2ME2对脊髓损伤大鼠运动功能及凋亡相关基因caspase-3表达的影响

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2ME2)对脊髓损伤(SCI)大鼠运动功能及细胞凋亡相关基因caspase-3表达的影响。方法成年雄性SD大鼠72只按随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组和2ME2治疗组,每组24只,采用改良的Allen’s法制作脊髓损伤模型,2ME2干预组大鼠自脊髓损伤模型建立后第1天开始按24 mg/kg给予2ME2腹腔注射,连续注射7 d,在造模成功后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d采用BBB运动评分系统对各组大鼠运动功能进行评估,造模成功后第7天应用免疫荧光技术检测各组大鼠caspase-3表达,应用TUNEL染色进行凋亡细胞计数。结果造模后14 d、21 d、28 d 2ME2治疗组BBB评分显著高于脊髓损伤组,差异具有统计学意义(P<0.05),与假手术组相比,脊髓损伤组及2ME2治疗组caspase-3表达阳性细胞数及凋亡细胞数显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05),2ME2治疗组较脊髓损伤组caspase-3表达阳性细胞数及凋亡细胞数显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 2ME2治疗能改善脊髓损伤大鼠肢体运动功能,具有一定神经保护作用,其治疗机制可能与通过抑制脊髓损伤后的进一步细胞凋亡相关基因的表达有关。     

肾源性细胞因子促红细胞生成素对急性脊髓损伤大鼠细胞凋亡的影响**★

目的：促红细胞生成素为肾源性细胞因子，在大鼠急性脊髓损伤后对脊髓神经功能具有保护作用。实验拟证明不同时间硬膜外腔注射后其对脊髓神经细胞凋亡的影响。 方法：实验于2007-01/04在苏州大学附属第二医院动物实验室完成。①实验材料：清洁级成年雄性SD大鼠48只，体质量(270 ±10) g；实验用人重组促红细胞生成素为日本麒麟啤酒株式会社制造，规格3 000 IU /支。②实验分组及处理：将大鼠随机分为正常组6只，假手术组6只（仅切除椎板），生理盐水组18只，实验组18只。按改良Allen打击法建立大鼠脊髓不完全损伤模型。实验组分别于大鼠脊髓损伤后1，6，24 h（每个时间点6只），于硬膜外腔注射重组人促红细胞生成素5 000 u/（kg?bw）；生理盐水组于相同时间予以相同体积生理盐水。③实验评估：通过动物神经运动功能BBB评分及斜板试验评价神经损伤程度；苏木精－伊红染色法观察组织学改变，并采用原位末端标记法标记法检测脊髓神经细胞凋亡数。 结果：①神经行为学评分：正常组、假手术组大鼠双下肢运动功能正常；与生理盐水组相比,脊髓损伤后实验组1,6及24 h神经运动功能有改善；斜板角度及BBB评分均明显提高，差别有显著性意义(P < 0.05)。②组织学苏木精－伊红染色结果：实验组组织学破坏改变明显较生理盐水组轻。③凋亡神经细胞及计数结果：实验组脊髓神经细胞凋亡指数均明显下降，差异有显著性(P < 0.05)。 结论：早期应用外源性促红细胞生成素对脊髓不完全损伤后引起的神经运动功能损害具有保护作用,能明显改善脊髓损伤后的临床功能表现。此种保护作用与促红细胞生成素能够抑制神经细胞凋亡有关。     

孕酮对兔脊髓急性缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨孕酮对兔脊髓急性缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法将90只日本大耳白兔随机分为假手术组(n=30)、脊髓损伤组(n=30)与孕酮治疗组(n=30),各组又进一步分为12 h、24 h、36 h、48 h、72 h、14 d等6个亚组,每亚组5只。假手术组只行腹部切开术但不阻断腹主动脉。脊髓损伤组和孕酮治疗组均制作缺血再灌注模型,制模成功后孕酮治疗组每24h注射孕酮1次(将孕酮溶于玉米油,浓度10 mg/ml,注射剂量为8 ml/kg),脊髓损伤组在相同时间点注射等量生理盐水。采用TUNEl染色评估细胞凋亡,采用BBB评分评估运动功能。结果 HE染色结果显示,假手术组脊髓形态正常;脊髓损伤组可见脊髓结构被破坏,正常神经元数目减少;孕酮治疗组较脊髓损伤组正常神经元数目多。TUNEL染色结果显示,脊髓损伤组和孕酮治疗组各时间点凋亡细胞数均明显高于假手术组(P0.05);孕酮治疗组各时间点凋亡细胞的数目均明显少于脊髓损伤组(P0.05)。假手术组术后12 h BBB评分为17.3分,术后14 d时升高到21.0分;脊髓损伤组术后12 h BBB评分为0.6分,随后缓慢升高,术后14 d时评分为9.2分。孕酮治疗组BBB评分变化与脊髓损伤组相似,但术后36 h开始,各时间点评分均明显高于相应脊髓损伤组(P0.05)。结论孕酮治疗可改善脊髓急性缺血再灌注损伤兔运动功能,可能与抑制细胞凋亡有关。     

咯利普兰对大鼠脊髓损伤后保护作用及其机制

目的探讨咯利普兰对大鼠脊髓损伤(SCI)后的保护作用及其可能机制。方法将84只SD大鼠随机分为三组:假手术组(n=4)、损伤组(n=40)和治疗组(n=40)。大鼠SCI模型采用纽约大学脊髓重物坠落伤模型。治疗组伤后即刻腹腔内注射咯利普兰,剂量为0.5 mg(/kg.d),2次/d,连续3d。损伤前后对损伤组和治疗组大鼠进行开放场地试验(BBB)评估大鼠脊髓功能。免疫组化染色分析三组大鼠损伤前后脊髓兴奋性氨基酸转运蛋白4(EAAT4)表达情况。结果损伤组和治疗组伤后即刻大鼠BBB评分均为0,处于完全瘫痪状态;然后BBB评分逐渐增高;伤后42、56和64d,治疗组BBB评分明显高于损伤组(P<0.01)。假手术组脊髓组织形态正常,EAAT4表达较少;脊髓损伤1周后,损伤中央出现较大空洞,EAAT4表达明显升高;而治疗组,组织空洞缩小,EAAT4表达较损伤组明显增加。结论咯利普兰有助于大鼠脊髓损伤后功能恢复,其机制可能与增加EAAT4表达有关。     

脊髓慢性压迫性损伤后细胞凋亡和BDNF表达的观察

目的 探讨大鼠脊髓在遭受到持续进行性压迫损伤后神经细胞凋亡以及脑源性神经营养因子（BDNF）及其TrkB受体的变化。方法 将75只SD大鼠分为模型组、对照组和正常组,各25只;根据造模后取材时间,各组再分为1、7、14、21、28 d 5亚组,每亚组5只。胸11~12椎板和硬脊膜之间置入缓膨材料（3 mm×5 mm,厚0.8 mm）制作大鼠慢性压迫性脊髓损伤模型,BBB评分评估行为学变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,免疫组化染色检测BDNF及其TrkB受体表达变化。结果 造模后7、14、21、28 d,模型组大鼠BBB评分均明显低于对照组和正常组（P<0.05）,而对照组和正常组均无统计学差异（P>0.05）。模型组大鼠可观察到从脊髓受压开始,神经细胞开始出现凋亡,中央管及前角区域的神经细胞凋亡明显,邻近灰质的白质部分神经胶质细胞凋亡明显;而对照组和正常大鼠未见明显凋亡细胞。模型组大鼠脊髓内BDNF及其TrkB受体呈强阳性,尤其是神经元部位,BDNF及其受体TrkB表达明显,且主要表达在运动类神经元中,随压迫进行,表达逐渐增强,至相对稳定;对照组和正常组大鼠脊髓内BDNF及其TrkB受体表达较少。结论 大鼠脊髓在受到慢性压迫性损伤时,神经细胞凋亡明显,BDNF、TrkB受体表达明显增强。     

丁酸钠对脊髓损伤大鼠模型的神经保护作用及机制

目的 探讨丁酸钠对脊髓损伤大鼠模型的神经保护作用及机制.方法 SD大鼠36只,随机分为丁酸钠组和对照组.用NYU撞击仪击打T8脊髓制作脊髓损伤模型,并立即给予丁酸钠组大鼠丁酸钠600 mg/(kg·d)腹腔注射,连续7 d.制模前、后1～6周给予大鼠Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分.制模后1周时,用免疫荧光染色法检查脊髓组织凋亡细胞和炎症细胞,制模后6周时进行神经传导功能检查.结果 脊髓损伤后4～6周时,丁酸钠组BBB评分显著高于对照组(均P＜0.05);在脊髓损伤后1周时,丁酸钠组脊髓的凋亡细胞和炎症细胞数显著少于对照组(均P＜0.05);脊髓损伤后6周时,丁酸钠组运动诱发电位的潜伏期明显短于、波幅明显高于对照组(均P＜0.05).结论 丁酸钠对脊髓损伤大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抗凋亡和抗炎作用有关.     

依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的:观察依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后细胞凋亡的影响,探讨脊髓保护的作用机制。方法:120只SD雄性大鼠,Allen法建立脊髓损伤模型,随机分为依达拉奉组、假手术组和对照组（均n=40）。依达拉奉组给予依达拉奉10mg·kg^-1,每日2次腹腔注射,连续6d;对照组给予等量同次数的生理盐水腹腔灌注;假手术组仅行椎板切除,不损伤脊髓,不给药。在伤后第1、7、14、28天观察各组大鼠活动情况行BBB评分,取受伤脊髓节段检测抑制羟自由基能力、caspase-3蛋白表达、原位脱氧糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL法）标记凋亡细胞。结果:依达拉奉组抑制羟自由基能力明显高于假手术组和对照组（P<0.05）;依达拉奉组caspase-3与对照组比各时间点的表达明显降低（P<0.05）;依达拉奉组与对照组比各时间点凋亡细胞显著减少（P<0.05）。结论:依达拉奉能减少急性脊髓损伤部位的羟自由基,下调caspase-3表达,抑制脊髓神经细胞凋亡,对继发性脊髓损伤有保护作用。     

神经生长因子对创伤性脊髓损伤大鼠膀胱功能和轴突损伤修复的作用研究

目的 探讨神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)对创伤性脊髓损伤(Traumatic spinal cord injury, t-SCI)大鼠膀胱功能和脊髓神经轴突损伤修复的影响及其分子机制。方法 取30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,通过改良Allen’s击打法构建创伤性脊髓损伤模型,随机分为假手术组、损伤组和NGF组,每组各10只;采用血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)评分观察术前、术后大鼠的后肢运动功能;BL-420生物仪实验系统检测尿动力学;甲苯胺蓝染色吻合口远端截取的左侧腰6前根,计算有髓轴突数量;采用苏木精-伊红(Hematoxylin eosin, HE)染色大鼠膀胱组织;原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick and labeling, TUNEL)染色大鼠损伤严重的脊髓,观察脊髓神经细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脊髓组织中原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(proto-oncogene serine/threonine-protein kinase, R...     

丹酚酸B促进大鼠急性脊髓损伤修复及量效关系探讨

目的 研究腹腔注射丹酚酸B(Sal B)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型的神经保护作用和促功能恢复作用,探讨Sal B在急性SCI治疗的应用价值,并探讨其量效关系. 方法参照Allen法制作SD大鼠T9脊髓节段急性损伤模型,腹腔注射Sal B或PBS液,按照注射液的不同分为4组:Sal B高剂量组(20 mg/kg组),Sal B中剂量组(10 mg/kg组),Sal B低剂量组(2 mg/kg组)和对照组(注射PBS液),每组12只.用比色法检测髓过氧化物酶活性;用免疫组织化学染色法检测损伤脊髓节段MMP-1、c-Fos抗体表达情况,用干湿重法评价的水肿程度,并采用后肢功能评分(BBB)评分评价10 d内大鼠的运动功能恢复情况. 结果损伤后4 h Sal B治疗组髓过氧化物酶活性下降,损伤后1 dHE染色切片显示SalB组治疗后局部组织损伤减轻,炎性细胞浸润数量减少,损伤后1d免疫组化染色结果显示,Sal B治疗组比对照组MMP-1表达减少,c-Fos表达下调;Sal B治疗组水肿程度轻于对照组,从SCI后第7天起,SalB组高剂量组(20 mg/kg组)和对照组之间的BBB评分有显著性差异(P<0.05).各指标改善情况与Sal B剂量呈正相关性. 结论 Sal B可减轻大鼠SCI后的组织损伤,下调损伤相关因子MMP-1和c-Fos的表达,降低损伤局部髓过氧化物酶活性,减轻组织水肿,并能促进损伤大鼠的功能恢复.     

丹酚酸B促进大鼠急性脊髓损伤修复及量效关系探讨

目的 研究腹腔注射丹酚酸B(Sal B)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型的神经保护作用和促功能恢复作用,探讨Sal B在急性SCI治疗的应用价值,并探讨其量效关系. 方法参照Allen法制作SD大鼠T9脊髓节段急性损伤模型,腹腔注射Sal B或PBS液,按照注射液的不同分为4组:Sal B高剂量组(20 mg/kg组),Sal B中剂量组(10 mg/kg组),Sal B低剂量组(2 mg/kg组)和对照组(注射PBS液),每组12只.用比色法检测髓过氧化物酶活性;用免疫组织化学染色法检测损伤脊髓节段MMP-1、c-Fos抗体表达情况,用干湿重法评价的水肿程度,并采用后肢功能评分(BBB)评分评价10 d内大鼠的运动功能恢复情况. 结果损伤后4 h Sal B治疗组髓过氧化物酶活性下降,损伤后1 dHE染色切片显示SalB组治疗后局部组织损伤减轻,炎性细胞浸润数量减少,损伤后1d免疫组化染色结果显示,Sal B治疗组比对照组MMP-1表达减少,c-Fos表达下调;Sal B治疗组水肿程度轻于对照组,从SCI后第7天起,SalB组高剂量组(20 mg/kg组)和对照组之间的BBB评分有显著性差异(P<0.05).各指标改善情况与Sal B剂量呈正相关性. 结论 Sal B可减轻大鼠SCI后的组织损伤,下调损伤相关因子MMP-1和c-Fos的表达,降低损伤局部髓过氧化物酶活性,减轻组织水肿,并能促进损伤大鼠的功能恢复.     

人参皂甙Rd对兔脊髓缺血性损伤保护作用的量效关系研究

目的探讨人参皂甙Rd对脊髓缺血性损伤保护作用的剂量效应关系。方法 40只雄性新西兰大白兔,随机分为5组（n=8）,采用肾下主动脉阻断法造成脊髓缺血（20min）。对照组：即单纯缺血再灌注组;保护组：即Rd-5组、Rd-10组、Rd-20组和Rd-40组,分别在缺血前1h从耳缘静脉注射人参皂甙Rd5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg;术后观察神经功能变化并记录再灌注4h、8h、12h、24h和48h神经功能学评分,再灌注48h处死动物后取脊髓（L5～7）标本行病理学观察。结果所有动物均存活,再灌注后48h,Rd-5组神经功能学评分和脊髓前角正常运动神经元计数与对照组相比均无显著性差异（P〉0.05）;Rd-10组神经功能学评分与对照组相比无显著性差异（P〉0.05）,但脊髓前角正常运动神经元计数明显高于对照组（P〈0.05）;Rd-20组、Rd-40组神经功能学评分和脊髓前角正常运动神经元计数均明显高于对照组（P〈0.01）,但这二组之间无显著性差异（P〉0.05）。且每组兔神经功能学评分与其对应脊髓前角正常神经元计数之间有显著相关性（r=0.769.P〈0.01）。结论人参皂甙Rd对脊髓缺血性损伤有保护作用,且呈一定的剂量效应关系。     

法舒地尔对脊髓缺血再灌注损伤后自由基及caspase-3表达的影响

目的探讨法舒地尔对脊髓缺血再灌注损伤后血清自由基水平、受损脊髓组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达以及下肢运动功能的影响。方法采用腹主动脉夹闭法将30只家兔制作成脊髓缺血再灌注损伤模型,并随机（掷硬币法）分为实验组和对照组。实验组腹腔内注射法舒地尔,对照组注射0．9％氯化钠溶液,共14d,建模后第1、3和5天,检测家兔血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）水平的变化;建模后第14天观察脊髓损伤的组织病理学变化,并用免疫组化染色检测受损脊髓中caspase-3的表达;建模后7、14d比较两组动物后肢运动功能。结果建模后第1、3和5天,法舒地尔组家兔血清MDA、SOD、NO水平均显著低于对照组,脊髓病理学也进一证实法舒地尔组脊髓损伤程度较对照组轻微,受损脊髓组织caspase-3的表达明显低于对照组（P〈0．01）;法舒地尔组家兔双下肢运动评分明显高于对照组（P〈0．01）。结论法舒地尔能明显降低脊髓损伤后血清自由基水平,抑制easpase-3的表达,对缺血再灌注损伤的脊髓有明显保护作用。     

许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植修复大鼠脊髓损伤*

目的：观察许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡、Bcl-2表达及下肢运动功能恢复的影响。 方法：清洁级SD大鼠随机分为4组：正常对照组、单纯损伤组、许旺细胞组、许旺细胞-海藻酸钠凝胶组。后3组制作脊髓全横断损伤模型。正常对照组、单纯损伤组不进行移植处理,许旺细胞组植入吸附许旺细胞悬液的明胶海绵块、许旺细胞-海藻酸钠凝胶组植入许旺细胞-海藻酸钠凝胶。分别于 12 h,1,3,7,21 d对动物进行BBB评分后处死,取损伤区脊髓节段制成石蜡切片进行TUNEL、Bcl-2染色,观察脊髓内凋亡细胞、Bcl-2细胞的数量及分布变化。 结果：正常对照组仅有少量淡染Bcl-2阳性细胞;单纯损伤组神经元Bcl-2免疫反应阳性细胞表达的高峰在第3天,14 d时Bcl-2免疫反应阳性细胞表达接近正常水平。许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植后损伤脊髓细胞Bcl-2免疫反应阳性细胞表达具有显著增高(P < 0.05),7 d高度表达并持续2周以上。单纯损伤组脊髓内细胞凋亡最多,并于损伤后1,7 d形成两个高峰,多分布于白质中。许旺细胞-海藻酸钠凝胶组BBB评分较单纯损伤组及许旺细胞组明显提高(P < 0.05)。 结论：许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植能抑制大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、促进Bcl-2的表达,提高了脊髓运动功能的恢复,但未达到正常水平。 关键词：脊髓损伤;细胞凋亡;许旺细胞;Bcl-2     

降纤酶对脊髓损伤后VEGF的表达及细胞凋亡的作用

目的 观察降纤酶对大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子(VEGF)的表达及细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠随机分为假手术组、对照组、干预组,每组各30只.各组分别于伤后各个时间点进行运动功能(BBB)评分,并随机处死5只,损伤部位取材进行HE染色和免疫组化染色,在光镜下观察、计算VEGF阳性细胞数及凋亡细胞数.结果 假手术组的BBB评分为21分,对照组、干预组在各时间点评分明显降低,干预组在5d及之后的各时间点BBB评分明显高于对照组(P＜0.05),尤其7d、14 d、28 d时间点两组有显著性差异(P＜0.01).脊髓损伤后对照组VEGF在脊髓损伤及损伤周边区高表达,5d达高峰,7d、14d表达仍较明显,28 d见少量表达.干预组各时间点VEGF的表达和对照组相比明显增加(P＜0.05),其中3d、5d、7d、14 d时间点差异显著(P＜0.01).凋亡细胞在脊髓损伤后逐渐增多,1d达高峰,此后逐渐减少;干预组各个时间点凋亡细胞数较对照组明显减少(P＜0.05),其中3d、5d、7d时间点差异显著(P＜0.01).相关性分析发现对照组1～5d时间点VEGF阳性细胞数和细胞凋亡数呈负相关(r=-0.90052,P＜0.05).结论 降纤酶可能通过促进VEGF的表达减少细胞凋亡,从而对急性脊髓损伤起治疗作用.     

大鼠脊髓损伤后含铁血黄素的变化及去铁敏的研究

目的初步探讨含铁血黄素在大鼠脊髓损伤后的变化及去铁敏的干预作用。方法健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为正常组10只、损伤不治疗组40(只)及去铁敏治疗组40(只)。大鼠急性脊髓损伤模型制作采用改良Allen’s法,于伤后1 d、7 d、14 d、28 d、56 d在脊髓损伤部位取材,行病理学(HE染色、和Perl’s普鲁士蓝)检查。通过运动功能评分法(BBB)观察每组动物给药前后不同时间点的神经功能改善情况。结果病理结果:①HE染色:去铁敏治疗组较正常损伤组:7 d后发现残存神经元数量较正常损伤明显增多,损伤周围胶质细胞增生明显,Nissl体较正常损伤组明显增多;14 d时,上述表现较7 d时更加明显;②Perl’s染色:损伤后1 d在去铁敏治疗组和损伤组没有发现含铁血黄素细胞,7 d后去铁敏治疗组损伤区含铁血黄素较同期损伤组明显增多,14 d后去铁敏治疗组含铁血黄素明显少于同期损伤组;28 d和56 d时,含铁血黄素无明显区别,均明显的减少。神经功能改善情况:术后24 h治疗组和对照组无明显的差异(P>0.05),7 d时治疗组明显好于对照组(P<0.01),14 d,28 d,56 d均明显优于对照组(P<0.01)。结论去铁敏对大鼠脊髓损伤后神经功能的改善有明显的效果。     

高压氧预处理对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的探讨高压氧预处理对急性脊髓损伤后不同时期神经细胞凋亡的影响及神经保护机制。方法将55只SD大鼠随机分为高压氧预处理组（25只）、正常损伤组（25只）及对照组（5只）。大鼠急性脊髓损伤模型制作采用改良Allen＇s法，分别于伤后1d、5d、7d、10d和14d在脊髓损伤部位取材，应用苏木精-伊红染色、原位缺口末端标记（TUNEL）方法检测大鼠脊髓损伤后的神经细胞凋亡情况。结果预处理组和单纯损伤组均见TUNEL阳性凋亡细胞，而预处理组凋亡细胞数减少；在各时间点预处理组与单纯损伤组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高压氧预处理可减少继发性脊髓损伤细胞凋亡，因而可促进脊髓损伤后修复，对中枢神经系统损伤具有保护作用。     

Effects of MPSS and a potent iNOS inhibitor on traumatic spinal cord injury

ONO-1714, a selective inhibitor of inducible nitric oxide synthetase (iNOS) attenuated the increase of apoptosis and improved the functional outcome of urinary bladder after traumatic spinal cord injury. These findings suggest that iNOS plays a role in the process of SCI. Early treatment with 30 mg/kg methylprednisolone sodium succinate (MPSS) could also inhibit the expression of iNOS gene, apoptosis and the loss of urinary bladder function. We confirmed that early MPSS treatment may prevent injury associated with apoptosis and urinary bladder disability by reducing iNOS mRNA. However, delayed single MPSS treatment 8 h after spinal cord injury was not effective. Early repeated MPSS treatment might allow greater recovery from acute spinal cord injury.     

高压氧预处理对大鼠脊髓损伤后GFAP和巢蛋白表达的影响

目的探讨高压氧预处理对成年大鼠脊髓损伤后不同时期巢蛋白（nestin）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达变化的影响。方法成年SD大鼠55只，雌性，体重250～300g。随机分为高压氧预处理组、正常损伤组各25只（n=5），对照组5只。采用改良Allen＇s法制作模型，分别于伤后1d、5d、7d、10d和14d取材，免疫组化染色及图像分析检测组织中GFAP和巢蛋白的表达。结果对照组显示除脊髓中央管周围可见到少量巢蛋白表达外，其它部位几乎不表达；GFAP在脊髓各个部位均有表达；正常脊髓损伤组：1d损伤区域巢蛋白和GFAP表达增加；5d表达显著增加；7d达高峰；10～14d逐渐下调，与对照组差异明显；高压氧预处理组：各时间段均与正常损伤组有明显差异（P〈0．05）。结论高压氧预处理可诱导巢蛋白高表达和星形胶质细胞增生，对中枢神经系统损伤起到保护作用。     

Comparative neuroprotective effect of sodium channel blockers after experimental spinal cord injury.

Spinal cord injury (SCI) results in loss of function below the lesion. Secondary injury following the primary impact includes a number of biochemical and cellular alterations leading to tissue necrosis and cell death. Influx of Na(+) ions into cells has been postulated to be a key early event in the pathogenesis of secondary traumatic and ischemic central nervous system injury. Previous studies have shown that some voltage-sensitive sodium channel blockers provide powerful neuroprotection. The purpose of the present study was to compare the neuroprotective effect of three sodium channel blockers-mexiletine, phenytoin and riluzole--after SCI. Ninety rats were randomly and blindly divided into five groups of 18 rats each: sham-operated group, trauma group (bolus injection of 1 mL physiological saline intraperiteonally [i.p.]), mexiletine treatment group (80 mg/kg, i.p.), phenytoin treatment group (200 mg/kg, i.p.) and riluzole treatment group (8 mg/kg, i.p.). Twenty-four hours after injury, the rats were killed for determination of spinal cord water content and malondialdehyde (MDA) levels. Motor function scores of six rats from each group were evaluated weekly for six weeks. Then the rats were killed for histopathological assessment. Although all the treatment groups revealed significantly lower MDA levels and spinal cord edema than the trauma group (p<0.05), the riluzole and mexiletine treatment groups were better than the phenytoin treatment group. In the chronic stage, riluzole and mexiletine treatment achieved better results for neurobehavioral and histopathological recovery than phenytoin treatment. In conclusion, all the tested Na(+) blockers had a neuroprotective effect after SCI; riluzole and mexiletine were superior to phenytoin.     

高压氧对大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子表达的影响

目的通过观察高压氧对成年大鼠脊髓损伤后不同时期血管内皮生长因子（VEGF）表达变化的影响,探讨高压氧对脊髓损伤的治疗作用机制。方法雌性SD大鼠55只,体质量250-300g。随机分为脊髓损伤组（对照组）、脊髓损伤＋高压氧治疗组各25只（n=5）,假手术组5只。采用改良A llen＇s法制作T8脊髓打击伤动物模型,各组分别于伤后1 d、1 w、2 w、4 w和8 w进行行为学观察,运动功能评分方法（BBB）评分后损伤部位取材,免疫组化染色及图像分析检测组织中VEGF的表达。结果假手术组的评分21分,治疗组和对照组与假手术组比较在各时间点评分明显降低,治疗组在各时间段BBB评分明显高于对照组（P〈0.05）。假手术组显示除脊髓中央管周围可见到极少量VEGF表达外,其它部位几乎不表达;对照组脊髓损伤1 d VEGF在大鼠脊髓损伤区及损伤周边区高表达,主要出现在软脊膜和脊髓灰、白质血管壁上的血管内皮细胞胞浆内,脊髓灰、白质内的神经胶质细胞和巨噬细胞胞浆内也出现表达,一般脊髓白质中更为多见,1 w后下调,而治疗组1 d至2 wVEGF的表达较对照组明显增加,差异有显著性（P〈0.05）,4 w、8 w时各组比较无统计学差异。结论急性脊髓损伤可上调VEGF在脊髓血管内皮细胞、胶质细胞和巨噬细胞内的表达,高压氧可能通过促进VEGF表达,促进血管内皮细胞生长从而对脊髓损伤起到治疗作用。