L-精氨酸对大鼠血管损伤后内膜增生及相关细胞周期调控基因表达的影响

目的:研究L-精氨酸(L-Arg)对大鼠血管损伤后内膜增生及相关细胞周期调控基因表达的影响。方法:大鼠分为假手术组,球囊损伤组(又分为术后48h、7d和14d亚组)及球囊损伤+L-Arg组。取各组实验动脉段测新生内膜面积,并采用免疫组化及计算机图像分析法测细胞周期依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E(cyclinE)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:球囊损伤后14d组的血浆NO水平低于假手术组(P＜0.01),CDK2、cyclinE及PCNA均于球囊损伤术后48h在中膜表达,第7d、14d在内膜表达,中膜几无表达,随着内膜增厚表达水平上升。与球囊损伤后14d组相比,球囊损伤+L-Arg组的血浆NO水平增高(P＜0.01),新生内膜面积少59.1%(P＜0.01),CDK2、cyclinE及PCNA的阳性表达指数分别低36.1%,46.3%和76.2%(P均＜0.01)。结论:L-Arg可有效抑制血管损伤后内膜增生,其机制可能与逆转CDK2、cyclinE及PCNA的过表达从而抑制血管平滑肌细胞增殖有关。     

L-精氨酸对肾性高血压心肌肥厚大鼠血浆内皮素及左心室肌原癌基因c-fosmRNA表达的影响

目的:研究L-精氨酸对肾性高血压心肌肥厚大鼠血浆内皮素及左室肌原癌基因c-fosmRNA表达的影响。方法:采用原位杂交方法检测原癌基因c-fosmRNA的表达,并用图像分析仪作半定量分析。用放射免疫法测定血浆内皮素含量。结果:经过8周治疗后,L-Arg使高血压心肌肥厚大鼠左室肌原癌基因c-fosmRNA表达显著减少(P＜0.01),并显著降低血浆内皮素含量(P＜0.01)。结论:L-Arg能降低高血压心肌肥厚大鼠血浆内皮素含量并使左室肌原癌基因c-fosmRNA的表达量减少。     

糖尿病冠状动脉粥样硬化猪模型构建

目的:通过给予巴马小型猪高脂饮食,低剂量链脲菌素联合球囊拉伤的方法,构建糖尿病冠状动脉粥样硬化模型.方法:将18头4月龄健康雄性巴马小型猪随机分为对照组(n=3)和模型组(n=15).对照组以普通饲料喂养;模型组以高脂饲料喂养,静脉注射链脲菌素(100 mg/kg)后持续监测葡萄糖2周,第3周行右冠状动脉中段球囊拉伤术...     

C-型利钠利尿多肽在大鼠血管球囊损伤中作用

目的和方法:本实验在大鼠主动脉球囊剥脱模型上,观察血浆和主动脉组织C-型利钠利尿肽(CNP)的动态变化及外源性CNP对大鼠球囊损伤后内膜生成的影响,以探讨CNP在再狭窄中的作用。结果:发现大鼠球囊损伤后血浆CNP的浓度升高,内膜剥脱后第3 d、10 d、21 d,血浆CNP水平分别增高80.7%(P＜0.01),43.5%(P＜0.05)和27.5%(P＜0.05),而主动脉组织CNP含量在损伤后第3 d下降46.6%(P＜0.05),第10 d,21 d和28 d CNP含量分别增加2.8倍(P＜0.01)、1.6倍(P＜0.05)和0.82倍(P＜0.05)。外源性CNP显著抑制球囊损伤后第7 d和21 d新生内膜的形成,内膜/中膜比值分别降低22%(P＜0.05)和20%(P＜0.05)。结论:CNP参与血管球囊损伤后的修复过程,外源性CNP可抑制内膜增厚。     

球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的变化

目的:探讨球囊损伤血管内皮后平滑肌细胞(SMC)凋亡的机制。方法:采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学技术检测球囊损伤内皮后血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡及Bax/Bcl-2蛋白的变化。结果:球囊损伤内皮后第3d,血管中层出现凋亡的SMC;损伤后第7d,内膜和中层SMC凋亡率最高,凋亡的SMC主要分布在内膜层;以后逐渐降低,至损伤后第28d,仅内膜层有少量凋亡的SMC。Irbesartan显著增加SMC凋亡(P＜0.01)。球囊损伤内皮后第3d,血管中层Bax/Bcl-2表达显著高于假手术组(P＜0.01);损伤后第7d血管中Bax表达最高,是假手术组的3倍,以后表达减少。球囊损伤内皮后Bcl-2表达逐渐增多,至第28d表达最高。Bax/Bcl-2也在损伤后第7d达最高,至第28d降至基础水平以下。Irbesartan使Bax表达增高、Bcl-2表达降低、Bax/Bcl-2升高。结论:Bax/Bcl-2参与了球囊损伤内皮后VSMC凋亡的调节。     

血管钙化时血管血红素加氧酶/一氧化碳系统的变化

目的:观察血管钙化时血管血红素加氧酶(HO)-一氧化碳(CO)-环磷酸鸟苷(cGMP)系统的改变, 以探讨血管钙化发病的细胞分子机理。方法:利用维生素D₃(VitD₃)和尼古丁(nicotine)复制大鼠血管钙化模型, 检测HO-1mRNA的相对含量, HO-1免疫组织化学染色, 测定主动脉HO-1活性、碳氧血红蛋白(HbCO)的生成及血管cGMP含量。结果:用竞争性定量RT-PCR的方法发现, 钙化动物血管组织的HO-1mRNA水平较对照组低34.9%(P＜0.05);免疫组织化学方法观察发现钙化血管的HO-1蛋白表达减少, 仅在内膜略有表达, 中膜无明显表达;HO-1活性低60.6%(P＜0.01);CO生成少53.9%(P＜0.01), cGMP的含量低77.1%(P＜0.01)。结论:钙化血管血红素-HO-CO-cGMP途径功能下调。     

bFGF、MMP-2在肺血减少型先天性心脏病幼猪动物模型远端肺血管发育中的作用

目的:采用球囊扩张人工房间隔造口+肺动脉环缩术建立肺血减少型先天性心脏病幼猪动物模型,探讨肺血减少时远端肺血管形态学变化的病理生理机制.方法:将出生1～2个月的幼猪20头随机分为3组.对照组(C组,n=6):右胸小切口制成一过性肺血减少;轻度-中度肺动脉狭窄组(T1组,n=7):经右心房表面送入球囊扩张器,行人工房间隔造口+肺动脉Banding环缩术,控制收缩期肺动脉环缩处压差(Trans-PABP)为20～30 mmHg;重度肺动脉狭窄组(T2组,n=7):术中Trans-PABP≥30～50 mmHg.三组于术后2个月取右肺中叶外侧段1.0 cm×0.8 cm×0.8 cm大小的肺组织,光学显微镜下观察远端肺细小动脉形态学改变,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELlSA)检测血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的含量.结果:T1、T2组行房间隔造口+肺动脉环缩术均获成功.术后2个月,T1、T2两组肺细小动脉内径均大于C组(P＜0.05),肺细小动脉数目(NAPSC)均少于C组(P＜0.05).血清bFGF 、MMP-2含量,T1、T2两组较C组升高(P＜0.05),而C组手术前后没有明显变化(P＞0.05).结论:肺血减少型先天性心脏病幼猪,肺组织细胞外基质发生构型重建,肺细小血管发育不良或退化,其发生基质重塑的基础是肺血减少时引起一系列酶和细胞因子等成分的变化.     

切割球囊与半顺应性球囊用于冠状动脉分叉病变预扩张的比较

文题释义：切割球囊：是一类将微切割技术和球囊扩张结合一起的特殊球囊,由一枚球囊组成,球囊外层表面上纵向装有三片或四片粥样硬化切开刀。在球囊未到达病变之前,刀片被紧密包绕在经过特殊折叠的球囊材料之内,不会损伤所过路径的正常血管。到达病变后,在扩张球囊时刀片伸出球囊外面,造成血管中膜的纵形切口。切割球囊适用于2-4 mm直径的血管,直径选择为其与血管直径之比不要超过1∶1,否则会造成内膜撕裂。目前切割球囊主要用在支架内再狭窄病变、开口病变、分叉病变、小血管病变和钙化病变。相对禁忌证为病变严重成角(>45°)、严重钙化、血栓及血管严重扭曲的病变。 紫杉醇药物涂层球囊：是一个由2部分组成的组合产品,一个标准的血管成形球囊导管来提供基础的输送装置,扩张靶向病变部位;另一部分是药物涂层,其在球囊表面的紫杉醇量为3 μg/mm²,该产品主要靠药物在血管内壁的释放发挥作用,可用于治疗小血管病变、分叉病变、部分冠状动脉血管原发病变,以及不能耐受或不适合长期服用抗血小板药物的患者。紫杉醇药物涂层球囊虽然能有效抑制血管平滑肌细胞再生,但不能有效抑制血管壁弹性回缩,后者在血管再狭窄中起着至关重要的作用。 背景：目前冠状动脉分叉病变治疗尚无高效统一的最佳方案,较多采用主支植入药物洗脱支架、分支用药物涂层球囊扩张的简单策略,但单纯直接的药物涂层球囊扩张不能克服血管壁弹性回缩难题,远期仍存在分支丢失的风险。 目的：比较切割球囊与半顺应性球囊用于冠状动脉分叉病变预扩张的疗效和安全性。 方法：选择2016年8月至2018年5月焦作市人民医院收治的冠状动脉分叉病变患者110例,其中男83例,女27例,年龄18-88岁,按照分层区组随机化原则分为观察组(n=55)和对照组(n=55)。两组均进行经皮冠状动脉介入治疗,观察组主支采用切割球囊预扩张后植入药物洗脱支架,分支采用切割球囊预扩张后行药物涂层球囊扩张;对照组主支采用半顺应性球囊预扩张后植入药物洗脱支架,分支采用半顺应性球囊预扩张后行药物涂层球囊扩张。术后即刻造影,判定主支、分支的前向血流TIMI分级及有无血管夹层发生;术前、术后即刻、术后6个月、12个月应用冠状动脉造影定量分析主支及分支血管参考直径、最小内径及狭窄程度;记录两组术后12个月内的主要心血管不良事件。研究已获得焦作市人民医院道德伦理委员会审核批准。 结果与结论：①术后即刻造影,观察组主支、分支的前向血流TIMI 3级达标率高于对照组(P=0.007,0.015),主支、分支的血管夹层发生率低于对照组(P=0.023,0.012),主支、分支的紧急靶血管重建率低于对照组(P=0.006,0.026);②观察组术后即刻、6个月及12个月的冠状动脉保持成功率高于对照组(P均 < 0.001);③术后即刻、6个月及12个月,观察组的主支、分支最小内径均大于对照组(P均 < 0.01),主支、分支内径狭窄程度均小于对照组(P均 < 0.05);④术后12个月内,观察组的主支、分支靶血管再狭窄率低于对照组(P=0.038,0.043),主要心血管不良事件发生率低于对照组(P=0.025);⑤结果表明,在适用主支病变植入药物洗脱支架、分支病变植入药物涂层球囊治疗冠状动脉分叉病变中,切割球囊预扩张较半顺应性球囊预扩张更加安全、有效,并能降低靶血管再狭窄率及主要心血管不良事件发生率。 ORCID: 0000-0002-6099-4241(晋辉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

经皮球囊封堵冠状动脉法制备小型猪心肌梗死模型及评价

目的: 探讨球囊封堵法建立小型猪心肌梗死模型的可行性,以及骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗心肌梗死疗效初探。方法: 选用小型藏猪20只,麻醉后经股动脉置入经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)球囊至左前降支中远段,完全堵闭血流90 min,行心电图、心脏超声心动图、心肌核素显像、心脏核磁共振及病理检查。随机分2组:MSCs移植组,OTW球囊将MSCs移植到梗死心肌处;生理盐水组,注入等量生理盐水。观察2组的左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)、左室舒张末期内径(EDV)和左室收缩末期内径(ESV)的变化。结果: 20只猪均完成冠脉造影,造模成功10只,,死亡10只,成功率50%。与造模之前比, LVEF、FS显著下降(P<0.05),EDV、ESV显著延长。8周后,MSCs移植组均较移植前好转(P<0.05, P<0.01),而生理盐水组亦有所改善,但无显著差异;MSCs移植组的LVEF和FS较生理盐水组明显增加(P<0.05,P<0.01),MSCs移植组的EDV和ESV较生理盐水组明显缩少(P<0.05,P<0.01)。结论: 球囊封堵法可成功建立小型猪心肌梗死模型,并且适合行骨髓干细胞移植的研究,但须特别注意预防心室纤颤的发生。MSCs移植可明显改善小型猪梗死心肌的功能。     

大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II受体的变化

目的:观察大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II(UII)受体特征的变化及血管对UII收缩效应的改变。方法:测定大鼠主动脉球囊损伤后[¹²⁵I]-UII配体结合及血管张力。结果:球囊成形术后3d、21d时,血管对UII的反应性增强(P＜0.05),主动脉UII受体最大结合(Bmax)较对照组分别高44%及36%,受体与配体解离常数(Kd)无显著差异(P＞0.05)。结论:血管球囊损伤后UII受体发生上调,受体密度增加,血管对UII的反应性增强,表明UII可能在血管成形术后再狭窄过程中发挥重要作用。     

血管紧张素转换酶抑制剂对损伤后动脉弹性蛋白酶的影响

目的：研究球囊导管损伤后早期血管紧张素转换酶抑制剂对动脉中膜弹性蛋白酶的影响。方法：12周雄性Wistar大鼠颈动脉和主动脉用球囊导管损伤,分成实验组和对照组,分别于术前2 d投与血管紧张素转换酶抑制剂（temocapril-HCl, 10 mg·kg^-1·d^-1）和溶剂,术后2、3、5和10 d处死。用原位杂交、免疫组织化学和酶活性测定研究弹性蛋白酶。结果：实验组动脉损伤10 d时的内膜面积与对照组相比明显被抑制（P<0.01）,实验组2、3和5 d弹性蛋白酶mRNA阳性细胞率、弹性蛋白酶阳性细胞率及其活性明显低于对照组（P<0.01, P<0.05）。结论：ACEI（temocapril-HCl）明显抑制损伤后动脉中膜平滑肌弹性蛋白酶表达和活性,提示弹性蛋白酶的表达与血管紧张素转换酶的作用有关。     

黄芪多糖对缺血脑损伤大鼠海马神经递质及c-fos mRNA表达的影响

目的: 观察黄芪多糖(astragalan,AG)对缺血性脑损伤大鼠海马乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及c-fos mRNA表达的影响。方法: 取Wistar雄性大鼠100只,随机分成假手术组(sham-operated group,SOG)、模型组(model group, MG)、低剂量黄芪多糖治疗组(low-dose astragalan treatment group, L-AGTG)、高剂量黄芪多糖治疗组(high-dose astragalan treatment group, H-AGTG),每组10只。所有MG和AGTG组颈部切开阻断右侧大脑中动脉,造成缺血性脑损伤后,AGTG组腹腔注射AG(5 mg·kg^-1和15 mg·kg^-1)。于1 d、3 d和7 d分别脑血流再灌注,随即评分神经功能缺损情况后取材,测定海马匀浆中ACh、NE和5-HT的含量,采用RT-PCR法半定量分析大鼠海马c-fos的mRNA水平。结果: AG能减轻脑缺血引起的海马损伤。L-AGTG 7 d和H-AGTG 3 d、7 d海马匀浆ACh、5-HT和NE的含量均显著高于MG而低于SOG(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量递增趋势;SOG的c-fos mRNA表达低于MG(P<0.05或P<0.01),提示脑缺血因素造成了 c-fos 基因表达增强,加速了下游基因表达,有利于神经细胞的保护;H-AGTG 3 d、7 d c-fos mRNA表达均高于MG(P<0.05),提示黄芪多糖具有上调c-fos mRNA表达的作用。结论: 黄芪多糖能减轻脑缺血再灌注引起的神经细胞损伤、改善海马神经功能,其作用机制与提高海马ACh、NE、5-HT含量和促进 c-fos 基因表达有关。     

AT2R基因在体转染抑制大鼠颈动脉新生内膜增生

目的: 探讨AngⅡ 2型受体（AT2R）基因在体转染对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的抑制作用。方法:大鼠颈动脉球囊损伤后，局部转染AT2R重组腺病毒载体（pAdCMV/AT2R）或空病毒载体（pAd-GFP），于术后7、14和21 d用RT-PCR、免疫组织化学及HE染色方法，进行AT2R、AngⅡ 1型受体(AT1R)、PCNA在颈动脉壁中表达的变化及定量组织形态学分析；免疫荧光双标染色和激光共聚焦技术检测血管中AT2R与PCNA表达的关系。结果: pAdCMV/AT2R转染后，大鼠颈动脉AT2R的表达水平显著高于未转染组和pAd-GFP组(P<0.01)，21 d时仍维持较强表达。在14 d时pAdCMV/AT2R组PCNA阳性表达率显著低于未转染组和pAd-GFP组［(27.29±5.81)% vs ( 72.25±4.47)%、(68.43±9.12)%，P<0.01］，在AT2R表达阳性的部位PCNA表达阴性。在21 d时，pAdCMV/AT2R组的内膜面积与中膜面积比显著低于未转染组和pAd-GFP组(0.78±0.06 vs 1.44±0.22、1.36±0.21, P<0.01)，pAd-GFP组和未转染组间无显著差异（P>0.05）；各组颈动脉AT1R表达水平无显著差异(P>0.05)。结论: AT2R基因在体转染可抑制球囊损伤后大鼠颈动脉平滑肌细胞增殖和新生内膜增生，AT2R基因转染后表达并发挥其生物学作用时，AT1R和AT2R之间不存在表达量上此起彼伏的关系，可能是建立在信号转导基础上的功能调节关系。     

Contusive spinal cord injury evokes localized changes in NADPH-d activity but extensive changes in Fos-like immunoreactivity in the rat

The histological detection of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d), a marker for nitric oxide-producing cells, was used to evaluate ongoing changes in the neural biochemistry of the rat spinal cord 1 week following contusive spinal cord injury (SCI). In addition, the immunohistochemical detection of the immediate-early gene c-fos was used to identify basal patterns of neural activity at this time. The numbers and laminar locations of NADPH-d- and c-fos-positive cells were examined in spinal segments adjacent to the site of injury (T12-S3) as well as those distant from the injury (C3-C5) in both SCI and un-injured rats. Our data show that contusive SCI results in a significant reduction in NADPH-d labelling in the superficial dorsal horn, and a significant increase in NADPH-d expression in small bipolar neurons and large motoneurons in the ventral horn at the site of the injury. In spinal segments distant to the injury site (C3-C5), NADPH-d activity did not differ from that of uninjured controls. Furthermore, significant reductions in the levels of c-fos expression were observed in SCI rats, in spinal segments both at and distant to the site of injury for all spinal laminae. The only exception was a dramatic increase observed in the sacral parasympathetic nucleus. These data suggest that increased NADPH-d expression is related to conditions specific to the site of injury, whereas the changes in c-fos expression probably indicate more global changes in neuronal activity following SCI.     

Mechanisms of restenosis after coronary intervention: difference between plain old balloon angioplasty and stenting.

BACKGROUND: Restenosis after coronary intervention remains an unsolved and important clinical problem. We histologically examined the mechanism of restenosis after both balloon injury and stenting. METHODS: Coronary arteries of swine were subjected to balloon injury and stenting. Next, just after stenting or at 7, 14, or 28 days, the animals were sacrificed for the evaluation by morphometric analysis, histological observation, and immunostaining. RESULTS: The neointimal area peaked at 14 days in the balloon injury group (BG) and increased linearly up to 28 days in the stent group (SG). At 28 days, the total vascular area in the BG was reduced to 78% of the control values. In the SG, the total vascular area remained enlarged. According to the phenotypic analysis, the vascular smooth muscle cells (VSMCs) in the neointimal area at 28 days were the contractile type in the BG and the synthetic type in the SG. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and macrophage-positive cells were not observed in neointima in the BG at 28 days, whereas they were observed around the stent struts in the SG. In addition, numerous inflammatory cells, such as neutrophils and eosinophils, were also present in the SG. CONCLUSIONS: Restenosis after balloon injury consisted of arterial remodeling and neointimal hyperplasia, whereas that after stenting consisted mostly of neointimal hyperplasia. The neointimal area in the SG lasted longer than that in the BG. Continuous inflammation may be an important factor in the restenosis of stenting.     

尾加压素Ⅱ对大鼠胸主动脉球囊损伤后血管重塑的作用

目的： 探讨尾加压素Ⅱ(UII)在血管损伤后重塑过程中的作用。方法: 建立大鼠胸主动脉球囊拉伤模型，随机分为4组（n=5）,分别为假拉伤组、拉伤组、UII组（胸主动脉球囊拉伤并持续泵入UII 1.0 nmol·kg-1·h-1）和urantide组( 胸主动脉球囊拉伤并持续泵入urantide 10 nmol·kg-1·h-1)。于第21 d取胸主动脉，分别检测血管形态改变、UII表达、平滑肌细胞增殖和胶原表达。结果: ①术后第21 dUII组收缩压高于拉伤组［（140.0±10.0) mmHg vs (132.0±3.4) mmHg, P>0.05］,明显高于urantide 组［（140.0±10.0) mmHg vs (128.0±2.4) mmHg, P<0.05］。②胸主动脉球囊损伤后,损伤血管局部UII表达增强。③同拉伤组比, UII组进一步促进了内膜的增生,管腔面积狭窄率明显增加(0.13±0.05 vs 0.07±0.02, P<0.05);细胞增殖指数明显增加(0.74±0.16 vs 0.40±0.11,P<0.01);胶原表达也明显增加(以IOD计量,318±127 vs 78±26, P<0.01)。④同拉伤组比,urantide组管腔面积狭窄率没有减轻(0.09±0.03 vs 0.07±0.02, P>0.05);细胞增殖指数明显增加(0.73±0.15 vs 0.40±0.11, P<0.01);胶原表达增多但无统计学意义(以IOD计量,200±79 vs 78±26, P>0.05)。结论: 大鼠胸主动脉损伤后局部UII表达增强；外源性UII促进新生内膜平滑肌细胞增殖和胶原表达，加重了损伤血管的狭窄，提示UII参与了损伤后修复的过程；10 nmol·kg-1·h-1urantide不能抑制损伤后血管重塑的进程, 拮抗UII的机制尚有待进一步探讨。