两个品系小鼠肺纤维化模型的比较观察

目的采用气管内注射博莱霉素（Bleomycin,BLM）的方法,比较观察两个品系小鼠肺纤维化程度,确定适用的肺纤维化小鼠模型。方法BALB／c小鼠和C57BL／6小鼠分别分成模型组和对照组,模型组气管内注射博莱霉素（5mg／kg）,对照组气管内注射相同体积生理盐水。所有小鼠于造模后第28日处死,观察肺系数、肺组织病理学改变及羟脯氨酸含量的变化。结果光镜下各模型组肺组织呈不同程度纤维化,其中以C57BL／6小鼠最为明显;模型组的羟脯氨酸（HYP）含量均显著高于对照组;C57BL／6小鼠模型组肺系数及HYP明显高于BALB／c小鼠模型组。结论通过气管内注射博莱霉素,BALB／c及C57BL／6小鼠均能复制肺纤维化模型,以C57BL／6小鼠肺纤维化程度最高,获得的肺纤维化模型较为理想。     

不同品系小鼠肺纤维化模型的比较研究

目的  通过对博来霉素诱导3个不同品系小鼠肺纤维化程度的比较研究,寻找最适合研究肺纤维化的小鼠模型。方法  选用C57BL/6、BALB/c以及KM 3种品系的小鼠,分别设为模型组和对照组。模型组向气管注射博来霉素（5 mg/kg）,正常对照组注入等量的生理盐水。3个品系的小鼠分别于造模后的第7天、14天和28天处死8只,观察在不同的时间点肺系数、羟脯氨酸含量的变化以及通过Masson染色观察肺纤维化程度的改变。结果  各模型组不同时间点的肺系数、羟脯氨酸含量和肺组织的病理学改变积分与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）;C57BL/6模型组小鼠在不同时间点肺系数、羟脯氨酸含量和肺组织病理学改变积分与BALB/c和KM比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论  C57BL/6小鼠对博来霉素反应敏感,肺纤维化明显,是3个品系小鼠中研究肺纤维化的最理想模型。

     

三个品系小鼠流感病毒气溶胶感染模型的比较

[摘要] 目的 通过气雾攻击产生气溶胶的感染方式对三个品系的小鼠分别进行感染,比较三个品系小鼠在感染过程中的感染差异,从而对三个品系小鼠流感模型的特点进行分析,为流感发病机制的研究及疫苗和药物的开发选择合适的感染模型提供参考。方法 选用A/Puerto Rico/8/34（H1N1）病毒株,采用气雾攻击的方法感染近交系C57BL/6、BALB/c和远交群 ICR三个品系的小鼠,每日称小鼠体重,肉眼观察小鼠状态,分别于感染后3d,7d,14d处死小鼠,取肺脏称其湿重,进行肺脏的病毒测定及病理观察。结果 三个品系小鼠均可感染,其中C57BL/6小鼠的存活率低于其他两个品系,3d 的肺指数和病毒载量均明显高于ICR小鼠（P<0.05),镜下病理结果显示较其他两个品系也更明显。BALB/c小鼠与其他两个品系小鼠相比,体重在后期的恢复最慢,存活率比 C57BL/6高但比ICR低;肺指数和病毒载量与其他两个品系相比没有显著差异;镜下病理改变相似,但弱于C57BL/6强于ICR。ICR小鼠的发病进程与其他两个品系小鼠基本相似,但体重、存活率、肺指数、病毒载量及镜下病理改变等指标均弱于其他两个品系。结论 三个品系小鼠均可建立流感气溶胶模型,但感染后的三个模型各有特点,在实验中可以根据不同的研究目的来选用合适的小鼠品系建立模型。     

三个品系转基因小鼠的遗传监测

为了解转基因小鼠在繁育过程中其遗传特性的稳定情况，用特异性引物以PCR方法分别对IL－4T、IL－10T、IFNgR%三个品系转基因小鼠进行了遗传监测。结果表明，三个品系的转基因小鼠中的部分小鼠其整合基因发生了不同程度的改变与丢失。     

双氢青蒿素对百草枯致小鼠肺纤维化的治疗研究

目的:探讨双氢青蒿素(dihydroartemisin,DHA)对急性百草枯(paraquat,PQ)染毒小鼠的治疗作用。方法:将134只小鼠随机分成3组:正常对照组(n=24)、PQ染毒组(n=55,实际存活24只)和DHA治疗组(n=55,实际存活35只)。PQ组与DHA组:以100mg/kg PQ一次性灌胃;2h后DHA组以20mg/kg DHA灌胃治疗,PQ组与对照组灌胃等量蒸馏水,每日1次。观察给药后第3,7,14,21天小鼠的一般情况,比较生存率差异,计算肺系数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织TGF-β1的表达;HE及Masson染色观察小鼠肺组织病理变化。结果:PQ组21d生存率与对照组和DHA组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PQ组肺组织中TGF-β1在第3,7,14,21天分别为(467.77±46.52)ng/L、(434.89±48.94)ng/L、(1 410.70±94.07)ng/L、(2 306.89±33.06)ng/L;DHA组一般情况较PQ组好,TGF-β1表达在第3,7,14,21天时分别为(441.54±23.58)ng/L、(443.22±46.83)ng/L、(750.49±29.96)ng/L、(1 554.95±92.30)ng/L,较PQ组差异显著(P<0.01)。随时间推移,PQ组肺泡炎加重,14d始伴随着TGF-β1的升高,肺组织出现纤维化改变,以第21天时最为明显,与对照组比较差异明显(P<0.01)。DHA组炎性细胞浸润较PQ组少,充血水肿轻,肺纤维化程度较PQ组减轻(P<0.05)。结论:DHA可能通过降低肺组织中TGF-β1表达,发挥对PQ中毒小鼠肺纤维化的治疗作用。     

不同品系小鼠哮喘模型的建立与比较

目的:比较不同品系小鼠哮喘模型的差异.方法:将BALB/c和C57BL/6两品系雄鼠随机分为对照组与哮喘组,每组6只.采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝混悬液致敏和激发小鼠,激发过程中观察小鼠哮喘症状.取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白介素(IL)-4和干扰素(IFN)...     

不同品系小鼠主动脉弓缩窄压力负荷模型的比较

目的 比较两种不同品系小鼠建立主动脉弓缩窄压力负荷模型后心脏形态及功能变化的差异.方法 将雄性KM小鼠及C57BL/6小鼠各一组随机分为术前(n=10)、假手术组(n=10)及主动脉弓缩窄(TAC)组(n=30).术前及术后8周应用高频心脏超声、血流动力学、心脏病理组织学方法进行检测,并进行死亡原因观察.结果 (1)KM小鼠及C57BL/6小鼠缩窄组围手术成功率分别为80%及87%,8周存活率分别为67%及77%.(2)与各假手术组比较,缩窄术后8周KM及C57BL/6小鼠TAC组心脏超声指标左心室收缩期、舒张期前壁厚度(Awsth;Awdth),左心室收缩期、舒张期后壁厚度(Pwsth;Pwdth)、左室重量指数(LVMI)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室压力上升和下降最大速率(dp/dtmax;dp/dtmin)及病理解剖指标心脏重量指数(H w/Bw)、左心室重量(LVw)、左心室重量指数(LV w/Bw)均显著增加(均P＜0.05),显示左心室肥孱KM缩窄组左心室收缩末期、舒张末期内径(LVESd LVEDd)、左心室舒张末期外径(EXL VDd)较其假手术组显著增加(均P＜0.05);与C57BL/6缩窄组比较,术后8周KM缩窄组LVESd、LVEDd、EXLVDd、LVw、肺脏重量指数(Lungw/Bw)显著增加(均P＜0.05).结论 KM小鼠主动脉弓缩窄动物模型与C57BL/6小鼠实验结果相似,均产生左室肥厚,但KM小鼠较早出现离心性肥厚趋势.     

三个品系小型猪正常心电图的比较

目的建立清醒状态记录小型猪心电图的方法，并对3个品系小型猪6个导联心电图进行分析比较。方法选用4月龄广西巴马猪7头、5月龄五指山小型猪6头、中国农大小型猪10头，清醒状态下吊床保定，测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL和aVF6个导联的心电图。结果3个品系小型猪心电图的波形与人相似，心率较快，在3个品系之间差别不明显，存在偶发性窦性心率不齐。广西巴马猪、五指山小型猪和中国农大小型猪的P-R间期分别介于0．08—0．10s、0．08—0．11s和0．08—0．11s；QRS波群分别介于0．04—0．06s,0．04—0．07s和0．04～0．05s。3个品系小型猪均有清晰的S-T段，偏移小于1mm。结论本研究获得了3个品系小型猪清醒状态时的心电图基本数据，经比较，3个品系之间无明显差异。     

三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较

目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响。方法将120只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组和气管切开模型组,分别利用不同方法气管注射博来霉素,观察小鼠的一般情况(体重变化和存活率)、组织病理学改变(HE和Masson染色)和羟脯氨酸水平。结果腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组造模后28 d小鼠体重均高于气管切开模型组,有统计学差异(P0.01、P0.001);各组小鼠存活率存在差异,除空白组外,气管切开模型组最低,留置针气管插管模型组最高,空白组和气管切开模型间有统计学差异(P0.05),其余各组间没有统计学意义;肺组织肺泡炎及肺纤维化程度由高到低依次为气管切开模型组、腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组,且造模后21 d最重;气管切开模型组病灶分布均匀,腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组分布不均匀,以气管周围肺组织较重;腰穿针气管插管模型组和气管切开模型组造模后28 d羟脯氨酸水平显著高于空白组(P0.01、P0.001)。结论综合多种因素,腰穿针气管插管造模法是三种造模方法中的最佳方法。     

10个品系小鼠的AFLP分析

目的：实验用小鼠的遗传质量分析和品系鉴定。方法：应用AFLP技术对10个品系小鼠进行分析。结果：共应用25条单酶切引物、25对双酶切引物进行检测，其中17条单酶切AFLP引物、20对双酶切AFLP引物检测到10个品系小鼠的多态性变化。单酶切AFLP共扩出251条带，片段大小在100－2000bp，共得到89个多态位点，占总扩增带的35．5％。双酶切AFLP在50－600bp扩增出清晰条带，统计1507条带，共得到378个多态位点，占总扩增带的25．1％。对多态性片段进行统计，计算出不同品系间的相似指数和遗传距离指数。结果表明昆明鼠（KM）与TA2、BALB／c、BALB／c-nu关系较近；所有品系间关系最近的两品系为BALB／c和BALB／c-nu；关系较远的是DBA／2与T739、615、C57BL／6J，与小鼠品系来源及培育史相符。结论：通过筛选获得特异性AFLP标记，可用以区分遗传背景或外观形态很相似的品系。为小鼠的遗传质量分析和品系鉴定提供了参考资料。     

不同剂量博莱霉素诱导 KM 小鼠肺纤维化模型的比较

目的：研究不同剂量博莱霉素（ BLM）诱导KM小鼠肺纤维化模型的病理变化,系统性分析KM小鼠肺组织不同时间点炎症反应、死亡率、转化生长因子－β1（ TGF－β1）和诱导型一氧化氮合酶（ iNOS）表达水平与肺纤维化的关系。方法 KM小鼠随机分为假手术组和模型低（2.5 mg／kg）、中（5 mg／kg）、高剂量（10 mg／kg）组。模型组小鼠气管内一次性滴注BLM,假手术组予等量生理盐水,分别于第7、14、28天取材,做肺组织HE、Masson染色,免疫组化法测TGF－β1,硝酸酶还原法测iNOs。结果各组均在手术过程中出现死亡,小鼠死亡高峰出现在8～14 d,总死亡率高剂量组明显高于中、低剂量组。 HE和Masson染色结果显示,模型低、中、高剂量组均导致了肺组织炎症反应,14 d炎症反应最强烈,中、高剂量比低剂量更明显,且两组在14 d开始出现肺纤维组织增生,高剂量比中剂量明显,28 d均出现典型肺纤维化,而低剂量组始终未见明显纤维化。模型组TGF－β1和iNOS均高表达,且中、高剂量组明显高于低剂量组。结论2.5 mg／kg BLM不能有效诱导KM小鼠肺纤维化,5 mg／kg和10 mg／kg均可诱导肺纤维化,但是10 mg／kg造模小鼠死亡率高,适合于短期造模,若需要典型的肺纤维化模型以5 mg／kg 28 d天取材较好;TGF－β1和iNOS水平与肺纤维程度有关。     

小鼠不同脑缺血模型及品系差异

小鼠脑缺血模型是研究神经细胞死亡、神经功能修复及药物保护作用的实验基础.然而,不同小鼠卒中模型在细胞死亡和神经修复研究中的应用及模仿人类脑卒中事件的能力相差很大;再者,各品系小鼠之间脑缺血敏感性也存在差异.为此,文中对3种小鼠大脑中动脉阻塞模型及小鼠在脑缺血中的品系差异做一综述.     

小鼠三种急性胃溃疡模型的比较

目的 对小鼠三种常见急性胃溃疡模型进行比较,对模型建立方法 、注意事项进行相关描述.方法 采用水浸法、利血平法、乙醇法在不同条件下诱导小鼠急性胃黏膜损伤,以溃疡指数及胃黏膜组织改变为指标,观察不同实验性急性胃溃疡小鼠胃黏膜损伤的作用.结果 三个模型均能形成应激性溃疡,病发部位为浅表为主.水浸法在21±1℃,水浸15 h,乙醇法在0.2 ml/只及0.1 ml/只条件下得到较好的急性胃溃疡模型,死亡率低.结论 乙醇法成模效果最好,水浸法次之.     

十二个同类系小鼠品系的繁育状况

同类系小鼠是一类除特定基因外遗传背景高度一致的近交系小鼠品系。由Snell等人于1958年首次培育成功的主要组织相容性复合体(H-2 Complex)同类系,是免疫遗传学研究的理想动物模型。目前国际上公布的同类系小鼠品系已有800多个,按其背景品系而分成若干同类系组。本中心自1986年开始从日本引进同类系小鼠,用于制作免疫遗传特性监测所需的单价特异性抗血清。现饲育同类系小鼠3组、12个品系,有的已达F_(15)代。同类系小鼠的引进与长期饲育,在国内并不多见;而国外又多着     

橘皮苷对百草枯诱导小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制

目的分析橘皮苷对百草枯诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法将60只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、橘皮苷高剂量组、橘皮苷中剂量组、橘皮苷低剂量组和地塞米松组,每组10只。正常组给予生理盐水一次性灌胃,其余组各给予百草枯水溶液(100 mg/kg)一次性灌胃建模。建模1周后,地塞米松组给予腹腔注射地塞米松,橘皮苷高、中、低剂量组分别给予0.10 mL/10 g、0.06 mL/10 g、0.03 mL/10 g的橘皮苷灌胃,正常组及模型组均给予等容量的生理盐水。给药3周后,检测各组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ-干扰素水平,取肺组织观察组织病理变化,并检测肺组织丙二醛和髓过氧化物酶(MPO)水平、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达水平。结果 (1)与正常组相比,模型组血清TGF-β1、TNF-α、丙二醛和MPO水平升高,血清γ-干扰素水平下降(均P<0.05);与模型组相比,橘皮苷不同剂量组和地塞米松组血清TGF-β1、TNF-α、丙二醛和MPO水平均降低,橘皮苷高/中剂量组和地塞米松...     

服百草枯致肺纤维化1例

1 病例资料 患者,女性,23岁,因"服百草枯后致呼吸困难6天",以 "百草枯中毒"入院.患者6天前因生气后服用约20ml百草枯,在当地卫生院给予洗胃、导泻、利尿等治疗.住院第6天,患者感呼吸困难,且呼吸困难进行性加重,以坐位或行走时呼吸困难明显,表现为张口呼吸,颜面、四肢青紫,口唇发绀,同时伴有胸背部疼痛及阵发性心悸,轻微咳嗽,咳少量黄色粘稠痰,痰中带有血丝,转往我院.入院查体,双肺呼吸音粗,可闻及干、湿性啰音.血气分析:二氧化碳分压30mmHg,氧分压46mmHg,氧饱和度84%.胸部CT:右肺中上野条片状阴影.入院后给予抗氧化剂、免疫抑制剂及糖皮质激素等治疗2周,患者呼吸困难症状稍有缓解,仍表现为活动性呼吸困难.复查血气分析:二氧化碳分压33mmHg,氧分压50mmHg,氧饱和度88%.胸部CT:右肺中上野及左肺下野内中带点片状及条索状高密度影.继续按原方案治疗1周后复查胸部CT:右肺中上野及下野内中带、左肺中下野内中带片絮状及条索状高密度影,右肺中上野局部病灶纤维化.患者家属不再积极治疗,自动出院,随访一个月后死亡.     

百草枯中毒致肺纤维化的急救措施

目的研究并分析百草枯中毒致肺纤维化的急救措施。方法回顾性分析24例百草枯中毒致肺纤维化患者的临床资料,将接受常规治疗的患者作为对照组,将接受常规治疗联合沙利度胺的患者作为观察组,对比两组患者的死亡率。结果观察组的死亡率明显低于对照组,P0.05。结论在百草枯中毒致肺纤维化患者的急救过程中,沙利度胺能够改善患者的肺损伤状态,值得推广应用。     

小鼠11个品系20个微卫星基因位点的遗传分析

目的利用PCR对近交系小鼠11个品系的20个微卫星基因座进行遗传检测,为实验室日常检测近交系小鼠的遗传背景提供一种分子生物学方法.方法用20个微卫星引物对11个品系近交系小鼠的基因组DNA进行PCR扩增.根据MMDBJ数据库信息,已知品系C3H、DBA、BALB/c和C57BL/6的多态性位点大小,由此可推知其他品系C57BL/6-Bg、C57BL/10、TA1、TA2、T739、M615和SCID的多态性位点大小.结果应出现的220条条带中有193条与预期的一致.结论利用这20个微卫星基因位点可以将11个品系的近交系小鼠区分开来,近交系小鼠具有丰富的遗传多样性,这些结果对于近交系小鼠的遗传检测具有重要指导意义.     

建立小鼠肺纤维化合并肺气肿模型的实验研究

目的研究采用细颗粒物(PM_(2.5))经鼻滴入联合臭氧(O_3)吸入建立小鼠肺纤维化合并肺气肿(CPFE)模型的方法的可行性,为CPFE模型的建立提供参考。方法雄性C57/BL6小鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)滴入+空气吸入组、PBS滴入+O_3吸入组和PM2.5滴入+O_3吸入组,每组8只。小鼠接受经鼻滴入PBS或PM_(2.5)混悬液(7.8 mg/kg),24 h后接受吸入空气或O_3,每周两次,连续8周。8周后,检测肺功能、支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类、苏木精-伊红染色观察肺组织病理形态学变化,包括炎症积分、平均肺泡内衬间隔(Lm),Masson染色观察测定气道上皮下胶原沉积厚度(SEc/Pbm),同时测定肺组织羟脯氨酸含量。结果与PBS滴入+空气吸入组相比,PBS滴入+O_3吸入组的吸气量(IC)增加,肺总量(TLC)增加,肺顺应性(Cchord)增加,FEV_(25)(第25 ms的用力呼气量)/FVC(用力肺活量)降低,BALF细胞总数增加,Lm增大,肺组织炎症积分增加,SEc/Pbm与羟脯氨酸无变化;PM_(2.5)滴入+O_3吸入组的IC降低,功能残气量(FRC)增加,TLC增加,Cchord降低,FEV_(25)/FVC与FEV_(50)(第50 ms的用力呼气量)/FVC降低,BALF细胞总数增加,肺组织炎症积分增加,Lm增大,SEc/Pbm和羟脯氨酸含量增加。与PBS滴入+O_3吸入组相比,PM_(2.5)滴入+O_3吸入组的IC降低,FRC增加,Cchord降低,FEV_(25)/FVC与FEV_(50)/FVC降低,BALF细胞总数增加,肺组织炎症积分增加,SEc/Pbm和羟脯氨酸含量增加。结论对小鼠进行8周的PM_(2.5)经鼻滴入联合O_3吸入可成功建立CPFE模型。