绿茶儿茶素对于人肝癌细胞的凋亡诱导作用

目的：探讨绿茶儿茶素（GTC）对BEL－7402人肝癌细胞的凋亡诱导作用。方法：应用透射电镜、流式细胞术、TUNEL和免疫组化等方法检测受100或200μg／ml GTC作用4天后的BEL－7402细胞的凋亡情况及其PCNA、bcl－2、c－myc、p53蛋白表达情况。结果：受GTC作用4天后的BEL－7402细胞的凋亡显著性增加,其PCNA表达显著性下降,而与凋亡相关的癌基因bcl－2、c－myc、p53蛋白表达未见明显改变。结论：GTC对于BEL－7402细胞的生长抑制作用可能与诱导细胞凋亡有关,也可能与抑制癌细胞DNA合成有关。本研究未发现GTC诱导BEL－7402细胞凋亡与bcl－2、c－myc、p53蛋白表达的相关性。     

绿茶儿茶素对人肝癌细胞生长的抑制作用

绿茶儿茶素（ＧｒｅｅｎＴｅａＣａｔｅｃｈｉｎ,ＧＴＣ）是绿茶的主要成分,流行病学和动物实验研究表明,ＧＴＣ具有抑瘤作用。本文旨在研究ＧＴＣ对体外培养人肝癌细胞生长的影响。１　材料与方法１１　材料人肝癌ＢＥＬ－７４０２、ＳＭＭＣ－７７２１细胞由中国医学科学院血液学研究所提供。ＧＴＣ由中国医学科学院肿瘤学研究所程书钧教授惠赠。ＭＴＴ（四唑盐）为Ｓｉｇｍａ公司产品。１２　方法１２１　ＧＴＣ对ＢＥＬ－７４０２和ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长抑制作用　该两种细胞均培养于含１５％胎牛血清的ＰＲＭＩ１６…     

HGF介导DXR诱导肝癌细胞的凋亡作用

 为了解肝细胞生长因子(HGF)对DXR诱导凋亡效用.方法:肝癌细胞处理分为单用组:DXR、ActinD和HGF.联合组DXR(0.0lug/ml)＋HGF(l0,20,30ng/ml)、DXR＋ActinD＋HGF;生理盐水及牛血清白蛋白对照组.测定MTT值,H-E染色及Hoe-chest33258荧光染色观察细胞形态.结果:24h大剂量DXR引起10%癌细胞凋亡、54%细胞死亡,小剂量者无明显诱导凋亡作用;大剂量ActinD凋亡细胞<30%.HGF10-50ng/ml无明显诱导凋亡效用.DXR(0.0lug/ml)＋HGF(10,20,30ng/ml)组48h后随HGF剂量加大细胞凋亡数亦增加.依次加入DXR、放线菌素D后对HGF介导的效用有抑制性.结论:合用DXR和HGF能够诱导肝癌细胞凋亡,可能与HGF介导的信号传导有关.     

海芋粗提物对人肝癌细胞的细胞毒和凋亡诱导作用

目的:探讨海芋粗提物对人肝癌细胞的细胞毒和凋亡诱导作用及其作用机制.方法:用海芋粗提物处理人正常肝细胞(L02)及肝癌细胞(SMMC-7721),用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、EdU掺入试验研究海芋粗提物对人正常肝细胞和肝癌细胞的增殖抑制作用;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测海芋粗提物对细胞周期的影响;RT-PCR检测细胞周期及凋亡相关基因PPARγ、Cyclin D1、Rb、P21、Bax、Bcl-2基因mRNA表达.结果:用不同浓度海芋粗提物处理后,肿瘤细胞增殖活性降低(P＜0.05),呈时间-剂量-效应关系;克隆形成下降(P＜0.05);EdU标记指数降低(P＜0.05);AO/EB染色凋亡细胞增多(P＜0.01);细胞周期分布改变,凋亡指数显著增加(P＜0.01),G0/G1期细胞增加(P＜0.05),S期和G2/M期细胞减少(P＜0.05);RT-PCR结果显示,海芋粗提物(400μg/ml)处理后,PPARγ表达增加46.0%(P＜0.01)、Cyclin D1降低43.7% (P＜0.01)、Rb增加283.3%(P＜0.01)、Bax增加77.1% (P＜0.01)、Bcl-2降低24.8% (P＜0.05).结论:海芋粗提物对肝癌细胞具有细胞毒和诱导凋亡作用,其作用机理可能与激活PPARγ,上调Rb、Bax基因表达,下调Cyclin D1、Bcl-2基因表达有关.     

绿茶儿茶素对BEL-7402人肝癌细胞裸小鼠异种移植瘤生长的影响

目的:探讨绿茶儿茶素(GTC)对BEL-7402人肝癌细胞在BALB/C裸小鼠体内生长的影响。方法:将受100μg/mlGTC作用4天的BEL-7402细胞接种于BALB/C裸小鼠,记录裸小鼠的发瘤时间。接种50天后处死裸小鼠,取瘤组织,测量其体积和重量。通过电镜、TUNEL和免疫组化等方法检测移植瘤细胞的凋亡情况。结果:GTC作用后的BEL-7402细胞在裸小鼠体内平均成瘤时间推迟,实验组:19.29±12.92(9～47)天,对照组:12.14±7.86(4～24)天;肿瘤平均体积缩小,实验组:0.35±0.22(0.05～0.73)cm3,对照组:1.45±1.20(0.17～3.28)cm3;平均重量减轻,实验组:0.18±0.14(0.03～0.42)g,对照组:0.65±0.48(0.14～1.31)g;瘤细胞凋亡增加,TUNEL阳性细胞计数均值,实验组和对照组分别为7.87±3.75/油镜视野和2.49±0.96/油镜视野。结论:GTC作用后的BEL-7402细胞在裸小鼠体内的生长受到抑制,其生长抑制作用可能与肿瘤细胞凋亡增加有关。     

熊果酸诱导人肝癌BEL-7404细胞凋亡的作用及其机制

目的 探讨熊果酸(UA)对人肝癌BEL-7404细胞凋亡的诱导作用及其机制.方法 采用MTT法检测UA对BEL-7404细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测BEL-7404细胞凋亡率,Western blot法检测BEL-7404细胞proeaspase-3、caspase-9、survivin蛋白的表达.并用顺铂(DDP)作为阳性对照.结果 UA和DDP对BEL-7404细胞增殖具有明显抑制作用,并呈浓度、时间依赖性;作用48 h后,阴性对照组、uA 50μmoL/L组、DDP 10 mg/L组的BEL-7404细胞凋亡率分别为(0.83±0.25)%、(16.10±0.30)%、(31.87±0.65)%,差异有统计学意义(P<0.01);作用48 h后,与阴性对照组相比,UA 50μmol/L组、DDP 10 mg/L组的procaspase-3、survivin蛋白表达降低,caspase-9蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 UA能够诱导BEL-7404细胞凋亡,其作用机制与procaspase-3、survivin蛋白表达降低及caspase-9蛋白表达升高有关.     

温热顺铂对肝癌细胞的杀伤效应及其诱导凋亡的研究

 目的 探讨温热 ＣＤＤＰ对 Ｈｃａ－Ｆ细胞的生长抑制、温度与药效的关系以及诱导凋亡的作用。方法 采用ＭＴＴ法，透射电镜，ＤＮＡ电泳以及流式细胞术分析法。结果ＣＤＤＰ对Ｈｃａ－Ｆ细胞有明显的细胞毒性，其ＩＣ５０值为０．５７μｇ／ｍｌ。ＣＤＤＰ合并高温（＞４１℃）加热明显提高了ＣＤＤＰ的杀伤力，二者之间存在着协同增敏作用。其作用强度呈现对药物浓度、作用时间与加热温度的正相关性，且在一定浓度范围内以谤导肿瘤细胞凋亡的发生为主。结论 加热（＞４１℃）顺铂提高了顺铂的细胞毒性。诱导细胞凋亡的发生是其抗肿瘤作用的主要机制之一。     

肝脂素诱导KG-1细胞凋亡作用的研究

 目的 探讨肝脂素是否可诱导白血病细胞系KG-1细胞发生凋亡及其最佳药物作用浓度及作用时间。方法 应用肝脂素作用于KG-1细胞,采用锥虫蓝拒染法、MTT细胞活性测定法,确定肝脂素作用于KG-1细胞的最佳药物作用浓度和作用时间,以瑞特染色细胞形态学观察法、流式细胞仪检测肝脂素作用前后KG-1细胞DNA分布,并提取肝脂素作用前后KG-1细胞的DNA进行琼脂糖电泳。结果 肝脂素诱导后的KG-1细胞细胞形态学呈现凋亡,DNA电泳出现梯状DNA,流式细胞仪检测出现亚凋亡峰。肝脂素作用于KG-1细胞的最佳药物作用浓度为250 mg／ml,最佳药物作用时间为用药后10 ~ 22 h。结论 肝脂素可直接诱导KG-1细胞发生凋亡,其分子机制有待进一步探讨。     

新疆紫草素诱导人大肠癌细胞的凋亡

目的：探讨新疆紫草素对人大肠癌细胞株CCL229的诱导凋作用。方法：应用MTT比色法检测新疆紫草素对人大肠癌细胞株CCL229的增殖抑制作用,用DNA琼脂糖凝胶电泳,流式细胞术（FCM）及TdT介导的原位末端标记法（TUNEL法）检测新疆紫草素对CCL229细胞的诱导凋亡效应。结果：1．新疆紫草素（0．1、1．0、10．0μg/ml）能够抑制CCL229细胞增殖,并且呈浓度相关性,2．新疆紫草素（1μg/ml）作用于CCL229细胞不同时间（24、48、72h)后,DNA琼脂糖凝胶电泳呈现细胞凋亡的典型梯形条带图谱,FCM出现明显的亚二倍体峰,TUNEL染色可见细胞凋亡的特征性棕黄色颗粒,结论：新疆紫草素能够有效地诱导大肠癌细胞CCL229凋亡。     

绿茶水提取物诱导体外培养的大肠癌LOVO细胞的凋亡

探讨绿茶水提取物对体外培养的大肠癌ＬＯＶＯ细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法：用ＭＴＴ法，琼脂糖凝胶电泳，秀射电镜和流式细胞仪的方法，观察绿茶水提取物处理ＬＯＶＯ细胞后其生化和形态学等指标的改变。结果；ＭＴＴ法证实绿茶水提取物对ＬＯＶＯ细胞有抑制作用，抑制率与绿茶水提取物的浓度呈正相关；透射电镜可见ＬＯＶＯ细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩，碎裂等凋亡细胞的形态学改变。     

逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡

目的 构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响。方法 构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3。调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3。通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列。筛选出可经四环素调控凋亡素基因表达的人结肠癌细胞株Lovo/on-vp3,经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合入细胞DNA,并得到了表达;Lovo/on-vp3细胞在1mg/L强力霉素培养环境中培养24h、48h和72h凋亡率明显高于无强力霉素环境中相同时间点的细胞凋亡率,两者差异有显著性。结论 凋亡素基因经RevTet系统导入人结肠癌细胞Lovo后,在强力霉素诱导下可表达凋亡素蛋白并诱导Lovo细胞凋亡。并随诱导时间延长凋亡素蛋白表达增加、细胞凋亡增多。     

放射诱导人肺癌细胞株凋亡的观察

目的 观察人肺癌细胞株受照射后发生凋亡的剂量、时间。方法 人肺大细胞肺癌细胞株NCI-H460为单层贴壁生长。取一定量的指数生长期细胞接种，分别给予0、2、4、6、8、10GY剂量，用6MV-X射线单次照射后，培养10d，计数克隆，制作放射存活曲线，测定Do值、Dq值及N值。用同样方法分别给予0、2、4、6、8、10Gy剂量，放射后6h，采用流式细胞仪检测法测出各剂量点细胞凋亡百分数，观察剂量与凋亡的关系。6Gy照射后2、4、8、12、24、48h，检测各时间点的细胞凋亡百分数，观察时间与凋亡的关系。结果 Do值为1．335，Dq值为2．410，N值为6．080。0、2、4、6、8、10Gy照射后6h各剂量点的细胞凋亡百分数分别为0．38％；2．07％；2．53％；3．00％；4．31％：3．97％。6Gy单次照射后2、4、8、12、24、48h细胞凋亡百分数分别为1.33％；2．63％，；4．87％；10．04％；11．04％；12．99％。结论 放射诱导NCI-H460细胞株凋亡与照射剂量、时间存在相关性。人肺大细胞肺癌细胞株自发凋亡较低，受照射后凋亡增加较少，提示大细胞肺癌中凋亡易感细胞比例较低。     

凋亡素及其诱导肿瘤细胞凋亡的作用

凋亡素是一种来源于鸡贫血病毒的小分子蛋白,能够选择性地诱导肿瘤细胞和转化细胞的凋亡,而对正常细胞无作用.凋亡素的肿瘤细胞特异性与其在细胞中的核定位密切相关.它诱导的细胞凋亡既不依赖于p53,也不会被Bcl-2的过表达所抑制,但涉及Caspase-3的激活.因此,凋亡素可作为一种新型的肿瘤诊断工具和候选抗肿瘤治疗制剂.     

绿茶儿茶素对于DMBA诱发大鼠乳腺癌前增生的抑制作用

目的:探讨GTC(Greenteacatechins,绿茶儿茶素)对于DMBA(9,10-Dimethylbenz-1,2-anthrancene,二甲基苯蒽)诱发的大鼠乳腺癌前增生的抑制作用。方法:42只7周龄雌性SD大鼠,随机分为A(空白对照)、B(DMBA灌胃)、C(GTC灌胃)、D(DMBA/GTC灌胃)4组。于实验开始日,B组和D组的大鼠一次性DMBA油溶液灌胃(7mg/100g体重);自实验开始日起,C组和D组的大鼠每日GTC水溶液灌胃1次(80mg/次)。4组大鼠均自由摄食基础饲料和饮用自来水,至实验结束。光镜下(100倍)计量各组大鼠乳腺导管的芽体、实团、乳头状增生和核分裂象等4项增生指标,并计算其平均值(x±s)。结果:1)B组的芽体、实团、芽体+实团、乳头状增生和核分裂象均显著地高于与其对照的A组;2)D组的实团、芽体+实团显著高于与其对照的C组,实团、乳头状增生较C组趋低;3)D组的芽体、实团、芽体+实团和乳头状增生显著低于B组,核分裂象在两组之间没有显著性差异;4)C组的各项增生指标均低于A组,但无显著性差异。结论:持续GTC水溶液灌胃可明显抑制DMBA诱导的大鼠乳腺的癌前增生。     

姜黄素对人胃腺癌细胞株BGC-823生长抑制及诱导凋亡的作用

目的 探讨姜黄素对人胃腺癌细胞BGC-823的生长抑制及诱导凋亡作用。方法MTT法检测不同浓度姜黄素对人胃腺癌BGC-823细胞的生长抑制作用,计算半数抑制浓度（IC₅₀）;将1.2μmol／L姜黄素作用于BGC-823细胞24、48、72h,用DAPI染色检测细胞凋亡;用RT-PCR、Western blotting法分别检测姜黄素对Bax、Bcl-2基因以及Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白的影响。结果 不同浓度的姜黄素作用于BGC-823细胞0～72h后,细胞呈不同程度的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制率明显上升,作用48h的IC₅₀为1.2μmol／L。DAPI染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。RT-PCR、Western blotting结果显示1.2μmol/L姜黄素可以增加Bax表达、减少Bcl-2表达和激活caspase-3。结论 姜黄素对人胃腺癌BGC-823细胞有生长抑制和诱导凋亡的作用,这可能与增加Bax表达、减少Bcl-2表达、激活caspase-3有关。     

阿霉素诱导细胞凋亡时的基因调控

目的 :探讨阿霉素诱导细胞凋亡的分子机制。方法 :通过光镜和电镜观察阿霉素作用不同时间后的形态学改变 ,DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析 DNA含量和细胞周期 ,并检测细胞 p5 3基因蛋白表达 ;免疫组织化学法检测 bcl- 2基因蛋白的表达。结果 :阿霉素作用于 MEC- 1细胞后出现了细胞凋亡的特征 ,p5 3蛋白表达的荧光指数 (FI)值分别为 0 .2 0± 0 .0 4、0 .42± 0 .11、1.6 7± 0 .17,bcl- 2基因蛋白表达逐步降低。结论 :p5 3基因和bcl- 2基因参与凋亡过程可能是阿霉素诱导 m Ec- 1细胞凋亡的主要机制     

人参皂苷和冬凌草甲素诱导癌细胞凋亡的作用机制

细胞凋亡在肿瘤的发生发展中起重要作用,用中药诱导癌细胞凋亡是当前肿瘤治疗的研究热点之一.已经发现许多中药活性成分能够诱导癌细胞凋亡,人参皂苷和冬凌草甲素是其中研究较为深入的两种.人参皂苷和冬凌草甲素诱导癌细胞凋亡的作用机制包括阻滞细胞周期进展、上调凋亡促进蛋白表达、下调凋亡抑制蛋白表达和激活caspase级联反应等多个...     

茶多酚诱导人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的凋亡及其作用机制

目的:研究茶多酚对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞生长及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:通过MTT法、瑞氏染色法和FCM法分别检测不同浓度的茶多酚对RPMI 8226细胞增殖和凋亡的影响;FCM法检测对细胞线粒体膜电位的影响;蛋白质印迹法检测△caspase-3片段和凋亡相关蛋白bc1-2的表达;ELISA法检测对RPMI 8226细胞分泌细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的影响.结果:与对照组相比,茶多酚浓度129.6和259.1 μmol/L处理RPMI 8226细胞1～3 d后均能明显抑制细胞的增殖,且呈时间-剂量相关性;统计显示,24 h时的半数细胞抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为165.7μmol/L.茶多酚(129.6μmol/L)作用24 h后,RPMI 8226细胞出现典型的凋亡形态学改变;茶多酚(129.6和259.1 μmol/L)作用24 h后,RPMI 8226细胞凋亡率分别为(24.6±2.3)％和(43.5±3.9)％,与对照组比较差异均有统计学意义;细胞的线粒体膜电位降低,活性△caspase-3片段产生,bc1-2蛋白表达水平下降,IL-6分泌水平降低.结论:茶多酚能抑制RPMI 8226细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与产生活性△caspase-3片段,抑制bc1-2蛋白表达,降低细胞分泌IL-6水平相关.     

一氧化氮诱导的癌细胞凋亡中P53／P21的表达

一氧化氮诱导的癌细胞凋亡中ｐ５３／ｐ２１的表达董为人李进综述李福山审校关键词一氧化氮细胞凋亡基因表达中图号Ｒ７３０．２Ｒ３４１一氧化氮——一种致ＤＮＡ损伤的基因毒物１．１一氧化氮的来源及生理、病理作用〔１，２〕１９８０年Ｆｕｒｃｈｇｏｔ和Ｚａｗａｄｚ...