茶多酚对肺癌PG细胞生长的调控研究

目的:探讨茶多酚对人PG细胞生长的影响。方法:采用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用;应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析,检测用药后PG细胞内Ca2 +浓度、CD44 V6表达和细胞增殖周期分布的变化。结果:3个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用,呈剂量依赖关系。细胞增殖受到明显抑制,使细胞阻滞于G0 / G1期,不能进入S期及G2 / M期,细胞增殖指数明显下降。细胞内Ca²⁺浓度与对照组相比,逐渐上升;CD44 V6表达水平则呈逐渐下降。结论:茶多酚对PG细胞的生长具有抑制作用,其作用机制与改变细胞内Ca2 +浓度和CD44 V6表达有关     

FasL及CD_(44)V_6在食管癌中的表达及其在细胞凋亡中的作用

细胞凋亡或称细胞程序性死亡是维持机体正常生理过程和功能所必备，细胞凋亡障碍是肿瘤发生发展的一个重要因素犤１犦。凋亡因子FasL为细胞膜Ⅱ型跨膜糖蛋白，通过与它的受体Fas结合，向细胞内传导信号导致细胞凋亡犤２犦。以前的报道示Fas和FasL可在不同的组织中表达，包括各种淋巴和上皮组织的恶性肿瘤以及食管癌犤３犦。因此，Fas和FasL的异常表达与肿瘤发生有关。而粘附分子CD４４V６为多功能的细胞表面糖蛋白。以前的研究多侧重于肿瘤的转移，尤其是周围淋巴结转移方面。最近的研究发现，CD４４V６具有抑制CD３／TCR复合体引发…     

茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响

目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ, ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用;用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程,使Ｇ１ 期细胞明显增多,Ｓ期细胞减少,细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时,ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡,其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８ １２ ０４ 收稿,１９９９ ０７ ３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题,Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬,女,副研究员,硕士生导师,研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂,使细胞停滞于Ｇ１ 期,阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期;同时亦可诱导细胞凋亡,这些结果可能为ＴＰ的抗瘤作用提供理论依据     

苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究

目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式,同时利用激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2 浓度的监测,研究SW与细胞内Ca2 超载的关系。结果:SW体外抗SGC7901细胞的完全致死剂量为6.2μg·ml-l,高于0.05μg·ml-l时抑制作用明显(P<0.05),其LC50为0.84μg·ml-l;经SW0.5～1.5μg·ml-l处理24h可引起凋亡抑制基因p53、Bcl2的明显下降、凋亡促进基因cmyc的明显升高以及肿瘤细胞内Ca2 超载,最终诱导SGC7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。     

苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究

目的:探讨苦马豆素(swainsonine,SW)体外诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC-7901细胞的作用浓度;通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53,c-myc,Bcl-2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC-7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式;同时利用激光共聚焦显微镜监测细胞内Ca~(2+)浓度,研究SW与细胞内Ca~(2+)超载的关系。结果:SW体外抗SGC-7901细胞的完全致死浓度为6．2μg·mL~(-1),高于0．05μg·mL~(-1)时抑制作用明显(P＜0．05),其IC_(50)为0．84μg·mL～(-1);经SW 0．5,1．5,4．5μg·mL~(-1)处理24h可引起凋亡抑制基因p53和Bcl-2的明显下降,凋亡促进基因c-myc明显升高以及肿瘤细胞内Ca~(2+)超载,最终诱导SGC-7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。     

葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响

目的探讨葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响。方法采用钙荧光探针F luo-3/AM标记培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察H2O2、ATP和高K+刺激作用下葛根素对培养的HUVECs中钙超载的影响。结果葛根素能抑制H2O2、ATP和高K+引起的[Ca2+]i升高,抑制率分别为72.2%、56.5%和78.2%;葛根素对高K+引起的钙超载的抑制作用与L-型电压依赖型钙通道的特异性拮抗剂Verapam il相似。结论葛根素可以缓解培养人脐静脉内皮细胞内钙超载,其作用机制可能与拮抗膜上电压依赖型钙通道和抑制内质网钙库释放有关。     

布比卡因对大鼠心室肌细胞内钙的影响

目的：运用激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度的布比卡因对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]。）的影响，进而探讨布比卡因心肌抑制作用的可能机制。方法：培养新生SD大鼠心室肌细胞，将培养的心室肌细胞随机分为4组．分别为对照组（C组）、10μmol／L布比卡因组（B2组）、50μmol／L布比卡因组（岛组）、100μmol／L布比卡因组（取组）。各组细胞均用钙荧光指示剂Fluo-3／AM染色，运用激光扫描共聚焦显微镜动态观察单个心室肌细胞内钙荧光强度（fluorescent intensity．FI）的变化。结果：与对照组比较10μmol／L的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内钙FI变化无明显影响（P〉0.05），50μmol／L和100μmol／L的布比卡因则明显抑制KCl诱导的钙离子跨膜内流（P〈0．05）；抑制程度B2组〉B2组（P〈0．05）。结论：低浓度的布比卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内[Ca^2＋]i的变化无明显影响，高浓度则明显抑制钙离子跨膜内流。布比卡因呈浓度依赖性抑制兴奋收缩耦联时心室肌细胞内游离钙离子内流，可能是其心肌抑制作用的原因之一。     

脑活素对液压冲击伤后原代神经细胞内游离钙的影响

目的探讨脑活素对液压冲击伤后神经细胞内游离钙的作用。方法原代培养的神经细胞分(1)正常组,(2)创伤组:液压冲击致神经细胞创伤后24h和48h组,(3)脑活素治疗组:分别于神经细胞创伤后0、1h给予1.25ml.L-1脑活素治疗(0h给药和1h给药组)。用激光扫描共聚焦显微镜和Ca2+荧光探针Fluo-3/AM观察细胞创伤后24h和48h细胞内游离钙[Ca2+]i的变化。结果神经元细胞创伤后,伤后24h神经元胞质内钙离子浓度达高峰,48h仍维持在较高水平;脑活素0或1h治疗后,在24h均能明显减轻创伤神经元细胞内的钙超载,48h后只有1h给予脑活素的细胞钙离子强度降低。结论脑活素对创伤的神经细胞有保护作用,且具有治疗时间窗。     

CD44V6和P27kip1基因蛋白表达对非小细胞肺癌生物学行为和预后的影响

目的 探讨CD44V6和P27^kip1以基因蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其意义。方法 应用免疫组化S-P法检测63例NSCLC组织、20例正常支气管黏膜中CD44V6和P27^kip1蛋白的表达情况。结果 CD44V6在NSCLC中的阳性表达率为65．1％，而在正常支气管黏膜中无阳性表达。CD44V6的表达与NSCLC的淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．01）。P27^kip1在正常支气管黏膜和NSCLC组织中的阳性表达率分别为80％和54％，两组比较差异有显著意义（P〈0．05）。P27^kip1的表达缺失与NSCLC的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论 CD44V6和P27^kip1基因蛋白在NSCLC的发生、发展、转移过程中均发挥作用，可作为判断NSCLC预后的重要指标。     

As_2O_3诱导人肝癌细胞凋亡及对Fas表达和钙含量的影响

化疗在原发性肝癌的综合治疗中占重要地位.为寻找肝癌治疗新的有效药物,我们观察了As2O3对人肝癌细胞株BEL7402的生物学效应,以期为As2O3临床治疗肝癌提供实验依据.     

Over-expression and siRNA of a novel environmental lipopolysaccharide-responding gene on the cell cycle of the human hepatoma-derived cell line HepG2

Lipopolysaccharide (LPS) is the toxic determinant for Gram-negative bacterium infection. The individual response to LPS was related to its gene background. It is necessary to identify new molecules and signaling transduction pathways about LPS. The present study was undertaken to evaluate the effects of a novel environmental lipopolysaccharide-responding (Elrg) gene on the regulation of proliferation and cell cycle of the hepatoma-derived cell line, HepG2. By means of RT-PCR, the new molecule of Elrg was generated from a human dental pulp cell cDNA library. Expression level of Elrg in HepG2 cells was remarkably upgraded by the irritation of LPS. Localization of Elrg in HepG2 cells was positioned mainly in cytoplasm. HepG2 cells were markedly arrested in the G1 phase by over-expressing Elrg. The percentage of HepG2 cells in G1 phase partly decreased after Elrg-siRNA. In conclusion, Elrg is probably correlative with LPS responding. Elrg is probably a new protein in cytoplasm which plays an important role in regulating cell cycle. The results will deepen our understanding about the potential effects of Elrg on the human hepatoma-derived cell line HepG2.