川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用,并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型,模型构建成功后,将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况,治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿,收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标,收集肾脏观察肾脏病理学,同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常,无明显病理特征;模型组出现肾小球增大,系膜和肾间质纤维组织增生;贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比,模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005);SOD和GSH明显降低(P＜005),与模型组相比,贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005),SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比,模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005);与模型组相比,贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能,提高血清和肾脏抗氧化指标,同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达,最终保护糖尿病肾脏损害。     

黄芪甲苷经 TGF －β／Smad 信号通路对糖尿病肾病大鼠肾脏的影响

目的：观察黄芪甲苷干预链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病肾病大鼠模型氧化损伤的影响及相关的分子机制研究。方法健康成年雄性SD大鼠80只,体重（2.54±0.45）kg,其中10只作为空白对照组,10只作为空白加高剂量黄芪甲苷组,其余60只则用于STZ模型。糖尿病肾病大鼠模型以60 mg／kg一次性腹腔注射诱导,造模后1周开始测血糖,剔除血糖低于13.9 mmol／L的大鼠。造模成功的大鼠随机选取10只作为模型对照组和模型加黄芪甲苷高中低（120 mg／kg、60 mg／kg、30 mg／kg）治疗组。每2周收集代谢数据,给药6周后处死。测定体重肾脏指数,血糖情况以及大鼠血清ROS及SOD情况,观察患侧肾脏组织病理,采用蛋白质免疫印迹法（ Western blot）检测TGF－β／Smad信号通路相关信号分子的表达。结果模型组大鼠肾重及肾脏指数最大,而治疗组大鼠肾重及肾脏指数明显减小（P＜0.05）,但仍高于对照组大鼠（P＜0.05）。实验各组大鼠血糖在0周时无明显差别。黄芪甲苷治疗组血糖值低于模型组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。黄芪甲苷可降低模型大鼠患侧肾脏组织纤维化病变,呈剂量依赖性下调TGF－β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad4、Smad2／3、P－Smad2／3、α－SMA、Collagen Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的蛋白表达水平,呈剂量依赖性上调Smad7的蛋白表达。结论（1） SD大鼠单次腹腔大剂量注射STZ建立致糖尿病肾病模型;（2）黄芪甲苷可通过降低ROS水平,升高SOD活性对糖尿病肾病大鼠的氧化损伤起到一定的缓解;（3）黄芪甲苷可通过下调大鼠肾脏TGF－β／Smad信号通路的表达而改善大鼠的胞外基质堆积而保护肾脏。     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制

目的:观察黄芪甲苷(AS-IV)对糖尿病肾病(DN)大鼠血糖、尿微量白蛋白、血清总蛋白、白蛋白、血清脂联素水平的影响及对肾脏的保护作用。方法:40只清洁级雄性SD大鼠分为正常组、模型组、黄芪甲苷低剂量组及黄芪甲苷高剂量组各10只。予链脲佐菌素造模,治疗8 w后处死大鼠取材及采血,取肾皮质行电镜观察,并检测血糖、尿微量白蛋白、血清总蛋白、白蛋白及脂联素水平。结果:与模型组比较,治疗后黄芪甲苷组血糖、尿微量白蛋白水平明显下降(P0.05),血清总蛋白、白蛋白及血清脂联素水平明显增加。结论:AS-IV对DN肾脏有明显保护作用,能降低血糖和尿白蛋白排泄量,改善低蛋白血症,升高血清脂联素水平,从而延缓糖尿病肾病的进展,其作用机制可能与上调血清脂联素水平有关。     

黄芪甲苷抑制p-130Cas表达缓解糖尿病肾病的作用机制研究

目的探讨黄芪甲苷（AS-IV）通过调节p-130Cas表达缓解糖尿病肾病（DN）的作用机制,以期为DN的治疗开辟新途径。方法将条件永生化的小鼠足细胞株分为正常对照组、高糖组、高糖+低剂量AS-IV组、高糖+高剂量AS-IV组,采用Realtime-PCR、Westernblot法检测各组足细胞p-130CasmRNA与蛋白表达水平。将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病+低剂量AS-IV组、糖尿病+高剂量AS-IV组,每组各10只。链脲霉素65mg/kg单次腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型。造模成功后高糖+低剂量AS-IV组、高糖+高剂量AS-IV组AS-IV干预8周,检测干预第4周末、第8周末各组大鼠24h尿白蛋白水平,光镜和电镜下观察第8周末各组大鼠肾脏病理学变化,免疫荧光法检测肾小球足细胞p-130Cas蛋白表达水平。结果高糖组足细胞p-130Cas蛋白与mRNA表达明显上调,AS-IV剂量依赖性抑制高糖诱导的p-130Cas蛋白与mRNA表达上调。糖尿病大鼠24h尿白蛋白水平明显上升,肾小球系膜增生,足细胞足突融合,足细胞p-130Cas蛋白表达明显上调。AS-IV剂量依赖性抑制糖尿病大鼠肾脏足细胞p-130Cas蛋白表达上调,抑制肾小球系膜增生,缓解足细胞足突融合,降低24h尿白蛋白水平,缓解DN。结论AS-IV可能通过抑制p-130Cas表达上调,抑制高糖诱导的足细胞足突融合,缓解DN。     

黄芪甲苷抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用和机制研究

目的探讨黄芪甲苷（AS- IV）抑制糖尿病大鼠足细胞凋亡的作用及其机制,为糖尿病肾病的治疗开辟新途径。方法将体重180~220g健康雄性SD大鼠按配伍法分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病AS- IV治疗组,每组10只,链脲霉素（STZ）腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型,糖尿病AS- IV治疗组予AS- IV 10mg/（kg·d）治疗,共8周;糖尿病组予等量1%CMC混悬液;正常对照组不予处理。第8周末测量大鼠体重、24h尿白蛋白、血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、ALT、血尿素氮、肌酐水平;PAS、Masson染色,光镜观察肾脏病理变化;肾母细胞瘤基因1（WT-1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,TUNEL染色观察足细胞凋亡,real- time PCR及Western blot测大鼠肾皮质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖、HbA1c和24h尿白蛋白增高,肾小球足细胞数量减少,系膜增生,足细胞凋亡增加,Bcl-2及其mRNA表达下调,Bax及其mRNA表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。AS- IV可显著改善糖尿病大鼠蛋白尿,抑制肾小球足细胞数目减少、系膜区增生、足细胞凋亡,上调Bcl-2表达,抑制Bax表达。结论 AS- IV对早期糖尿病大鼠足细胞具有保护作用,可能与其调节凋亡蛋白Bcl-2和Bax,抑制足细胞凋亡相关。     

芒柄花苷经AMPK/SIRT1/FoxO1通路对2型糖尿病肾病大鼠肾损伤的改善作用

目的：探讨芒柄花苷经AMPK/SIRT1/FoxO1通路对2型糖尿病肾病（DN）大鼠肾损伤的改善作用。方法：用腹腔注射链脲佐菌素准备大鼠DN模型,芒柄花苷低剂量组和芒柄花苷高剂量组大鼠分别灌胃给予芒柄花苷（剂量分别为50mg/kg和200mg/kg）,阳性对照组灌胃给予二甲双胍（250mg/kg）,阴性对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水,持续16周。测定大鼠血清中BUN、Scr和血糖水平,对大鼠肾脏进行病理学检查,同时采用Western Blot法检测肾组织中SOD、GSH-PX、MDA、AMPK、SIRT1、FoxO1、FN和LC3B蛋白水平。结果：模型组大鼠肾小球异常肥大,系膜细胞增殖,系膜基质增加,间质纤维化;芒柄花苷和二甲双胍治疗后,肾小球形态逐渐恢复正常,肾小球内的炎症和纤维化程度也有不同程度的改善。与阴性对照组比较,模型组、芒柄花苷低剂量组、芒柄花苷高剂量组和阳性对照组各组大鼠BUN、Scr、血糖、MDA、FoxO1和FN水平升高,SOD、GSH-PX、AMPK、SIRT1和LC3B水平降低（P<0.05）。与模型组比较,芒柄花苷低剂量组、芒柄花苷高剂量组和阳性对照组...     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠足细胞的影响及其机制研究

目的：探讨黄芪甲苷（AS- IV）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞的保护作用及其机制,为DN早期防治开辟一条新途径。方法体重180~200g健康雄性SD大鼠45只按配伍法分为正常对照组（NC组）、DN组和AS- IV治疗组（DN＋AS- IV组）,链脲佐菌素腹腔注射建立大鼠早期DN模型。DN＋AS- IV组大鼠在造模前2周予AS- IV 10mg/（kg＆#183;d）灌胃预处理至实验结束,共14周。造模后第6、12周末收集并测定24h尿量及尿蛋白;同时各组按抽签法选取5只大鼠测体重,处死大鼠后测血生化指标,取肾组织,光镜观察肾脏病理病理变化,电镜观察足细胞形态变化,肾母细胞瘤抑制基因1（WT1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,Western blot法测定大鼠肾皮质α3β1整合素蛋白水平的变化。结果与NC组相比,DN组大鼠血糖和24h尿蛋白增高,肾脏肾小球系膜区增生,足细胞足突融合,肾小球足细胞数量减少,α3β1整合素蛋白水平下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。AS- IV可显著改善DN大鼠蛋白尿,抑制肾小球系膜区增生,抑制足细胞足突融合和数目减少,上调α3β1整合素表达。结论 AS- IV对早期DN大鼠足细胞具有保护作用,可能与其上调足细胞α3β1整合素表达相关。     

基于AMPK通路探讨茶多酚改善糖尿病大鼠糖脂代谢机制

目的：探讨茶多酚从AMP活化蛋白激酶（AMPK）通路途径调控糖尿病大鼠糖脂代谢的机制。方法：经糖耐量试验筛选6周龄SD大鼠45只,按随机数字表法分为正常组10只和造模组35只,造模组糖尿病造模成功后剩余30只,根据体质量分层法和血糖水平分为模型组、二甲双胍组和茶多酚组,每组各10只。各组均于每日下午灌胃,正常组与模型组给予无菌生理盐水,二甲双胍组给予二甲双胍水溶液,茶多酚组给予茶多酚。干预120 d后,检测各组大鼠的空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）;酶联免疫吸附试验法检测肝脏乙酰辅酶A羧化酶（ACC）和激素敏感性脂肪酶（HSL）;实时荧光定量法检测肝脏ACCmRNA、转录因子胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)mRNA、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）mRNA;免疫印迹法检测肝脏AMPKα1、磷酸化AMP活化蛋白激酶α1(P-AMPKα1)、SREBP1、HMGCR、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶（PEPCK）。...     

MTHFR和eNOS基因多态性与糖尿病肾病的相关研究

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因G894T位点与糖尿病肾病的关系。方法:运用PCR-RFLP检测2型糖尿病合并糖尿病肾病者60例(DN+组)、2型糖尿病不伴糖尿病肾病者60例(DN-组)、60例健康对照组(NC组)的MTHFR、eNOS基因型,比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果:(1)MTHFR基因C677T位点DN+组TT基因型频率及T等位基因频率明显高于DN-组及NC组(P<0.05);(2)eNOS基因G894T位点DN+组T等位基因频率明显高于DN-组及NC组(P<0.05);(3)MTHFR基因C677T位点的TT基因型与eNOS基因G894T位点的TG基因型在2型糖尿病肾病方面具有协同作用(P<0.05)。结论:MTHFR基因C677T位点和eNOS基因G894T位点变异增加了糖尿病患者发生肾病的危险性,可能是糖尿病肾病的遗传易感基因。     

栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及AMPK/MLCK信号通路的影响

目的 探讨栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响.方法 90只SD大鼠按随机数字表法分成对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300mg/kg)、栀子苷低、高剂量组(40、80mg/kg),每组18只.2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导制备溃疡...     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黄芪甲苷对慢性肾衰竭大鼠钙磷代谢紊乱的改善作用及机制

[目的]分析黄芪甲苷(astragaloside-Ⅳ,AS-Ⅳ)对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠钙磷代谢紊乱的改善作用,以及对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的调控机制.[方法]将无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级雄性Wista...     

黄芪甲苷对糖尿病大鼠肝损伤保护作用及其机制研究

目的 探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用及其可能机制.方法 采用腹腔注射链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型.将造模成功的糖尿病大鼠随机分为对照组、模型组、罗格列酮组(1.25 mg/kg)、AS-Ⅳ组(20、40、80 mg/kg).连续灌胃给药6周,于给药前测空腹血糖,处死,取肝脏,称肝湿重,计算肝脏指数;采用ELISA法测定各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;试剂盒检测肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和丙二醛(MDA)含量变化;HE染色观察肝组织病理形态学变化;免疫组化法检测肝脏组织中胰岛素受体底物2(IRS-2)的表达;Western blot法检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达水平.结果 与对照组相比,模型组大鼠肝脏指数、空腹血糖、空腹血清胰岛素、血清AST、ALT、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白水平、肝脏组织中MDA含量均明显升高(P＜0.01),T-SOD与GSH-Px降低(P＜0.01),肝病理损伤明显,同时肝组织中IRS-2、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达减少.与模型组相比,AS-Ⅳ(20、40、80 mg/kg)组能明显改善上述指标的变化,使肝组织损伤减轻,并增加IRS-2、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达.结论 AS-Ⅳ对糖尿病大鼠肝损伤有保护作用,其机制可能与抗氧化、上调肝脏PI3 K/AKT信号通路有关.     

栀子苷对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎作用及AMPK/MLCK信号通路的影响

目的 探讨栀子苷对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎作用及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响。方法 90只SD只大鼠随机分成对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300mg?kg^-1)、栀子苷低、高剂量组(40、80mg?kg^-1),每组18只;模型组、柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎模型,建模成功后,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低、高剂量组给予相应药物灌胃,持续4周,对照组及模型组给予等体积的生理盐水。试验结束后,测定各组大鼠结肠黏膜损伤指数、疾病活动指数(DAI)评分、大体形态损伤评分,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WB)法测定大鼠肠黏膜AMPK、MLCK mRNA和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 与对照组比较,模型组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);且栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平低于栀子苷低剂量组(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平高于栀子苷低剂量组(P<0.05);与柳氮磺胺吡啶组比较,栀子苷低剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);栀子苷高剂量组和柳氮磺胺吡啶组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白表达、IL-2、IL-6、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 栀子苷能抑制溃疡性结肠炎大鼠肠道损伤及炎症反应;其机制与栀子苷可能增强了AMPK mRNA和蛋白表达,抑制了MLCK mRNA和蛋白表达,进而抑制了AMPK/MLCK信号通路有关。     

基于NRF2/FPN1通路探究黄芪甲苷减轻糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制

目的 探讨基于核因子E2相关因子2（NRF2）/膜铁转运蛋白1（FPN1）通路对黄芪甲苷（AS）减轻糖尿病（DM）心肌梗死大鼠心肌损伤的作用机制。方法 通过高糖饲料及链脲佐菌素（STZ）建立DM大鼠模型,将DM造模成功的50只大鼠通过结扎左冠状动脉前降支构建DM心肌梗死大鼠模型,将造模成功的50只大鼠随机分为梗死组、AS低剂量（AS-L,20 mg/kg AS）组、AS中剂量（AS-M,40 mg/kg AS）组、AS高剂量（AS-H,80 mg/kg AS）组、AS-H+NRF2抑制剂（ML385,80 mg/kg AS+30 mg/kg ML385）组,同时以10只开胸大鼠设为假手术组。干预结束后,检测心功能［左心室射血分数（LVEF）、肌酸激酶同工酶-MB（CK-MB）、肌酸激酶（CK）］指标;2, 3, 5-氯化三苯基四唑（TTC）检测心肌梗死体积比;试剂盒检测铁含量水平;HE染色检测大鼠心肌组织病理变化;qRT-PCR及Western blot分析心肌组织中NRF2、谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4）、FPN1mRNA及蛋白表达。结果 与假手术组相比,梗死组大鼠病理损伤严重,LVEF、NRF2、GPX4、FPN1mRNA及蛋白表达显著降低,梗死体积比、铁离子含量、CK-MB、CK显著增加（均P<0.05）;与梗死组相比,AS-L组、AS-M组、AS-H组大鼠病理损伤得到改善,LVEF、NRF2、GPX4、FPN1mRNA及蛋白表达显著增加,梗死体积比、铁离子含量、CK-MB、CK显著降低,呈现剂量依赖性（均P<0.05）;与AS-H组相比,AS-H+ML385组病理损伤相对严重,LVEF、NRF2、GPX4、FPN1mRNA及蛋白表达显著降低,梗死体积比、铁离子含量、CK-MB、CK显著增加（均P<0.05）。结论 AS可减轻DM心肌梗死大鼠心肌损伤,可能通过激活NRF2/FPN1通路抑制铁死亡实现     

黄芪甲苷基于血管内皮细胞间连接对脑缺血/再灌注大鼠脑保护作用

目的 探讨黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑血管内皮间连接的保护作用及机制.方法 选取健康清洁级、雄性、SD大鼠40只,随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血/再灌注损伤模型组(I/R组)、模型+黄芪甲苷组(AST-Ⅳ组).Sham组只分离、暴露颈部血管,不插线栓,其余各组大鼠以改良线栓法建立大脑中动脉阻塞/再灌注模型...     

瑞舒伐他汀通过NO/eNOS信号通路改善慢性心力衰竭大鼠的心功能

目的探讨瑞舒伐他汀(ROS)通过一氧化氮(NO)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路对慢性心力衰竭大鼠心功能的保护作用及其机制。方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠,皮下注射异丙肾上腺素[ISO,5mg/(kg·d)]连续给药7d诱发大鼠慢性心力衰竭,瑞舒伐他汀组[ROS,5mg/(kg·d)]于第1天皮下注射ISO开始同时予以灌胃给药至第7天,停止ISO皮下注射,第8天继续给予ROS灌胃至第14天。检测血流动力学参数和心肌NO含量并观察心肌组织病理变化,采用Western blot法检测心肌eNOS的蛋白表达。结果 1瑞舒伐他汀显著改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠心脏血流动力学参数,与ISO组比较,瑞舒伐他汀组显著升高左心室收缩压(LVSP)和左心室最大上升速率(+LV dP/dtmax)(P<0.01),显著降低左心室最大下降速率(-LV dP/dtmin)(P<0.01)。2瑞舒伐他汀可改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌组织病理损害,与ISO组比较,瑞舒伐他汀的治疗可缩小心肌纤维化面积,减轻炎性细胞浸润及心肌细胞水肿,减轻毛细血管扩张。3在慢性心力衰竭大鼠心肌组织中,瑞舒伐他汀显著升高ISO诱导减低的NO含量(P<0.01)。4瑞舒伐他汀组与ISO组比较,增加ISO诱导降低的心肌组织eNOS蛋白的表达(P<0.01)。结论瑞舒伐他汀可改善ISO诱导慢性心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与NO/eNOS信号转导通路有关。     

黄芪甲苷对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及机制

目的 探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用并探讨其分子机制。方法 将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：假手术组(sham)、黄芪甲苷组(sham+AS-Ⅳ)、脓毒症组(CLP)和脓毒症+黄芪甲苷处理组(CLP+AS-Ⅳ),每组10只。采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症模型。所有动物在手术前12 h禁食,可自由饮水。通过腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉小鼠。sham组小鼠进行与CLP组相同的剖腹手术,但不结扎和穿刺盲肠。sham+AS-Ⅳ组和CLP+AS-Ⅳ组小鼠术后腹腔注射黄芪甲苷(100 mg/kg)治疗,sham组和CLP组小鼠术后给予腹腔注射等体积生理盐水处理。处理至术后24 h后,采集血、尿等样本并处死小鼠,检测小鼠血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)及尿液中肾损伤分子-1(KIM-1)和尿白蛋白/肌酐(UAlb/Cr)的水平,观察小鼠肾组织形态结构,检测小鼠肾组织中IL-1β、IL-6和TNF-α以及Bax、Caspase-3的mRNA水平,MDA、ROS含量及SOD、GSH的活性,肾组织的细胞凋亡情况,SIR...     

基于AMPK/mTOR/ULK1通路探讨解毒通络保肾方改善糖尿病肾脏疾病的作用机制

目的 通过动物实验及细胞实验观察解毒通络保肾方对糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠肾脏病理形态及大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖的影响,探讨其改善DKD的作用机制。方法 (1)从85只健康雄性SD大鼠中任取10只纳入正常组,其余大鼠采用高脂饲料喂养与链脲佐菌素注射诱导为DKD模型。造模成功的大鼠按体质量随机分为模型组,厄贝沙坦组(16 mg/kg),解毒通络保肾方低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg)。正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃。每日1次,连续灌胃8周。采用光学显微镜和透射电镜观察肾脏组织病理形态,蛋白质印迹法检测肾脏组织自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin-1)、自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、泛素结合蛋白P62(P62)、自噬相关蛋白5(ATG5)的表达。(2)培养HBZY-1细胞,分为空白对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),模型组(30 mmol/L葡萄糖),解毒通络保肾方低、中、高剂量组(50、100、200 mg/L),厄贝沙坦组(5μmol/L)。采用CCK8法检测细胞增殖率,划痕实验检测细胞迁移能力,蛋白质印迹法检测LC...     

糖尿病对大鼠阴茎组织中eNOS和nNOS的影响及胰岛素的治疗作用

目的:研究糖尿病(DM)对大鼠阴茎组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达的影响及胰岛素的治疗作用。方法:随机选取雄性SD大鼠70只,其中60只以链脲佐菌素(STZ)诱导建立DM模型后,行阿朴吗啡阴茎勃起实验,筛选DM性ED模型。以未加处理因素的10只大鼠作为正常对照组,发生ED者随机分为DM性ED组、胰岛素组,发生DM但未发生ED者作为DM组,未成DM者作为STZ组。各组干预6周后,采用免疫组织化学SP法检测各组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达。结果:DM组、DM性ED组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.01);胰岛素组显著高于DM组和DM性ED组(P<0.01),其中,eNOS蛋白表达水平接近于正常对照组(P>0.05),nNOS蛋白表达水平低于正常对照组(P<0.01);STZ组与正常对照组之间eNOS、nNOS蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)DM可以显著降低大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平,提示其可能是DM性ED发病的重要机制之一;(2)胰岛素干预可以减缓DM性ED大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达的下降。