选择P815作为DBA／2小鼠H-2抗原靶细胞

采用DBA／2和C57BL／6二组主要组织相容性复合体不相同的近交系小鼠，将DBA／2小鼠的淋巴细胞植入C57BL／6体内，分别选用P815和DBA／2小鼠的淋巴细胞作为靶细胞，应用抗体-补体介导细胞杀伤的免疫学方法，研究P815作为DBA／2小鼠H-2抗原靶细胞的可行性，实验结果显示．P815可以替代DBA／2小鼠的淋巴细胞作为靶细胞。     

小鼠H—2抗原的提取与纯化

This study was designed to purify the mouse major histocompatibility complex antigen (H-2Ag). The detergent was used to extract the crude H-2Ag, and monoclonal antibodies affinity chromatography was applied to purify H-2 antigen. A 45 kd heavy chain and a 12 kd light chain from the purified proteins were shown by electrophoresis. Besides, the pure H-2 antigen was found to have immunological and biological activity. This method should be useful in purifying large quantities of H-2Ag for the researches in transplantation and functional analysis of H-2 antigen.     

DBA/2小鼠生长和繁殖的研究

繁殖性能是实验动物生物学特性之一，在相对稳定的内外饲养环境条件下，它主要取决于不同品种、品系的遗传特怀，ＣＳＢ／Ｃ小鼠已近交繁殖３４代，结果表明，该小鼠生长发育快，繁殖力强，仔鼠成活率高，在近并繁殖过程中，体型趋于小型化，体重、体长、尾长都明显的变小。     

小鼠H-2抗原的提取与纯化

为建立一种简易获取较大量纯化小鼠组织相容性抗原（Ｈ－２抗原）的方法，采用去污剂溶解小鼠脾细胞膜，单克隆抗体亲和层析法纯化获取小鼠Ｈ－２抗原。结果：电泳显示纯化物为４５ｋｄ（重链）和１２ｋｄ（轻链）两条带，且该纯化物具有明显的免疫学及生物学活性（效价１６４０）。结论：这种亲和层析法纯化的组织相容性抗原，可用于器官移植研究及组织相容性抗原的免疫功能研究。     

HLA－DR抗原在大肠良、恶性病变中的表达

应用免疫组化ＳＰ法现在ＨＬＡ－ＤＲ抗原在５４例大肠良、恶性病变中的表达情况。结果显示正常大肠粘膜上皮、增生性息肉及息肉状腺瘤上皮均无ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，而腺癌中出现ＨＬＡ－ＤＲ的异常表达（阳性率为５０％），且表达率与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１），与癌组织分化程度无关（Ｐ＞０．０１）．结果说明ＨＬＡ－ＤＲ抗原的异常表达可作为反映大肠粘膜上皮恶变的一项指标，对评估大肠癌的预后也有一定的参考价值。     

DBA/1小鼠胶原诱发关节炎模型的特征

目的建立DBA/1小鼠胶原性关节炎模型（CIA）,分析其发病的特点、临床表现及病理学变化。方法用完全弗氏佐剂乳化牛Ⅱ型胶原,在DBA/l小鼠尾根部皮内注射100μL,3周后重复注射等量抗原,动态观察小鼠的临床变化,如足爪肿胀程度、关节炎指数评分和体重变化等,对发病关节及小鼠脾脏进行病理学检测。结果从首次免疫后28d开始,胶原免疫组小鼠踝关节开始出现明显红肿,7周左右肿胀达到高峰,小鼠CIA发生率为100%;病理学结果显示,患病关节出现炎性细胞浸润、软骨和骨骼破坏、滑膜增生等较为典型的变化;脾脏生发中心增多,红髓充血;正常对照组小鼠则无上述表现。结论用牛Ⅱ型胶原,可成功诱导DBA/l小鼠CIA模型,发生率为100%。该模型较充分模拟了人类RA的病变特征,关节炎指数、踝关节和脾脏病理等是评价CIA模型的主要指标。     

HER2/neu诱导DBA/2小鼠特异性CTL应答及其抑瘤效应研究

目的：探讨HER2/neu原癌基因DNA疫苗免疫诱导特异性细胞免疫应答及其在体内的抑瘤效应。方法：将重组HER2/neu原癌基因真核表达载全转染P815细胞，用细胞组织化学及Western-blot方法鉴定质粒在细胞中的表达。在DBA/2小鼠体内构建表达HER2抗原的肿瘤动物模型，通过重组质粒免疫小鼠，诱导小鼠产生细胞免疫应答，观察免疫动物体内的抗瘤效应。结果：在体外获得了稳定表达HER2/neu基因的P815细胞；免疫小鼠脾细胞中诱导出特异性CTL，并杀伤HER2/neu阳性的P815细胞；荷瘤小鼠的肿瘤生长受抑，存活期延长。结论：HER2/neu原癌基因DNA疫苗免疫可诱导特异性细胞免疫应答，并具有一定抗瘤效应。     

单抗原免疫微珠法在人组织相容性抗原反应抗体检测中的局限性及影响因素分析

人组织相容性抗原反应抗体（human leukocyte antigen-antibody,HLA-Ab）的检测已成为诊断及检测肾移植术后排斥反应的重要指标。单抗原免疫微珠法（single antigen beads,SAB）是一种灵敏度高、特异性强的HLA-Ab检测方法。然而,SAB检测结果的分析和解释较为复杂,需要综合考虑多方面的影响因素。本文将讨论使用此方法对HLA-Ab进行检测时的局限性、影响因素及解决办法。希望可以通过对上述问题的探讨来进一步完善SAB检测结果的解读与应用。     

OK432-肿瘤疫苗对DBA/2小鼠外周血中T细胞亚群的影响

目的探讨OK432-肿瘤疫苗对小鼠外周血T细胞亚群的影响。方法将36只DBA/2小鼠随机分为OK432-肿瘤疫苗组、OK432组及正常组,每组12只。培养细胞,制作疫苗后,对三组小鼠分别腹腔注射OK432-肿瘤疫苗、OK432及磷酸盐缓冲液（PBS）,每周1次,连续3周。然后分别在1、3、7 d时眼球采血,利用流式细胞术检测外周血中的T细胞亚群的含量,采用SPSS 17.0软件进行数据处理。结果免疫后第3天,OK432-肿瘤疫苗组、正常组、OK432组CD3＋T细胞平均值分别为（55.31±2.06）%、（48.81±3.60）%、（47.21±3.51）%;CD4＋T细胞平均值分别为（40.55±2.32）%、（34.91±1.04）%、（34.24±0.95）%;OK432-肿瘤疫苗组与正常组及OK432组CD3＋、CD4＋T细胞差异均有统计学差异（P〈0.05）。免疫后第7天,OK432-肿瘤疫苗组、正常组CD3＋T细胞平均值分别为（36.26±1.98）%、（23.72±1.90）%;CD4＋T细胞平均值分别为（27.11±0.87）%、（15.42±2.87）%;CD4＋/CD8＋的平均值分别为（3.47±0.33）%、（2.91±0.52）%,差异均有统计学差异（P〈0.05）;OK432-肿瘤疫苗组、OK432组CD8＋T细胞的平均值为（7.85±0.98﹚%、（5.48±0.40）%,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 OK432-肿瘤疫苗能够有效增强小鼠的细胞特异性免疫能力。     

分离近交系YYHL小鼠的皮肤移植

利用小鼠皮肤异体移植法研究分离近交系YYHL小鼠F20 的基因纯合性,经100d 观察,受试小鼠均无急、慢性排斥反应发生,全部为永久性接受。结果表明,该突变种群经过20 代的近交培育,组织相容性抗原一致,基因具有高度纯合性,已达到近交系要求     

移植物抗宿主病中次要组织相容性抗原作用的研究

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植(HSCT)的主要并发症之一。近年的临床研究表明,GVHD与次要组织相容性抗原(mHAgs)有重要关系。本文综述mHAgs及其相关的研究进展。     

近交培育的豫医无毛小鼠H抗原系统的同源性

目的：研究豫医无毛小鼠Ｈ 抗原系统的同源性。方法：采用近交培育２０ 代２ 月龄雌性豫医无毛小鼠皮肤异体移植法。结果：经１００ ｄ 观察,受试小鼠无急慢性排斥反应发生,移植皮片全部为永久性接受。结论：豫医无毛小鼠突变种群经２０ 代近交培育,组织相容性抗原一致,基因具有高度同源性     

C57小鼠视网膜神经层细胞发育中的增殖细胞核抗原表达及其意义

研究Ｃ５７小鼠出生后视网膜的发育和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达、两者关系以及细胞动力学过程。方法采用ＨＥ染色及免疫组化标记ＰＣＮＡ的方法，对出生后第１～２１天的Ｃ５７小鼠视网膜神经层的细胞发育作连续性观察。结果光镜下观察到，Ｃ５７小鼠出生后，视网膜神经层仍然有一个发育过程。神经节细胞层在出生时即已经形成；外丛状层在出生后第６天才分化出来，而内、外核层细胞形态上的接近成熟小鼠的形态，分别在出生后第１０天、第１９天。ＰＣＮＡ显示在外层神经细胞层和节细胞各有一次和增殖相关的阳性表达。３个细胞层在形态学的分化基本完成后，又出现了一次结束时间是由外向内变化的阳性过程（外核层：第１１～１５天；内核层：第８～１６天；神经节细胞层：第１６～２１天），这一次阳性表达过程可见到细胞形态向成年形态的转化。结论Ｃ５７小鼠出生后视网膜神经层的发育，分为细胞分化和细胞成熟两个阶段，分化阶段的细胞顺序是以细胞空间位置决定的，成熟阶段的顺序是按神经传导的方向发展的，可能与细胞的功能相关。ＰＣＮＡ的表达和细胞的增殖、分化、成熟在时间、空间上具有高度的相关性。     

可溶性组织相容性抗原-G1抑制人自然杀伤细胞释放穿孔素颗粒酶介导异种排斥反应

目的：研究可溶性组织相容性抗原-G1（sHLA-G1）抑制人自然杀伤细胞（NK细胞）释放穿孔素、颗粒酶，从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞的杀伤作用。方法：利用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入LCL721.221细胞株，并提取sHLA-G1。以RT-PCR、斑点酶联免疫吸附（Dot-ELISA）技术分别在基因水平和蛋白水平检测sHLA-G1的表达；以人类NK细胞系（NK92）为效应细胞，猪内皮细胞系PED为靶细胞，用β-己糖氨酶释放实验检测sHLA-G1抑制NK92释放穿孔素、颗粒酶；单四唑（MTT）法检测sHLA-G1抑制NK细胞的杀伤活性。结果：与未加入sHLA-G1的对照组相比，NK92释放的β-己糖氨酶显著减少（P〈0．05），且对sHLA-G1组PED的杀伤效率均有明显降低（P〈0．01）。结论：sHLA-G1可通过抑制NK92释放穿孔素、颗粒酶以减轻NK92对PED的杀伤作用。     

脂质体IFNr对DBA／2小鼠P388白血病细胞转移的影响

给ＤＢＡ／２小鼠双前肢足垫皮下注射２×１０Ｐ３８８细胞后，腹腔注入Ｌ－ＩＦＮｒ（脂质体包裹ＩＦＮｒ）或ＩＦＮｒ４，２０，１００×１０４Ｕ／（ｋｇ·ｄ），连续１０ｄ，结果小鼠生存期分别延长１８．３、２９．３、３３．９、２３．９、３１；９、３３．６ｄ。在第１５天循环血中的单核细胞分别相应降低２５．３％、５４．９％，８９．７％和５５．８％、８５．２％、９０．２％；移植瘤引流区腋窝淋巴结肿大呈剂量依赖性缩小。结果表明两种ＩＦＮｒ制剂均有显著的抗白血病细胞Ｐ３８８转移的作用，Ｌ－ＩＦＮｒ的效果优于ＩＦＮｒ。     

细粒棘球蚴抗原B对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

目的探讨细粒棘球蚴抗原B(抗原B)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病免疫机制的影响。方法将造模成功的20只NOD小鼠依据随机数字表法分为抗原B处理组和生理盐水处理组,各10只。记录并比较两组小鼠初始/成模后/用药后1、2、3周的体质量和血糖变化值。运用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中白细胞介素(IL)2/IL-10的水平;运用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胰腺组织中两种细胞因子的表达量。结果在用药后3周各组小鼠之间体质量比较差异有统计学意义(P<0.05),生理盐水处理组体质量下降明显;生理盐水处理组血糖上升水平较抗原B处理组高(P<0.05)。酶联免疫吸附测定结果显示,抗原B处理组IL-2水平较生理盐水处理组低,血清IL-10水平高于生理盐水处理组(P<0.05)。荧光定量PCR结果:抗原B处理组IL-2 mRNA表达量较生理盐水处理组显著下调,IL-10显著上调(P<0.05)。结论细粒棘球蚴抗原B可以降低IL-2水平,升高IL-10水平,暂可认为使Th1/Th2细胞发生免疫偏移,向着有利于胰岛保护的方向,细粒棘球蚴抗原B可能有预防或治疗1型糖尿病的作用。     

重组人TGF┐β1诱导免疫耐受及其对Hela细胞MHC抗原表达的实验研究

重组人ＴＧＦ┐β１诱导免疫耐受及其对Ｈｅｌａ细胞ＭＨＣ抗原表达的实验研究ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｆｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎＴＧＦ┐β１ｉｎｒａｔａｎｄｔｈｅｉｎｆｌｕｅ...     

DBA/1小鼠与C57BL/6小鼠胶原诱导性关节炎模型的比较研究

目的：对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）在不同品系小鼠（DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠）的发病情况进行比较研究,以期寻找出一种适合制备CIA模型的小鼠品系。方法：用鸡Ⅱ型胶原（typeⅡcollagen, CⅡ）乳剂分别免疫DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠诱导CIA,进行关节外观的观察及关节炎临床评分。结果：免疫后第31天, DBA/1小鼠出现关节红肿,关节炎临床评分升高,在第39天达到高峰。随着时间的推移,小鼠关节红肿等急性炎症现象有所减退。用改进方法免疫的C57BL/6小鼠于第21天开始出现关节红肿、临床评分升高现象。结论：在制备CIA模型时建议首选DBA/1小鼠。     

汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性抗原的检测

目的通过检测汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性病毒抗原,以建立汉坦病毒感染动物的评价体系。方法将汉坦病毒陈株按照原病毒液、10-1、10-2三个滴度经肌肉注射感染C57BL/6小鼠,在感染后的第3、6、9、12、15天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原。结果 C57BL/6小鼠感染汉坦病毒后短期内在其肝脏和脾脏可以检测到特异性抗原,随着时间的延长,这些抗原逐步消失。结论上述结果为建立汉坦病毒感染动物的评价体系提供了一种参考。