一氧化氮合成酶基因家族

哺乳动物细胞存有一氧化氮合成酶基因家族，其编码的蛋白为ＮＯＳ蛋白家族。本文综述了ＮＯＳ家族的基因结构、基因表达调控、蛋白结构与功能的研究进展。     

肺组织内一氧化氮合酶阳性细胞观察

为了探讨一氧化氮合酶（ＮＯＳ）是否在肺内存在，取Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，断颈处死取肺，冰冻切片，ＮＡＤＰＨＤ孵育液孵育，经洗，脱水、透明和封片，光镜观察ＮＯＳ阳性细胞。观察发现：在Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺内的各级支气管上皮层内，含有ＮＯＳ阳性细胞。阳性细胞胞浆内含蓝色或深蓝色颗粒，核不着色。ＮＯＳ阳性细胞以细支气管和终末细支气管上皮层内最多且Ｃｌａｒａ细胞是ＮＯＳ阳性细胞。结果提示：肺内含有ＮＯＳ阳性细胞，这一发现为临床治疗支气管哮喘提供了理论依据     

一氧化碳中毒和高压氧治疗前后大鼠脑一氧化氮和一氧化氮合酶活性的变化

目的：观察急性一氧化碳（ＣＯ）中毒大鼠脑组织中一氧化氮（ＮＯ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化及高压氧（ＨＢＯ）对其的影响。方法：建立实验性大鼠ＣＯ中毒模型,采用改良的Ｇｒｉｅｓｓ法、分光光度法分别测定一氧化碳中毒及高压氧或常压氧治疗后大脑和小脑中ＮＯ、ＮＯＳ活性。结果：ＣＯ中毒后小脑ＮＯ明显增加,ＮＯＳ活性受抑制。ＨＢＯ治疗使ＮＯ、ＮＯＳ均恢复到正常水平。ＣＯ中毒后大脑ＮＯ降低,ＮＯＳ活性受抑制。ＨＢＯ治疗使ＮＯ增高,ＮＯＳ活性恢复正常。结论：急性ＣＯ中毒使大脑及小脑ＮＯ、ＮＯＳ活性均发生改变,这种改变可能参与ＣＯ造成的脑损伤。ＨＢＯ治疗有益于对脑ＮＯ、ＮＯＳ变化的调节作用。     

高血压病患者血管平滑肌细胞一氧化氮合酶活性变化和精氨酸 …

目的 探讨高血压病患者动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点和精氨酸加压素（ＡＶＰ）和ＮＯ合成的影响及其在高血压发病中的意义。方法 采用复合胶原酶法分离培养１０例血压正常人动脉ＶＳＭＣｓ,检测细胞培养的ＮＯ含量和ＶＳＭＣｓ的ＮＯＳ活性,以及ＡＶＰ对其活性的影响。结果 （１）高血压病患者ＶＳＭＣｓ的ＮＯ含量和ＶＳＭＣｓ的ＮＯＳ活性,以及ＡＶＰ对其活性的影响     

内皮素对血管平滑肌细胞中一氧化氮合成酶基因表达的影响

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定出一氧化氮合成酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）ｍＲＮＡ不仅在心血管系统细胞中广泛存在，并且发现内皮素可以促进血管平滑肌细胞中ＮＯＳｍＲＮＡ的表达（＋３４．８％），增高血管平滑肌细胞中ＮＯＳ酶活性（＋７４％）。结果提示，由内皮素引起的血管平滑肌细胞中ＮＯＳ基因表达和ＮＯＳ活性的增加，可能是高血压中的一个重要的负反馈因素。     

内皮素和一氧化氮与老年动脉硬化闭塞症相互关系的探讨

目的 从分子生物学角度探讨内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）与动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ）的相互关系。方法 选择９６例ＡＳＯ患者和８６只模型,利用放射免疫、Ｇｒｉｓｓ、光电比色和逆转录ＰＣＲ方法检测血浆ＥＴ、ＮＯ和血管一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、ＥＴｍＲＮＡ和ＮＯＳｍＲＮＡ表达情况。结果 ＡＳＯ患者和模型均存在高ＥＴ血症和低ＮＯ血症,ＡＳＯ病变血管存在低ＮＯＳ活性、低ＮＯＳｍＲＮＡ表达和高ＥＴｍＲＮＡ表     

化学发光法测定大鼠脑组织中一氧化氮合成酶的活性

利用化学发光分析技术建立一种新的一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性测定方法。Ｌ－精氨酸在多种辅助因子的参与下，经ＮＯＳ的催化生成一氧化氮（ＮＯ）。ＮＯ与过氧化氢反应生成过氧亚硝酸，后者能与鲁米诺产生强的发光反应，当ＮＯ浓度为０．１ｐｍｏｌ／Ｌ～１ｎｍｏｌ／Ｌ时，发光强度与ＮＯ浓度成正比；通过测量发光强度来确定ＮＯＳ的活性。用该方法重复测量１０只大鼠脑组织中的ＮＯＳ活性，其测定值为：（２８．３±６．９）ｐｍｏｌＮＯ／Ｌ／ｍｇ蛋白／ｍｉｎ；稳定性较好。此方法避免了同位素方法的繁琐及放射性污染，是一种简便易行的ＮＯＳ活性测定方法     

鼠脑线粒体一氧化氮的生成

目前已知细胞产生一氧化氮(ＮＯ)主要由存在于胞浆的一氧化氮合酶(ＮＯＳ)催化Ｌ精氨酸(ＬＡｒｇ)生成。最近,Ｇｉｕｌｉｖｉ等[1]发现,分离的大鼠肝线粒体能独立合成ＮＯ,并提取和纯化出线粒体ＮＯＳ。Ｂａｔｅｓ等[2]用免疫组织化学技术发现大鼠脑的线粒体内膜存在ＮＯＳ或其抗原相关蛋白,而ＮＯＳ激活所必需的底物及辅助因子亦存在于脑神经元的线粒体内。由此我们推测脑线粒体存在有独立于胞浆的ＬＡｒｇ/ＮＯＳ/ＮＯ系统,该系统对线粒体的生理及病理生理活动可能具有重要意义。我们在分离和纯化的大鼠脑线粒体上用光谱技术直接检测脑线…     

老年戊型病毒肝炎患者血清一氧化氮等自由基及sIL—2R的检测

为检测４５例老年戊型病毒性肝炎血清ＮＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ和ｓＩＬ－２Ｒ的水平，探讨其在老年肝炎中的临床意义。采用分光光度比色分析法检测ＮＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ同时用ＥＬＩＳＡ法检测ｓＩＬ－２Ｒ的水平。结果提示老年戊型肝炎患者血清ＳＯＤ降低、ＮＯ、ＭＤＡ和ｓＩＬ－２Ｒ升高。     

一氧化氮抑制单核—内皮细胞粘附的机制

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）抑制单核－内皮细胞粘附的机制。方法：以普钠作为ＮＯ的供体，用细胞粘附实验，流式细胞仪荧光强度测定，细胞ＥＬＩＳＡ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ等方法分别从细胞，蛋白表达，基因表达方面研究ＮＯ对内皮细胞粘附分子（ｖａｓｃｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＶＣＡＭ－１）表达的影响，结果：ＮＯ抑制ＩＬ－１α诱导的单核－内皮细胞粘附，抑制ＩＬ－１α诱发的ＶＣＡＭ－１的     

G蛋白反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

使用硫代修饰的Ｇ蛋白（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白）反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ）作用于含２０％胎牛血清ＤＭＥ培养液培养基的血管平滑肌细胞（ｖＳＭＣ）。通过细胞计数和免疫细胞化学方法，观察了Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ对ｖＳＭＣ增殖和ＰＣＮＡ表达的影响。结果表明，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ联合应用能明显抑制ｖＳＭＣ增殖；免疫细胞化学分析亦显示ｖＳＭＣ中ＰＣＮＡ蛋白表达显著减少。而相同浓度的正义ＯＤＮｓ只有微小抑制作用。结果提示，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能应用于防治临床血管活性物质依赖性细胞增生性疾病的研究。     

一氧化碳中毒和高压氧治疗前后大鼠脑一氧化氮和一氧化氮合酶 …

目的：观察急性一氧化碳中毒大鼠脑组织中一氧化氮，一氧化氮合酶活性的变化及高压氧对其的影响。方法；建立实验性大鼠ＣＯ中毒模型，采用改良的Ｇｒｉｅｓｓ法，分类光度法分别测定的氧化碳中毒及高压氧或常压氧治疗后大脑和小脑中ＮＯ，ＮＯＳ活性。结果；ＣＯ中毒后小脑ＮＯ明显增加，ＮＯＳ活性受抑制。     

小儿肾小球疾病血清一氧化氮变化的研究

采用镉还原和Ｇｒｉｅｓｓ反应法，测定１６例原发性单纯性肾病综合征（ＩＮＳ）、２０例急性肾小球肾炎（ＡＧＮ）和２６例过敏性紫＊（ＨＳＰ）病儿血清中一氧化氮（ＮＯ）的稳定代谢产物ＮＯ２＋ＮＯ３浓度。结果发现三种肾小球疾病病儿血清ＮＯ与５２例健康儿童比较分别有不同程度变化；ＩＮＳ活动期较ＡＧＮ急性期显著增高；ＨＳＰ中有肾损害表现病儿明显高于无肾损害表现病儿．本研究提示，血清ＮＯ水平变化与肾小球疾病的不同病因及病理损伤有关；测定血清ＮＯ可能有助于鉴别ＩＮＳ与ＡＧＮ以及其它炎症性肾小球疾病，可能对判断ＨＳＰ的病情严重程度及指导治疗有一定参考价值。     

一氧化氮合成酶mRNA在中枢和外周组织中的表达和分布

应用反转录－聚合酶链式反应（ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ一ＰｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ一ＰＣＲ）方法，亚克隆出大鼠小脑和肾脏ＮＯＳｃＤＮＡ，并以此为探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和定量ＰＣＲ方法，测定大鼠中枢和外周一些组织中ＮＯＳｍＲＮＡ的含量，证明ＮＯＳｍＲＮＡ广泛存在于中枢和外周组织中，在中枢以小脑含量为最高，在外周组织中以肾脏含量为最高；定量ＰＣＲ方法测定ＮＯＳｍＲＮＡ较Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析更为灵敏。     

一氧化氮与肿瘤研究进展

一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)是近年来发现的生物体内重要的信使分子 ,它参与多种疾病的病理生理过程。ＮＯ是由一氧化氮合酶 (ＮＯｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ)介导 ,以Ｌ -精氨酸 (Ｌ -Ａｒｇ)和分子氧为底物合成的一种小分子气体自由基。ＮＯＳ有 3种亚型 :内皮型 (ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＮＯＳ ,ｅＮＯＳ)、诱导型 (ｉｎ ｄｕｃｉｂｌｅＮＯＳ ,ｉＮＯＳ)和神经型 (ｎｅｕｒｏｎａｌＮＯＳ ,ｎＮＯＳ)。ＮＯＳ不仅存在于人和动物的正常组织 ,包括免疫细胞 (如巨噬细胞 ) ,还存在于许多肿瘤细胞和实体瘤组织中。大量研究表明 ,…     

内源性一氧化碳与一氧化氮在高血压发病中的相互作用

目的;研究一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）／一氧化碳（ｎｉｃｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ,ＮＯ）系统和血红素加氧酶（ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ,ＨＯ）／一氧化碳（ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ,ＣＯ）系统在高血压机机制中的作用及其相互关系。方法：采用ＮＯＳ抑制剂诱导大鼠高血压模型,观察大鼠动脉血压,主动脉组织ＮＯＳ,ＨＯ活性和ＣＯ产生释放的变化。结果;大鼠在注身     

心肌顿抑组织一氧化氮含量的变化

目的 探讨心肌顿抑（ＭＳ）时局部组织一氧化氮（ＮＯ）含量的变化。方法 开胸阻断犬左前降体（ＬＡＤ）１５ｍｉｎ,实验组分别再灌注ＮＯ合成前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）、供体Ｓｉｎ－１、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ,通过将ＮＯ检测电极与左室前壁ＭＳ组织流出血液密切接触的直接测定法及用Ｇｒｅｉｓｓ法检测冠状窦血样的间接测定法,观察ＭＳ组织ＮＯ含量的变化。结果 ＭＳ组织ＮＯ含量降低,再灌注Ｌ－Ａ     

老年记忆减退大鼠NO2^—含量和NOS活性的变化

目的：同时测定老年性记忆减退大鼠一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性和一氧化氮（ＮＯ）的终末代谢产物亚硝酸盐含量（ＮＯ２＾－），研究ＮＯ与老年记减退发生的关系，为探讨老年性记忆减退发生的机制及寻找新的治疗方法提供理论依据。方法：用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫将老年大鼠（２４月龄）筛选为记忆正常和记忆减退两组，以老年记忆减退大鼠作为老年记忆减退模型；用双波长分光光度法测定一氧化氮合酶（ＮＯＳ）比活性；用改良硝酸还原酶法     

NO含量与NOS活力对ALT与AST活力影响的研究

目的 研究一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ;ＮＯ）与一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ;ＮＯＳ）活力对丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）与天冬氨酸氨酶（ＡＳＴ）活力的影响并探讨其机制。方法 对大鼠腹腔注射Ｌ－Ａｒｇ,４ｈ后采血取肝检测ＮＯ含量,ＮＯＳ活力、ＡＬＴ及ＡＳＴ活力并与对照组大鼠对比,ＮＯ定量用硝酸还原酶法、ＮＯＳ测定用分光光度法、ＡＬＴ与ＡＳＴ测定用改良赖氏法（２,４－二硝基苯     

一氧化氮合酶在卵巢肿瘤中的检测及意义

目的：检测正常卵巢组织,卵巢良性肿瘤组织,卵巢恶性肿瘤组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的比活性,探讨ＮＯＳ与卵巢肿瘤间的关系。方法：ＮＯＳ活性用分光光度法检测。蛋白含量用酚试剂法检测。结果：卵巢恶性肿瘤组织中ＮＯＳ含量显著增高（Ｐ＜０．０１,卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中的ＮＯＳ含量无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。卵巢恶性肿瘤组织中高、中、低分化随恶性程度升高,ＮＯＳ含量增多（Ｐ＜０．０１）,与恶性程度呈正相关。结论：ＮＯ合成的增多,可能是卵巢恶性肿瘤发生及生长过程中的一个重要环节,卵巢恶性肿瘤组织中ＮＯＳ含量增高是ＮＯ合成增多的重要原因之一