髓系抑制性细胞在肿瘤基因治疗中的研究现状

1概述人们很早以前发现在慢性炎症的局部和肿瘤组织中聚集有大量的未成熟髓样细胞(immature myeloid cells)[1],而且,随着肿瘤的发生与发展,这群细胞在机体的骨髓、脾脏及肿瘤组织中不断增多。由于该群细胞具有免疫抑制功能,因此曾被命名为IMCs(immature myeloid cells)和MSCs(myeloid suppressor cells),直到2006年该领域的学者才根     

肾细胞癌血清转化生长因子-β_1水平及其意义

目的　探讨血清转化生长因子 β1(TGF β1)对肾细胞癌侵袭性的作用。方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 17例肾细胞癌患者根治术前后血清TGF β1浓度和 17例行体外冲击波碎石患者 ,17例前列腺增生患者及 17例正常人血清TGF β1浓度进行测定。结果　所有肾细胞癌根治术前患者血清TGF β1水平明显高于正常对照组 (P <0 0 0 1) ,根治术后患者TGF β1浓度明显下降 (P <0 0 1)。结论　血清TGF β1浓度有可能成为一种判断肾细胞癌预后的瘤标。     

肝细胞生长因子 转化生长因子-β_1在IgA肾病肾组织的表达及意义

目的对IgA肾病肾组织进行肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子(TGF)-β1水平测定,探讨其与IgA肾病肾脏病理分型、Katafuchi评分及临床指标的关系。方法①76例IgA肾病患者肾脏组织被分为轻度系膜增生(A组)、中到重度系膜增生(B组)、局灶增生或增生硬化性IgA肾病(C组)3组;②采用Katafuchi的半定量标准评分,计算相应的肾小球总积分、系膜增生程度积分、球性硬化积分、血管积分;③检测患者的血压、尿蛋白定量(24h)、血清肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)、血清白蛋白(Alb)和脂蛋白a[Lp(a)];④免疫组织化学及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定患者肾组织切片中HGF、TGF-β1水平,收集数据进行统计分析。结果①随着病变的加重,各病理指标相应积分及血压、Lp(a)、尿蛋白定量(24h)、Scr逐渐增加,Ccr、Alb逐渐降低;②与A组比较,B组肾组织TGF-β1明显增多(P<0.01),C组显著降低(P<0.05);与A组比较,B、C组HGF面积显著降低(P<0.01);③肾组织HGF阳性面积与Ccr、Alb呈正相关(r=0.76、r=0.60),与肾组织TGF-β1阳性面积无相关,与血压、、Scr、Lp(a)、肾小管间质积分、肾小球总积分、系膜增生程度积分、球性硬化积分、血管积分呈负相关(r分别=-0.69、-0.75、-0.70、-0.67、-0.74、-0.69、-0.35、-0.39、-0.32,P<0.01)。结论①各临床病理指标与病理分级有相关性,提示动态监测临床病理指标对判断IgAN的预后有意义;②IGF-β1参与肾纤维化过程;随肾脏病变的加重HGF含量降低,可导致其纤维化作用减弱。     

2型糖尿病肾病患者血清肝细胞生长因子和转化生长因子-β1水平及临床意义

目的 探讨血清肝细胞生长因子（HGF）及转化生长因子β1（TGF-β1）在2型糖尿病（DM）不同肾损害期中的变化及其临床意义。方法收集2型DM患者95例,其中正常尿蛋白组32例。微量尿蛋白组32例,临床尿蛋白组31例。采用ELISA法检测血清HGF及TGF-β1水平,同时检测尿微量白蛋白。结果正常蛋白尿组血清HGF及TGF-β1水平明显高于正常对照组（P〈0．05）;随着DM患者肾损害的逐渐加重,血清HGF水平逐渐减低,微量蛋白尿组与临床尿蛋白组血清HGF水平明显低于正常对照组（P〈0．05）;而血清TGF-β1水平则逐渐增高,微量蛋白尿组与临床尿蛋白组的血清TGF-β1水平明显高于正常对照组（P〈0．01）;血清HGF和TGF-β1呈显著负相关（r=-0．618,P〈0．01）。结论2型DM患者不同肾损害期HGF和TGF-β1变化明显,HGF和TGF-β1在发生、发展中起重要作用。     

转化生长因子-β_1基因单核苷酸多态性与鼻咽癌易感性及复发的关系

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1-869T/C,TGF-β_1-509C/T基因单核苷酸多态性(SNPs)与鼻咽癌易感性与复发的关系。方法采用病例对照研究,采集来自辽宁地区不同医院的鼻咽癌患者193例,同期就诊的非肿瘤患者231例静脉血,酚氯仿法提取基因,Taqman real-time聚合酶链反应(PCR)方法及SDS软件对TGF-β_1基因型进行分型。SPSS 13.0软件包进行数据分析,以χ~2检验比较SNPs基因型在病例与对照之间分布的差异,以单因素和多因素Logistic回归计算比值比(OR)及95%可信区间(CI)。结果单因素分析显示,TGF-β_1-869位点的各基因型与鼻咽癌易感性不相关,同样TGF-β_1-509位点的各基因型与鼻咽癌易感性也不相关,经校正年龄性别吸烟状态后显示仍与鼻咽癌易感性仍不相关。经单因素及多因素进一步分析后显示:TGF-β_1-869、TGF-β_1-509位点各基因型与鼻咽癌复发也不相关,差异无统计学意义。结论 TGF-β_1-869和TGF-β_1-509位点SNPs与鼻咽癌易感性及复发均不相关。     

放线菌酮抑制转化生长因子-β_1诱导的小鼠肝细胞的凋亡(英文)

目的:研究TGF-β_1诱导细胞凋亡的机制。方法:采用DNA片段化和荧光染色方法对TGF-β_1诱导的细胞凋亡进行定性观察,结晶紫染色方法定量检测TGFβ_1的细胞存活率,免疫印迹方法检测Tak1、p53和Bax的蛋白水平,用荧光素酶报告基因的方法测定TGF-β_1诱导的基因表达,采用薄层层析方法检测脂类信号分子神经酰胺的水平。结果:IGF-β_1诱导AML12小鼠肝细胞出现典型的细胞凋亡变化,包括DNA片段化,细胞核的固缩、碎裂。放线菌酮下调了Tak1的水平以及TGF-β_1诱导的PAI-1表达。TGF-β_1能够诱导p53表达,但不诱导Bax表达。TGF-β_1诱导的细胞凋亡过程中未见神经酰胶水平的升高。结论:TGF-β_1诱导的细胞凋亡需要TGF-β_1诱导的基因表达。     

金雀异黄素对高级蛋白氧化产物刺激大鼠系膜细胞转化生长因子β_1分泌的影响

目的观察金雀异黄素（Gen）对高级蛋白氧化产物（AOPPs）刺激下SD大鼠肾小球系膜细胞（MC）分泌TGF-β1的影响。方法以体外培养的SD大鼠MC为研究对象,分为对照组、AOPPs组和Gen组。检测细胞培养液中TGF-β1的浓度,并明确量效关系。结果AOPPs刺激的MC与对照组比较,细胞培养液中TGF-β1的浓度升高,而Gen能抑制上述效应,且具有时间和浓度依赖性。结论在体外培养条件下,Gen能抑制AOPPs刺激下MCTGF-β1表达的增加,且作用具有时间和浓度依赖性,其机制可能均与Gen灭活氧化应激有关,提示Gen对AOPPs刺激下的MC具有保护作用。     

胃癌血清转化生长因子-β1和铁蛋白水平的临床研究

目的探讨转化生长因子(TGF-β1)和铁蛋白(SF)在胃癌血清中的水平及其临床意义.方法应用ELISA法对35例胃癌患者TGF-β1和SF水平进行测定,并同期检测24例健康人的血清TGF-β1和SF水平作对照.结果胃癌患者血清TGF-β1和SF水平均明显高于正常人(P＜0.01);分化较差组、浆膜浸润组及有淋巴结转移组均分别明显高于分化较好组、无浆膜漫润组及无淋巴结转移组(P＜0.05);胃癌组血清TGF-β1和SF水平呈正相关(P＜0.01).结论血清TGF-β1和SF可能在胃癌的浸润和转移过程中发挥某种相似作用.     

氟伐他汀对高糖大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1的影响

目的观察高糖大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)转化生长因子β1(TGF-β1)的变化以及氟伐他汀对其影响。方法体外培养HBZY-1细胞,将其分成以下几组:正常组、高糖组、甘露醇对照组、3个浓度氟伐他汀组。24 h后进行细胞形态观察,MTT法测定并计算细胞存活率和抑制率。RT-PCR法测定各组TGF-β1 mRNA的表达。Western blot法、免疫细胞化学法测定各组TGF-β1蛋白表达及分布。结果与正常组相比,HBZY-1细胞在高糖刺激下,TGF-β1 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)。与高糖组相比,氟伐他汀组TGF-β1 mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论高糖环境可促使HBZY-1细胞TGF-β1异常表达;而氟伐他汀可阻抑高糖对HBZY-1细胞TGF-β1的活化而发挥肾脏保护作用。     

转化生长因子β_1单核苷酸多态性及血清水平与高血压左室肥厚的关系

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因+869、+915位点等位基因频率及基因型在高血压左室肥厚患者中的分布,初步分析其基因型及血清水平与高血压左室肥厚的关系。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),检测186例高血压患者(其中91例伴左室肥厚)及105名对照组TGF-β1基因+869T/C、+915G/C多态性,同时采用双抗体夹心ABC-酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清TGF-β1水平。结果高血压左室肥厚组血清TGF-β1水平显著高于高血压非左室肥厚组和对照组(P均<0.05),TGF-β1+869T/C多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P均<0.05),C等位基因携带者患高血压左室肥厚的风险是T等位基因的1.787倍(OR=1.787,95%CI:1.194~2.673),携带C等位基因的高血压左室肥厚患者血清TGF-β1水平高于不携带者(P<0.05)。结论TGF-β1基因+869T/C多态性与高血压左室肥厚的发病具有相关性,C等位基因可能是高血压左室肥厚发病的遗传易感基因;携带C等位基因的个体可能通过促进TGF-β1的高度表达,进而增加了高血压左室肥厚的发病风险。     

脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞合成转化生长因子β1的作用

目的 探讨脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞(MsMC)合成转化生长因子β1(TGFβ1)的作用.方法 将MsMC分为7组:A组加入无血清DMEM培养基;B组加入脂肪细胞条件培养基;C组加入pSuper质粒转染后条件培养基;D组加入pcDNA3.1(-)质粒转染后条件培养基;E组加入脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染后条件培养基;F组加入脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染后条件培养基;C组加入添加3 mg/L脂联素的脂肪细胞条件培养基.用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒、脂联素siRNA-pSuper表达质粒、pcDNA3.1(-)质粒及pSuper质粒分别转染3T3-L1细胞(脂质体2000转染法),诱导细胞分化为成熟脂肪细胞后收集细胞,以蛋白质印迹法检测细胞裂解液中脂联素蛋白含量.孵育MsMC 9 h后,收取细胞,用实时定量聚合酶链反应检测细胞裂解液中TGFβ1 mRNA水平;孵育24 h后收取上清液,用酶联免疫吸附试验检测上清液中TGFβ1蛋白质水平.结果 与未转染的成熟脂肪细胞比较,用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量增加[(0.59±0.06)比(0.21±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05);用脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量减少[(0.12±0.01)比(0.39±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05).B组TGFβ1 mRNA水平及蛋白质表达含量高于A、F、G组[TGFβ1 mRNA:(3.09 ±0.15)比(1.50±0.35)、(2.1±0.53)、(1.8±0.42),TGFβ1蛋白质水平:(708±10)比(224±16)、(382±11)、(300 ±25)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脂肪细胞条件培养基可刺激系膜细胞合成TGFβ1,而脂联素对这一效应具有明显抑制作用.     

血清可溶性髓系细胞触发受体-1水平在小儿肺炎诊断中的研究

目的:研究小儿肺炎及其不同病原体感染中血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)水平的变化情况。方法:随机选取重症肺炎及普通肺炎患儿各30例,分别检测刚入院及治疗5d后的血清sTREM-1水平,并检测其具体病原体感染情况。结果:在治疗前,重症肺炎组与普通肺炎组血清sTREM-1水平显著高于正常对照组,而重症肺炎组血清sTREM-1水平与普通肺炎组比较差异无统计学意义。治疗后,重症肺炎组的血清sTREM-1水平仍显著高于普通肺炎组和正常对照组(P<0.05),但普通肺炎组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。重症感染组与普通感染组均以细菌感染最为常见,而且两组的单独细菌感染及混合感染的血清sTREM-1水平均显著高于非细菌感染者。结论:血清sTREM-1水平是小儿肺炎的敏感指标,且与炎症轻重相关。而细菌感染是sTREM-1增高的主要因素,但在小儿肺炎中,非细菌感染亦可引起sTREM-1增高。     

血清转化生长因子-β的研究进展

转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）是由三种结构相近功能相似的生物活性因子组成的家族,化学本质是多肽类物质,TGF-β至少有6个结构相关的份子（TGF-β1,2,3,4,5,6）,它们在多种组织和细胞内有表达,     

阿魏酸钠对转化生长因子β_1抑制肝细胞增殖作用的影响

目的　探讨转化生长因子 β1(TGFβ1)抑制肝细胞生长过程中 ,阿魏酸钠 (sodiumferulic,SF)的干预作用。方法　以培养的正常人肝细胞株 (L0 2细胞 )为对照 ,5 μg·L-1TGFβ1处理的细胞为模型组 ,MTT比色法及3 H TdR参入法分别检测TGFβ1及SF对L0 2细胞生长和DNA合成的影响 ;以流式细胞计数仪分析TGFβ1和SF对L0 2细胞周期各时相变化的影响 ;采用化学荧光探针DCFH DA ,经流式细胞计数仪检测TGFβ1致细胞内活性氧自由基 (ROS)生成情况及不同浓度的SF的干预作用。结果　 5 μg·L-1TGFβ1处理L0 2细胞 2 4h ,细胞存活率下降为对照组的 6 7 93% (P <0 0 1vs对照组 ) ,细胞DNA合成抑制率为 37 5 6 % ,2 5 0μmol·L-1SF可以使L0 2细胞存活率升高 19 2 8% (P <0 0 1vs模型组 ) ,DNA合成增加 17 71% (P <0 0 5vs模型组 ) ;SF促进L0 2细胞周期由G0 /G1期向S期和G2 /M期过渡 ,12 5 μmol·L-1和 2 5 0 μmol·L-1SF使L0 2细胞周期S期的比例分别增加 11 4 5 %和 17 92 % (P <0 0 1vs模型组 ) ;5 μg·L-1TGFβ1使L0 2细胞内ROS产生量升高为对照组的1 90倍 ,6 2 5 μmol·L-1～ 2 5 0 μmol·L-1SF分别降低TGFβ1的诱导作用 14 5 %～ 2 7 5 %。结论　阿魏酸钠对抗由TGFβ1引起的肝细胞生长抑制作用 ,这可能与     

脑梗死患者血清转化生长因子β_1测定及临床意义

目的　探讨脑梗死患者血清转化生长因子 β1(TGF β1)的动态变化及其与脑梗死体积和临床预后的关系。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定 31例脑梗死患者起病第 1、3、7天血清TGF β1水平并与对照组比较。结果　脑梗死患者血清TGF β1水平在起病第 1、3天显著低于对照组 (P <0 0 1) ,以第 1天为低谷值。TGF β1低谷值与脑梗死体积无显著相关性 ,而与临床预后密切相关。结论　TGF β1参与了脑梗死的病理生理过程 ,早期测定血清TGF β1水平对判断临床预后有重要意义。     

慢性丙型肝炎患者血清转化生长因子-β_1含量测定的临床意义

转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )是一种高二聚体多肽 ,具有促进间质细胞分化和增生 ,增加细胞外间质的沉积 ,抑制其降解的作用 ,是肝纤维化形成过程中一个重要的调控因子 ,我们采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)方法测定了 2 2例慢性丙型肝炎患者血清中的 TGF- β1 含量 ,并观察了 TGF- β1水平与重组复合 α干扰素治疗的关系。1　对象与方法1.1　测定对象 :2 2例慢性丙型肝炎患者均为本院 1996年1月至 1997年 3月内住院患者 ,病程 6个月以上 ,所有患者血清丙型肝炎病毒抗体 (抗 HCV)均阳性 ,13例患者HCV RNA阳性 ,所有患者均未检出甲…     

普罗布考对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及转化生长因子-β1的影响

目的探讨普罗布考（probucol,PRB）对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（rat mesangial cells,RMCs）增殖及转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。方法①将RMCs分为正常对照组（葡萄糖5．5mmol·L^-1）、高糖组（葡萄糖30．0mmol·L^-1）、高糖＋不同浓度PRB纽（葡萄糖30．0mmol·L^-1＋10、20、50μmol·L^-1PRB）,MTT法检测培养24、48、72h后细胞的增殖情况,ELISA法检测培养24h后TGF-β1分泌量。②将RMCs分为正常对照组（葡萄糖5．5mmol·L^-1）、渗透浓度对照组（5．5mmol·L^-1葡萄糖＋24．5mmol·L^-1甘露醇）、高糖组（葡萄糖30．0mmol·L^-1）、高糖＋20μmol·L^-1PRB组,ELISA法检测培养12、24、48、72h后TGF-β1分泌量。结果①培养24h后,高糖刺激RMCs增殖,PRB呈时间依赖性和剂量依赖性地抑制RMCs的增殖（P〈0．05）。②高糖刺激24h后,TGF-β1分泌量增多,PRB能抑制高糖诱导的TGF-β1,分泌（P〈0．05）。结论PRB可能通过抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的分泌,抑制高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞的增殖,发挥肾脏保护作用。     

早期糖尿病肾病患者血尿转化生长因子β_1水平及干预研究

目的检测早期糖尿病肾病(DN)患者血和尿转化生长因子β1(TGF-β1)水平,比较氯沙坦、辛伐他汀以及两药联合治疗对早期DN患者TGF-β1的影响。方法选取糖尿病伴微白蛋白尿的患者65例,随机分为氯沙坦组、辛伐他汀组、氯沙坦联合辛伐他汀治疗组,另选取29名健康志愿者作为正常对照。12周后采用放射免疫法检测24h尿白蛋白排泄率(UAER),双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清和尿液TGF-β1水平。结果早期DN患者血和尿TGF-β1水平显著高于健康志愿者(P<0.01),且与UAER呈显著正相关(P<0.01)。与治疗前基础值相比,两药均能减少UAER以及血和尿中TGF-β1(P<0.05),以联合治疗更为明显。结论早期DN患者血和尿TGF-β1水平升高,氯沙坦、辛伐他汀以及氯沙坦联合辛伐他汀能有效降低TGF-β1,血和尿TGF-β1水平可作为DN早期诊断和治疗效果评估的较特异指标。     

转化生长因子-β_1siRNA表达载体的构建

目的构建人转化生长因子β1(TGF-β1)基因siRNA质粒载体,为放射性肺损伤以及其他TGF-β1高表达疾病的基因治疗提供新的方法。方法根据人TGF-β1mRNA序列为模板,设计合成相应的寡核苷酸序列,经退火形成双链DNA片段,克隆到线性pRNAT载体中,用酶切方法对重组体进行鉴定,最后将构建的TGF-β1特异性siRNA质粒载体转染人胚肺成纤维细胞HFL-I细胞,通过通过荧光定量PCR检测和ELISA检测TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平,以及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到线性pRNAT载体质粒中,与对照组相比,TGF-β1mRNA水平及蛋白水平的表达量均受到明显抑制,人胚肺成纤维细胞凋亡明显增加,统计有显著性差异(P<0.05)。结论成功构建了人TGF-β1基因siRNA质粒载体,对于放射性肺损伤以及其他TGF-β1高表达疾病的基因治疗奠定了基础。