Expression and effects of human telomerase RNA in testicular tumor

Human telomerase RNA (hTR) plays an important role in determining repeated telomere sequence and the expression of an antisense telomerase RNA that leads to telomere shortening and cell death. Using highly sensitive in situ nucleic acid hybridisation, we investigated the expression of hTR in human testicular     

人端粒酶RNA在成釉细胞瘤中的表达

目的:研究人端粒酶RNA(hTR)在成釉细胞瘤(AB)中的表达和分布.方法:采用原位杂交方法对AB、牙源性角化囊肿(OKC)和口腔正常黏膜进行hTRmRNA检测.并分析hTR与AB临床病理特征关系.结果:AB、OKC、口腔正常黏膜hTR阳性率分别为94.4%、81.2%、28.6%,有显著性差异(P＜0.01).AB中原发、复发、恶变3组比较hTR mRNA表达也有统计学意义(P＜0.05).hTR mRNA表达与AB临床病理特征无关(P＞0.05).结论:AB的发生、发展可能与hTR的过量表达有关,hTR可能成为判断AB预后的可靠指标.     

Gain of human telomerase RNA gene is associated with progression of cervical intraepithelial neoplasia grade I or II

Background  The 3q26 chromosome region, where the human telomerase RNA gene (hTERC) is located, is a biomarker for cervical cancer and precancerous lesions. The aim of this study was to confirm the value of measuring hTERC gene gain in predicting the progression of cervical intraepithelial neoplasia grade I or II (CIN-I and -II, respectively) to CIN-III and cervical cancer.

Methods  Liquid-based cytological samples from 54 patients with CIN-I or CIN-II lesions were enrolled in this study. Follow-up was performed with colposcopy and biopsy within 24 months after the diagnosis of CIN-I or CIN-II. Copy numbers of the hTERC gene were measured by fluorescence in situ hybridization with a dual-color probe mix containing the hTERC gene probe (labeled red) and the control, the chromosome 3 centromere-specific probe (labeled green).

Results  All patients whose lesions progressed from CIN-I or CIN-II to CIN-III displayed a gain of the hTERC gene, whereas patients where the hTERC gene was not amplified did not subsequently progress to CIN-III or cervical cancer. The signal ratio pattern per cell was recorded as N:N (green: red). The numbers of cells with the signal ratio pattern of 4:4 or N:≥5 in patients whose lesions progressed to CIN-III were significantly higher than those whose lesions did not progress. Significantly, none of the patients with a 4:4 signal ratio pattern regressed spontaneously.

Conclusions  In conclusion, measurement of hTERC gene gain in CIN-I or CIN-II patients using liquid-based cytological samples could be a useful biomarker to predict the progression of such cervical lesions. In addition, a 4:4 or N:≥5 signal ratio pattern may indicate the unlikeness of spontaneous regression of CIN-I or CIN-II lesions.

     

端粒酶基因在宫颈脱落细胞中的表达及其临床意义

[目的]探讨人类染色体端粒酶(hTERC)基因在宫颈脱落细胞中的表达及其临床意义。[方法]收集2008年3月~2009年3月就诊于大连医科大学附属第一医院妇产科患者的宫颈脱落细胞标本,选取细胞学及组织学均正常的20例标本建立阈值,并选取100例细胞学异常或组织学异常标本,共120例宫颈脱落细胞标本参与实验,荧光原位杂交(FISH)方法检测脱落细胞hTERC基因。[结果]CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌组与正常组及CINⅠ组比较,hTERC基因阳性表达率均明显增高(P<0.05),且宫颈癌组表达率高于CINⅡ/Ⅲ组(P<0.05)。细胞学分级AS-CUS及以上各组与正常组比较,hTERC基因阳性表达率均增高(P<0.05),且HSIL组及宫颈癌组表达率均较AS-CUS组及LSIL组增高(P<0.05)。组织学分级中,CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌的基因扩增异常细胞数目均高于正常组(P<0.05)。CINⅡ及以上级别病变基因扩增异常细胞数目约为(27±17)%,其单侧95%可信区间为μ>23.6%。hTERC基因对ASCUS样本的高级别病变阳性预测值为91%,阴性预测值为94%。[结论]hTERC基因在CINⅡ/Ⅲ和宫颈癌中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加。hTERC基因扩增异常细胞数≥24%可能成为检测CINⅡ及以上高级别病变的独立生物学指标并对ASCUS分流有一定的指导意义。     

端粒酶hTERT在骨肉瘤组织中表达的意义

目的 探讨骨肉瘤组织中端粒酶hTERT基因的表达及意义.方法 应用原位分子杂交技术,对52例骨肉瘤组织、17例骨质增生骨组织、11例异位骨化组织和10例正常骨组织中端粒酶hTERT基因进行检测和定位,并运用图像分析系统对hTERT基因表达水平进行研究.结果 端粒酶hTERT基因在骨肉瘤组织中表达阳性率为82.7%(43/52),表达强度与肿瘤细胞的分化程度无明显相关(P>0.05).端粒酶hTERT基因细胞表达水平与肿瘤细胞的分布定位一致.在骨质增生骨组织、异位骨化组织和正常骨组织中端粒酶hTERT基因的表达均为阴性.结论 原位分子杂交是检测端粒酶亚单位hTERT的有效方法,在骨肉瘤细胞水平检测端粒酶hTERT基因的定位诊断具有重要意义.在骨肉瘤发展和维持中端粒酶可能起到重要的作用,同时还可能存在端粒酶以外的机制导致肿瘤细胞永生化.     

宫颈病变与端粒酶及端粒酶基因

宫颈癌是妇产科常见的恶性肿瘤之一,在宫颈癌的发生过程中,人乳头瘤病毒（HPV）感染是重要的环境致瘤因素,但由于HPV并不能单独致瘤,细胞内遗传性因素的改变可能具有更重要的意义。端粒酶基因是近年提出的遗传易感因素之一,本文就端粒酶基因相关研究进展进行综述。     

端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱移行细胞癌组织中的表达意义

目的 研究端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达,探讨其在TCC发生、发展及预后复发中的意义。方法 采用兔抗人hTERT多克隆抗体及S－P免疫组化法检测在56例TCC及10例正常膀胱组织中的表达。结果 hTERT在TCC中阳性表达率为64.3%,与在正常膀胱组织表达率0％相比,有显性差异（P＜0.05）。hTERT在Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ级TCC中的表达率分别为43.8%（7／16）,57.7%（15／26）,100％（14／14）,Ⅰ与Ⅲ级、Ⅱ与Ⅲ级、Ⅰ＋Ⅱ与Ⅲ级比较差异显（P＜0.05）,hTERT在浅表性及浸润性TCC中的表达率为53.1%（17／32）,79.2%（19／24）,两差异显（P＜0.05）。hTERT阳性表达率与患复发有显相关性（P＜0.05）。结论 hTERT表达异常可能与膀胱肿瘤的发生、发展有关。检测hTERT表达可作为预测膀胱肿瘤预后复发的潜在指标。     

男性不育症患者睾丸组织中端粒酶RNA表达状况的研究

目的 为探讨人端粒酶RNA（hTR)基因在男性不育症患者睾丸组织中的表达及其意义。方法 应用核酸原位杂交技术对47例男性不育症患者睾丸组织和10例正常睾丸组织中端粒酶hTR基因的表达进行检测和定位，并应用HPIAS-1000高清晰度图像处理系统对hTR阳性信号进行图像分析，结果 端粒酶hTR基因阳性表达与生殖细胞（精原细胞、精母细胞、精子细胞）的分布定位一致，在精细胞不发育（唯Sertoli细胞综合征）患者睾丸组织中无端粒酶hTR基因的表达。结论 提示端粒酶活性的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因，但不是唯一的原因。可能还有端粒酶以外的因素起作用，对端粒酶研究有助于了解它在男性生殖中的作用，并为男性不育症在端粒酶途径的基因治疗提供理论和实验依据。     

端粒酶蛋白催化亚单位基因及其蛋白在胃癌中的表达

目的　探讨端粒酶蛋白催化亚单位 (hTERT)基因mRNA及其蛋白在胃癌发生、发展中的重要作用以及在胃癌诊断中的意义。方法　应用原位杂交方法检测 5 3例胃癌标本中hTERTmRNA的表达 ,应用免疫组化S P法检测相同标本中hTERT蛋白的表达。结果　 5 3例胃癌标本中 ,hTERTmRNA阳性 41例 (77% ) ,其中低分化腺癌阳性 18例 (82 % ) ,高分化腺癌阳性 2 1例 (81% ) ,黏液腺癌及黏液细胞癌阳性 2例 (2 / 5 ) ;hTERT蛋白阳性共 46例 (87% ) ,其中低分化腺癌阳性 2 0例 (91% ) ,高分化腺癌阳性 2 5例(96 % ) ,黏液腺癌及黏液细胞癌阳性 1例 (1/ 5 ) ;hTERTmR NA及hTERT蛋白的表达在低分化腺癌组与高分化腺癌组之间差异未见显著性 (P >0 0 5 ) ,但hTERTmRNA与hTERT蛋白之间呈正相关 (rS=0 6 2 3,P <0 0 1)。结论　hTERTmRNA及蛋白表达的检测有可能为胃癌的诊断及鉴别诊断提供一种新的形态学的指标     

Expression of telomerase activity， telomerase RNA component and telomerase catalytic subunit gene in lung cancer

目的：探讨hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关,深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法：采用TRAP-PCR和RT-PCR方法分别检测68例肺癌组织、68例癌旁组织端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERT的表达。结果：68例肺癌组织中端粒酶阳性率79%,HTR阳性率为98.5％,HTERT阳性率为91.2%。68例癌旁组织中,无一例表达端粒酶阳性,且大多数癌旁组织均表达HTR(91.2%),而HTERT在68例癌旁组织中仅7例为阳性。结论：肺癌组织中表达高频率的端粒酶活性而癌旁组织无一例表达端粒酶阳性说明了端粒酶的活性是肺癌发生发展所必须的。与HTR相比,HTERT同端粒酶具有更市制一致性,其一致率为88.9％。HTR与HTERT可能是在转录后或翻译水平对端粒酶进行调控的。     

反义hTR对人胃癌细胞株SGC-7901恶性表型的逆转作用

目的 探讨反义ｈＴＲ基因转染对胃癌细胞系ＳＧＣ－７００１恶性有型的逆转作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法 构建包含端粒重复序列模板区的反义ｈＴＲ基因真核表达载体用脂质体法将其转染率胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１,比较观察反义ｈＴＲ基因转染后７９０１细胞的ｈＴＲＲＮＡ表达、端粒酶活性、体外生长增殖降低,体外生长增殖能力降低,接触抑制恢复、细胞凋亡率增加、软琼脂集落形成能力和裸鼠体内致瘤能力完全消失。结     

Expression of telomerase and its RNA in nasopharyngeal carcinoma

Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ,ａｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎｔｈａｔｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎｔｈｅｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｔｅｌｏｍｅｒｅｌｅｎｇｔｈ ,ｈａｓｂｅｅｎｆｏｕｎｄｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｃｅｌｌｉｍｍｏｒｔａｌｉｔｙａｎｄｍａｌｉｇｎａｎｃｙ Ｒｅｃｅｎｔｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｉｓａｈｉｇｈａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｎｍｏｓｔｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｓａｓｗｅｌｌａｓｉｎｉｍｍｏｒｔａｌａｎｄｔｕｍｏｒｃｅｌｌｌｉ…     

Expression of Telomerase Gene mTR in the Testis of SD Rats and Its Significance

Summary:To study the expression of mTR gene in the testis of SD rats with varied ages and its sig-nificance,in situ hybridization(ISH)techniques were applied to detect the expression of telomerasegene mTR mRNA in the testis of SD rats.The expression of mTR was found in testes of different-age male SD rats.There was a positive correlation between the expression of mTR and the location ofgerm cells(spermatogonia,spermatocyte,spermatid).In Setoli cells,leydig cell and spermatozoa,no telomerase mTR was detectable.Type A spermatogonia expressed the highest level of telomerasemTR mRNA.It was suggested that the expression of mTR gene in the testis of SD rats is of lifetimeand coincides with the telomerase activity.     

恶性黑色素瘤人端粒酶RNA原位杂交研究及意义

应用原位杂交法检测恶性黑色素瘤,黑色素细胞痣和正常皮肤中的ｈＴＲ表达。结果显示：①恶性黑色素瘤,黑色素细胞痣和正常皮肤的ｈＴＲ阳性表达率分别为８６３％,６２５％和１６７％;恶性黑色素瘤的ｈＴＲ阳性表达率显著高于黑色素细胞痣和正常皮肤的阳性表达率（Ｐ＜０．０１）。②转移性恶性黑色素瘤的ｈＴＲ阳性表达强度显著强于原发性恶性黑色素瘤者（Ｐ＜０．０５）。提示ｈＴＲ能间接地反映端粒酶的活性。ｈＴＲ可作为恶性黑色素瘤的诊断和转移预测的新标志物。     

膀胱移行细胞癌中端粒酶逆转录酶的表达及意义

目的　研究端粒酶逆转录酶 (hTRT)在膀胱移行细胞癌BTCC中的表达及其与肿瘤分级、分期、复发之间的关系。方法　采用原位核酸分子杂交法 ,对 5 2例BTCC和 10例正常膀胱中hTRT的表达情况进行检测 ,分析其在膀胱癌和非癌膀胱组织中的表达以及与肿瘤病理学分级、分期和患者复发情况的关系。结果　 5 2例BTCC中hTRT表达均较正常膀胱黏膜增高 ,阳性率为 90 4 % (P <0 0 0 1) ;hTRT的表达随BTCC的病理分级、分期的增高而相应增高 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中表达率分别为 80 0 %、95 8%、10 0 % ,浅表性 (Tis T1 )、浸润性 (T2 T4 )中表达率分别为 87 0 %、93 1% ,初发BTCC、复发BTCC表达率为 87 5 %、95 0 % (P<0 0 5 ) ;结论　人端粒酶逆转录酶 (hTRT)在BTCC中表达上调 ,提示hTRT可能通过激活端粒酶 ,使细胞无限增殖 ,对BTCC的发生发展起重要作用 ;hTRT随BTCC病理分级、分期增高而表达增高 ,并与肿瘤复发有关 ,hTRT有可能作为判断分级、分期 ,监测复发的指标 ;hTRT可能为膀胱癌基因治疗提供新的合理靶点。     

老年肺癌患者外周血单个核细胞hTERT基因表达

目的探讨外周血单个核细胞(PBMCs)的人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达水平对于老年肺癌的诊断意义.方法采用RT-PCR定量检测20例老年肺癌患者及10例正常老年人外周血单个核细胞的hTERT的基因表达水平.结果老年肺癌患者hTERTmRNA的水平明显高于正常对照组(0.927±0.115vs0.408±0.124,P<0.001).与病理类型与临床分期无相关性.结论定量测定PBMCs的hTERTmR-NA的表达水平是诊断不适合其他检查的老年肺癌患者的有效方法.     

宫颈脱落细胞中人端粒酶RNA组分基因表达在宫颈病变中的临床价值

目的：研究宫颈脱落细胞中人端粒酶RNA组分（hTERC）基因的表达,探讨其在宫颈上皮内瘤变（CIN）及鳞状上皮细胞癌（SCC）筛查与诊断中的价值。方法：采用宫颈液基细胞学（LCT）、高危型人乳头瘤病毒DNA（HC-Ⅱ）检测及组织病理学的检测,并以组织病理学为金标准,分级盲法使用荧光原位杂交（FISH）方法检测人端粒酶RNA（hTERC）基因的表达。结果：hTERC基因扩增在细胞病理学HSIL及以上病变组扩增率显著升高（P〈0.05）。hTERC基因的扩增率与组织病理学级别、HC-Ⅱ阳性率均显著正相关（均P〈0.01）。HC-Ⅱ阳性率与细胞学、组织病理学级别均显著正相关（均P〈0.01）。结论：在宫颈病变组织中可见hTERC基因的表达、扩增与宫颈细胞学和组织学异常以及HPV病毒感染正相关,hTERC基因的扩增与否可能作为判断有无宫颈高度病变及估计预后的指标之一。     

非小细胞肺癌端粒酶活性的相对定量检测

应用端粒酶聚合酶链反应 (PCR) -酶联免疫吸附测定 (ELISA)法 ,检测手术切除标本中肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织端粒酶活性。结果显示 :1 5例肺癌组织端粒酶活性为 0 84± 0 3 8;其中 8例鳞癌为 0 82± 0 3 9,7例腺癌为 0 86± 0 3 9,明显高于 1 5例癌旁组织 0 1 6± 0 0 3和 3例正常肺组织 0 1 4± 0 0 2 (均P <0 .0 0 1 )。以吸光度A450>0 .2 0为阳性 ,1 5例肺癌组织端粒酶活性阳性率为 86 7% (1 3 /1 5 ) ;其中腺癌阳性率为 85 7% (6 /7) ,鳞癌阳性率为87 5 % (7/8) ;而 1 5例癌旁组织和 3例正常肺组织端粒酶活性表达均为阴性。提示端粒酶活性可作为非小细胞肺癌诊断的特异性较强的分子标记物 ;TRAP PCR ELISA法检测端粒酶活性具有方法简便 ,结果可靠。     

Inhibiting effect of antisense hTRT on telomerase activity of human liver cancer cell line SMMC-7721

Objective: To induce changes in biological character of human liver cancer cell line SMMC-7721 by blocking the expression of telomerase genes hTRT and to explore its value in cancer gene therapy. Methods: The vehicle for eukaryotic expression of antisense hTRT was constructed and then transfected into SMMC-7721 cells. The effects of antisense hTRT gene on telomerase activity, cancer cell growth and malignant phenotypes were analyzed. Results: The obtained transfectants that could express antisense hTRT gene stably showed marked decrease in telomerase activity;the shortening of telomere was obvious; cells presented contact growth inhibition; in nude mice transplantation, the rate of tumor induction dramatically decreased. Conclusion : Antisense hTRT gene expression can significantly inhibit telomerase activity of cancer cells and decrease malignant phenotypes in vitro and in vivo. Therefore, as a telomerase inhibitor, antisense hTRT gene may be a new pathway for cancer therapy.