多聚酶链反应研究人乳头瘤病毒感染和口腔鳞状细胞癌及癌变白斑的关系

建立了一种简并引物ＰＣＲ技术扩增多型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ的方法，本方法至少可以特异地扩增ＨＰＶ６，１１，１６，１８及３３。将其用于扩增福尔马林固定石蜡包埋口腔鳞状细胞癌及癌变白斑组织中的ＨＰＶｓＤＮＡ，其阳性例数分别为２２／３０，２３／３０例。本研究表明ＨＰＶ极可能参与了口腔鳞状细胞癌和癌变白斑的癌发生。     

口腔鳞状细胞乳头状瘤组织中HPV DNA的原位杂交研究

目的 探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）感染与口腔鳞状细胞乳头状瘤（ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｐａｐｉｌｌｏｍａ，ＳＣＰ）的发生之间的关系。方法 应用地高辛标记的ＨＰＶ６／１１和ＨＰＶ１６／１８核酸探针分别在３０例口腔ＳＣＰ组织上进行原位杂交，检测口腔ＳＣＰ组织中ＨＰＶ ＤＮＡ的特征。结果 ＨＰＶ６／１１ ＤＮＡ阳性１６例（５３％），ＨＰＶ１６／１８ＤＮＡ未检出，ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ阳性细胞多数分布在鳞状上皮的表层、中层和基底层。结论 原位杂交方法可以检测口腔ＳＣＰ组织中ＨＰＶ ＤＮＡ的存在并能准确组织定位，进一步支持ＨＰＶ６／１感染与口腔ＳＣＰ的发生密切相关。     

口腔鳞癌中HPV感染状况与抑癌基因P53突变关系的研究

采用多聚酶链反应技术扩增３０例福尔马林固定石蜡包埋的口腔鳞癌组织中的ＨＰＶ ＤＮＡ及Ｐ５３第七外显子基因，结果显示ＨＰＶ ＤＮＡ阳性者２２例，Ｐ５３基因有突变者１６例。其中ＨＰＶ ＤＮＡ阳性者约有１／２存在着Ｐ５３基因突变，ＨＰＶ ＤＮＡ阴性者绝大部分在Ｐ５３突变。本研究表明Ｐ５３基因突变在ＨＰＶ ＤＮＡ阴性的鳞癌的癌发生中发挥了重要作用，而在ＨＰＶ ＤＮＡ阳性的鳞癌中Ｐ５３基因突变只是鳞癌发生中     

人类乳头瘤病毒在颌面部鳞状细胞癌感染的检测

用核酸分子原位杂交方法观察人类乳头病病毒ＨＰＶ６Ｂ．１１型病毒与颌面部鳞状细胞癌的关系，结果：病理诊断为鳞状细胞癌Ⅲ级１２例中，ＨＰＶ阳性者９１．７％。ＨＰＶ阴性者８．３％，鳞状细胞癌Ｉ级８例，ＨＰＶ阳性者占２５％，ＨＰＶ弱阳性占６２．５％，ＨＰＶ阴性占１２．５％，结果揭示了ＨＰＶ６Ｂ．１１型ＤＮＡ在口腔恶性鳞状细胞癌中有过表达，提示颌面部鳞状细胞癌的分化程度可能与ＨＰＶ病毒感染有密切关系。     

口腔鳞状细胞癌与人乳头状瘤病毒感染的关系

本文用抗牛乳头状瘤病毒（ＢＰＶ）的抗血清对３１例口腔鳞状细胞癌中的人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）结构抗原进行检测，证明其中３０例口腔鳞状细胞癌中ＨＰＶ结构抗原一，说明口腔癌的发病与ＨＰＶ感染有密切关系，对防治ＨＰＶ感染，减少口腔癌的发病有着重要意义。     

口腔鳞癌中人乳头瘤病毒的研究

为了探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６、１８型及其与癌的关系，作者采用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术，检测２３例口腔鳞状细胞癌（ｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＯＳＣＣ），正常口腔粘膜（ｎｏｒｍａｌｏｒａｌｍｕｃｏｓａ，ＮＯＭ）中的ＨＰＶ１６型和１８型ＤＮＡ中的Ｅ６、Ｅ７基因片段，并对其ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析，以研究ＨＰＶ与ＯＳＣＣ的关系。结果显示：ＯＳＣＣ中ＨＰＶＤＮＡ阳性率４７．８％（１１／２３），其中ＨＰＶ１６型６例，ＨＰＶ８型３例，ＨＰＶ１６和１８型复合感染２例，ＮＯＭ中ＨＰＶ阳性率２０％（２／１０），２例阳性者，均为ＨＰＶ１６型。研究结果提示：高危型ＨＰＶ与口腔鳞癌可能有关，二者的确切关系尚需进一步研究。但ＨＰＶ致癌基因Ｅ６、Ｅ７片段在口腔鳞癌中的检出，为鳞癌的病因研究开辟了新的前景     

口腔粘膜组织中HPV16DNA和空泡细胞关系的研究

本研究采用斑点杂交技术，检测８３例口腔扁平苔藓、口腔白斑、口腔鳞癌及正常口腔粘膜组织中的ＨＰＶ１６ ＤＮＡ，并分析ＨＰＶ１６ ＤＮＡ与空泡细胞出现的关系。口腔粘膜组织ＨＰＶ１６ ＤＮＡ的检出率为１０．８％，空泡细胞的检出率为３４．９％。两者均阳性的检出率为７．２％，结果提示空泡细胞不是ＨＰＶ感染所特有的，不能作为诊断ＨＰＶ的特征性指标。     

舌鳞状细胞癌中人乳头瘤病毒感染

目的 为了解人乳头瘤病毒，尤其ＨＰＶ１６与舌鳞癌发生的关系。方法 采用免疫组织化学技术和ＰＣＲ技术，对４０例福尔马林固定，石蜡包埋舌鳞状细胞癌术后标本进行人乳头瘤病毒感染相关性研究。结果 １２／３８例舌鳞癌癌旁上皮细胞中发现不同程度ＨＰＶ的结构抗原表达，而癌细胞中未见表达。３０／４０例人乳头病毒公共引物ＰＣＲ阳性；２５／３０例ＨＰＶ１６ ＰＣＲ阳性。结论 人乳头瘤病毒，尤其ＨＰＶ１６与舌鳞癌的发生     

口腔颌面部病变组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

为探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）和口腔颌面部肿瘤以及某些口腔粘膜病的关系，应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测４型人乳头瘤病毒６，１１，１６，１８型ＤＮＡ．结果：４５例口腔颌面部良性病变和恶性肿瘤患者，４８份组织标本中的人乳头瘤病毒ＤＮＡ（ＨＰＶ－ＤＮＡ），总阳性率达７５．６％（３４／４５）．其中恶性肿瘤ＨＰＶ－ＤＮＡ阳性率为７６．９（２０／２６）．良性病变ＨＰＶ－ＤＮＡ阳性率为７３．７％（１４／１９）．恶性肿瘤和良性病变２组间ＨＰＶ－ＤＮＡ的型别有显著的差异，恶性肿瘤以ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８型为主，良性病变以ＨＰＶ１８和ＨＰＶ６为主．非肿瘤对照组共３０人ＨＰＶ－ＤＮＡ阳性率为１０％，均为ＨＰＶ１８型．ＨＰＶ１８在口腔颌面部恶性肿瘤和良性病变组织中阳性率均较高，但两者间无统计学差异     

人乳头瘤病毒16型在口腔癌及癌旁组织中的存在状态

采用斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交检测２５例口腔鳞癌及其相应癌旁组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型ＤＮＡ，口腔癌ＨＰＶ１６ＤＮＡ的阳性率为２４．０％（６／２５），癌旁组织为８．０％（２／２５）。经ＢａｍＨＩ、ＰｓｔＩ酶切杂交后出现的阳性区带显示ＨＰＶ１６ＤＮＡ在口腔癌及癌旁组织中均以游离状态存在。作者推测ＨＰＶ１６ＤＮＡ在口腔癌的致癌机理中可能作为一个协作因子发生作用。     

p16和p53蛋白在口腔白斑和鳞状细胞癌中表达的比较研究

目的比较p16和p53在口腔白斑和口腔鳞状细胞癌中异常表达的情况。方法对17例健康者的口腔粘膜、60例白斑患者和40例口腔鳞状细胞癌患者的病损组织进行了p16和p53蛋白的免疫组化染色。结果正常口腔粘膜、白斑单纯增生、白斑异常增生和口腔鳞状细胞癌的p16阳性率分别为100％、90％、60％和35％，p53蛋白的阳性率分别为12％、27％、50％和73％，p16阳性率和细胞染色强度指数（stainning intensity index，SII）分别与口腔粘膜组织恶性度的增高显著负相关；p53阳性率和S11分别与口腔粘膜组织恶性度的增高显著正相关。p16和p53在不同组织中的阳性率显著负相关；p16和p53在白斑异常增生的协同失活率达23％，在口腔鳞状细胞癌中达到42．5％。p16阳性率、p16SII、p53SII及两种基因均异常的比率在口腔鳞状细胞癌无淋巴结转移和口腔鳞状细胞癌有淋巴结转移患者之间均有显著差异。结论p16可作为早期监视口腔白斑恶变、监测口腔鳞状细胞癌发展进程和判断口腔鳞状细胞癌预后的分子生物学指标。p16和p53失活在白斑癌变和口腔鳞状细胞癌的发展过程中可能有叠加效应。     

端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌中的表达研究

目的　了解端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌中的表达情况并探讨端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌演变过程中的作用。方法　对 37例口腔鳞状细胞癌、2 0例癌前病变 (白斑 )、15例口腔良性肿瘤 (乳头状瘤 )及 12例正常口腔组织 ,采用聚合酶链反应 -酶联免疫吸附法检测其端粒酶活性。结果　口腔鳞状细胞癌中的端粒酶活性阳性率明显高于良性肿瘤组织和正常组织。口腔癌前病变组与鳞状细胞癌组基本一致。结论　端粒酶可稳定染色体末端的端粒结构,端粒酶活化在口腔肿瘤恶变过程中起重要作用;端粒酶可作为判断癌变能力的良好分子生物学标志。     

口腔疣状癌中人乳头瘤病毒感染

本研究采用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ），利用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）公共引物及ＨＰＶ１６型特异引物分析了１２例口腔疣状癌中ＨＰＶ的感染．结果表明９／１２例公共引物ＰＣＲ呈ＨＰＶ相关序列阳性；４／１３例ＨＰＶ１６特异性引物ＰＣＲ结果阳性，说明ＨＰＶ参与了口腔疣状癌的发生     

人乳头瘤病毒,疱疹病毒I型及人巨细胞病毒与口腔鳞癌关系的研究

目的：研究口腔鳞癌与人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）、孢疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－Ｉ）和人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的关系。方法：采用斑点杂交和ＰＣＢ技术检验３２例口腔鳞癌、１４例口腔白斑和１０例正常口腔粘膜中ＨＰＶ１６、ＨＳＶ－Ｉ及ＨＣＭＶＤＮＡ。结果：在正常口腔粘膜、白斑及口腔鳞癌中ＨＰＶ１６、ＨＳＶ－１及ＨＣＭＶＤＮＡ感染率分别为０％、３５．７％、５０．０％、４０．０％、５０．０％、４３．３％和０％、１４．３％、２８．１％,口腔鳞癌及白斑组织中ＨＰＶ１６－ＤＮＡ的检出率均高于正常口腔,且差别具有显著性（ｐ〈０．０５）;但ＨＳＶ－Ｉ和ＨＣＭＶＤＮＡ在口腔疾患中的检出率与正常比较无显著差别（ｐ〈０．０５）。结论：ＨＰＶ１６感染与口腔鳞癌的发生相关;ＨＳＶ－Ｉ和ＨＣＭＶ可能参予口腔鳞癌的发生及发展,并且与ＨＰＶ１６有协同致癌的作用     

人乳瘤病毒16型和EB病毒感染与口腔鳞癌关系

用多聚酶链反应技术为２１例口腔鳞癌及癌旁正常组织成对标本中的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）和ＥＢ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ作检测。结果口腔鳞癌和癌旁正常组织ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性率分别为５２．４％和１４．３％，ＥＢＶ为８５．７％和３３．３％，ＨＰＶ１６和ＥＢＶ均为阳性者分别为４７．６％和９．５％，癌组织和癌旁正常组织间统计学上均有显著性差异。提示口腔粘膜ＨＰＶ１６或ＥＢＶ感染均与口腔鳞癌发生有关。ＨＰＶ１６和ＥＢＶ在口腔粘膜感染可能有协同致口腔鳞癌作用。     

TRAIL在口腔鳞状细胞癌和白斑中的表达及意义

目的：研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织及白斑中的表达及意义。方法：采用免疫组化Maxvision两步法检测54例口腔鳞状细胞癌、30例口腔黏膜白斑、22例正常口腔黏膜组织中TRAIL的表达水平。结果：TRAIL在口腔鳞状细胞癌组织和黏膜白斑中的表达水平均低于其在正常口腔黏膜中的表达水平（P〈0.05）,分别为33.3%、56.7%、86.4%,其在癌组织与白斑中表达水平的差异无统计学意义。TRAIL在高分化癌组织中的表达水平高于中低分化组（P〈0.05）。TRAIL在不同临床分期组间及淋巴结转移与非转移组间表达水平的差异无统计学意义。结论：TRAIL表达的抑制可能与口腔鳞状细胞癌及口腔黏膜白斑的发生有关,并且TRAIL可能参与了初始阶段的正常黏膜向癌组织的转化。TRAIL在口腔鳞状细胞癌中的表达水平与癌组织的分化程度相关。     

口腔鳞状细胞癌近红外拉曼光谱特征及其诊断价值研究

目的探索近红外拉曼光谱技术及化学计量法在口腔鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法收集正常口腔黏膜组织10例、鳞状细胞癌组织20例、白斑30例进行近红外拉曼光谱扫描,分析不同病变类型的特征性光谱,通过化学计量法进行分析建模,并评价其分类诊断效力。结果相对于正常组织,鳞状细胞癌及白斑中DNA、蛋白及脂类合成增强,表现出较明显的增殖活性。在对鳞状细胞癌和正常组织的建模比较中,诊断准确度98.81％;在鳞状细胞癌与白斑建模诊断中,诊断准确度96.30％。结论近红外拉曼光谱检测结合支持向量机分类建模技术,可以检测到口腔正常黏膜、白斑及鳞状细胞癌样本中的生化物质变化,并进行准确分类建模诊断。     

用核酸杂交法研究人类乳头瘤病毒与口腔癌的相关性

以放射性核素￣（３２）Ｐ标记ＨＰＶ１１、ＨＰＶ１６、Ｅ＿６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ探针，用核酸斑点杂交法，检测了部分口腔恶性肿瘤组织中的ＨＰＶ相关序列。（１）用ＨＰＶ１１探针检测１２例，其中口腔粘膜鳞状细胞癌（ｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＳＣＣ）８例，涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）２例，涎腺多形性腺瘤恶变（ｍａｌｉｇｎａｎｔｐｌｅｏｍｏｒｐｈｉｃａｄｅｎｏｎｉａ，ＭＰＡ）１例，软组织胚胎性横纹肌肉瘤（ｅｍｂｒｙｏｉｄｒｈａｂｄＯｍｖｏｓａｒｃｏｍａ，ＥＲＳ）１例；结果阳性５例（５／１２），弱阳性１例，６例为阴性。（２）用ＨＰＶ１６Ｅ＿６探针检测１０例，其中ＳＣＣ６例，ＡＣＣ２例，ＭＰＡ１例，ＥＲＳ１例；结果阳性６例（６／１０），弱阳性１例，３例为阴性。（３）用ＮＰＶ１８探针检测１２例，肿瘤类型及例数同ＨＰＶ１１检测组，结果阳性３例（３／１２），阴性９例（９／１２），非肿瘤对照组共４例（唇、腭裂各２例），除１例唇裂出现了与ＨＰＶ１１和ＨＰＶ１６Ｅ＿６杂交呈弱阳性外，余均为阴性。     

口腔白斑和口腔鳞状细胞癌患者血清前列腺素E2和干扰素-α的意义

目的：血清前列腺素E2（FGE2）、干扰素－α（IFN－α）的检测对诊断口腔早期癌的临床意义。方法：60例可疑病人及30名正常人空腹血的实验室前列腺素E2、干扰素－α测试。结果：口腔鳞状细胞癌前列腺素E2恙白斑、正常人有显著差别，而白斑与正常人前列腺素E2水平无显著差别；口腔鳞状细胞癌、白斑的干扰素－α水平与正常人有显著差别；口腔鳞状细胞癌与白斑干扰素－α水平无显著差别。结论：血清前列腺素E2、干扰素－α的检测作为一种辅助诊断对诊断口腔早期癌是有意义的。     

口腔鳞癌组织中人乳头瘤病毒16型的原位杂交研究

目的：探讨HPV16-E6基因在口腔粘膜白斑，口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其在口腔鳞癌发生、发展过程中的意义及分布特征。方法：应用地高辛标记的HPV16-E6的寡核酸探针分别对口腔鳞状细胞癌组织，口腔粘膜白斑组织，宫颈癌组织及正常组织中进行原位杂交，以检测各组织中HPV16型的DNA表达和分布情况，结果：口腔鳞状细胞癌组织HPV16阳性率46．67％；口腔粘膜白斑组织阳性率60％。HPV16E6基因阳性信号集中分布于癌细胞胞核中。结论：原位杂交方法可用来检测OSCC组织中HPV16型DNA的存在并能准确组织定位；较高的阳性率进一步支持高危型HPV16型的感染与口腔鳞状细胞癌的发生有关；在癌前病损组织中的高危型HPV16的检m率高于口腔鳞癌组织，说明HPV在口腔鳞癌发生的早期阶段可能具有致癌作用。