隐球菌抗原-胶体金免疫层析法在隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎诊断中的应用价值

目的探讨胶体金检测隐球菌荚膜多糖抗原对隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎的诊断价值。方法选取2017年1月-12月南昌大学第一附属医院548例疑似隐球菌性肺炎患者与414例疑似隐球菌性脑膜炎患者为研究对象,分析应用胶体金免疫层析法检测患者隐球菌荚膜多糖抗原对隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 962例患者经病理活检或培养阳性或墨汁染色确诊为隐球菌性肺炎36例,隐球菌性脑膜炎38例;胶体金免疫层析法诊断隐球菌性肺炎的敏感性和特异性分别为91.67%和99.61%,阳性预测值和阴性预测值分别为94.29%和99.42%;诊断隐球菌性脑膜炎的敏感性和特异性分别为97.37%和99.73%,阳性预测值和阴性预测值分别为97.37%和99.73%。结论胶体金免疫层析法具有准确率高、快速简便的特点,可作为隐球菌性脑膜炎和隐球菌性肺炎的辅助诊断,具有一定的临床应用价值。     

应用肺泡灌洗液荚膜多糖抗原早期诊断肺隐球菌病一例

报道1例应用胶体金免疫层析法(LFA)检测肺泡灌洗液(BALF)隐球菌荚膜多糖抗原早期诊断肺隐球菌病的病例,为肺隐球菌病的诊断提供参考.本例患者仅存在隐球菌肺部感染,入院时LFA对血清荚膜多糖抗原检测结果为阴性,但对BALF荚膜多糖抗原检测结果为阳性,考虑相比血清,BALF中可检测的荚膜多糖抗原较早出现阳性.故LFA检...     

巨噬细胞在新生隐球菌感染过程中的作用及机制概述

 

新生隐球菌（Cryptococcus neoformans,C. neoformans）是一种酵母样真菌,既可引起肺组织感染,也可引起危及生命的脑膜脑炎。当新生隐球菌感染人体后,巨噬细胞作为第一道免疫防线,迅速识别、吞噬及破坏病原体。新生隐球菌与巨噬细胞相互作用的不同结果会导致疾病向不同的结局发展,了解这些作用机制对于隐球菌病的防治起到关键作用。本文就新生隐球菌感染期间与巨噬细胞的相互作用及内在分子机制作一综述,以期为疫苗研制及免疫疗法提供理论基础和方向。

     

肺隐球菌病22例临床分析

肺隐球菌病（Pulmonary Cryptococcosis,PC）是由新生隐球菌及其变种感染所引起的急性、亚急性或慢性肺部真菌感染。在肺部真菌病中,发病率仅次于肺曲菌病。随着近年来广谱抗生素、免疫抑制剂、糖皮质激素和抗肿瘤药物等的广泛使用,移植手术的开展,以及临床及实验室的重视,肺隐球菌病的发病率有上升趋势。本文回顾性分析我院2003—2008年1月经病理确诊并治疗的22例肺隐球菌病患者的相关资料,以提高临床医生对本病的诊治水平。     

肺隐球菌病诊断中CT联合隐球菌抗原检测的作用

目的：研究肺隐球菌病患者采用隐球菌抗原检测联合CT引导下经皮穿刺肺活检对病情进行诊断的临床价值。方法：选择2020年1月～2022年12月在本院接受治疗的肺隐球菌病疑似患者68例,在患者接受手术治疗前,首先以CT引导下经皮穿刺肺活检技术对病情进行检查,定义为甲组,再采用隐球菌抗原检测方式进行检查,定义为乙组,将联合检测作为丙组。所有研究对象在手术后均接受组织病理学检查（作为金标准）。对比以下观察指标：(1)各组检测结果;(2)三组检查敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值;(3)各组检查操作时间和病情确诊时间。结果：(1)丙组检查操作时间长于乙组,组间数据比较差异有统计学意义,P<0.05,乙组略长于甲组,组间数据比较差异无统计学意义,P>0.05;丙组病情确诊时间短于乙组,组间数据比较差异有统计学意义,P<0.05,乙组略短于甲组,组间数据比较差异无统计学意义,P>0.05;(2)术后组织病理学检查证实,存在阳性病例61例,阴性病例7例,所占比例分别为89.71%和10.29%。甲组阳性53例,占比77.94%,乙组55例,占比80.88%,丙组60例...     

广西贵港地区2009－2012年新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株基因分型与毒力特性研究

目的 研究广西贵港地区新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株, 在种、基因型和交配型的构成及毒力特性。方法 收集2009－2012年广西贵港地区临床分离的新生隐球菌株20株, PCR扩增转录间隔区(ITS)序列进行分子生物学验证, 通过特异性引物进行PCR扩增, 鉴定血清型、交配型。利用M13-PCR指纹图谱法和URA5-限制性片段长度多态性分析法, 鉴定和验证基因型。表型研究包括37 ℃生长试验、黑色素生成试验和尿素酶试验。结果 20株有19株为新生隐球菌格鲁比变种, 血清型为A型, α交配型, 基因型为VNⅠ型。1株为格特隐球菌, 属α交配型, 基因型VGⅠ。毒力特性研究结果显示, 所有临床分离株37 ℃正常生长, 黑色素试验、尿素酶试验阳性。结论 广西贵港地区隐球菌致病菌株中绝大多数(95%)为新生隐球菌格鲁比变种、血清型为A型, α交配型, 基因型为VNⅠ型, 并发现格特隐球菌菌株。     

肺隐球菌病28例临床特点分析

目的 总结分析28例肺隐球菌病患者的临床特点,以提高对本病的认识.方法 总结经病理确诊为肺隐球菌病住院患者28例,分析其临床表现、实验室检查、影像学特点、诊断方法 及治疗情况.结果 28例肺隐球菌病,男19例,女9例,年龄18～66岁,有基础疾病者13例,有临床症状者22例.外周血淋巴细胞分类CD4降低3例(10.7%),血隐球菌乳胶凝集试验阳性27例(96.4%),活检肺组织涂片或痰涂片找到隐球菌孢子各1例(3.6%),活检肺组织培养或痰培养隐球菌阳性分别为4例(14.2%)和1例(3.6%).影像学表现为结节团块型18例,渗出实变型6例,混合型4例.纤支镜肺活检证实7例(25%),CT引导下经皮肺穿刺活检证实20例(71.4%),手术证实1例(3.6%).使用氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B等药物抗真菌治疗,均治愈或好转,疗程4周至2年不等.结论 肺隐球菌病临床表现无特异性,标本涂片及培养阳性率均低,影像学改变多样化,误诊率高,确诊有赖于病理,血隐球菌乳胶凝集试验是有价值的实验室辅助检查,患者宜足疗程全身抗真菌治疗.     

HIV抗体阴性的肺隐球菌病临床特点分析

目的 探讨HIV抗体阴性的肺隐球菌病(PC)的临床特点及影像学表现等,提高对该病的认识.方法 回顾性分析14例HIV抗体阴性的PC患者的临床资料.结果 14例PC中免疫功能正常6例,有基础疾病8例.有症状12例,主要为发热、咳嗽、咳痰等.合并隐球菌性脑膜炎2例.影像学表现主要可分为:结节、团块型6例,片絮、斑片型3例,混合型5例.14例均经病理确诊.单纯药物治疗11例,手术+药物治疗1例,症状缓解11例,未治2例,未愈1例.结论 PC 临床表现缺乏特异性,非免疫缺陷的人群中也应提高诊断意识,避免误诊,尽早治疗.     

28例免疫功能基本正常儿童肺隐球菌病的临床特征及流行病学调查

目的探讨免疫功能基本正常儿童肺隐球菌病的临床特征及流行病学特征。方法选取2015年1月—2022年9月湖州及周边地区医院的28例免疫功能基本正常儿童肺隐球菌病患者为研究对象,收集所有患儿临床资料,回顾性分析临床特征、影像学表现及预后情况。结果在入组的28例患儿中,男孩19例(67.9%),女孩9例(32.1%);年龄1~3岁7例(25.0%),3~6岁8例(28.6%),>6岁13例(46.4%)。临床症状表现以咳嗽为主,有14例(50.0%),其次为恶心呕吐8例(28.6%)、高热6例(21.4%),无症状的患者有8例(28.6%)。不同性别、不同年龄阶段患儿的临床症状表现比较差异无统计学意义(P>0.05)。影像学形态特征分析显示,入组的28例患儿中,病灶形态为单发型13例(46.4%)、多发型8例(28.6%)、混合型2例(7.1%)、肺炎型5例(17.9%)。单发型病灶影像学征象以边缘平直征(13例,100.0%)、晕轮征(11例,84.6%)、胸膜凹陷征(7例,53.8%)为主,多发型病灶影像学征象以蘑菇兄弟征(6例,75.0%)、晕轮征(5例,62.5%)及边缘平直征(4例,50.0%)为主,肺炎型病灶影像学征象以支气管充气征(5例,100.0%)为主。不同形态特征病灶的边缘平直征、晕轮征、蘑菇兄弟征、支气管充气征比较差异有统计学意义(P<0.05)。肺隐球菌病患儿可疑环境接触史以鸽子(10例,35.7%)、宠物或家禽(6例,21.4%)为主,其次为可疑土壤(3例,10.7%)和鸟禽类粪便(2例,7.1%)。实验室检测结果显示,免疫功能基本正常的肺隐球菌病患儿存在明显的CRP升高(20例,71.4%)和血沉异常(11例,39.3%)。25例均完成治疗,有14例接受氟康唑治疗,8例接受伏立康唑治疗,3例接受两性B霉素+氟胞嘧啶+氟康唑序贯治疗,3例患者未接受治疗,仅随访观察。不同治疗方式对肺隐球菌病的治疗有效率和疾病控制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺隐球菌病可发生于免疫功能基本正常、无可疑环境接触史的儿童,但临床症状表现无明显特异性,需要借助影像学检查、实验室检查进行辅助诊断。     

云南省艾滋病患者分离新生隐球菌的药物敏感性检测与分析

目的了解云南省艾滋病患者分离新生隐球菌的药物敏感性情况。方法采用比色微量稀释法,对2007年8月—2018年7月云南省传染病医院住院艾滋病患者标本分离的304株新生隐球菌进行药敏试验,检测6种常用抗隐球菌药物的敏感性。结果药敏结果显示:两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑及泊沙康唑MIC_(50)分别为1、2、4、0.03、0.06、0.12μg/mL,MIC_(90)分别为1、4、8、0.06、0.12、0.25μg/mL,几何均数分别为0.75、2.32、3.28、0.039、0.053、0.09μg/mL。在6种抗真菌药物中,新生隐球菌对伏立康唑和两性霉素B的耐药率为1.32%,5-氟胞嘧啶的耐药率为0.33%,未发现对伊曲康唑和氟康唑产生耐药的菌株。结论云南省艾滋病患者分离的新生隐球菌对不同药物敏感性有差异,可为临床选药提供参考。     

两种丙型肝炎抗体检测方法的结果比较

丙型肝炎是流行广泛、危害严重的传染性疾病,我国人群感染率为3．1％。丙型肝炎抗体（抗HCV抗体）检测是目前诊断丙型肝炎的常有指标。为了寻找一种能用于流行病学调查和高危人群、献血员、孕妇等体检的操作简便,成本较低的抗HCV抗体检测方法,笔者对70例丙型肝炎患者分别采用酶联免疫法（ELISA）和胶体金免疫层析法（GICA）进行了抗HCV抗体检测比较,现报道如下。     

一种快速检测甲型流感病毒方法的建立

目的 建立一种用于甲型流感病毒抗原检测的基于胶体金免疫层析法的快速、简便试剂盒。方法 以柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记一种抗甲型流感病毒单克隆抗体。硝酸纤维素膜上包被另一种抗甲型流感病毒单克隆抗体,制成免疫层析试纸。待测样品中的甲型流感病毒首先与胶体金标记抗体结合,然后移动至硝酸纤维素膜上与固定的单克隆抗体发生反应,形成肉眼可见的红色带。结果 本试纸与不同浓度甲型流感病毒培养液均能发生特异性反应,与乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒等16种病原体无交叉反应。用甲型流感病毒培养液不同浓度标本与美国同类产品比较,灵敏度相同。稳定性检测显示42 ℃和37 ℃热破坏放置结果均优于美国同类产品。临床比对结果评价kappa值为0.976,一致性非常高。结论 试纸条灵敏度和特异性能够达到临床使用的要求,并具有简便快速、无需特殊仪器设备等优点,对甲型流感的诊断和流行病学调查具有十分重要的应用价值。     

四种梅毒血清学检测方法临床应用评价

目的:了解快速血浆反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附试验(ELISA)的临床应用和价值。方法:采用RPR、TPPA、胶体金法和ELISA同时对4241例监测对象的标本进行检测,以TPPA作为参考标准,分别统计RPR、胶体金法和ELISA的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果:RPR、胶体金法、ELISA诊断梅毒的敏感性分别为66.80%、97.27%、98.18%,特异性分别为99.72%、99.43%、99.55%;胶体金法、ELISA与TPPA检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05),RPR与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TP-ELISA法具有较高的敏感性和特异性法,可用于临床筛查和梅毒感染的确证试验。     

两种糖化血红蛋白检测方法的比较和性能评价

目的对两种糖化血红蛋白的检测方法进行比较和方法学评价。方法用离子交换层析法、免疫比浊法测定糖化血红蛋白,依据美国临床实验室标准化协会EP9-A2文件要求,分别在上述两种检测系统中测定标本糖化血红蛋白的浓度,记录检验结果,检查离群点,计算线性方程、相关系数和直线回归方程。结果离子交换层析法测定均值8．49,免疫比浊法测定均值9．04,线性回归方程Y=0．966X-0．24,两者相关性良好,两者之间的偏差在临床允许误差范围内。结论当使用2种以上检测方法检测同一项目时,应进行方法比对和偏倚评估,免疫比浊法和离子交换层析法两种检测方法具有可比性,临床可接受。     

18例免疫功能正常的原发性肺隐球菌病患者临床分析

目的:了解免疫功能正常的原发性肺隐球菌病患者的临床特征。方法:回顾性分析浙江省人民医院2018年1月至2020年2月诊断为肺隐球菌病且免疫功能正常患者的相关资料,包括年龄、性别、临床症状、影像学表现、实验室检查结果[包括血常规、C反应蛋白（CRP）,血沉和生化指标等]、诊断方法及治疗转归情况。结果:共纳入免疫功能正常的...     

三种检测乙型肝炎两对半常用方法的比较

目的 探讨酶联免疫吸附试验( ELISA)法、时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)法及胶体金免疫层析(GICA)法检测乙型肝炎血清标志物(乙型肝炎两对半)的临床应用价值.方法 145例疑似乙型肝炎患者分别采用ELISA法、TRFIA法及GICA法进行乙型肝炎两对半检测,对结果进行对比分析.结果 以TRFIA法测定结果为金标准,ELISA法和GICA法乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心杭体(HBcAb)阳性符合率分别为71％(57/80)、45％(36/80),乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、HBeAb、HBcAb阳性符合率分别为33％( 1/3)、0(0/3),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);其余两项或者多项联合检测阳性符合率比较差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA法和GICA法敏感度在HBsAg差异有统计学意义(P＜0.05),在HBsAb、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、HBeAb、HBcAb差异无统计学意义(P＞0.05);特异度在HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb差异均无统计学意义(P＞0.05).三种方法检测HBsAg的结果比较差异有统计学意义(P＜0.05),ELISA法与TRFIA法比较差异无统计学意义(P＞0.05),GICA法与TRFIA法比较差异有统计学意义(P＜0.05);三种方法检测HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的结果比较差异无统计学意义(P＞0.05);三种方法检测HBsAb、HBeAb阳性的结果比较差异有统计学意义(P＜0.05),且ELISA法、GICA法与TRFIA法比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TRFIA法测量范围敏感度、特异度最高,但价格高;ELISA法准确率处于三种方法的中间水平,价格便宜,与TRFIA法同样适合于批量检测;GICA法准确率低,但快速简单,适合于前两种方法的补充.     

4种常用梅毒抗体检测方法的应用评价

目的对4种常用梅毒抗体血清学检测方法进行试验比较,并对不同类方法展开应用评价。方法用TRUST、TP-ELISA、TPPA、胶体金法对124例梅毒阳性患者、218例对照组血清进行梅毒抗体测定,并计算灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果 TRUST、TP-ELISA、TPPA、胶体金法4种方法的灵敏度、特异性分别为81.4%、96.3%;96.8%、97.7%;99.2%、99.1%;90.3%、100.0%。结论 4种方法各有其特点和适用范围。在明确诊断是否感染梅毒时,特异检测方法提供了较为特异的试验依据。而在具体的治疗过程中,可选择非特异性试验如TRUST,根据效价滴度动态变化来判断疗效。实验室应充分结合临床,根据具体情况加以选择、组合优化,合理选用不同方法进行梅毒检测,为梅毒的确诊、判断发展以及疗效提供可靠依据。     

梅毒螺旋体感染四种血清学检测方法的临床评价

目的探讨四种梅毒血清学实验诊断方法的准确性及在临床的应用价值。方法应用甲苯胺红不加热血清学试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金法检测518例性病科患者血清,并用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）确认。结果 TRUST法灵敏度为58.18%,ELI SA法为99.37%、胶体金法为99.06%;TRUST法特异度为88.5%,ELI SA法为98.50%、胶体金法为100%。结论梅毒检测方法各有优缺点,应根据检验目的合理选用不同的试验方法。     

2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究

[目的]寻求能够快速定性,定量检测4种传染病及其病原体的试验方法。[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O_(157)：H_7(以下简称EHEC O_(157)),评价方法的灵敏性、特异性。通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的“白色粉末”和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用。应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用。通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O_(157)以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力。[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入“白色粉末”的样品灵敏性为1×10~4cfu/ test,炭疽芽孢最低检测限为1×10~5cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97％；鼠疫杆菌检测灵敏性为5×10~4cfu/ml,最低检测菌数为5×10~3cfu/test,在10~7cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括最近缘假结核耶尔森菌；EHEC O_(157)检测灵敏性为1×10~3cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98％。胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O_(157)检测灵敏度分别为1×10~6cfu/ml、1×10~5cfu/ml、1×10~5cfu/ml,“白色粉末”等环境样品最低可检测敏感性为1×10~5cfu,1×10~4cfu,1×10~4cfu/test。胶体金免疫层析方法分别应用于炭疽、鼠疫强毒株的检测,检测限为5×10~4cfu/test和7×10~4cfu/test。在实际血清样品检测中,与间接血凝方法对比,鼠疫抗体UCP和胶体金免疫层析方法有更好的敏感性。血清样品检测显示,SARS抗体的胶体金和UCP免疫层析方法均有较好的特异性和敏感性。[结论]2种免疫层析方法都有快速、敏感、特异的特点：上转磷光免疫层析方法可实现定量检测,敏感性优于胶体金免疫层析法；炭疽检测与加拿大RAMP检测系统相当；胶体金免疫层析法具有简便、直观、易行的特点。2种免疫层析方法均适合于炭疽芽孢芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O_(157)、鼠疫杆菌抗体、SARS抗体的现场检测和筛查。