蝎毒抗癌多肽对肝癌小鼠放疗后瘤重和血液系统的影响

目的：观察蝎毒抗癌多肽（APBMV）与放疗（RT）合用对H22带瘤小鼠瘤重和血液系统的影响。方法：取H22带瘤小鼠100只，检测肿瘤生长抑制率（IR），白细胞计数，脾脏指数（SI）和外周血血红蛋白含量，观察不同剂量APBMV与放疗合用后上述指标的变化。结果：放疗后第6天和第9天，RT与APBMV合用后瘤重明显降低，IR最高达78．28％和70．45％（与RT组和APBMV组比较，P＜0．05或P＜0．01）；白细胞计数和SI较RT组显著升高（P＜0．05）；血红蛋白含量测定结果各组间差异无显著性（P＞0．05）。结论：APBMV与放疗合用对H22的抑制作用比单纯放疗和单用APBMV增强，APBMV可一定程度减轻辐射所致的血液系统损伤。     

东亚钳蝎毒抗癌多肽对人肿瘤细胞系和动物移植瘤的作用

目的研究东亚钳蝎毒抗癌多肽(APBMV)对人早幼粒白血病细胞系HL-60和人肝癌细胞系SMMC-7721及对小鼠肝癌H22移植瘤的作用.方法体外应用MTT法、生长抑制实验和集落形成实验,观察APBMV对HL-60、SMMC-7721及H22瘤细胞的作用;体内实验采用小鼠H22实体瘤模型,检测肿瘤生长抑制率(IR)、白细胞计数(WBC)和脾脏指数(SI),观察APBMV对H22带瘤小鼠的影响.结果APBMV 对HL-60和SMMC-7721细胞均具较强的毒性作用,其IC50值分别为10.74 μg/ml和11.33 μg/ml; APBMV可显著抑制两种细胞的生长,剂量效应关系明显,HL-60和SMMC-7721细胞24h、48h和96h的IC50值分别为19.41 μg/ml、9.90 μg/ml、11.41 μg/ml和l5.87 μg/ml、13.05 μg/ml、8.70 μg/ml;APBMV浓度>8 μg/ml时,可明显抑制SMMC-7721细胞的集落形成(P<0.01),IC50为10.83 μg/ml.H22细胞经APBMV处理后,代谢MTT的能力明显低于对照组,但剂量效应关系不明显(P>0.05).APBMV能显著抑制H22带瘤小鼠的肿瘤生长,IR最高达40.30%( P<0.01), 小鼠WBC和SI无明显变化或略高于对照组,而5-Fu组小鼠WBC和SI均明显下降(P<0.01).结论APBMV是东亚钳蝎蝎毒中有效低毒的抗肿瘤成分,对HL-60、SMMC-7721细胞和小鼠H22肿瘤有显著抑制作用.     

蝎毒抗癌多肽对肝癌小鼠放疗后瘤重和血液系统的影响

目的 :观察蝎毒抗癌多肽 (APBMV)与放疗 (RT)合用对H2 2 带瘤小鼠瘤重和血液系统的影响。方法 :取H2 2 带瘤小鼠 10 0只 ,检测肿瘤生长抑制率 (IR)、白细胞计数、脾脏指数 (SI)和外周血血红蛋白含量 ,观察不同剂量APBMV与放疗合用后上述指标的变化。结果 :放疗后第 6天和第 9天 ,RT与APBMV合用后瘤重明显降低 ,IR最高达 78 2 8%和 70 4 5 % (与RT组和APBMV组比较 ,P <0 0 5或P <0 0 1) ;白细胞计数和SI较RT组显著升高 (P <0 0 5 ) ;血红蛋白含量测定结果各组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :APBMV与放疗合用对H2 2 的抑制作用比单纯放疗和单用APBMV增强 ,APBMV可一定程度减轻辐射所致的血液系统损伤     

岩消胶囊对小鼠肝癌抑制作用的实验研究

目的研究岩消胶囊对小鼠肝癌的抑制作用。方法选取40只小鼠，随机分为空白对照组、阳性对照组、实验组，分别观察实体瘤重量、小鼠存活时间、实体瘤的形态学和对腹水癌细胞的直接杀伤死亡率。结果实验组的实体瘤重量显著降低（P〈0．01），抑瘤率达52．0％；小鼠存活时间明显延长，生命延长率81．6％（P〈0．01）；对腹水癌细胞有显著的杀伤作用（P〈0．05）。结论岩消胶囊能显著抑制小鼠肝癌细胞移植性肿瘤的生长，减轻瘤体重量；能显著延长荷瘤小鼠生存期；同时对肿瘤细胞有直接杀伤作用。     

DC 荷载α－GalCer 联合肿瘤特异性 CTL 对小鼠 Heps 肝癌移植瘤生长的影响

目的：探讨树突状细胞（DC）荷载α－半乳糖神经酰胺（α－GalCer）联合肿瘤特异性细胞毒 T 淋巴细胞（CTL）对小鼠 Heps 肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法：诱导扩增小鼠骨髓来源的 DC 细胞和 T 淋巴细胞,培养成为具有肿瘤特异性的 CTL,DC 细胞体外荷载α－GalCer。建立 Heps 肝癌移植瘤模型,将36只模型鼠随机分为4组（n ＝9）,分别尾静脉给予生理盐水（对照组）、CTL（CTL 组）、DC 荷载α－GalCer（DC 荷载α－GalCer 组）、DC 细胞荷载α－GalCer ＋CTL（联合治疗组）输注。每隔两天测量移植瘤体积,观察体积变化。于治疗后第14d,处死小鼠,取眼球血及瘤体组织。流式细胞术（FCM）检测外周血 CD4＋、CD8＋ T 细胞比例。免疫组织化学染色观察肿瘤组织中 Bcl －2／Bax 凋亡蛋白的表达。结果：与对照组相比,各治疗组均可抑制肿瘤的生长,差异具有统计学意义（P ＜0．01）;联合治疗组较 DC 荷载α－GalCer 组及 CTL 组肿瘤体积明显减小（P ＜0．05）。联合治疗组小鼠外周血 CD4＋、CD8＋ T 细胞数量较另外三组显著升高（P ＜0．05）;对照组、CTL组、DC 荷载α－GalCer 组小鼠外周血中 CD4＋、CD8＋ T 细胞含量无明显差异（P ＞0．05）。与对照组相比,各治疗组移植瘤内 Bax 阳性细胞数量明显增加（P ＜0．05）,Bcl －2阳性细胞数量明显减少（P ＜0．05）;与 CTL组和α－GalCer 组相比,联合治疗组移植瘤内 Bax 阳性细胞明显增加（P ＜0．05）,Bcl －2阳性细胞明显下降（P ＜0．05）。结论：DC 荷载α－GalCer 与肿瘤特异性 CTL 联合应用能够对小鼠 Heps 肝癌移植瘤具有协同杀伤作用。     

CD80 CD86和CD137L基因联合表达对小鼠肝癌种植模型肿瘤免疫原性的影响

目的探讨CD80、CD86和CD137L基因联合表达对肿瘤免疫原性的影响。方法按接种变异瘤株不同,将BALB／C小鼠随机分成A组（H22．Wt细胞）、B组（H22-neo细胞）、C组（H22-CD80／CD86^＋细胞）、D组（H22．CD137L^＋细胞）、E组（H22-CD80／CD86／CD137L^＋细胞）5组,建立H22．BALB／C小鼠荷肝癌模型,A、B组为对照组。观察小鼠成瘤率、成瘤潜伏期、荷瘤鼠存活率及肿瘤增殖情况。通过复种试验观察转基因对H22变异株免疫原性和机体免疫保护作用的影响。结果E组首次接种成瘤率仅有50．0％,显著低于其余4组（P〈0．01）。首次接种后,C组荷瘤鼠肿瘤生长受到明显抑制,有2只荷瘤鼠肿瘤完全消退。E组肿瘤生长所受抑制较C组更为明显,肿瘤峰值体积显著小于C组,且有3只荷瘤鼠肿瘤完全消退。其余3组荷瘤鼠未见肿瘤完全消退。与A、B、D组相比,C、E组荷瘤鼠生存率显著改善（P〈0．01）,而C、E两组荷瘤鼠生存率差异无统计学意义（P〉0．05）。复种试验表明,C、E组荷瘤鼠再次成瘤率低于对照组,E组与C组差异也有统计学意义（P〈0．01）;第3次接种后,E组成瘤率显著低于C组（P〈0．01）。E组中5只首次接种未成瘤的小鼠,于第21天重复接种H22-Wt细胞,小鼠100％排斥肿瘤,于第56天第3次接种H22／Wt细胞,小鼠仍然100％排斥肿瘤。结论CD80＋CD86和CD137L单独或者联合表达均可显著降低野生型H22细胞株致瘤性,CD80、CD86和CD137L基因联合表达显著改善了野生型H22细胞的免疫原性。     

三氧化二砷抑制小鼠H22肝癌移植瘤血管生长的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对小鼠H22肝癌移植瘤组织血管生成的抑制作用。方法：建立小鼠H22肝癌移植瘤模型，腹腔应用As2O3治疗后，通过瘤体体积及瘤重的比较，病理观察血管分布，VEGF及bFGF免疫组化检测，反映As2O3对小鼠H22肝癌组织血管生成的抑制作用。结果：As2O3高剂量及低剂量组均有效地抑制荷瘤鼠皮下肿瘤的体积及瘤重，瘤重抑瘤率分别为39．32％、44．89％，病理观察发现As2O3治疗组的肿瘤血供较对照组明显减少，免疫组化检测结果为As2O3治疗组肿瘤细胞的VEGF阳性细胞数低于对照组VEGF阳性细胞数，As2O3治疗组bFGF阳性表达率明显低于对照组（P〈0．01），有显著差异。结论：As2O3对小鼠肝癌移植瘤血管生成具有明显的抑制作用，具有治疗肝癌的潜在价值。     

受体介导的C-myc反义核酸抑制肝癌移植瘤生长

目的：探讨半乳糖（galactose，Gal）受体介导的C—myc反义核酸对肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法：将C-myc反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide，ASODN）与半乳糖-聚乙烯亚胺（polyethyleneimine，PEI）转染载体作用形成Gal-PEI-ASODN复合物，采用荧光显微镜检测荧光标记反义桔酸进入人肝癌Bel-7402细胞的形态。克隆形成实验观察反义核照对细胞克隆形成的影响．用肝癌移植瘤小鼠模型观察反义核酸对肝癌移植瘤的生长抑制作用．免疫组化技术检测肝癌组织C—myc蛋白的表达。结果：Gal—PEI—ASODN复合物能被肝癌Bel-7402细胞有效摄取，荧光标记的反义核酸分布在细胞的表面、胞浆、胞核部位；Gal—PEI—ASODN复舍物对肝癌细胞克隆形成有明显抑制作用。与细胞对照组相比，差异显著（P〈0．01）。Gal—PEI—ASODN复合物能显著抑制小鼠肝癌移植瘤的生长，肿瘤抑制率为40，25％。与细胞对照组相比，差异显著（P〈0．01）；有可能抑制瘤细胞内C—myc蛋白的表达。结论：半乳糖受体介导的C—myc ASODN能有效抑制Bel-7402细胞的增殖。抑制小鼠肝癌移植瘤的生长，阻断C—myc蛋白的表达。     

去氢骆驼蓬硷抗癌作用的研究

目的研究去氢骆驼蓬硷对小鼠移植性肿瘤及肿瘤细胞株的抑制作用.方法体内抑瘤试验选用肉瘤S-180、肝癌H22、艾氏腹水癌等瘤株腹腔注射给药,观察对实体瘤的抑制作用及对腹水癌的生命延长作用.体外细胞毒试验选用K562、Hela细胞株,采用MTT法,计算对肿瘤细胞株平均细胞生长抑制率.结果去氢骆驼蓬硷对肉瘤S-180及肝癌H22的抑制率具有非常显著性差异(P＜0.01)对艾氏腹水癌作用不明显.对K 562细胞生长半数抑制浓度IC50为3.8μg/ml,对Hela细胞生长半数抑制浓度IC50为13.1μg/ml.结论去氢骆驼蓬硷对肿瘤细胞体内抑瘤试验、体外细胞毒试验均有明显的抑制作用.     

褪黑素对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响

目的：观察褪黑素（melatonin,MLT)对小鼠移植性肝癌生长的抑制作用及对小鼠腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响。方法：建立肝癌小鼠模型，连续2周每日皮下注射MLT，绘制肿瘤生长曲线并采用放射免疫法测定小鼠腹腔巨噬细胞分泌的IL－1β和TNF－α的水平。结果：注射MLT的小鼠肿瘤生长速度明显＜阴性对照组（P＜0．05），腹腔巨噬细胞IL－1β的诱生水平明显提高（P＜0．05），但TNF－α的水平却明显下降。结论：MLT能显著凶制小鼠移植性肝癌的生长，它对荷瘤小鼠的巨噬锚能具有选择性调节作用。     

蝎毒抗癌多肽对人肝癌细胞株的作用

 目的 观察蝎毒抗癌多肽（ＡＰＢＭＶ）对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的作用。方法ＭＴＴ法、生长抑制实验和集落形成实验。结果 ＡＰＢＭＶ对 ＳＭＭＣ－７７２１细胞具较强毒性作用，ＩＣ５０为１１．３３μｇ／ｍｌ；ＡＰＢＭＶ可显著抑制细胞生长，剂量与时间效应关系明显。结论ＡＰＢＭＶ是东亚钳蝎蝎毒中有效低毒的抗肿瘤成分，对肝癌细胞有一定的毒性作用。     

重楼复方对荷H_（22）小鼠抑瘤及免疫功能的影响

目的：观察重楼复方（Chonglou Fufang,CLFF）对小鼠H22肝癌的抑制作用及其免疫调节作用。方法：建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,将小鼠随机分为6组：空白对照组、CLFF高、中、低剂量组、环磷酰胺（Cyclo-phosphamide,CTX）组、复方斑蝥（Fufang Banmao,FFBM）组。各组连续灌胃给药10d。于末次给药后24h,断颈处死小鼠,剥离瘤体,无菌条件下取脾脏,分别计算抑瘤率、脾指数,并采用MTT显色法检测药物对细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocyte,CTL）的细胞不良反应。结果：CLFF显著抑制肿瘤生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别为54.84%、54.38%、37.27%,与空白对照组比较具有显著性差异（P〈0.01）;CLFF高、中、低剂量组脾指数分别为（7.20±3.07）mg/g、（7.23±2.34）mg/g、（10.89±3.91）mg/g,各剂量组与环磷酰胺组比较具有显著性差异（P〈0.01）,中低剂量组与空白对照组比较具有统计学意义（P〈0.05）;CLFF高中低剂量组对小鼠的CTL细胞的杀伤率分别为51.76%、44.18%、22.74%,高剂量组与空白对照组及CTX组比较,P〈0.05,具有统计学意义。结论：CLFF具有显著抑制肿瘤作用,其抑瘤机制可能与其调节机体的免疫功能有关。     

重楼复方对荷H22小鼠抑瘤及免疫功能的影响

目的:观察重楼复方(Chonglou Fufang,CLFF)对小鼠H22肝癌的抑制作用及其免疫调节作用。方法:建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,将小鼠随机分为6组:空白对照组、CLFF高、中、低剂量组、环磷酰胺(Cyclo-phosphamide,CTX)组、复方斑蝥(Fufang Banmao,FFBM)组。各组连续灌胃给药10d。于末次给药后24h,断颈处死小鼠,剥离瘤体,无菌条件下取脾脏,分别计算抑瘤率、脾指数,并采用MTT显色法检测药物对细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)的细胞不良反应。结果:CLFF显著抑制肿瘤生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别为54.84%、54.38%、37.27%,与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.01);CLFF高、中、低剂量组脾指数分别为(7.20±3.07)mg/g、(7.23±2.34)mg/g、(10.89±3.91)mg/g,各剂量组与环磷酰胺组比较具有显著性差异(P<0.01),中低剂量组与空白对照组比较具有统计学意义(P<0.05);CLFF高中低剂量组对小鼠的CTL细胞的杀伤率分别为51.76%、44.18%、22.74%,高剂量组与空白对照组及CTX组比较,P<0.05,具有统计学意义。结论:CLFF具有显著抑制肿瘤作用,其抑瘤机制可能与其调节机体的免疫功能有关。     

苦参碱对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的观察苦参碱的体内抗肿瘤活性,初步探讨其体内抑瘤作用机制。方法采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,观察荷瘤动物的生长情况和肿瘤生长曲线,测定肿瘤生长抑制率;肿瘤组织病理学切片进行HE染色形态学观察,其超微结构行透射电镜观察。结果苦参碱对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,抑瘤率达60％以上。苦参碱处理组小鼠的成瘤时间明显晚于生理盐水对照组,肿瘤生长也较对照组慢。组织学观察显示,肿瘤细胞大量变性坏死,电镜下可见凋亡细胞和凋亡小体。结论苦参碱具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞的分裂和增殖、直接杀伤肿瘤细胞和(或)诱导肿瘤细胞凋亡、调节机体的抗肿瘤免疫应答效应有关。     

碳酸锂对环磷酰胺的抑瘤及毒副作用的影响

观察碳酸锂（Ｌｉ２ＣＯ３）对环磷酰胺（ＣＰ）的抑瘤作用和毒副作用的影响。按标准方法对每只小鼠进行肿瘤（肝癌Ｈ２２、肉瘤Ｓ１８０）接种。Ｌｉ２ＣＯ３［２０、４０ｍｇ／ｋｇ．ｄｉｇ，连续１０天。ＣＰ（９０、１８０ｍｇ／ｋｇ）一次ｉＰ。结果显示：Ｌｉ２ＣＯ３与ＣＰ联合应用可显著提高抑瘤率，增加荷瘤鼠的外周血白细胞（ＷＢＣ）数和降低骨磷嗜多染红细胞（ＰＣＥ）的微核率（ＭＮＦ）。提示Ｌｉ２ＣＯ３能明显增强Ｃ     

VI-28胶囊辅助环磷酰胺治疗荷载LLC肿瘤小鼠的实验研究

目的:探讨经化疗药物作用后的H22细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性,观察TRAIL、纤黏连蛋白及内皮抑素的真核表达质粒pTRAIL,pCH510,pES联合化疗抑制小鼠肿瘤生长的作用。方法:pTRAIL转染BHK细胞后,加入分别经MMC,ADM,5-FU处理的H22细胞,MTT法检测pTRAIL对H22细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析H22细胞凋亡。在小鼠种植瘤体内注射MMC与pTRAIL,pCH510,pES,观察其对肿瘤生长的抑制作用。结果:pTRAIL能抑制H22生长并诱导细胞凋亡,与MMC,ADM及5-FU联合,H22的凋亡百分数分别为28.1%(P<0.01),22.5%(P<0.01)及47%(P>0.05)。体内,MMC+pTRAIL+pES+pCH510联合能有效抑制肝细胞肿瘤生长,肿瘤生成率为37.5%。结论:MMC或ADM作用后的残存H22肿瘤细胞对pTRAIL敏感,MMC+pTRAIL+pES+pCH510具有协同抑瘤效应,能将小鼠肝细胞肿瘤抑制在组织学水平。     

壳寡糖对体内外肝癌细胞生长的抑制作用及其机制探讨

目的　探讨壳寡糖对体内外肝癌细胞生长的抑制作用及其相关机制。方法　体外实验采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法检测壳寡糖对肝癌ＳＭＭＣ-７７２１细胞生长的影响,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡率,ＲＴ-ＰＣＲ方法检测Ｂｃｌ-２ｍＲＮＡ的表达。体内实验观察壳寡糖对肝癌Ｈ２２移植瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤组织Ｂｃｌ-２蛋白的表达。结果　体外实验表明,壳寡糖能抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡,其作用随剂量增加而增强;壳寡糖４ｍｇ／ｍｌ的细胞增殖抑制率为２３.８２％,壳寡糖２ｍｇ／ｍｌ的凋亡率为１５.２８％,与对照组比较,差异均有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;壳寡糖能下调肝癌细胞中Ｂｃｌ-２ｍＲＮＡ的表达。体内实验显示,壳寡糖能抑制小鼠肝癌Ｈ２２移植瘤的生长,高剂量组３００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）的抑瘤率为３３.１３％,并可明显下调肿瘤组织中Ｂｃｌ-２蛋白的表达。结论　壳寡糖在体内外均具有抑制肝癌细胞增殖及诱导肝癌细胞凋亡的作用,其促凋亡的机制可能与下调Ｂｃｌ-２的表达有关。     

Polyporus sp.MO5多糖的抗肿瘤作用

目的研究真菌Polyporus sp.M05多糖PSM-a体内对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及其机制.方法 MTT法检测PSM-a体外对S180细胞株的增殖抑制作用.建立S180小鼠模型,灌胃治疗,每日检测肿瘤体积并计算瘤体比和抑瘤率.实验结束后处死小鼠,MTT比色法测定小鼠自然杀伤(NK)细胞及淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)的杀伤活性.HE染色检测肿瘤组织细胞坏死情况.结果 PSM-a在体外能抑制S180细胞生长;在体内能显著降低荷瘤小鼠的瘤重和瘤体比,250μg/ml的PSM-a对肿瘤抑制率高达80%以上;PSM-a能促进NK细胞及LAK细胞的杀伤活性;病理切片显示PSM-a作用后引起肿瘤组织坏死.结论 PSM-a对S180荷瘤小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,其机制可能与提高机体免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性有关.     

5-FU联合胸腺肽对H_（22）细胞皮下移植瘤小鼠免疫功能的影响

目的：探讨5-FU联合胸腺肽的抗肿瘤及免疫调节功效。方法：32只ICR小鼠建立H22小鼠肝癌细胞的皮下移植瘤模型,分为对照组（生理盐水）,5-FU组（10mg/kg）,5-FU＋胸腺肽组（10mg/kg＋0.2mg/kg）,胸腺肽组（0.2mg/kg）,连续给药5天后测量肿瘤重量和体积,检测外周血WBC及淋巴细胞（LY）数量及外周血中CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK细胞的百分含量、血清中白介素2（IL-2）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的浓度。结果：5-FU联合胸腺肽显著抑制了小鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.01）,胸腺肽上调了5-FU降低的WBC及LY细胞数量（P〈0.05）,增加外周血中CD3＋、CD4＋及NK细胞的水平（P〈0.05）;与对照组比,显著升高了血清中IL-2和TNF-α的浓度（P〈0.01）。结论：5-FU联合胸腺肽可增强机体的细胞免疫功能,上调血清中细胞因子的表达水平,具有显著的抗肿瘤功效。而不良反应较小。