.研究对象 :选择 1996年 5月～ 1998年 6月在我室接受ＩＶＦ ＥＴ治疗后的 2 1例患者共 6 5个剩余胚胎。2 .方法 :(1)ＩＶＦ ＥＴ :方法见文献 [3]。于取卵后 4 8ｈ…     

体外受精-胚胎移植后异位妊娠12例临床分析

随着助孕技术的应用 ,在ＩＶＦ ＥＴ中胚胎虽被直接置入宫腔内 ,却无法完全避免并发异位妊娠甚至宫内外同时妊娠 ,体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)后异位妊娠 (ＥＰ)发生率有增加趋势[1 ] ,其发生、诊治有一定的特殊性 ,现对ＩＶＦ ＥＴ后ＥＰ12例进行回顾性分析 ,以探讨其发生的高危因素 ,临床特点及早期诊治方法。1　临床资料1.1　一般资料　 1996年 1月至 2 0 0 0年 10月在我院施行ＩＶＦ ＥＴ后妊娠 176例 ,其中发生异位妊娠 12例 ,发生率为 6 .8% ,其中宫内外同时妊娠 1例。患者年龄 2 6～ 37岁 ,均为未产妇 ,不孕 2～ 6年。原发不孕…     

双胎妊娠一胎畸形行选择性减胎术对妊娠结局的影响

多胎妊娠是辅助生育技术的主要并发症之一。研究表明 ,为改善多胎妊娠的结局 ,对多胎妊娠行选择性胚胎减灭术 (减胎术 )是安全有效的 ,减胎术多在妊娠 7～ 12周进行[1] 。我们对在我院行辅助生育技术妊娠的 3例孕 18～ 2 6周的双胎妊娠一胎畸形者行减胎术 ,以探讨在妊娠中期施行减胎术的可行性及对妊娠结局的影响。一、资料和方法1 研究对象 :为 1999年 12月～ 2 0 0 0年 10月在我院生殖医学中心接受辅助生育技术妊娠的 3例双胎妊娠一胎畸形的患者。例 1,32岁 ,行第 2周期常规体外受精 胚胎移植(ＩＶＦ ＥＴ) ,在移植前 2ｈ行部分透明带切割…     

宫腔镜检查在体外受精-胚胎移植中的价值

体外受精 -胚胎移植 (ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｍｂｕｙｏｔｒａｎｓ ｆｅｒ,ＩＶＦ -ＥＴ)的临床受孕率虽经努力 ,但效果仍不如人意 ,导致ＩＶＦ -ＥＴ失败的原因很多且复杂 ,子宫内环境不良是重要原因之一。为探讨宫腔镜在ＩＶＦ -ＥＴ中的价值 ,我们进行了本研究。1　资料与方法1.1　临床资料　有 15 4例不孕患者行宫腔镜检查。检查指征为 ( 1)实施ＩＶＦ前 ;( 2 )子宫输卵管造影 (ＨＳＧ)显示宫腔异常 ;( 3)阴道Ｂ超显示子宫内膜形态异常。患者 2 5～ 37岁 ,不孕 2～ 11年。原发不孕 86例 ,继发不孕 6 8例。1.…     

辅助生育技术进展──囊胚期胚胎培养及移植

黄国宁副主任医师　尽管近20余年来ＩＶＦ-ＥＴ技术已进行很多革新,但胚胎种植率及临床妊娠率仍然很低。由于ＩＶＦ-ＥＴ在通常情况下是将体外培养了2～3天的4～8细胞期的胚胎移植回宫腔,而不象在生理环境下,胚胎在妇女输卵管内发育至囊胚期(第5天左右)才进入子宫腔进一步卵裂、囊胚孵出、着床。所以改变移植回子宫腔的胚胎时期从生殖生理上被认为是提高胚胎种植率的方法之一。(1)囊胚期胚胎移植的优点:①减少移植胚胎数量,降低多胎率。②缩短囊胚移植入子宫腔后胚胎进一步发育与着床之间的间隔,从而减少母-胎相互间的某些不利因素的影响。…     

人植入前胚胎基因表达的调控

以往对人植入前胚胎的筛选主要基于形态学指标 ,随着分子生物学技术在植入前遗传学诊断 (ＰＧＤ)中的应用 ,可以在染色体水平、基因水平上对某些遗传病进行胚胎植入前筛查 ,但应用仅限于遗传病高危人群 ,而体外受精 胚胎移植(ＩＶＦ ＥＴ)中的绝大部分胚胎未得到发育潜能的评估。具有发育潜能的胚胎 ,首先应该是基因表达调控正常的胚胎。研究人植入前胚胎基因表达的调控 ,不仅对于筛选表达活性正常的胚胎 ,进一步提高ＩＶＦ ＥＴ妊娠率具有重要意义 ,同时有助于揭示不孕与不育、早期流产、出生缺陷以及某些疾病早期变化的机理 ,探讨胚胎期…     

影响体外受精-胚胎移植妊娠的相关因素分析

近年来 ,虽然行体外受精 (ＩＶＦ)或卵母细胞浆内单精子注射 (ＩＣＳＩ)受精与胚胎移植 (ＥＴ) (ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ)后的临床妊娠率已有较大幅度的提高 ,但由于患者自身情况和操作技术等因素的影响 ,仍有较大比例的ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ未能妊娠成功。本研究对有关临床和实验资料进行综合分析 ,寻找影响ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ妊娠的临床相关因素。一、资料和方法1 研究对象 :研究对象为 2 0 0 0年 2月～ 2 0 0 1年 1月在本中心完成ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ治疗的患者 887例 ,共进行 947个周期的治疗。2 临床资料收集 :对 887例患者按本中心…     

辅助生育技术进展──胞浆内单精子注射治疗男性不育

邢福祺教授　1992年Ｐａｌｅｒｍｏ在世界上率先报道了应用胞浆内单精子注射(ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ,ＩＣＳＩ)技术获得健康新生儿出生。这一技术的问世为不孕症的治疗,特别是男性原因不育、受精障碍的治疗带来了福音。可谓是ＩＶＦ-ＥＴ技术的一个重大突破性成果。因而这一技术很快在世界范围内普及开来。(1)ＩＣＳＩ的适应证①重症精子减少症;②弱精子症;③受精障碍或受精完全失败。目前一般认为,在精子数量及活动能力基本正常情况下,ＩＶＦ时的受精率小于25%～30%为受精障碍。受精完全失败是指极…     

卵胞浆内单精子注射对胚胎冷冻保存的影响

人类早期胚胎的冷冻保存 (冻存 )可以提高累积妊娠率 ,降低患者的费用。在卵巢过度刺激综合征的治疗周期中 ,冻存新鲜胚胎可避免妊娠加重卵巢过度刺激的危险[1] 。目前进行冻存的胚胎均通过常规体外受精和卵胞浆内单精子注射 (ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ,ＩＣＳＩ)两种方法获得。ＩＣＳＩ操作过程是否会对胚胎的冻存造成影响仍有争议[2 ,3 ] 。我们通过分析冻存胚胎植入的妊娠结局 ,旨在探讨ＩＣＳＩ对胚胎冻存的影响 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1 研究对象及分组 :自 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 0…     

激光辅助孵化胚胎透明带内层方法的临床价值

目的:评估采用新鲜第3天胚胎透明带内层消融与外层消融对反复种植失败患者妊娠结局的影响。方法:将151例反复种植失败的患者分为3组:透明带打通组(52例)进行激光辅助孵化将胚胎透明带打通;透明带外层消融组(49例)进行激光辅助孵化以消融胚胎透明带的外层;透明带内层消融组(50例)进行激光辅助孵化以消融胚胎透明带的内层。比较3组的临床妊娠率、多胎率和种植率。结果:透明带内层消融组的临床妊娠率、种植率和多胎妊娠率均高于透明带外层消融组,差异有统计学意义(P0.05);透明带内层消融组的临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率略高于透明带打通组,但差异无统计学意义。结论:进行激光辅助孵化以消融胚胎透明带内层,显著提高了反复种植失败患者的妊娠率和种植率。     

IVF—ET失败的原因及采取的措施

近十几年来，ＩＶＦ－ＥＴ发展韧带，但临床上活产率仅１０％左右。ＩＶＦ－ＥＴ失败的原因很多，涉及到每一个环节，包括受精率低、胚胎体外发育欠佳、子宫内膜接受能力差以及母俩 分泌失调等诸多因素。针对这些因素，生殖 们采取了一系列的措施。本文对此做一简要综述。     

舒林酸对裸鼠腹腔内人卵巢癌基质金属蛋白酶及其抑制物基因表达的影响

舒林酸能够显著抑制动物及人结直肠癌的发生 ,使家族性直肠息肉退化[1 3 ] ,对乳腺癌等也表现出抑制作用[4] 。本研究通过观察舒林酸对人卵巢浆液性上皮癌细胞株(ＳＫＯＶ3)诱导的裸鼠腹腔内肿瘤基质金属蛋白酶及其组织抑制物基因表达的影响 ,探讨舒林酸的作用机理。一、资料与方法1 材料 :(1)细胞系 :人卵巢浆液性囊腺癌细胞株ＳＫＯＶ3由美国休斯敦安德森癌症中心郁茵华教授惠赠。 (2 )主要试剂 :ＤＭＥＭ细胞培养基、Ｔｒｉｚｏｌ(ＲＮＡ提取试剂 )及逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)试剂均购于美国ＧＩＢＩＣＯＬ公司 ;舒林酸购于中美…     

维生素D代谢产物联合卡铂对人卵巢癌细胞株的作用

近年来 ,有关研究报道 ,肿瘤细胞株中可检测到维生素Ｄ(ＶｉｔＤ)受体 (ＶＤＲ) ,并观察到维生素Ｄ在体内的活性代谢产物 1,2 5 (ＯＨ) 2 ＶｉｔＤ3在许多肿瘤细胞中的抗增殖和诱导分化作用[1 ,2 ] 。本研究通过体外实验 ,观察单用 1,2 5(ＯＨ) 2 ＶｉｔＤ3及其与卡铂联合应用 ,对卵巢癌ＡＯ及ＳＫＯＶ3细胞株增殖的影响。一、材料与方法1.研究材料 :卵巢癌ＳＫＯＶ3细胞株引自中国协和医科大学 ;ＡＯ细胞株引自中国科学院细胞研究所。 1,2 5 (ＯＨ) 2 ＶｉｔＤ3由美国Ｓｉｇｍａ公司生产 ;大鼠抗人 ＶＤＲ ＩｇＧ 2ｂ抗体 (9Ａ7) ,由美国…     

妊娠期尖锐湿疣的诊断和治疗进展

尖锐湿疣 (ＣＡ)是一种ＤＮＡ病毒———人乳头瘤病毒(ＨＰＶ)引起的生殖道性传播疾病 (ＳＴＤ)。近年来ＣＡ发生率迅速增加 ,这是由于ＨＰＶ感染日趋普遍 ,在我国性病检测点报道[1 ,2 ] ,生殖器ＨＰＶ检出率为 30 6 9 10万 ,仅次于淋病 ,占我国ＳＴＤ的第二位 ,而ＣＡ只是ＨＰＶ感染后有症状的部分 ,正如有学者形容ＣＡ为大冰山露出海面的尖峰[1 ] ,Ｆｉｆｅ等[2 ] 报道 :ＣＡ与无症状的ＨＰＶ感染的比率为1∶10。有学者报道[3 ] 在正常无症状的妇女中 ,ＨＰＶ感染率为 5 %～ 40 % ,而妊娠后即可增至 6 0 %以上 ,可见妊娠后有易感ＨＰＶ的…     

辅助生育技术进展──影响体外受精-胚胎移植成功率的因素

梁晓燕教授　在ＩＶＦ-ＥＴ的临床工作中,除患者年龄、实验室中胚胎的质量、移植时间及移植胚胎数目外,仍有较多的因素影响ＩＶＦ-ＥＴ的成功率。①患者的不孕原因,是否合并生殖道感染;②卵巢的储备功能;③个体化的控制性超排卵方案的运用;④取卵的数目及质量,是否合并手术并发症;⑤子宫内膜的同步及接受性,是否存在子宫内膜的病理性改变;⑥胚胎移植的过程;⑦精子的质量。在此,主要讨论子宫腔和子宫内膜状态影响ＩＶＦ-ＥＴ成功率的可能因素,以及关于ＥＴ时操作的有关问题。子宫内膜状态,已有大量的报道,当ＥＴ时,子宫内膜厚度为8～12ｍｍ时…     

黄体酮在体外受精中的应用及安全性

诱发超排卵是体外受精 (ＩＶＦ)的重要步骤之一 ,但它同时也可能导致黄体功能异常[1] ,因此 ,支持黄体功能已成为大多数ＩＶＦ中心治疗的常规。但是否所有的ＩＶＦ周期都需要补充黄体功能目前观点仍不一致。此外 ,由于在 2 0世纪 70年代前后 ,较多文献报道了性激素与胎儿畸形的关系 ,因此 ,人们对孕期较大剂量使用黄体酮是否会引起胎儿畸形还心存疑虑。显然 ,了解黄体酮在ＩＶＦ中的应用情况和安全性十分必要。1　促性腺激素释放激素类似物 (ＧｎＲＨ -ａ)与黄体功能异常1984年Ｐｏｉｒｔｅｒ等首先报道 ,联合使用ＧｎＲＨ -ａ诱发超排卵可…     

细菌性阴道病与早产的研究进展

细菌性阴道病 (ｂａｃｔｅｒｉａｌｖａｇｉｎｏｓｉｓ,ＢＶ)已成为生育年龄妇女最常见的阴道感染 ,妊娠合并ＢＶ的发病率为 6 8%～30 % [1 5] 。有关ＢＶ与早产的关系 ,近几年倍受关注 ,现将有关文献综述报道如下。一、早产的发生率妊娠合并ＢＶ妇女 (ＢＶ孕妇 )和未合并ＢＶ妇女 (非ＢＶ孕妇 )的早产发生率分别为 6 3%～ 6 8%及 1 1%～ 4 2 %。ＢＶ孕妇较非ＢＶ孕妇更易发生早产[6,7] 。Ｒｉｄｕａｎ等[8] 对 490例孕妇进行ＢＶ筛查并随访其预后 ,在 16～ 2 0周诊断为ＢＶ孕妇及非ＢＶ孕妇的早产发生率分别为 2 0 2 %及 11 8%。在 2 8…     

单羊膜囊双胎妊娠四例临床分析

单羊膜囊双胎妊娠极罕见 ,经减胎后存活婴儿出生国内尚未报道。本院近 3年施行常规体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)及卵胞浆内单精子注射 (ＩＣＳＩ ) 10 66个周期 ,临床妊娠42 8个周期 ,双胎妊娠 12 7例 ,其中 2例是单羊膜囊双胎 ,2例是单羊膜囊双胎合并单胎妊娠的三胎 ,单羊膜囊双胎占临床妊娠的 0 9% ,占双胎妊娠 3 1%。现将结果报道如下。一、临床资料例 1　3 2岁 ,结婚 7年未孕 ,双侧输卵管阻塞。丈夫 3 2岁 ,染色体 46,ＸＹ ,严重弱精。于 2 0 0 0年 6月行ＩＣＳＩ助孕。采用黄体期长方案促排卵 ,经阴道Ｂ超取出 7个成熟卵 ,ＩＣＳ…     

抗心磷脂抗体对体外受精—胚胎移植的影响

目的探讨血清抗心磷脂抗体对体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）中胚胎着床的影响。方法采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）对１９９４年１１月至１９９６年５月共１５０个ＩＶＦ－ＥＴ周期（１５０例）中女性血清中抗心磷脂抗体（ＡＣＡ－ＩｇＧ、ＩｇＭ类）进行测定,同时观察ＩＶＦ－ＥＴ周期的妊娠结局。结果２１个ＡＣＡ阳性周期的临床妊娠率为９．５％,明显低于１２９个ＡＣＡ阴性周期的临床妊娠率２６．３％（Ｐ＜０．０５）。１５例生化妊娠者的血清ＡＣＡ阳性率为２０．０％,９９例未妊娠者的ＡＣＡ阳性率为１６．２％,两者ＡＣＡ阳性率均高于３６例临床妊娠者的５．６％（Ｐ＜０．０５）。生化妊娠者与未妊娠者的ＡＣＡ阳性率比较,差异无显著性（Ｐ＞０．２５）。结论女性患者体内ＡＣＡ可能干扰了ＩＶＦ－ＥＴ中胚胎着床和胚胎着床后的早期发育,体内自身抗体的存在也是ＩＶＦ－ＥＴ失败的原因之一。     

胎儿卵巢始基卵泡IGF-IR表达及临床意义

成人卵巢存在由胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ(ＩＧＦ-Ｉ、ＩＧＦ-Ⅱ)及相应受体和胰岛素样生长因子结合蛋白(ＩＧＦＢＰ)组成的旁分泌-自分泌系统,参与卵泡发育和优势卵泡的选择[1,2]。我们采用免疫组化方法检测了44例胎儿卵巢组织中胰岛素样生长因子Ｉ受体(ＩＧＦＩＲ)的表达情况,探讨了它与人类胎儿卵巢分化、发育的关系,现报道如下。1　资料与方法11　临床资料　收集1997年8月至1998年10月浙江大学医学院附属妇产科医院引产的女性胎儿44例,取卵巢组织用10%的中性福尔马林液固定、脱水、石蜡包埋,连续切片厚4μｍ,分别行ＨＥ染色和免疫组化染色…