糖皮质激素受体基因多态性与肾病综合征患儿激素耐药相关性探讨

目的　筛选人类糖皮质激素受体基因 (NR3C1)的多态性 ,并分析其在激素耐药型、激素敏感型肾病综合征患儿以及参照人群 (随机抽取的脐血标本 )中的分布 ,以研究NR3C1多态性与肾病综合征患儿激素耐药的关系。方法　提取 3 9例激素耐药型、67例激素敏感型肾病综合征患儿以及64例参照人群血基因组DNA ,PCR扩增NR3C1中编码人类糖皮质激素受体全部功能区的第 2～ 9α外显子 ,以变性高效液相色谱 (DHPLC)分析检测PCR产物 ,对洗脱曲线异常者进行DNA测序。结果　在总计 170份基因组DNA样本中 ,DHPLC分析发现 12种多态性 ,均经DNA测序证实。另外 ,有 3组多态性呈紧密连锁的单倍型 ( [198G >A + 2 0 0G >A] ,[13 74A >G +IVSG 68_IVSG 63delAAAAAA +IVSH 9C >G + 2 3 82C >T] ,[1896C >T + 2 166C >T + 2 43 0T >C] )。后 2种单倍型为首次报道 ,它们在激素耐药型肾病综合征组的基因型频率 ( 10 .3 %和 15.4% )明显高于敏感型肾病综合征 ( 1.5%和 7.5% ) ,2种单倍型的OR值分别为 7.54和 2 .2 6。其余多态性在各组中出现频率相对较低。结论　在NR3C1基因中筛选出 12处多态性 ;而且新发现的 2种多位点紧密连锁的单倍型可能与肾病综合征患儿发生糖皮质激素耐药有关     

糖皮质激素受体与儿童激素耐药型肾病综合征研究进展

原发性肾病综合征是儿科常见的泌尿系统疾病,糖皮质激素是其首选和基础用药,然而临床中约有10％ ～ 20％的患者对激素耐药,耐药机制复杂.研究显示糖皮质激素受体参与了耐药的发生.本文就肾病综合征患儿糖皮质激素受体表达及其基因多态性做一综述.     

原发性肾病综合征患儿外周血糖皮质激素受体水平与糖皮质激素疗效探讨

检测了３６例原发性肾病综合征患儿外周血糖皮质激素受体（ＧＣＲ）、血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）及皮质醇水平、结果显示：肾病综合征患儿血浆ＡＣＴＨ及皮质醇水平低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），单纯性肾病综合征组ＧＣＲ水平高于正常对照组。应用糖皮质激素（ＧＣ）２４小时后ＧＣＲ水平下降，以单纯性肾病组下降明显。结果表明，肾病综合征患儿外周血ＧＣＲ水平与ＧＣ疗效关系密切，ＧＣＲ水平高者对ＧＣ疗效好，提示通过检测ＧＣＲ数量及其变化可预测ＧＣ对肾病综合征患儿的疗效。     

ACE2基因多态性与儿童原发性肾病综合征的相关性研究

目的血管紧张素转换酶2(ACE2)基因多态性与高血压病、糖尿病肾病等多种疾病相关,是否参与儿童原发性肾病综合征(PNS)的发病尚不明确,该研究探讨广东汉族儿童ACE2基因A9570G多态性与PNS的相关性。方法选取广东汉族PNS患儿66例为肾病组,健康体检者60例为对照组,采用聚合酶链反应-限制性核酸内切酶片段长度多态性技术分析肾病组与对照组的ACE2基因A9570G基因型分布和等位基因频率。结果在女性和男性,两组间等位基因频率及基因型分布差异均无统计学意义(P0.05)。肾病组按糖皮质激素治疗反应分为激素敏感组和激素耐药组,亚组分析发现,在女性,激素敏感组GG基因型频率低于激素耐药组(17%vs 45%,P0.05),激素敏感组G等位基因频率亦低于激素耐药组(31%vs 61%,P0.05);在男性,激素敏感组G基因型/G等位基因频率低于激素耐药组(36%vs 64%,P0.05)。结论 ACE2基因A9570G多态性与儿童PNS的发生无明确关联,但可能与PNS患儿对糖皮质激素治疗的反应有关,G等位基因可能是儿童PNS激素耐药的遗传易感因素。     

糖皮质激素抵抗及其受体表达的相关性研究进展

糖皮质激素(GC)被广泛应用于许多炎症性疾病和自身免疫性疾病的治疗并取得很好疗效,然而也有部分患儿用药过程中表现出GC效应不明显甚至出现激素抵抗,使得这些患儿的治疗复杂化.阐明GC的抵抗机制对于减轻长期大剂量使用GC带来的不良反应及优化治疗策略尤为重要.就小儿肾病综合征而言,GC抵抗可以发生于激素信号途径的多个环节,包括GC受体(GR)基因的表达、数量、GRα/GRB的相对水平、GR翻译后的修饰对其核转位及与配体亲和力的影响、炎症介质增高对GR诱导的基因转录的影响等,也有部分GC抵抗的患儿,其机制并非GC信号途径本身,而与编码裂孔隔膜蛋白的基因突变有关.     

TIM-1基因多态性与原发性肾病综合征的关系

目的 研究TIM-1基因多态性与儿童原发性肾病综合征(PNS)的相关性.方法 采用病例对照研究,选取PNS患儿57例,应用PCR-限制性片段长度多态性分析、PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析、基因测序技术检测PNS患儿和144例健康儿童(健康对照组)的TIM-1基因启动子区-1454G/A的SNP与外显子4 ins/del多态性,计算基因型和等位基因频率.结果 健康对照组TIM-1启动子区-1454位G/G、G/A和A/A基因型频率分别为0.608、0.328、0.064,而PNS组频率分别为0.772、0.228、0.000,其基因型频率与健康对照组比较差异有统计学意义(χ2=6.561,P=0.038),且PNS组患儿携带-1454G等位基因的频率增高(OR=2.295,95%CI:1.199～4.390,P=0.011);健康对照组TIM-1外显子4 del/del、del/ins和ins/ins基因型频率分别为0.611、0.340、0.049,而PNS组频率分别为0.579、0.368、0.053,其基因型频率与健康对照组比较差异无统计学意义(χ2=0.176,P=0.916).结论 TIM-1基因启动子-1454G/A的单核苷酸多态性可能与儿童PNS的易感性相关.     

原发性肾病综合征糖皮质激素耐药机制研究进展

糖皮质激素耐药的确切机制尚未完全明了。现就近年来有关原发性肾病综合征糖皮质激素耐药的可能机制，包括糖皮质激素受体（GR）数量、结构异常，GR表达尤其GRβ表达异常，P－糖蛋白170、多药耐药基因、11β－羟基类固醇脱氢酶、GR信号转录调控异常，肾病综合征临床并发症和病理特征，单基因突变等与激素耐药的关系作一概述。     

儿童特发性肾病综合征对糖皮质激素耐药的机制

儿童特发性肾病综合征对糖皮质激素(GC)耐药是临床中最感棘手的问题.其发生机制复杂,既与GC受体、甲状腺激素水平、肾小管间质损害等密切相关,更有分子遗传学背景的异常,如NPHS2、MDR1、HLA等基因异常.随着越来越多对GC耐药机制的分子基础被阐明,基因治疗有可能成为解决GC耐药的一个重要手段.     

糖皮质激素受体水平在肾病综合征治疗中的意义

目的探讨糖皮质激素受体(GCR)水平对肾病综合征(NS)疗效的影响,观察绞股蓝、刺五加对GCR水平的调节作用。方法设正常对照组、治疗Ⅰ组(单用激素组)、治疗Ⅱ组(绞股蓝、刺五加与激素合用组),采用放射配体结合法分别测定各组GCR,同时观察各组同期24 h尿蛋白定量。结果与正常对照组相比,治疗Ⅰ组和Ⅱ组GCR水平均降低,治疗4周后治疗Ⅱ组不仅GCR水平恢复较治疗Ⅰ组快,且尿蛋白消退亦快。结论绞股蓝、刺五加对NS患儿GCR有调节作用,有消除尿蛋白、治疗NS的作用。     

糖皮质激素对肾病综合征患儿成骨细胞功能的影响

目的　糖皮质激素是治疗肾病综合征的首选药物。但糖皮质激素可抑制成骨细胞功能,导致骨质疏松。该研究通过检测成骨细胞不同分化阶段的生化指标:I型前胶原羧基端前肽(PICP)、骨钙素(BGP)和总碱性磷酸酶(AKP),探讨糖皮质激素对肾病综合征(NS)患儿成骨细胞功能的影响。方法　测定正常对照组(n=30),未治NS患儿(n=30)和激素治疗后NS患儿(每日泼尼松2mg/kg治疗4 ~8周,n=30)血清PICP、BGP及AKP水平。结果　未治NS患儿血清PICP165 ±56μg/L,BGP15 ±9ng/L水平明显低于正常对照组205 ±81μg/L, 19 ±12ng/L(均P<0. 05),而血清总AKP198 ±71U/L与正常对照组202 ±46U/L比较差异无显著性。激素治疗后NS患儿血清PICP85 ±56μg/L、BGP8±5ng/L、AKP104 ±59 U/L均明显低于未治NS患儿(P<0. 01)。结论　NS患儿本身存在骨合成障碍,大剂量糖皮质激素治疗可进一步抑制NS患儿的成骨细胞合成功能。     

糖皮质激素对肾病综合征患儿成骨细胞功能的影响

目的　糖皮质激素是治疗肾病综合征的首选药物。但糖皮质激素可抑制成骨细胞功能,导致骨质疏松。该研究通过检测成骨细胞不同分化阶段的生化指标:I型前胶原羧基端前肽(PICP)、骨钙素(BGP)和总碱性磷酸酶(AKP),探讨糖皮质激素对肾病综合征(NS)患儿成骨细胞功能的影响。方法　测定正常对照组(n=30),未治NS患儿(n=30)和激素治疗后NS患儿(每日泼尼松2mg/kg治疗4 ~8周,n=30)血清PICP、BGP及AKP水平。结果　未治NS患儿血清PICP165 ±56μg/L,BGP15 ±9ng/L水平明显低于正常对照组205 ±81μg/L, 19 ±12ng/L(均P<0. 05),而血清总AKP198 ±71U/L与正常对照组202 ±46U/L比较差异无显著性。激素治疗后NS患儿血清PICP85 ±56μg/L、BGP8±5ng/L、AKP104 ±59 U/L均明显低于未治NS患儿(P<0. 01)。结论　NS患儿本身存在骨合成障碍,大剂量糖皮质激素治疗可进一步抑制NS患儿的成骨细胞合成功能。     

肾病综合征患儿血清骨保护素改变及糖皮质激素对其的影响

目的：观察肾病综合征（nephrotic syndrome, NS）患儿骨保护素改变及糖皮质激素治疗对骨保护素的影响,探讨骨保护素在NS骨代谢改变中的应用价值。方法：随机选取NS患儿44例,其中NS初发患儿24例,糖皮质激素治疗减量过程中复发患儿20例,其糖皮质激素累积剂量为28327±5879 mg/m2;23例年龄性别匹配的正常儿童设为对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清骨保护素浓度,采用电化学发光免疫法测定血清骨钙素N端中分子片段（骨钙素N-MID）含量。结果：初发NS组血清骨保护素、骨钙素N-MID含量分别为 211±55 ng/L、46±14 ng/mL,均明显低于对照组（分别为470±57 ng/L、73±9 ng/mL）（P<0.05）。NS复发组血清骨保护素、骨钙素N-MID含量均较NS初发组及对照组低,分别为176±42 ng/L、29±10 ng/mL（P<0.05）。结论：NS患儿本身即存在骨代谢异常,大剂量应用糖皮质激素后可进一步加重骨代谢改变,提示NS患儿骨保护素改变受疾病本身及糖皮质激素治疗的双重影响,骨保护素有望成为预测NS患儿骨代谢改变的新型生化指标。     

Clinical assessment of moderate-dose glucocorticoid in the treatment of recurrence of primary nephrotic syndrome in children: a prospective randomized controlled trial北大核心CSCD

Objective To study the clinical effect and adverse drug reactions of different doses of glucocorticoid (GC) in the treatment of children with recurrence of steroid-sensitive nephrotic syndrome (SSNS). Methods A total of 67 children who were hospitalized and diagnosed with SSNS recurrence in the Department of Nephrology, Children's Hospital, Capital Institute of Pediatrics, from November 2017 to December 2019 were enrolled. They were randomly divided into a moderate-dose GC group (32 children) and a full-dose GC group (35 children). The two groups were compared in terms of urinary protein clearance, recurrence rate within 6 months, and incidence rate of GC-associated adverse reactions. Results There was no significant difference in the urinary protein clearance rate between the moderate-dose GC and full-dose GC groups (91% vs 94%, P>0.05). There was also no significant difference in the recurrence rate within 6 months between the two groups (41% vs 36%, P>0.05). At 6 months of follow-up, compared with the full-dose GC group, the moderate-dose GC group had a significantly lower cumulative dose of prednisone [(87± 18) mg/kg vs (98±16) mg/kg, P=0.039 and a significantly lower proportion of children with an abnormal increase in body weight (6% vs 33%, P=0.045). The logistic regression analysis showed that prednisone dose ≥10 mg/alternate day at enrollment was a risk factor for recurrence within 6 months in children with SSNS (P=0.018). Conclusions For children with SSNS recurrence, moderate-dose GC has similar effects to full-dose GC in the remission induction rate and the recurrence rate within 6 months, with a lower cumulative dose and fewer GC-associated adverse reactions within 6 months than full-dose GC. © 2022 Central South University. All right reserved.     

GRβ在原发性肾病综合征患儿糖皮质激素耐药中的作用

目的　研究原发性肾病综合征患儿PBMCsGRβ表达水平与肾组织中原位GRβ表达水平的关系及其在PNS患儿糖皮质激素耐药中的作用。方法　40例原发性肾病综合征患儿分成激素敏感组与激素耐药组,每组各 20例,应用免疫组织化学技术,对其肾活检组织与PBMCs中GRα、GRβ进行检测,应用半定量评分法对各组肾病患儿肾小球与肾小管间质病理改变进行半定量分析。结果　激素耐药组肾小球病理积分与肾小管病理积分高于激素敏感组 (P均 <0.01);激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRα与PBMCs中GRα表达低于正常对照组 (P均 <0.01);激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRβ与PBMCs中GRβ表达高于正常对照组(P均<0.01);中度损害组肾活检组织与PBMCsGRβ表达高于轻度损害组,重度损害组高于中度损害组(P均<0.01);相关分析表明:原发性肾病综合征患儿PBMCs和肾固有细胞GRβ表达明显正相关(r=0. 651; P<0.01), PBMCs和肾固有细胞中GRβ表达与肾脏病理积分正相关(r=0.579, 0.623,P均<0.01)。结论　原发性肾病综合征患儿肾局部、PBMCs中GRβ过表达与PNS患儿糖皮质激素耐药发生有关,与PBMCs和肾局部GRα数目的多少无关,过表达的GRβ可能是通过拮抗GRα的活性影响激素效应的发挥。     

糖皮质激素的基础及其在儿童肾病综合征中的临床应用

糖皮质激素是临床应用最广泛的药物之一,其在肾病综合征中更是得到了广泛应用.该文重点从糖皮质激素的基础如分类、临床剂量区分、作用机制、应用的基本原则、肾上腺轴被抑制与否的判断、注意事项及在肾病综合征中的临床应用等方面进行概述.     

儿童原发性肾病综合征尿蛋白质组样品预处理方法的研究

目的：优化儿童原发性肾病综合征尿蛋白质组样品的预处理方法。方法：取原发性肾病综合征儿童尿液,采用称量、SDS-PAGE及双向电泳（2-DE）等方法比较不同pH、冷丙酮沉淀不同时间等条件下所得到的蛋白质,优化蛋白提取的条件。结果：pH 2.7条件下所得到的蛋白种类最多;冷丙酮沉淀0.5 h获得的蛋白量明显少于1 h及2 h的蛋白量（P<0.05）,而冷丙酮沉淀 1 h 和2 h获得的蛋白量没有显著性差异。pH 2.7条件下冷丙酮沉淀1 h为样品预处理的最佳条件,可获得满意的2-DE分离效果。结论：pH 2.7条件下,冷丙酮沉淀1 h为尿蛋白质组样品预处理的最佳条件。