川芎嗪对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及TGF-β1表达的影响

目的观察川芎嗪对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及转化生长因子(TGF-β1)表达的影响.方法32只SD大鼠均分为正常对照组、以卵蛋白致敏制备的哮喘模型组以及给予不同剂量川芎嗪进行干预的小剂量、大剂量川芎嗪干预组共4组,采用免疫组织化学和计算机图像分析方法测定各组大鼠气道壁TGF-β1含量、平滑肌层厚度及内外径.结果模型组气道壁TGF-β1含量和平滑肌层厚度较正常组均显著增加(均为P<0.001),气道内外径比值较正常组减小(P<0.001).两种剂量川芎嗪干预组平滑肌层厚度均较模型组变薄(均为P<0.001),TGF-β1含量均较模型组减低(均为P<0.001),气道内外径比值均高于模型组(均为P<0.001),两种剂量川芎嗪干预组间平滑肌厚度无差别(P>0.05),大剂量组对TGF-β1表达抑制较小剂量组强(P<0.01).气道壁平滑肌层厚度与TGF-β1表达呈正相关(rs=0.5878,P<0.01).结论川芎嗪能减轻哮喘大鼠气道壁平滑肌层的增厚并抑制TGF-β1表达.     

地塞米松对哮喘大鼠气道壁胶原沉积和转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察地塞米松对哮喘大鼠模型气道壁胶原、转化生长因子β_1(TGF-β_1)含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组和激素干预组,以卵蛋白致敏并长期吸入激发制备大鼠慢性哮喘模型,干预组于每次吸入前腹腔注射地塞米松,模型组以生理盐水代替。肺组织石蜡切片行胶原和TGF-β_1免疫组化染色后计算机图像分析测定其含量。结果:模型组气道壁Ⅲ型胶原及TGF-β_1含量均高于对照组(q值分别为13.57、12.76,P值均<0.001);激素于预组Ⅲ型胶原及TGF-β_1含量低于模型组(q值分别为12.88、11.23,P值均<0.001),较之对照组差异均无显著性;各组间Ⅰ型胶原的含量差异不大(P值均>0.05)。TGF-β_1的表达与Ⅲ型胶原的含量呈显著正相关(r=0.606,P<0.01)。结论:地塞米松可以减少气道壁Ⅲ型胶原的沉积和TGF-β_1的表达,对Ⅲ型胶原沉积的抑制可能部分通过抑制TGF-β_1表达而实现的。     

哮喘大鼠模型肺组织、肺泡灌洗液及血清中TGF-β1水平比较

目的:观察哮喘大鼠肺组织、肺泡灌洗液及血清中转化生长因子(TGF-β1)水平探讨其与气道重塑的关系,了解血清、肺泡灌洗液中两者的水平及诊断价值。方法:20只Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组,每组10只,采用卵蛋白(OVA)等致敏大鼠哮喘模型;第14天后,哮喘模型组1%卵蛋白溶液雾化吸入,共6周,对照组用生理盐水雾化吸入。观察两组大鼠哮喘发作症状、气道壁的厚度、平滑肌的厚度、胶原沉积情况、TGF-β1表达,肺泡灌洗液及血清ELISA检测血清、肺泡灌洗液中TGF-β1的水平。结果:哮喘大鼠肺组织、肺泡灌洗液及血清中TGF-β1与气道壁的厚度,平滑肌的厚度以及胶原面积呈正相关。结论:TGF-β1参与了气道重塑的过程,血清中的水平较肺泡中的水平稳定,检测其对临床诊断具有指导意义。     

两种激素干预对小鼠哮喘气道重塑模型的影响

目的 建立小鼠哮喘气道重塑模型,观察腹腔注射地塞米松和雾化吸入布地奈德对气道重塑的干预作用.方法 将32只BALB/C级小鼠随机分为4组:对照组(A组)、哮喘气道重塑模型组(B组)、地塞米松治疗组(C组)、布地奈德治疗组(D组),每组8只.B,C,D组以卵蛋白致敏,后以卵蛋白反复激发,C组在每次激发前给予腹腔注射地塞米松,D组在每次激发前给予布地奈德雾化吸入,A组以生理盐水代替致敏和激发,解剖小鼠肺组织包埋、切片,行HE染色和Masson染色.然后分析HE染色下各组支气管壁总面积(Wat)和支气管壁平滑肌面积(Wam),分析Masson染色下基底膜下胶原沉积面积(Wcol).结果 B组小鼠支气管壁总面积(Wat)/基底膜周径(Pbm)、支气管平滑肌面积(Wam)/基底膜周径(Pbm)、胶原沉积面积(Wcol)/基底膜周径(Pbm)均高于A组正常对照组的小鼠(P<0.05);C组和D组的(Wat)/(Pbm),(Wam)/(Pbm),(Wcol)/(Pbm)都低于B组(P<0.05);C组和D组比较,无明显的差异(P>0.05).结论 小鼠哮喘形成过程中,气道重塑起着重要作用;腹腔注射地塞米松及雾化吸入布地奈德均能抑制气道重塑的形成,两者比较作用无差异.     

哮喘大鼠血清、支气管肺泡灌洗液及肺组织中转化生长因子-β1与哮喘气道重塑

目的 观察哮喘大鼠模型血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量及肺组织中TGF-β1的表达,分析其相关性及与哮喘气道重塑的关系,为临床哮喘的诊断和治疗提供理论依据.方法 Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组和哮喘模型组,每组20只.用卵蛋白(OVA)致敏和激发制成哮喘大鼠模型,用Elisa法测定血清及BALF中TGF-β1的含量,免疫组化法测定肺组织中TGF-β1的表达,Masson染色观察胶原沉积的情况,计算机图像分析系统评价呼吸性细支气管平滑肌厚度及上皮损伤程度评分等气道重塑指标.结果 造模后,与对照组相比模型组血清中TGF-β1的含量明显减低(P<0.05);BALF中TGF-β1的含量增加(P<0.01);肺组织中TGF-β1的表达增多(P<0.01).哮喘大鼠气道黏膜上皮损害、气道平滑肌厚度、气道胶原蛋白的沉积较对照组明显增加.结论 BALF中TGF-β1的含量增加、肺组织中TGF-β1的表达增加,加重了哮喘气道重塑;血清中TGF-β1含量减少,提示可以通过检测血清中TGF-β1为哮喘的诊断提供依据、间接了解气道重塑.     

川芎嗪对哮喘大鼠气道壁嗜酸细胞浸润和转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察川芎嗪对哮喘大鼠模型气道壁嗜酸性粒细胞(EOS)浸润、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量的影响。方法:32只SD大鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组和大、小剂量川芎嗪干预组,以卵蛋白致敏,并长期吸入激发诱喘制备大鼠哮喘模型,干预组每次雾化吸入前腹腔注射川芎嗪(分别为80mg/kg和40mg/kg),模型组以生理盐水代替。肺组织石蜡切片行TGF-β1免疫组化染色,并经计算机图像分析测定其含量,同时HE染色计数气道壁嗜酸性粒细胞(EOS)数。结果:模型组气道壁EOS计数及TGF-β1含量均高于正常对照组(P均<0.001);两种剂量川芎嗪干预组EOS计数均低于模型组(P<0.01,P<0.05),但大小剂量组间无差别(P>0.05);干预组TGF-β1含量均显著低于模型组(P均<0.001),大、小剂量组间差异有显著性(P<0.01);TGF-β1的表达与EOS计数呈显著正相关(rs=0.7180,P<0.01)。结论:川芎嗪可以减少气道壁EOS浸润和TGF-β1的表达,其降低TGF-β1表达的作用可能部分通过抑制EOS浸润而实现。     

糖皮质激素对哮喘大鼠气道NGF和IGF-I表达影响

目的了解神经生长因子（NGF）及胰岛素样生长因子-I（IGF-I）在哮喘大鼠气道组织表达及其对气道重塑影响,以及地塞米松（激素）早期干预在哮喘防治中的作用。方法30只清洁级Wistar大鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组,每组10只。以卵蛋白致敏并长期吸入激发制备大鼠哮喘模型,激素干预组于每次吸入卵蛋白前腹腔注射地塞米松（O．5mg／kg）,对照组以生理盐水代替卵蛋白及地塞米松。免疫组化技术检测气道壁NGF、IGF-I表达并进行定量分析,测量气道平滑肌厚度和支气管平滑肌细胞核数,并分析NGF、IGF—I表达与肺泡灌洗液（BAI。F）细胞计数及分类相关性。结果哮喘模型组、激素干预组NGF、IGF-I表达水平、气道平滑肌厚度、支气管平滑肌细胞核数显著高于正常对照组（F=60．19～284．63,q=6．57～15．93,P〈0．05）,激素干预组低于哮喘模型组（q=5．23～9．15,P〈0．05）。相关性分析显示,哮喘模型组中NGF、IGF-I的表达与平滑肌厚度呈正相关（r=0．473、0．819,P〈0．05）,与BALF总数和淋巴细胞数呈正相关（r=0．603～0．783,P〈0．01）。结论早期应用糖皮质激素可以通过减少气道中NGF、IGF-I的表达,减轻哮喘时的气道重塑。     

哮喘气道重塑与氧化应激的实验研究

目的探讨大鼠支气管哮喘模型的慢性气道炎症、气道重塑特征以及与氧化应激的关系。方法以卵蛋白为过敏原致敏,反复多次激发以模拟临床反复发作过程,建立大鼠慢性哮喘模型。64只SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘组,每组再进一步划分4、8、12、16周4个时间段。观察指标:①肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞计数与分类;②肺组织病理观察:进行支气管周围炎性细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值(IOD值);③测定12周大鼠肺组织匀浆MDA含量、SOD活性及肺组织TGF-β1蛋白含量。结果①各时间段哮喘组的BALF细胞计数与正常对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。其中中性粒细胞百分比、黏液指数随时间推移呈增加趋势。②4周哮喘组即有气道管壁增厚、平滑肌增生、胶原沉积增多、管腔变小、TGF-β1的表达增多等气道重塑的特征,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01),并随时间推移呈增加趋势,以16周哮喘组最明显。③与对照组比较,哮喘组的MDA含量、TGF-β1含量均明显升高(均P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01)。结论通过延长卵蛋白激发时间可以成功制备SD大鼠慢性哮喘气道重塑模型;哮喘气道重塑在早期即出现,中性粒细胞及氧化应激可能参与哮喘的气道重塑。     

哮喘大鼠HIF-1α、转化生长因子-β的表达及调控

目的 探讨HIF-1α、TGF-β1在哮喘急性发作期中的作用及两者间的相关性.方法 选取健康清洁级雄性SD大鼠48只,随机均分为4组：正常对照组、哮喘组、地塞米松治疗组（地塞米松组）、布地奈德治疗组（布地奈德组）.制备大鼠哮喘模型,观察各组大鼠肺组织病理变化、分析支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数和分类计数,并采用免疫组织化学法和原位杂交法测定各组大鼠肺组织中HIF-1α、TGF-β1的表达情况,并作相关性分析.结果 正常对照组大鼠气道及肺实质无异常改变,细胞结构完整;哮喘组大鼠气道腔内有大量炎症细胞及分泌物充塞,形成黏液栓,气道上皮细胞损伤、脱落、基底膜增厚且形态不规则、平滑肌肥大增生;布地奈德组和地塞米松组大鼠气道腔内无明显分泌物,其它症状亦较哮喘组明显减轻.哮喘组细胞总数及EOS、PMN、Lym计数比例均显著高于正常对照组（P〈0.01）,Mφ计数比例显著低于正常对照组（P〈0.01）;布地奈德组和地塞米松组细胞总数及EOS、Lym计数比例均显著低于哮喘组（P〈0.01）,Mφ计数比例显著高于哮喘组（P〈0.01）.哮喘组大鼠肺组织HIF-1α及TGF-β1的表达均显著高于正常对照组（P〈0.01）,地塞米松组和布地奈德组HIF-1α的表达均明显高于正常对照组（P〈0.05）,布地奈德组和地塞米松组大鼠肺组织HIF-1α及TGF-β1的表达均显著低于哮喘组（P〈0.01）.哮喘大鼠肺组织中HIF-1α与TGF-β1的表达呈显著正相关（P〈0.01）.结论 哮喘急性发作期HIF-1α及TGF-β1的表达显著增加,两者间呈现显著正相关;糖皮质激素干预可以降低HIF-1α及TGF-β1的表达,减轻哮喘气道炎症.     

姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑和核因子-κB的影响

目的:探讨姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、姜黄素组,各10只;采用卵蛋白(OVA)致敏复制大鼠哮喘模型。观察3组大鼠气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积及NF-κB和转化生长因子(TGF-β1)表达情况。结果:哮喘组大鼠炎性细胞浸润、胶原沉积、气道壁厚度、NF-κB、TGF-β1表达与对照组比较有显著性差异(P<0.01),而姜黄素组较哮喘组明显减轻(P<0.01);NF-κB与TGF-β1表达、气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积变化成正相关(P<0.01)。结论:姜黄素可抑制哮喘大鼠NF-κB活性以干预其气道重塑。