姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织TGF—β1与HGF表达的影响

目的探讨TGF—β1与HGF在肺纤维化中的作用及不同浓度姜黄素对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织中HGF及TGF—β1表达的影响。方法健康雄性SD大鼠90只,随机分为6组。分别为空白对照组（A组）、模型组（B组）、泼尼松治疗组（C组）、姜黄素50组（D组）、姜黄素100组（E组）、姜黄素200组（F组）,应用气管内给予博莱霉素制作肺纤维化动物模型。造模7、14、28d时分三次取材。用RT-PCR,Western blot检测各组肺组织中HGF及TGF—β1 mRNA及蛋白的表达。结果A组28dTGF—β1的光密度值（0．693±0．028）及灰度值（0．96±0．10）最低。B组28dTGF—β1光密度值（1．586±0．020）及灰度值（1．77±0．15）最高、F组28dTGF—β1光密度值（0．881±0．032）及灰度值（1．19±0．12）与B组比较最低。而HGF的光密度值及灰度值的检测正好相反。F组28dHGF的光密度值及灰度值最高。B组与D组的HGF和TGF—β1光密度值及灰度值差异无统计学意义（P〉0．05）。结论姜黄素抑制肺纤维化的机制之一可通过增高HGF的活性同时减低TGF—β1的活性来实现,这种作用有一定的剂量依赖性。     

百草枯中毒致大鼠肺纤维化模型中肺组织的胎盘生长因子表达

目的观察在百草枯（PQ）致大鼠肺纤维化模型中肺组织胎盘生长因子（PLGF）的变化。方法将42只健康成年雌性SD大鼠随机分为对照组和染毒组，每组21只，分别观察7、14和28d。染毒组于实验开始一次性灌胃染毒PQ（40mg／kg），对照组予以等量的生理盐水。取肺组织行半定量的病理组织学检查、羟脯氨酸测定，并利用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化方法测定PLGFmRNA和蛋白表达。结果PQ染毒后大鼠肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高，肺组织羟脯氮酸含量明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈O．01）。7、14、28d时肺组织PLGFmRNA表达分别1．28±0．29、0．80±0．07、0．65±0．13，均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫组化阳性指数在3个时点分别为2．27±0．34、1．78±0．41、1．25±0．69，明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PQ中毒大鼠肺组织PLGFmRNA和蛋白水平的表达明显上调。     

雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用及其机制。方法Wistar大鼠雌雄各半30只随机等分为三组:生理盐水对照组(N组6只)、百草枯组(B组12只)(灌胃)及雪莲组(T组12只)(胃中注入百草枯并给予雪莲腹腔注射)。采用HE染色观察肺纤维化的情况,碱水解法测羟脯氨酸含量,ELISA法检测肺组织匀浆中转化生长因子β1(TGF-β1)水平的变化。结果雪莲组与百草枯组比较,第28天肺纤维化减轻。百草枯组肺羟脯氨酸含量增高,雪莲组减少。雪莲组组织匀浆中TGF-β1水平于各时间点低于百草枯组。结论雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1水平有关。     

博莱霉素致大鼠肺纤维化原癌基因c-erbB2和肺表皮生长因子受体的表达

目的 探讨肺纤维化模型大鼠肺组织中原癌基因c-erbB2激活和肺表皮生长因子受体(EGFR)的表达.方法 将54只Wistar大鼠随机分成博莱霉素(BLM)组、EGFR拮抗剂Iressa组和对照组,每组18只.用BLM(5 mg/kg)气管注射制造大鼠肺纤维化模型,对照组气管注入生理盐水O.2～0.3ml;Iressa组造模前1 h灌胃给予Iressa(200 mg/kg),BLM组和对照组用生理盐水10 ml/kg灌胃,每组均灌胃5次/周,分别于第1、14、28天处死大鼠.观察大鼠肺组织病理改变,用免疫组化法检测肺组织原癌基因c-erbB2和EGFR的表达.结果 Iressa组大鼠肺组织可见纤维化并炎性细胞浸润,与BLM 组变化规律相同,肺纤维化程度低于BLM组.第28天Iressa组肺纤维化评分(2.17±0.41)明显低于BLM组(3.50±0.84),差异有统计学意义(P＜0.01).各时间点BLM组和Iressa组c-erbB2和EGFR表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).Iressa组的c-erbB2表达与BLM组变化规律一致,均随时间的延长,c-erbB2表达逐渐下降,不同时间的c-erbB2表达比较,差异有统计学意义(P＜0.01).Iressa组的c-erbB2表达与BLM组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).Iressa组于第14、28天时肺组织中EGFR表达水平为0.17±0.02和0.28+0.04,明显低于BLM组(0.27+0.04、0.34±0.02),差异有统计学意义(P＜0.01).Iressa组第28天EGFR表达明显高于第14天,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 c-erbB2和EGFR在大鼠肺泡炎及肺纤维化不同阶段表达增强,c-erbB2和EGFR可能参与了肺纤维化的发生.

Abstract：

Objective To study the expression of the epidermal growth factor receptor( EGFR) and the oncogene c-erbB2 on pulmonary fibrosis induced by bleomycin( BLM) in rats. Methods Fifty-four Wistar rats were randomly divided into three groups, the pulmonary fibrosis group (BLM), Iressa group and the control group. There were 18 rats in each group. Control group were injected with saline 0.2~0.3 ml in trachea.Iressa group and BLM group were injected with BLM intratracheal. After the fibrosis models were build, Iressa group were given orally Iressa(200 mg/kg)l h before modeling in Iressa group, saline were fed 10 ml/kg in BLM group and control group. The three groups were fed 5 times per week; and were sacrificed after treatment on days 1, 14and 28 respectively. The lungs were harvested for histological studies. Results The lung tissue in Iressa group showed fibrosis and inflammatory cell infiltration, the same as shown in the BLM group. The pulmonary fibrosis score was significantly lower than the BLM group on the 28 th day (2.17±0.41 vs 3.50±0.84, P＜0.01). Compared with the control group, c-erbB2 and EGFR were hyperexpressed significantly both in BLM group and Iressa group at all time points (P＜0.01); c-erbB2 expression had no changes between the Iressa group and the BLM (P＞0.05), that were gradually decreased, and was significantly different at each time point (P＜0.01). EGFR expression was increased gradually on the 14th and 28th day (0.17±0.02 and 0.28±0.04)in Iressa group ,that was significantly lower than the BLM group (0.27±0.04 and 0.34±0.02)(P＜0.01). EGFR expression increased significantly on the 28th day than on the 14th day in the Iressa group(P＜0.01). Conclusion The expression of C-erbB2 and EGFR are enhanced in different stages of alveolitis and pulmonary fibrosis, c-erbB2 and EGFR may be participated in different stages of pulmonary fibrosis.     

黄芩素对胃癌细胞VEGF和HGF表达的影响

[目的]观察血小板型12-脂氧合酶(p12-LOX)在胃癌SGC-7901细胞中的表达及黄芩素(Baicalein,Bai)对胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肝细胞生长因子((hepatocyte growth fact,HGF)表达的影响,并初步探讨作用机制。[方法]RT-PCR检测SGC-7901细胞中p12-LOXmRNA的表达及Bai对其VEGF mRNA表达的影响;ELISA法检测Bai对VEGF和HGF蛋白表达的影响。[结果]RT-PCR产物经琼脂糖电泳结果,可见一条337bp的p12-LOX基因扩增带和一条651bp的β-actin内参基因扩增带;Bai作用6h后VEGFmRNA表达明显低于对照组(除5μmol/L组),且随Bai浓度的增加,VEGF mRNA表达量逐渐降低;ELISA显示,不同浓度Bai作用SGC-7901细胞24h后,各实验组与对照组相比,HGF蛋白表达量均明显降低(除5μmol/L组),且与浓度相关;随着Bai浓度的增加,各实验组HGF表达量均明显下降。[结论]SGC-7901细胞中存在p12-LOX的表达;Bai可抑制SGC-7901细胞VEGF和HGF的表达,且呈一定的浓度依赖性。     

姜黄素对肺纤维化大鼠I型胶原蛋白和转化生长因子β1mRNA表达的影响

目的 探讨姜黄素对肺纤维化大鼠I型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠96只,随机分为正常对照组、模型组、泼尼松治疗组(泼尼松组)、姜黄素治疗组(姜黄素组),每组24只.除正常对照组外,其余各组大鼠气管内一次性注入博莱霉素诱导肺纤维化.造模后第15天起,姜黄素组和泼尼松组分别给予姜黄素(300 mg/kg)和泼尼松(5 mg/kg),每日灌胃1次,其余2组每日给予质量分数为1%的羧甲基纤维素钠(10 ml/kg)灌胃1次,直至处死动物.各组动物分别于造模后第21、28、42、56天随机处死6只.HE、Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化(EnVision二步法)测定肺组织中I型胶原蛋白表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织mRNA的表达.结果 第42、56天姜黄素组肺纤维化程度明显低于模型组和泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05);第28、42、56天姜黄素组肺组织I型胶原蛋白表达水平明显低于模型组和泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05);姜黄素组21、28 d肺组织TGF-β1mRNA表达水平分别为0.61±0.09、0.48±0.16,明显低于同期模型组,差异有统计学意义(均P＜0.05);21 d姜黄素组肺组织TGF-β1mRNA表达水平明显低于泼尼松组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预,抑制肺纤维化的发展,疗效优于传统治疗药物泼尼松.姜黄素可抑制I型胶原蛋白的合成与沉积,降低肺组织TGF-β1mRNA的表达.     

百草枯染毒大鼠组织中毒物含量与脏器损伤的关系

目的 观察百草枯染毒大鼠模型中百草枯在血浆和脏器组织中含量的动态变化,探讨百草枯染毒大鼠组织中毒物含量与脏器损伤之间的关系.方法 90只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和染毒组.观察染毒后不同时间点百草枯在血浆和脏器组织中的动态变化,同时留取肺、肾、肝、心、脑组织做病理学检查,并进行肺组织中羟脯氨酸测定.结果 百草枯染毒后8、24、48 h时,血中百草枯含量为(525.69±98.91)、(357.74±75.28)、(69.44±17.22)ng/ml,3d时检测消失;8、24、48h及3、7d时其在肺组织中含量分别为(2170.85±452.33)、(2769.18±596.17)、(1351.90±158.60)、(1054.03±)87.47)、(528.28±125.04)ng/g,14 d时检测消失;在肾脏、肝脏、心脏组织中8 h时百草枯含量分别为(2391.54±400.78)、(251.26±88.71)、(330.95±62.09)ng/g,然后逐渐减少,肝脏、心脏组织中14 d时检测消失,肾脏组织中28 d时检测消失;在脑组织中较低,但存在时间较长,28 d时仍可检测出百草枯.染毒大鼠各脏器损伤病理变化不同,以肺组织损伤最为严重,脑组织损伤最小;肾、肝、心组织损伤有逐步恢复趋势,而肺组织损伤逐渐加重,肺组织中羟脯氨酸含量也逐渐增高.结论 百草枯染毒大鼠不同组织在不同时间点其毒物含量不同,百草枯在组织内含量越高,其损伤越重.百草枯在肺内完全消除后,肺损伤仍可继续发展.     

中药对CCl4中毒性大鼠肝纤维化HGF m RNA表达量的影响

目的　从分子水平检测中药预防肝纤维化的作用及机制。方法　利用 CCl4 复合因素对SD大鼠复制肝纤维化模型 ,用中药灌胃预防 ,检测其生化指标、肝纤维化指标、病理情况以及肝组织中 HGF m RNA表达量。结果　肝纤维化组及中药预防组的 AL T、AST、A/ G均较空白组恶化 (P <0 .0 1) ,但中药预防组的 AL T、AST、A/ G的恶化程度低于肝纤维化组 (P <0 .0 1)。 HA(透明质酸 )、PC ( 型血清前胶原 )、L N (层粘蛋白 )、PL D(羟脯氨酸 )四项血清学指标的结果显示 :肝纤维化组及中药预防组均高于空白组 (P <0 .0 1) ,但中药预防组的升高幅度低于肝纤维化组 (P<0 .0 1) ,此四项指标的降低与病理组织切片反应肝纤维化的程度相一致。中药预防组与肝纤维化组肝组织 HGFm RNA的相对表达量比空白组高 (P <0 .0 1) ,中药预防组肝组织 HGFm RNA的相对表达量较肝纤维化组高 (P <0 .0 1)。结论　联合检测生化、肝纤维化指标可提高肝纤维化早期诊断 ;肝纤维化时肝组织 HG...     

HGF在肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌的表达

目的 研究肝细胞生长因子（HGF）在肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌的表达。方法 应用免疫组化方法检测44例I期肺腺癌与32例细支气管肺泡细胞癌手术切除标本HGF的表达，并统计5年生存率。结果 肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌细胞HGF阳性表达率分别为66．3％与85．4％（P=0．012）；肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌细胞HGF染色积分为4．08±0．72与5．41±0．89，差异有统计学意义（P=0．009）。I期肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌的5年生存率为68．2％与81．3％，差异有统计学意义（P=0．045）。结论 HGF在肺腺癌与细支气管肺泡细胞癌的表达存在差异。     

蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠HGF表达影响

目的 观察蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响.方法 60只健康清洁级Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、蓝莓低、中、高剂量组、鳖甲软肝片组,除对照组外,其余各组大鼠腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,各蓝莓组在造模同时分别给予不同浓度蓝莓原浆,鳖甲软肝片组用复方鳖甲软肝片灌胃,1次/d,共12周;采用实时荧光定量RT–PCR和免疫组织化学法检测大鼠肝组织HGF、MMP-9以及TIMP-2 mRNA及蛋白表达.结果 与对照组比较,肝纤维化模型组HGF、MMP-9、TIMP-2的mRNA水平及蛋白表达升高;与模型组比较,中、高剂量蓝莓组HGF mRNA及蛋白表达[(634.9±61.2)、(637.7±68.2)和(31.8±3.0)、(31.2±4.3)]与MMP-9 mRNA及蛋白表达[(359.1±29.5)、(361.4±27.1)和(39.4±4.0)、(38.5±3.7)]明显升高,TIMP-2 mRNA及蛋白表达[(426.0±16.7)、(431.3±33.0)和(41.6±6.2)、(37.3±4.3)]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定预防作用,其机制可能与上调HGF、MMP-9,下调TIMP-2表达有关.     

肝细胞生长因子及其激活物在子宫内膜异位症的表达

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)及其激活物(HGFA)在子宫内膜异位症的表达及与发病机理的关系。方法:采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测27例异位内膜、27例对应的在位内膜及25例对照组子宫内膜组织中的HGF和HGFA的免疫表达水平。结果:HGF和HGFA主要在内膜的腺上皮阳性表达,在间质仅弱阳性表达。子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮HGF和HGFA阳性表达最强,异位内膜次之,正常对照组在位内膜腺上皮最弱(P均<0.05)。对照组内膜腺上皮HGF和HGFA的表达增殖期强于分泌期(P<0.05)。HGF和HGFA两者在各组内膜腺上皮中的表达水平呈正相关(P<0.05)。结论:子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮HGF和HGFA的高表达可能与子宫内膜异位症的发病相关。     

谷胱甘肽对大鼠肺纤维化模型的干预作用

目的　观察谷胱甘肽对博莱霉素 (Bleomycin ,BLMA5)致大鼠肺间质纤维化模型的干预作用。方法　大鼠随机分为对照组、BLM模型组、谷胱甘肽组。按BLM 5mg·kg-1体重复制大鼠肺间质纤维化模型 ,2 4h后谷胱甘肽组每天腹腔内注射谷胱甘肽注射液 12 0mg·kg-1。于 7、14、2 8d观察各组肺间质纤维化形成的病理变化和肺匀浆中谷胱甘肽 (GSH)及胶原的含量变化。结果　与模型组比较 ,谷胱甘肽组病理变化与模型组一致 ,但较BLM模型组减轻 ;肺组织匀浆GSH含量明显增高 (P <0 0 1) ,胶原含量无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　腹腔内注射谷胱甘肽具有对抗氧自由基、保护肺脏免受氧化损伤的作用 ,但对BLM引起的肺脏胶原沉积无明显保护作用     

阻遏矽肺纤维化的实验研究

目的 比较骨髓间充质样干细胞( BM-MSCs)与pcDNA3.1肝细胞生长因子(HGF)转染的BM-MSCs对SiO2所致大鼠肺泡炎和早期肺纤维化的影响并探讨其机制.方法 收集培养雄性Wistar 幼鼠的原代BM-MSCs,并进行4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记.将50只雄性Wistar大鼠气管滴注40mg/ml SiO2混悬液1ml造模后,随机分为模型组、BM-MSCs组和pcDNA 3.1-HGF+BM-MSCs组.造模次日,模型组(10只):尾静脉注入PBS 1 ml; BM-MSCs组(20只):尾静脉注入106个/ml BM-MSCs 1 ml;pcD-NA3.1-HGF+BM-MSCs组(20只):尾静脉注入106个/ml pcDNA3.1-HGF转染的BM-MSCs 1 ml.14和28 d后,分别处死大鼠,取肺组织冰冻切片,荧光显微镜下检测体内DAPI标记细胞;HE和Masson染色观察肺炮炎和纤维化情况;免疫印迹( Western blot)法测各组大鼠肺组织的HGF表达量;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量,样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果14、28 d时,pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织肺泡炎评分(14 d:1.16±0.13,28 d:0.82±0.20)均低于同时期BM-MSCs组(14 d:1.68±0.17,28 d:1.58±0.31)和模型组(14 d:2.36±0.17,28 d:2.80±0.14),BM-MSCs组肺泡炎评分均低于同时期模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺纤维化评分( 14 d:0.10±0.11,28 d:1.16±0.13)均明显低于同时期BM-MSCs( 14 d:0.54±0.15,28 d:1.36±0.13)和模型组(14 d:0.64±0.09,28 d:1.84±0.17),差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织匀浆中TNF-α含量[14 d:(280.48±23.11) pg/mg,28 d:(249.78±22.33) pg/mg]均明显低于BM-MSCs组[14 d:(342.58±35.34) pg/mg,28 d:(319.51±17.84) pg/mg]和模型组[14 d:(442.29±36.76) pg/mg,28 d:(348.53±33.95) pg/mg],BM-MSCs组肺组织匀浆中TNF-α含量低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织匀浆中HYP表达量[14 d:(0.46±0.04) μg/mg,28 d:(0.65±0.05)μg/mg]均明显低于同时期BM-MSCs组[14 d:(0.63±0.04) μg/mg,28 d:(1.04±0.07) μg/mg]和模型组[14 d:(0.72±0.06) μg/mg,28 d:(1.39±0.06) μg/mg],差异均有统计学意义(P＜0.05);28 d时,BM-MSCs组肺组织匀浆中HYP表达量低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用pcDNA3.1-HGF转染后的BM-MSCs比单独应用BM-MSCs能更有效地对抗SiO2诱导的大鼠肺泡炎和早期肺纤维化,作用机制可能与其减轻肺组织的炎症有关.     

葛根素抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的实验研究

目的探讨葛根素对百草枯致肺纤维化的治疗作用。方法采用大鼠百草枯致肺纤维化模型,给予葛根素进行干预治疗,并于第3、7、14、28d测定血清中超氧化物歧化酶、丙二醛和肺组织中羟脯氨酸含量,观察组织病理学改变,对比分析各组动物肺细胞损伤及肺纤维化程度。结果葛根素能明显降低百草枯肺纤维化大鼠肺组织中羟脯氨酸和血清中丙二醛的含量,提高大鼠体内超氧化物歧化酶的活力;病理组织学观察表明,葛根素能明显改善实验性肺纤维化的程度.结论葛根素对百草枯诱导大鼠肺纤维化具有一定的拮抗作用。     

吡非尼酮抗百草枯中毒小鼠肺纤维化的研究

目的 探讨吡非尼酮(PF)对百草枯(PQ)中毒小鼠肺纤维化的治疗作用,为临床治疗提供理论依据.方法 雄性ICR小鼠90只,随机分为正常对照组、PQ组、地塞米松组、25、50和100 mg/kgPF组,每组15只.正常对照组小鼠一次性空腹灌胃给予生理盐水,2 h后给予质量分数为1%羧甲基纤维素(CMC)灌胃,再每天定时空腹灌胃同等量CMC;PQ组、地塞米松组及各PF剂量组小鼠给予PQ100mg/kg一次性灌胃染毒,灌胃后2 h,再每天定时PQ组给予0.02ml/10 gCMC灌肠,PF组给予PF(25、50、100 mg/kg)和地塞米松(0.02 ml/10 g)灌胃,每天1次,共49 d.计算肺系数,HE染色,光学显微镜下观察肺组织病理改变;测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,转化生长因子(TGF-β1)的mRNA表达水平、蛋白表达水平,支气管肺泡灌洗液(BALF)中的TGF-β1蛋白含量.结果 PQ组3 d生存率为53.33%,25、50、100 mg/kg PF组3 d生存率分别为46.67%、73.33%、86.67%,地塞米松组3 d生存率为80%,地塞米松组、50、100 mg/kg PF组3 d生存率明显高于PQ组和25 mg/kg PF组,差异有统计学意义(P＜0.05).25、50及100mg/kg PF组小鼠肺系数均明显低于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05).地塞米松组肺组织中HYP含量为(50.95±11.65)mg/g,25、50、100mg/kg PF组HYP含量分别为(44.52±9.48)、(43.27±6.01)、(40.82±5.90)mg/g,较PQ组[(74.27±3.68)mg/g]明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).地塞米松组BALF中TGF-β1蛋白含量为(22.03±7.27)mg/ml,25、50、100 mg/kg PF组TGF-β1蛋白含量分别为(55.33±17.50)、(27.75±5.84)、(21.31±6.82)mg/ml,与PQ组[(52.52±15.51)mg/ml]相比,明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);100 mg/kg PF组肺组织TGF-β1mRNA表达水平与PQ组相比,明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01)与PQ组比较,地塞米松组,50、100mg/kgPF组肺组织中TGF-β1蛋白表达下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PF可以减少百草枯中毒小鼠肺组织胶原沉积,减轻肺部纤维化程度.

Abstract：

Objective To study the curative effects of pirfenidone (PF)on pulmonary fibrosis induced by paraquat (PQ) in mice and to provide the theoretical basis for clinical treatment. Methods Ninety adult healthy male ICR mice were randomly divided into six groups: control group, PQ group , 2 mg/kg Dexamethasone group, 25 mg/kg PF group, 50 mg/kg PF group and 100 mg/kg PF group, there were 15 mice in each group. The corresponding volume of normal saline was given to the each mouse in control group according to the weight, after 2 h 0.1% CMC was given to the each mouse of control group one time by intragastric administration, then the CMC was administrated at regular time until sacrifice. All mice for other 5 groups were exposed to 100 mg/kg PQ by intragastric administration. At 2 h after exposure to PQ, 0.02 ml/10 g dexamethasone and 25、50、100 mg/kg PF were given to mice for dexamethasone group and for 3 PF groups by intragastric administration each day for 49 days, respectively. The lung coefficient was calculated and pathological changes of lung tissue were observed by HE staining for each mouse. The hydroxyproline (HYP)level in lung tissue was measured for each mouse. The mRNA level of and the protein level of TGF-β1 in lungtissue for each mouse were determined, and the protein level of TGF-β1 in the bronchus-alveolus lavage fluid (BALF) of each mouse was detected. Results The survival rates on the 3rd day in PQ group, 3 PF groups and dexamethasone group were 53.33%, 46.67%, 73.33%, 86.67% and 80%, respectively. The survival rates on the 3rd day in dexamethasone group, 50 mg/kg and 100 mg/kg PF groups were significantly higher than those of PQ group and 25 mg/kg PF group (P＜0.05). The lung coefficients of 3 PF groups were significantly lower than that of the PQ group (P＜0.05). The lung tissue HYP levels of dexamethasone group and 3 PF groups were 50.95±11.65, 44.52±9.48, 43.27±6.01 and 40.82±5.90 mg/g respectively, which were significantly lower than that (74.27±3.68) of PQ group(P＜0.01 ). The TGF-β1 protein levels of BALF in dexamethasone group, 50 and 100 mg/kg PF groups were 22.03±7.27, 27.75±5.84 and 21.31 ±6.82 ng/ml respectively, which were significantly lower than that(52.52±15.51 ) ng/mlof PQ group(P＜0.01 ). The expression level of TGF-β1 mRNA in 100 mg/kg PF group decreased significantly, as compared with PQ group (P＜0.01). Conclusion PF could reduce the collagen deposition and pulmonary fibrosis induced by PQ in mice lungs.     

阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的 探讨阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响。方法 45只SPF级雄性Wister大鼠,随机分为3组,正常对照组、百草枯组(模型组)、阿托伐他汀干预组(治疗组),每组15只。百草枯组和阿托伐他汀干预组均以百草枯50 mg/kg灌胃染毒建立大鼠肺纤维化模型。阿托伐他汀干预组给予阿伐他汀钙的生理盐水悬混液20 mg/kg灌胃给药,给药体积为200 uL。分别于中毒后第7、14、28天随机处理各组中5只大鼠进行实验观察。分离右肺组织(1 cm×1 cm×0.3 cm),96 h后行石蜡包埋切片。RT-PCR检测肺组织MMP-9、TIMP-1mRNA的表达,Western-blot检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果 MMP-9 mRNA表达结果阿托伐他汀钙治疗组高于对照组,但低于模型组。TIMP-1 mRNA表达结果正常对照组稍低,其余两组差别不大。肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达,百草枯中毒大鼠肺组织内MMP-9及TIMP-1的表达明显高于对照组及治疗组,治疗组两个细胞因子表达高于对照组,但显著低于模型组。结论 阿托伐他汀可以抑制百草枯中毒大鼠肺内MMP-9/TIMP-1的表达,拮抗百草枯所致的肺纤维化。     

刍藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究

目的观察白黎芦醇（REs）对博来霉素（BLM）致大鼠肺纤维化的逆转作用。方法将60只SD大鼠分为对照组、模型组、RES中剂量干预组（50mg／kg）及R_ES高剂量干预组（100mg／kg）,以气管内滴注BLM制造肺纤维化模型;于第14d起用RES进行干预,分别取第17d、24d及31d三个时间点对大鼠肺组织行MASSON染色、羟脯氨酸含量（HYP）测定及TGF-／31mRNA测定。结果模型组第17天,大鼠肺组织呈现典型肺纤维化。RES各干预组较模型组纤维化程度随时间变化而有所减轻;模型组中HYP含量（751．80±22．5、996．00±39．48、1197．60±105．98）明显高于对照组（266．00±24．08、307．00±16．40、318．00±18．7,P〈0．05）;RES高剂量干预组中各时间点HYP含量（657．45±18．31、514．34±9．78,504．20±13．16）均较模型组（751．80±22．52、996．00±39．48、1197．60±105．98）下降（P〈0．05）;模型组中TGF邛1mRNA含量在第17天（1．000±0．782）较对照组（0．490±0．039）高表达,使用RES高剂量干预后TGF—β1mRNA各时间点（0．788±0．205、0．472±0．199、0．474±0．310）较模型组（1．000±0．782、0．759±0．226、0．603±0．147）均降低（P〈0．05）。结论RES可能通过调节TGF-β1对已形成的大鼠肺纤维化有逆转作用。     

白藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究

目的观察白黎芦醇(RES)对博来霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的逆转作用。方法将60只SD大鼠分为对照组、模型组、RES中剂量干预组(50mg/kg)及RES高剂量干预组(100mg/kg),以气管内滴注BLM制造肺纤维化模型;于第14d起用RES进行干预,分别取第17d、24d及31d三个时间点对大鼠肺组织行MASSON染色、羟脯氨酸含量(HYP)测定及TGF-β1mRNA测定。结果模型组第17天,大鼠肺组织呈现典型肺纤维化,RES各干预组较模型组纤维化程度随时间变化而有所减轻;模型组中HYP含量(751.80±22.5、996.00±39.48、1197.60±105.98)明显高于对照组(266.00±24.08、307.00±16.40、318.00±18.7,P<0.05);RES高剂量干预组中各时间点HYP含量(657.45±18.31、514.34±9.78,504.20±13.16)均较模型组(751.80±22.52、996.00±39.48、1197.60±105.98)下降(P<0.05);模型组中TGF-β1mRNA含量在第17天(1.000±0.782)较对照组(0.490±0.039)高表达,使用RES高剂量干预后TGF-β1mRNA各时间点(0.788±0.205、0.472±0.199、0.474±0.310)较模型组(1.000±0.782、0.759±0.226、0.603±0.147)均降低(P<0.05)。结论 RES可能通过调节TGF-β1对已形成的大鼠肺纤维化有逆转作用。