散发性结直肠癌微卫生不稳定性与hMSH3和hMSH6基因突变的研究

目的：探讨散发性结肠癌中微卫星不稳定性及其与错配修复基因hMSH3和hMSH6的关系。方法：应用放射性同位素为基础的聚合酶链式反应（PCR）技术检测了48例散发性结直肠癌中4个位点（D2S1233、BAT－26、D17S261、D17S799）的微卫星不稳定性和错配修复基因hMSH3和hMSH6的突变。结果：（1）散发性结直肠癌的hMSH3、hMSH6基因突变率分别为：10．4％、25％；（2）D2S123、BAT－26、D17S261、D17S799 4个位点的不稳定性检出率分别为12．5％、18．8％、10．4％、8．3％；（3）hMSH3和hMSH6基因突变和微卫星不稳定性相关显著（P＜0．01）。结论：（1）错配修复基因突变引起微卫星不稳定性是散发性结肠癌发生的重要机制；（2）部分微卫星不稳定性是由错配修复基因hMSH3和hMSH6突变引起，其余的微卫星不稳定性可能涉及到其它错配修复基因；（3）可通过单独检测BAT－26微卫星位点的不稳定性来确定RER阳性，这在肿瘤的防治中将是一种更加简单，准确的分子手段而应用于临床。     

nMSP-DHPLC检测粪便SEPT9基因甲基化及其在结直肠癌诊断中的应用

目的探讨粪便SEPT9(septin 9)基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。方法常规提取87例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁正常结肠组织及其术前粪便DNA,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methyl-ation specific PCR,nMSP)结合变性高效液相色谱(denatured high performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测结直肠癌组织、癌旁组织及粪便SEPT9基因甲基化水平;比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在87例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为80.5%(70/87),癌旁组织检出率为8.0%(7/87),二者比较差异有统计学意义(P<0.01),特异性为91.9%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果基本一致。SEPT9基因甲基化与大于65岁老年患者和右半结肠癌显著相关。结论结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高,尤其是老年和右半结肠癌患者;粪便SEPT9基因甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。