P糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶和拓扑异构酶Ⅱ在胃癌组织中的表达

背景与目的:P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)等多种细胞内物质是恶性肿瘤产生多药耐药的物质基础,胃癌是比较常见的恶性肿瘤,应用免疫组化方法检测化疗前P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ三因素在胃癌中表达的报告还比较少,为此,本文检测P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶II(Topo-Ⅱ)在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌分化、转移的关系。方法:应用免疫组化方法,检测75例术前未进行化疗的胃癌患者癌组织中P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ的表达。结果:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ在75例胃癌组织中表达率分别为76.0%、85.3%和68.0%,与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位及浸润深度无关,其在胃癌组织中的表达管状腺癌分别与粘液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌比较差异均有显著性(P<0.05)。P-gp、GST-π高表达及Topo-Ⅱ低表达与其淋巴结转移有显著相关性。结论:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ的表达与胃癌组织类型有关,其表达可能还与胃癌细胞的分化、转移有关。     

肾细胞癌组织P-糖蛋白和谷胱甘肽-S-转移酶的表达及临床意义

目的　研究P -糖蛋白 (P -gp)的谷胱甘肽 -S -转移酶 (GAT -π)在肾细胞癌组织中的表达及临床意义。方法　用免疫组化方法检测 40例肾细胞癌术前进行化疗的和 15例正常肾组织中的P -gp和GST -π表达。结果　P -gp和GST -π在 15例正常肾组织中的表达率均为 10 0 % ,在 40例肾细胞癌组织中分别为 6 7 5 %和 5 7 5 % ,P -gp和 (或 )GST -π阳性率为 75 %。P -gp和GST -π的表达与其组织学类型有关 ,与肿瘤的分化程度无关。结论　检测P -gp和GST -π对肾细胞癌病人的治疗方案选择和预后判断具有重要的临床意义     

谷胱甘肽转移酶-π与卵巢癌化疗耐药的关系

多药耐药(MDR)现象严重影响了卵巢癌患者的化疗疗效,对MDR及其机制的研究表明,作为Ⅱ相药物代谢解毒酶的谷胱甘肽转移酶(GST)-π通过影响药物的生物转化与代谢过程来促进肿瘤细胞对化疗药物的抵抗,与卵巢癌MDR的产生关系密切.     

谷胱甘肽转移酶-π-与卵巢癌化疗耐药的关系

多药耐药（MDR）现象严重影响了卵巢癌患者的化疗疗效,对MDR及其机制的研究表明,作为Ⅱ相药物代谢解毒酶的谷胱甘肽转移酶（GST）-π-通过影响药物的生物转化与代谢过程来促进肿瘤细胞对化疗药物的抵抗,与卵巢癌MDR的产生关系密切。     

P-糖蛋白、谷胱苷肽-S-转移酶和DNA拓扑异构酶Ⅱ在胃癌中的表达及意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)、谷胱苷肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在胃癌中的表达及临床意义.方法应用免疫组织化学二步法检测41例胃癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达.结果 P-gp、GST-π和TopoⅡ的阳性率分别为34.1%(14/41)、53.7%(22/41)和31.7%(13/41),P-gp表达只与肿瘤浸润深度有关,GST-π的表达与肿瘤生物学行为无关,TopoⅡ的表达与组织学分类,肿瘤浸润深度有关.结论 P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达与胃癌的主要的生物学行为无关,联合检测有助于指导临床化疗药物筛选及化疗方案的优化.     

化疗药物杀伤原代胃癌细胞效应与P-糖蛋白和GST-π表达的关系

背景与目的:化疗耐药是影响进展期胃癌疗效的主要原因之一。本研究旨在评价不同化疗药物对原代胃癌细胞的体外杀伤效应及其诱导凋亡能力,同时研究上述效应与胃癌组织P鄄糖蛋白(P鄄gp)和谷胱甘肽S转移酶π(GST鄄π)表达的关系。方法:39例分离纯化后的人新鲜胃癌细胞,分别暴露于血浆峰浓度的5鄄氟尿嘧啶(5鄄FU)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)及羟基喜树碱(HCPT)。用台盼蓝染色法和MTT法检测经上述药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化;用原位末端转移酶标记法(TdT法)检测胃癌细胞凋亡率;并用免疫组化染色检测胃癌组织中GST鄄π和P鄄gp的表达。结果:经化疗药物作用后,体外培养的胃癌细胞出现不同程度的形态学改变、代谢活性下降及细胞凋亡。不同个体肿瘤细胞对不同化疗药物的敏感性不同。MTT结果提示,所测药物对胃癌细胞的平均抑制率由高到低依次为MMC[(38.6±7.7)%],DDP[(38.1±8.8)%],5鄄FU[(37.8±10.3)%],ADM[(31.9±10.4)%],HCPT[(29.9±10.2)%]。MMC、DDP及5鄄FU的平均抑制率明显高于HCPT及ADM(P<0.01)。TdT结果提示,诱导胃癌细胞凋亡率由高到低的药物依次为DDP[(32.1±7.7)%],5鄄FU[(31.1±8.8)%],MMC[(29.8±6.3)%],HCPT[(21.9±7.4)%],ADM[(19.9±7.4)%]。本组病例GST鄄π和P鄄gp的     

胃癌中P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、肺耐药蛋白的表达及其意义

 目的　检测胃癌组织中P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）的表达,分析其与胃癌临床病理因素的关系。方法　采用免疫组织化学SP法对59例胃癌患者癌组织进行研究。结果　在59例胃癌患者中P-gp阳性率最高[86.4 %（51例）],其次为LRP[84.7 %（50例）],二者呈正相关（r＝0.803）;MRP阳性率最低[27.1 %（16例）]。P-gp、MRP、LRP与分化程度无关（均P＞0.05）。P-gp与临床分期呈正相关（r＝0.742）,MRP、LRP均与胃癌浸润深度、淋巴结转移与否及分化程度无关。结论　P-gp、MRP、LRP在未接受化疗胃癌组织中高表达,提示胃癌中存在P-gp、MRP、LRP介导的原发性耐药。     

胃癌P-糖蛋白表达的临床意义及逆转策略

文章介绍胃癌多药耐药基因(MDR1)产物P-糖蛋白(P-gp)表达的临床意义,以及与其他标志物联合检测的关系,并针对P-gp耐药逆转策略等研究进展进行综述.     

P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶在胆囊癌的表达及临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S转移酶(GST-Pi)在胆囊癌的表达及临床应用价值。方法:对42例胆囊癌及10例慢性结石性胆囊炎手术标本进行免疫组化检测,肿瘤病人术后随访2年,收集数据进行统计分析。结果:P-gp和GST-Pi在胆囊癌中的阳性率为76.2%和64.3%,均高于在慢性结石性胆囊炎中的表达水平30%和20%,有显著性差别(P=0.014和P=0.035)。P-gp和GST-Pi均与胆囊癌Nevin分期有关,P-gp和GST-Pi阳性的肿瘤患者2年生存率低于阴性患者(55.6%vs11.1%,P=0.013;45.5%vs12%,P=0.036)。结论:P-gp和GST-Pi可作为胆囊癌的预后指标。     

P-糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶在胆囊癌的表达及临床意义

目的：探讨P-糖蛋白（P-gp）和谷胱甘肽S转移酶（GST-Pi）在胆囊癌的表达及临床应用价值。方法：对42例胆囊癌及10例慢性结石性胆囊炎手术标本进行免疫组化检测,肿瘤病人术后随访2年,收集数据进行统计分析。结果：P-gp和GST-Pi在胆囊癌中的阳性率为76.2%和64.3%,均高于在慢性结石性胆囊炎中的表达水平30%和20%,有显著性差别（P=0.014和P=0.035）。P-gp和GST-Pi均与胆囊癌Nevin分期有关,P-gp和GST-Pi阳性的肿瘤患者2年生存率低于阴性患者（55.6%vs11.1%,P=0.013;45.5%vs12%,P=0.036）。结论：P-gp和GST-Pi可作为胆囊癌的预后指标。     

耐药相关基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨耐药相关基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoⅡ表达.结果:58例治疗前NSCLC中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoⅡ阳性率分别为96.55%,67.24%,75.86%,65.52%,98.28%,并有部分共表达.癌旁正常肺组织呈阴性或弱阳性表达.性别、有无吸烟史、有无淋巴结转移及在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoⅡ阳性表达无明显差异(P＞0.05).比较腺癌组与鳞癌组,MRP、LRP、GST-π阳性表达有显著性差异(P＜0.05),而P-gp、TopoⅡ阳性表达无明显差异(P＞0.05);MRP、LRP、P-gp、GST-π共表达有显著性差异(χ2=21.662,P＜0.001);低分化腺癌、鳞癌与中、高分化腺癌、鳞癌P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoⅡ阳性表达无明显差异(P＞0.05).结论:肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程,肺腺癌原发的多药耐药机率较肺鳞癌高,联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后.     

人结肠癌LoVo/Adr细胞耐药性与细胞内Ca2+浓度的关系

背景及目的：基于在耐药细胞中Ca^2 增高,且钙通道拮抗剂维拉帕米可逆转多药耐药性,推测Ca^2 可能在耐药性中起一定的作用。本文的目的是探讨人结肠癌LoVo/Adr细胞耐药性与细胞内Ca^2 浓度之间的关系。方法：以Fluo-3/AM标记LoVo和LoVo/Adr细胞内Ca^2 ,用共聚焦显微镜观察其浓度变化;采用MTT法检测维拉帕米逆转细胞耐药性的伤脑筋和流式细胞仪检测细胞内阿霉素的浓度。结果：LoVo细胞和LoVo/Adr细胞Fluo-3/AM的荧光强度分别为850.45和1495.88;加用5mg/L维拉帕米后,LoVo细胞和LoVo/Adr细胞荧光强度分别为813.25和1284.14。说明耐药株LoVo/Adr细胞内Ca^2 浓度显著高于敏感株LoVo细胞,维拉帕米不能明显显著LoVo/Adr细胞内Ca^2 浓度,但5mg/L维拉帕米可显著增加LoVo/Adr细胞内阿霉素的浓度,对阿霉素和长春新碱的增敏倍数分别是8.85倍和5.31倍。结论：细胞内Ca^2 浓度增高可能是耐药株LoVo/Adr的表型特征之一,但与该细胞株耐药性无直接关系。     

Establishment of a cisplatin-resistant gastric carcinoma cell line OCUM-2M/DDP

 A cis-diamminedichloroplatinum (CDDP)-resistant scirrhous gastric cancer cell line, OCUM-2M/DDP, was established by chronic exposure of cells of the parent scirrhous gastric cancer cell line, OCUM-2M, to CDDP at progressively increasing concentrations. The OCUM-2M/DDP cell line had an 11.3-fold higher level of resistance relative to its parent cell line as determined by a succinate dehydrogenase inhibition test. The biological and biochemical characteristics of the resistant and parent cell line were compared. There were differences in the modal chromosome number and DNA index, suggesting that some alterations of the DNA in the CDDP-resistant cells had occurred. Neither the parent nor resistant cell line expressed mdr-1 mRNA. After exposure to CDDP for 4 h, the intracellular platinum content of OCUM-2M cells was significantly higher than that of OCUM-2M/DDP cells (51.9±1.8 vs 16.4 plus 1.0 ng/mg protein, mean±SD, respectively). The GSH levels in OCUM-2M cells and OCUM-2M/DDP cells were 3.5±1.0 μg/mg protein and 16.8±1.2 μg/mg protein, respectively. These levels were also significantly different. These findings suggest that the possible mechanisms of resistance to CDDP in OCUM-2M/DDP cells may be a decrease in intracellular CDDP accumulation and detoxication by GSH. This OCUM-2M/DDP cell line could be used in further investigations of the mechanism of CDDP resistance in gastric cancer. Received: 16 August 1996 / Accepted: 16 November 1996     

外周血P糖蛋白功能检测及其与乳腺癌多药耐药性的关系

目的 建立人外周血NK细胞P糖蛋白功能检测的方法,分析P糖蛋白功能与乳腺癌患者原发性多药耐药之间的关系.方法 选择经含蒽环类和紫杉类药物联合化疗的初治乳腺癌患者16例,治疗后化疗敏感和耐药者各8例.采集患者外周血标本,分离NK细胞,与荧光物质罗丹明123(Rh123)孵育,应用流式细胞仪检测不同时间点外周血NK细胞内Rh123的荧光强度;以Rh123的荧光强度(F)和相应时间点(t)作图,通过曲线估计回归分析,构建P糖蛋白药泵功能检测的最佳数学模型,计算每例患者相应的外排速率常数;分析化疗敏感组和耐药组患者速率常数的差异,以及以速率常数预测乳腺癌原发性多药耐药的可行性.结果 所有患者的NK细胞在撤离Rh123后60min,基本不再外排Rh123,NK细胞内Rh123的蓄积量、排出量和残留量均与化疗敏感性之间无明显相关性.通过回归分析建立了P糖蛋白功能检测的最佳数学模型F1=F0·e-kt(F1为t时间点的荧光强度,k为外排速率常数),化疗敏感组与耐药组患者外排速率常数差异有统计学意义(P=0.025).以k>3.9为标准,诊断乳腺癌原发性多药耐药,其诊断敏感性为75.0%,特异性为100%.准确率87.5%.结论 外周血NK细胞P糖蛋白药泵外排功能与乳腺癌患者原发性多药耐药密切相关,外排速率常数可能是预测乳腺癌化疗敏感性的理想指标.     

甲基莲心碱逆转人胃癌细胞株多药耐药性

目的:研究新的钙阻断剂甲基莲心碱(Nef)对耐长春新碱(VCR)人胃癌细胞多药耐药性(MDR)的逆转作用及其机制。方法:采用MTT比色法测定药物的细胞毒作用,SP法免疫细胞化学及流式细胞术检测Nef对人胃癌细胞多药耐药性相关蛋白(MRP)表达的影响。结果:①在10μmol/L的浓度下,Nef对SGC7901及SGC7901/VCR无显著细胞毒作用;②2.5、5、10μmol/LNef能使VCR对SGC7901/VCR细胞的IC50从2.32μg/ml依次下降至0.340、0.128、0.053μg/ml,逆转倍数分别为6.8、18.1、43.8。在浓度为10μmol/L时,逆转活性较VRP为高(P<0.01);③SGC7901/VCR细胞较SGC7901细胞高表达MRP,经Nef处理后,SGC7901/VCR细胞MRP表达明显下降。表明Nef能下调SGC7901/VCR细胞MRP的表达。结论:甲基莲心碱在体外能逆转耐长春新碱人胃癌细胞(SGC7901/VCR)的多药耐药性。其机制可能与下调MRP的表达有关。     

槲皮素对多药耐药细胞株KB-MRP的耐药逆转研究

目的:研究槲皮素(quercetin)对多药耐药细胞株KB-MRP的耐药逆转作用。方法:使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度槲皮素对细胞株KB-MRP的抑制率,确定其非细胞毒性浓度。用MTT法分别检测阿霉素(ADM)、依立替康(CPT-11)、长春新碱(VCR)、环磷酰胺(CTX)对细胞株KB-3-1、KB-MRP以及使用槲皮素处理后的KB-MRP的半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞术检测KB-3-1、加入槲皮素前后KB-MRP细胞内的化疗药物阿霉素(ADM)的荧光强度以及加入槲皮素前后多药耐药细胞株KB-MRP的MRP1蛋白表达。结果:终浓度为0~40μmol/L的槲皮素对KB-MRP无明显细胞毒作用。KB-MRP对ADM、VCR、CPT-11均有不同程度的耐药但对CTX不耐药。使用20μmol/L槲皮素处理后KB-MRP对上述ADM、CPT-11、VCR的敏感度均有不同程度的提高,胞内的化疗药物阿霉素(ADM)的荧光强度增强。槲皮素的浓度提高至40μmol/L时,KB-MRP对上述药物的敏感程度提高更明显。流式细胞仪结果显示经槲皮素处理后KB-MRP细胞MRP1表达明显下降。结论:槲皮素可以逆转KB-MRP的多药耐药,逆转效果与剂量相关,逆转机制可能与MRP1的表达下调有关。     

粉防己碱对人口腔上皮癌多药耐药KB-MRP1细胞株多药耐药性的逆转作用

背景与目的:粉防己碱(tetrandrine,Tet)是从中草药粉防已的根块中提取的双苄基异喹啉生物碱,具有逆转P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)作用.本研究探讨粉防己碱对人口腔上皮癌多药耐药细胞株KB-MRP1耐药的逆转作用及其可能的机制.方法:采用MTT法检测不同浓度粉防己碱对KB-3-1细胞和KB-MRP1细胞的增殖抑制效应;MTT法检测顺铂(cisplatin,DDP)、长春新碱(vincristine,VCR)、阿霉素(adriamycin,ADM)、依托泊苷(etoposide,VP-16)对KB-3-1、KB-MRP1细胞增殖的抑制作用及加用粉防己碱时的变化;采用流式细胞仪检测细胞内ADM蓄积程度以及细胞凋亡.结果:1.5μg/ml及更低浓度的粉防己碱对KB-3-1和KB-MRP1细胞无明显细胞毒性作用.KB-MRP1对VCR、ADM、VP-16和DDP的耐药倍数分别为21.23、38.39、12.47和1.31.加入1 μg/ml粉防己碱后,KB-MRP1对VCR、ADM、VP-16的耐药逆转倍数分别为4.96、5.85和4.27倍.加入1.5 μg/ml粉防己碱后,KB-MRP1对上述化疗药物的敏感程度提高更明显.1.5 μg/ml浓度的粉防己碱可明显提高ADM在KB-MRP1细胞内的蓄积,增强VCR诱导的KB-MRP1细胞凋亡.结论:粉防己碱可以逆转KB-MRP1细胞的多药耐药,逆转效果与药物浓度有关,逆转机制可能与增加细胞内化疗药物蓄积和增强化疗药物诱导的细胞凋亡有关.