心肌肥厚大鼠心肌组织中钙调神经磷酸酶抑制因子的信号转导

目的:观察醛固酮诱导心肌肥厚大鼠心肌组织钙调神经磷酸酶抑制因子表达和心肌钙调神经磷酸酶活性及血浆中醛固酮和血管紧素II水平的变化。方法:实验于2003-08/12在解放军总医院老年病研究所实验室完成。选用健康雄性Wistar大鼠21只。随机分为3组,每组7只,分别为正常对照组和心肌肥厚组及环孢素A组。①分组干预:正常对照组:皮下注射等量生理盐水,10g/L盐水饮用,连续14d;心肌肥厚组:皮下注射醛固酮18μg/d,10g/L盐水饮用,连续14d复制心肌肥厚模型。环孢素A组:除皮下注射醛固酮18μg/d外,同时以环孢素A5mg/(kg·d)皮下注射14d,10g/L盐水饮用,连续14d。②心肌组织钙调神经磷酸酶抑制因子测定:钙调神经磷酸酶抑制因子条带的平均密度测定采用凝胶成像分析系统完成。③血浆中醛固酮和血管紧素Ⅱ水平:采用放射免疫方法测定。④心肌钙调神经磷酸酶活性:参照发色底物法改进方法测定。结果:大鼠21只均进入结果分析。皮下注射醛固酮14d后,①血浆醛固酮水平:环孢素A组明显高于心肌肥厚组和正常对照组[(0.75±0.17),(0.28±0.06),(0.21±0.03)ng/L,P<0.05]。②心肌组织钙调神经磷酸酶活性:心肌肥厚组明显高于正常对照组[(0.40±0.09),(0.18±0.58)A410,P<0.05]。③血浆血管紧张素II水平:心肌肥厚组明显低于环孢素A组和正常对照组[(304±106),(1309±925),(448±258)ng/L,P<0.05]。④钙调神经磷酸酶抑制因子的表达:心肌肥厚组明显高于正常对照组和环孢素A组(56.26±3.37,36.26±6.19,44.71±6.58,P<0.01)。结论:①钙调神经磷酸酶抑制因子有拮抗心肌肥厚反应的作用。②在外源性醛固酮诱发大鼠发生心肌肥厚反应过程中,钙调神经磷酸酶的活性增加,而其内源性负性调节蛋白钙调神经磷酸酶抑制因子的表达亦相应增加;应用钙调神经磷酸酶特异性阻断剂环孢素A后,心肌组织内钙调神经磷酸酶的活性呈下降趋势,而钙调神经磷酸酶抑制因子的表达亦相应显著下降,提示钙调神经磷酸酶抑制因子的变化受到钙调神经磷酸酶信号转导系统调控。     

丹参酮ⅡA抑制高血压状态下心脏醛固酮合成及其相关基因的表达

背景：醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子，有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚。目的：观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因CYP11B1和CYP11B2表达的作用，以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径。设计：以自发性高血压大鼠为实验对象，以正常血压的WKY大鼠为对照，完全分组设计，随机对照实验，各组问均数的比较用方差分析。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科和中西医结合研究所。材料：实验于2003-01／2004-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选用12周龄雄性正常血压WKY大鼠10只为对照组，将12周龄雄性自发性高血压大鼠20只随机分为2组，每组10只，分别为高血压组和丹参酮ⅡA组。方法：丹参酮ⅡA组经腹腔每天注射1．5mg／kg丹参酮ⅡA，高血压组和对照组均腹腔注射相当容积的蒸馏水。实验12周后断头处死大鼠留取心肌标本，心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量采用放射免疫法测定。心肌醛固酮合成相关基因CYP11B1和CYP11B 2mRNA表达水平采用反转录聚合酶链反应检测。主要观察指标：实验12周后各组大鼠心肌组织醛固酮和血管紧张素Ⅱ含量及CYP11B1和CYP11B2基因的mRNA表达量比较。结果：自发性高血压大鼠20只和正常血压WKY大鼠10只均进入结果分析。①实验12周后大鼠心肌组织醛固酮含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.056&;#177;0．014)，(0．031&;#177;0．010)，(0．018&;#177;0.009)ng／g，P&;lt;0．0l，0．05]，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。②实验12周后大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ含量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(0．093&;#177;0．016），(0．088&;#177;10．024)，（0．043&;#177;0．012)ng／L，P&;lt;0．01]。③实验12周后大鼠心肌组织CYP11B1基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(2．774&;#177;0．138，2．533&;#177;0．127，1．973&;#177;0．102，P&;lt;0．05)。④实验12周后大鼠心肌组织CYP11B2基因的表达量：高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(1．573&;#177;0．106．1．024&;#177;0．113,0．786&;#177;0．121．P&;lt;0．01，0．05)，丹参酮ⅡA组明显低于高血压组(P&;lt;0．05)。⑤各组大鼠心肌组织CYP11B1和CYP11B2及参照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的反转录聚合酶链反应产物电泳带的位置与理论值相符。结论：丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因CYP11B2的表达水平，减少心脏局部醛固酮的生物合成有关。     

高血压左室肥厚发病中细胞间黏附分子1的表达及丹参酮ⅡA的抑制效应

背景：细胞间黏附分子1作为炎症反应的可靠标志物在动脉粥样硬化发病中具有重要的作用。近年来研究认为其介导的慢性炎症反应可能参与高血压左室肥厚的发病过程，但也有报道持相反观点。丹参酮ⅡA是丹参的一种脂溶性提取性，动物实验证明其具有抑制高血压左室肥厚发生的作用。目的：探讨细胞间黏附分子1在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响。设计：随机对照观察。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料：实验于2002—10／2004—01在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成，选用12周龄雄性WKY大鼠10只、自发性高血压SHR大鼠20只，分为对照组(WKY大鼠10只)、高血压组(SHR大鼠10只)、丹参酮ⅡA组(SHR大鼠10只)。方法：丹参酮ⅡA组经尾静脉注射丹参酮ⅡA1．5mg／(kg&;#183;d)治疗，其他两组分别注射等量的蒸馏水。12周后断头处死所有大鼠留取心肌标本，应用苏木精-伊红染色、VG染色，免疫组化染色及心肌EDI标记检测心肌巨噬细胞浸润数，心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白的表达应用反转录一聚合酶链反应及酶链免疫吸附实验等方法。主要观察指标：各组大鼠心肌巨噬细胞浸润数，心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白表达。结果：20只SHR和10只WKY大鼠被纳入实验，并全部进入结果分析，无脱失值。①与对照组比较，高血压组大鼠肥厚心肌中细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达显著增加(0．176&;#177;0．087，0．537&;#177;0．195；0．104&;#177;0．011，0．173&;#177;0．027，P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，巨噬细胞浸润明显(0．62&;#177;0．07，1．85&;#177;0．23，P&;lt;0．01)。②与高血压组比较，丹参酮ⅡA组大鼠心肌细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达水平显著下调(0．537&;#177;0．195，0．291&;#177;0．106；0．173&;#177;0．027，0．125&;#177;0．014．P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，巨噬细胞浸润数减少(1．85&;#177;0．23。1．16&;#177;0．17，P&;lt;0．05)，心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻。结论：心肌细胞间黏附分子1的过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用。丹参酮ⅡA抑制左室肥厚的效应可能与其下调细胞间黏附分子1表达，减少炎性细胞的心肌浸润有关。     

大鼠压力负荷性心肌肥厚与氯沙坦及赖诺普利的预防作用

目的：探讨心血管重构的结构、生化改变及氯沙坦与赖诺普利对心血管重构的作用。方法：实验选用雄性SD大白鼠60只+随机将其分为6组：假手术组．模型组，赖诺普利20mg／(ks&;#183;d)组(大剂量赖诺普利组)，赖诺普利2mg／(kg&;#183;d)(小剂量赖诺普利组)，氯沙坦30mg／(kg&;#183;d)(大剂量氯沙坦组)，氯沙坦5mg／(kg&;#183;d)组(小剂量氯沙坦组)，每组10只。采用膈下腹主动脉缩窄法建立大鼠心肌肥厚模型。假手术组、模型组、降压和非降压剂量氯沙坦与赖诺普利在术后第2天用药至30d后，检测平均动脉压．心脏肥厚程度及局部心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶和胶原蛋白含量的变化。结果：模型组大鼠颈动脉平均动脉压、心脏质量、左室质量、心脏质量／体质量、左室质量／体质量。心肌细胞横径，胶原蛋白含量明显高于或大于假手术组(t=6．009—13．308，P&;lt;0．01)；而局部心肌一氧化氮、一氧化氮合酶含量[(7．04&;#177;4．11)μmol／g，(4．00&;#177;0．67)μkat／g]明显低于假手术组[(15．28&;#177;2．50)μmol／g，(8．17&;#177;1．00)μkat／g，t=5．416，10．966，P&;lt;0．011。大剂量赖诺普利组，大、小剂量氯沙坦组大鼠心肌胶原蛋白含量与假手术组比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；但均明显低于模型组(t=13．011．12．206，3．302，P&;lt;0．01)；大剂量氯沙坦组大鼠心肌胶原蛋白含量明显低于大剂量赖诺普利组和小剂量氯沙坦组(t=3．651．P&;lt;0．01，t=2．473，P&;lt;0．05)；小剂量赖诺普利组大鼠心肌胶原蛋白含量明显低于模型组(t=4．42，P&;lt;0．01)，高于假手术组(t=6．725．P&;lt;0．01)。心脏质量指数与平均动脉压呈显著正相关(r=0．7841．P&;lt;0．01)；心脏质量指数与一氧化氮呈显著负相关(r=-7730．P&;lt;0．01)；心脏质量指数与心肌胶原含量呈显著正相关(r=0．8177，P&;lt;0．01)。结论：心血管重构与血压、心脏间质成分及一氧化氮有密切关系；赖诺普利预防心肌肥厚可能是血流动力学和非血流动力学因素共同作用的结果；氯沙坦可能主要依靠非血流动力学因素抗心肌肥厚。     

复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的抑制作用

目的：评价复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化、左室重构及血浆中血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)、醛同酮的效应。方法：实验选用12周龄SHR50只，随机将其分为5组，即空白对照组、依那普利组、小、中、小剂量复方鳖甲组(小、中、大剂量药物组)，每组各10只。另取正常SD大鼠10只作为正常对照组。测定治疗10周后各组大鼠收缩压、心脏质量指数(heart weight index，HWI)、左室质量指数(left ventricular mass index，LVMI)、胶原蛋白含量，血浆中血管紧张素Ⅱ、醛固酮含量，心肌胶原容积分数(collagen volume fraction，CVF)和血管周围胶原面积(perivascular circuferential area，PVCA)。结果:治疗10周后，空白对照组大鼠收缩压，HWI，LVMI，胶原蛋白含量【(195&;#177;9)mmHg，(5．38&;#177;0．25)，(3．81&;#177;0．09)，(6．13&;#177;0．93)mg／g，1mmHg=0．133kPa】均明显高于正常对照组【(127&;#177;10)mmHg．(3．88&;#177;0．28)，(2．57&;#177;0．17)，(4．19&;#177;0．72)mg／g】(P&;lt;0．01)。依那普利组大鼠收缩压明显低于与空白对照组(P&;lt;0．01)，而复方鳖甲软肝方各组收缩压比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；依那普利组大鼠HWI，LVMI明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，而复方鳖甲软肝方各组差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；依那普利组，复方鳖甲软肝方中、大剂量组大鼠心肌组织胶原蛋白含量明显低于空白对照组(P&;lt;0．05-0.01)。空白对照组AngⅡ，醛固酮和CVF，PVCA均明显高于正常对照组(P&;lt;0．01)。依那普利、中、大剂量药物组AngⅡ明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)；依那普利组醛固酮明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，小剂量药物组有所降低(P&;lt;0．05)，中剂量药物组，大剂量药物组亦有明显降低(P&;lt;0．01)，且各复方鳖甲软肝方组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；依那普利组CVF明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，中、大剂量药物组亦有明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)；依那普利组、各剂量复方鳖甲软肝方组大鼠PVCA明显低于空白对照组(P&;lt;0．05-0．01)。结论：复方鳖甲软肝方无明显降压、逆转左室肥厚等功能，但可能通过影响肾素血管紧张素-醛固酮系统的机制，抑制心肌纤维化。     

磷酸阿米酮对大鼠心肌损伤的保护作用

目的：探讨磷酸阿米酮对大鼠实验性损伤心肌的保护作用。方法：应用随机数字表将36只Wistar大鼠随机分为对照组、损伤组、磷酸阿米酮保护组，每组12只。损伤组及保护组均以异丙肾上腺素(80mg／kg)腹腔注射。损伤组尾静脉注射生理盐水。保护组尾静脉注射磷酸阿米酮(5mg／kg)。对照组则以生理盐水腹腔注射及尾静脉注射。24h后检测血清肌酸磷酸激酶(creatine phosphosphokinase，CPK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性；血浆内皮素(endothelin，ET)含量、心肌含水量、钙及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量；对心尖部心肌进行病理分级。结果：对照组、损伤组和保护组血浆ET含量分别为(194&;#177;21)ng／L，(292&;#177;26)ng／L和(202&;#177;22)ng／L；损伤组CPK【(34．2&;#177;4．1)μmol／(L&;#183;s)】和LDH活性【(24．7&;#177;3．0)μmol／(L&;#183;B)】、ET含量、心肌含水量(78．9&;#177;0．3)％、钙含量(52&;#177;4)％及MDA含量(10．9&;#177;1．2)μmol／g均高于对照组和保护组(q=2．99—4．27，P均&;lt;0．05)；血浆ET含量与心肌钙含量呈正相关(γ=0．89，P&;lt;0．01)；损伤组心肌分级高于对照组(P&;lt;0．01)，保护组分级低于损伤组(P&;lt;0．05)。结论：内皮素参与大鼠实验性心肌损伤的发病过程，其作用为引起细胞内钙超载；磷酸阿米酮对大鼠损伤心肌有保护作用，其机制可能为抑制内皮素转化酶而减少内皮素产生，从而防止发生细胞内钙超载。     

病毒感染小鼠心肌中内皮素及其A受体表达

目的：探讨病毒性心肌炎小鼠心肌组织中是否存在有血管收缩作用的内皮素及内皮素A受体mRNA。方法：实验于2003-10／2004-04在哈尔滨医科大学克山病研究所完成。选用雄性清洁级Balb／c小鼠40只，腹腔注射嗜心肌柯萨奇B组病毒3型制备病毒性心肌炎模型，用反转录-聚合酶链反应技术半定量检测病毒感染后即刻，9，14及21d小鼠心肌中的内皮素A受体-mRNA表达。用免疫组化方法测定病毒感染后即刻及感染后14d心肌中内皮素表达情况。结果：①病毒感染后14d心肌中内皮素A受体mRNA表达明显高于病毒感染后即刻(0．672&;#177;0．0828，0．501&;#177;0．085，q=4．888，P&;lt;0．05)。病毒感染后7，21d心肌中内皮素A受体mRNA的表达高于感染后即刻，但无明显差异(q=1．471，3．089，P&;gt;0．05)。②病毒感染14d后心肌中内皮素表达明显高于病毒感染后即刻(0．034477&;#177;0．017676，0．00288&;#177;0．001768．τ=4．3568，P&;lt;0．05)。结论：内皮素系统参与病毒性心肌炎的损伤过程。     

螺旋藻对力竭运动大鼠心肌损伤的保护作用

目的：观察螺旋藻对力竭运动大鼠心肌线粒体丙二醛、钙离子浓度及超氧化物歧化酶、磷脂酶A2活性的影响。方法：实验于2002-09／2003-03在广西医科大学生理实验室完成。选择成年SD雄性大鼠30只，随机分为安静组、力竭运动组、螺旋藻力竭运动组，每组10只。安静组、力竭运动组喂普通饲料，螺旋藻力竭运动组在饲料中加入15％螺旋藻干粉喂养，共喂养4周。力竭运动组、螺旋藻力竭运动组大鼠在跑台上进行下坡运动至力竭，跑台速度16m／min，坡度为-16&;#176;，力竭标准为动物已跟不上预定速度，经电刺激尾巴仍不能继续往前跑。力竭运动组、螺旋藻力竭运动组大鼠力竭后即刻断头处死，同时亦将安静组处死，迅速取心室肌组织，观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛、钙离子浓度、磷脂酶A：和超氧化物歧化酶的活性。结果：30只大鼠全部进入结果分析。①大鼠心肌线粒体丙二醛、钙离子浓度和磷脂酶A2活性：力竭运动组显著高于安静组[(21．12&;#177;2．66)μmol／g，(13．68&;#177;2．90)μmol／g；(31．66&;#177;4．83)μmol／g(16．83&;#177;4．45)μmol／g；(1792．44&;#177;145.48)μkat／g，(604．09&;#177;53．04)μkat／g，q=16．97，10．54，39．21，P&;lt;0．01]，螺旋藻力竭运动组[(17．40&;#177;1．38)μmol／g，(20．74&;#177;4．01)μmol／g，(1040.75&;#177;59．81)μkat／g]显著低于力竭运动组(q=451，7．76，24.80，P&;lt;0．01)。②心肌线粒体超氧化物歧化酶活性：力竭运动组明显低于安静组[(306．09&;#177;9444)μkat／g／g，(474．29&;#177;．2750)μkat／g，q=22.86,P&;lt;0．01]。螺旋藻力竭运动组[(372．60&;#177;19．61)μkat／g明显高于力竭运动组(q=22．86,P&;lt;0．01)。结论：力竭运动引起心肌线粒体丙二醛、钙离子浓度及磷脂酶A2活性的升高，超氧化物歧化酶活性下降，造成心肌线粒体和心肌的损伤；螺旋藻可抑制力竭运动后心肌线粒体的上述变化而起到保护心肌，抗运动性损伤的作用。     

参七汤对大鼠缺血心肌内皮素基因表达的影响

目的：研究参七汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素影响的分子机制。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组、缺血组和参七汤组，利用垂体后叶素造模，分别测定各组心肌内皮素浓度及内皮素-1基因的表达。结果：参七汤组心肌内皮素浓度明显低于缺血组(2．28&;#177;0．50，6．87&;#177;1．70，P&;lt;0．01）。免疫组化显示缺血组心肌内皮素-1染色灰度值明显低于参七汤组(心房肌：167．63&;#177;4．28，182．75&;#177;7．74，P&;lt;0．01；心室肌：154．38&;#177;4．05，182．97&;#177;2．14，P&;lt;0．05)。结论：参七汤可显著降低缺血心肌内皮素浓度，可能是参七汤所代表的益气补元活血法能有效抑制缺血心肌内皮素-1基因的表达及蛋白合成。     

常氧与缺氧状态下豚鼠心肌细胞内钙离子浓度与葛根素注射液的干预

目的：探讨在常氧、缺氧状态下，豚鼠心肌细胞内游离钙离子浓度与葛根素注射液干预的影响，并与硝苯地平的作用相比较。方法：采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注。Ⅰ型胶原酶分离心肌细胞．并调整细胞数为2&;#215;10^9L^-1。在细胞外钙含量为2mmol／L情况下，采用F-2000型荧光分光光度计进行心肌细胞内钙含量测定，计算细胞内游钙离子浓度。将心肌细胞悬液分为6组，分别为常氧及缺氧条件下的对照组、葛根素注射液组、硝苯地平组。在常氧条件下(氧分压=15．9kPa)，观察100s后，随机选择3组分别加入营养液10μL、葛根素注射液10μL(终浓度：0．1mmol／L)、硝苯地平10μL(终浓度：20mmol／L)观察100，200，300，400，500s。而另外3组在缺氧条件下(氮气：0．1cm^3／s)也分别给予同浓度的上述3种药物后，按上述5个时间点进行观察。采用荧光分光光度计动态测量不同条件下各组心肌细胞内游离钙离子浓度的变化。结果：①在静息(0～100s)常氧状态(氧分压=15．9kPa)及控制细胞外细胞内游离钙离子浓度为2mmol／L(生理情况)时，6组的心肌细胞内游离钙离子浓度无显著差异(P&;gt;0．05)，故知6组的组间一致性较好，具有可比性。②心肌细胞内游离钙离子浓度：葛根素注射液组和硝苯地平组给药后100，200，300，400，500s均明显低于对照组(P&;lt;0．05～0．01)。但葛根素注射液组下降远度较硝苯地平组慢(P&;lt;0．05～0．01)。③心肌细胞内游离钙离子浓度：缺氧状态下，葛根素注射液组缺氧后100，200，300，400，500s增加较对照组缓慢(163．7&;#177;19．7)，(224．2&;#177;20．7)，(309．7&;#177;15．1)，(424．7&;#177;14．0)，(477．5&;#177;21．5)nmol／L；(208．8&;#177;28．9)，(328．5&;#177;14．4)，(401．8&;#177;21．2)，(534．3&;#177;20．8)，(751．4&;#177;36．0)nmol／L，P&;lt;0．01]。硝苯地平组在缺氧后100，200，300，400，500s比对照组增加少(P&;lt;0．01)，且降低速率较葛根素注射液组高【硝本地平组：(109．4&;#177;19．6)，(140．8&;#177;16．2)．(203．1&;#177;15．2)，(265．4&;#177;17．3)，(301．7&;#177;24．1)nmol／L,P&;lt;0．01】。结论：在常氧条件下葛根素注射液使心肌细胞内游离钙离子浓度明显下降；缺氧条件下，葛根素注射液延缓缺氧所引起的心肌细胞内游离钙离子浓度增加，从而阻止心肌细胞内钙超载，对心肌起到保护作用。葛根素注射液的作用与经典的钙通道阻断剂硝苯地平相似，但与硝苯地平比较，具有相对缓慢的抑制缺氧后心肌细胞内游离钙离子浓度升高的特点。     

环孢霉素A对高血压大鼠心肌组织形态和结构的影响

目的：研究不同剂量、不同使用时间的环孢霉素A对肾性高血压大鼠心肌的毒性作用。方法：将37只大鼠随机分为5组，高血压组(n=7)：行“一肾一夹(IKIC)”手术；环孢霉素Ⅰ组(n=8)：IKIC+环孢霉素A5mg／(kg&;#183;d)腹腔注射4周；环孢霉素Ⅱ组(n=8)：IKIC+环孢霉素A5mg／(kg&;#183;d)腹腔注射6周；环孢霉素Ⅲ组(n=8)：IKIC+环孢霉素A20mg／(kg&;#183;d)腹腔注射4周；假手术组(n=6)行假手术；观察各组大鼠的血压、体质量、心体质量比及环孢霉素A对心肌组织结构的影响。结果：高血压组大鼠血压、心体质量比[(185&;#177;30)mmHg，(0.35&;#177;0.06)％]明显高于假手术组[(129&;#177;4)mmHg(0.23&;#177;0．02)％](t=4，451，P&;lt;0．01；t=2．906，P&;lt;0．05)；环孢霉素Ⅰ组大鼠明显低于手术组和高血压组(t=2．502，P&;lt;0．05)，对心肌结构无明显损伤；而在环孢霉素Ⅱ组发现心肌明显水肿．线粒体水肿，体质量不升甚至下降等明显毒性作用。结论：环孢霉素A可抑制高血压心肌肥大，但较大剂量或较长时间应用则会产生严重心肌水肿，并且这种作用是剂量、时间依赖性的。     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的：证实胶质源性神经营养因子(glial cell line—derived neurotrophic factor，GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用。方法：切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型，借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF，术后不同时间分别取L5脊髓切片，利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶和酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)活性并进行图像分析。结果：坐骨神经切断后第4，9，16及21d，对照组和GDNF组胆碱酯酶活性分别为21．53&;#177;1．54和23．67&;#177;1．08(P&;lt;0．05)，19．82&;#177;1．35和22．87&;#177;1．04(P&;lt;0．01)．22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．01)，25．52&;#177;1．43和28．92&;#177;1．37(P&;lt;0．01)：对照组和GDNF组ACP活性(平均灰度)分别为37．49&;#177;1．39和35．40&;#177;1．18(P&;lt;0．05)，40．94&;#177;1．38和38．43&;#177;1．31(P&;lt;0．05)，22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．05)．37．15&;#177;1．52和34．68&;#177;1．43(P&;lt;0．05)结论：GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用。     

高血压患者的左室舒张功能与胰岛素样生长因子

目的：应用超声技术评价高血压患者左室舒张功能，并探讨其与胰岛素样类生长因子1的关系。方法：选择2003—06／2003-12齐鲁医院门诊及住院的单纯原发性高血压患者61例为高血压组。根据左室质量指数将患者分为左室心肌肥厚组30例和无心肌肥厚组31例。选择同期齐鲁医院门诊体检健康自愿者20例为对照组，男8例，女12例。脉冲波多普勒超声测量所有研究对象二尖瓣血流，根据二尖瓣瓣尖频谱测量舒张早期最大血流速度、晚期最大血流速度及其比值。多普勒组织成像测量二尖瓣环心肌舒张早期峰值运动速度、晚期峰值运动速度及其比值。所有研究对象均用放射免疫分析测定血清胰岛素样类生长因子1的浓度。结果：高血压患者二尖瓣瓣尖舒张早期、晚期最大血流速度比值明显小于对照组(P&;lt;0．01)，左室心肌肥厚组二尖瓣瓣尖舒张早期最大血流速度／二尖瓣瓣尖晚期最大血流速度比值明显小于无心肌肥厚组(P&;lt;0．01)；无心肌肥厚组、左室心肌肥厚组患者二尖瓣侧环心肌舒张早期峰值运动速度／心肌舒张晚期峰值运动速度比值(0．88&;#177;0．12，0．74&;#177;0．09)均小于对照组(1．42&;#177;0．11)(P&;lt;0．01)；左室心肌肥厚组比值明显小于无心肌肥厚组(P&;lt;0．01)。无心肌肥厚组、左室心肌肥厚组患者血清胰岛素样生长因子1水平明显高于对照组(P均&;lt;0．001)；左室心肌肥厚组血清胰岛素样生长因子1水平明显高于无心肌肥厚组(P&;lt;0．01)；胰岛素样生长因子1与二尖瓣瓣尖舒张早期最大血流速度／二尖瓣瓣尖晚期最大血流速度、侧环心肌舒张早期峰值运动速度／心肌舒张晚期峰值运动速度呈显著负相关(r=-0．65，-0．61，P&;lt;0．01)。结论：胰岛素样生长因子1与应用超声技术评价的高血压左室舒张功能有较好相关性。     

HD02对慢性前脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：研究HD02在大鼠慢性前脑缺血过程中对神经细胞凋亡的作用。方法：16～18个月SD大鼠64只，雄性，体质量300-350g。利用末端标记法和流式细胞仪，测定HD02干预前后脑缺血大鼠脑组织神经细胞的凋亡情况，并检测Caspase-3免疫阳性细胞、Calcineurin和钙激活中性蛋白酶(Calpain)活性。结果：HD02有减少阳性凋亡细胞出现率[(5．404&;#177;1.38)％与模型对照组(12.72&;#177;3．45)％比较，t=4．84，P&;lt;0．01]及减少Caspase-3免疫阳性细胞表达(HD02组比模型对照组：缺血15d：7．10&;#177;1．90比12．55&;#177;3.30,t=3．86，P&;lt;0．01：缺血30d：4，60&;#177;1．15比9．50&;#177;4．20，t=4．67，P&;lt;0．01)，降低Calcineurin D02组比模型对照组：大脑皮质每克蛋白中含[(38．24&;#177;5．58)比(48．98&;#177;5.04)nmol／s，t=3.64，P&;lt;O．O1]；海马每克蛋白中含[(37．87&;#177;3．38)比(52．58&;#177;4．92)nmol／s，t=3．75，P&;lt;0．O1]和Calpain活性[大脑皮质每毫克蛋白中含(2．96&;#177;O．77)比(4．56&;#177;0．85)A／h，t=3．84，P&;lt;0．05]；海马每毫克蛋白中含[(2．90&;#177;0．28)比(4．91&;#177;0．94)A／h，t=3．97，P&;lt;0，01]的作用。结果：HD02有一定的抗神经细胞凋亡的作用．     

抗感染组织工程化骨的生物特性

目的 探索抗感染组织工程化骨一期修复感染性骨折、骨缺损的新途径。方法 昆明小鼠84只，雄性，体重24—27g。其中30只于右侧股部肌袋植入利福平组织工程化骨做药物释放特性观察。54只以随机数字法分为A，B，C3组，每组18只。将植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋中。A组植入利福平组织工程化骨，B组植入单纯组织工程化骨，C组植入牛松质骨，做成骨活性观察。结果 ①此种材料21d内骨粒周围软组织的利福平浓度(1.8mg／L)高于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(0．008—0．06mg／L)，而小鼠血药浓度很低。②此种材料的成骨活性与单纯组织工程化骨无明显差别(P&;gt;0．05)，均较单纯牛松质骨载体的成骨活性好(P&;lt;0．01)。碱性磷酸酶(μmol／s&;#183;kg)测定显示：7d A组43&;#177;12，B组48&;#177;10，C组22&;#177;5，F=7．56，P&;lt;0．01；14d A组65．3&;#177;3．2，B组63．0&;#177;2．8，C组18．2&;#177;2．7，F=34．86，P&;lt;0．01；28d A组122&;#177;20，B组133&;#177;12，C组27&;#177;7，F=53．86，P&;lt;0．01。结论 一定剂量的利福平组织工程化骨有较好的成骨活性和极好的抗感染能力。且能保持很低的血药浓度。     

大鼠全脑缺血再灌注时左旋四氢巴马汀对脑内离子稳态平衡的影响

背景：脑缺血再灌注可使脑内离子稳态遭到严重破坏，这种离子稳态的破坏又可加重脑缺血再灌注损伤。目的：通过观察脑缺血再灌注时脑组织钙、镁、锌、钠、钾、铁含量的变化，探讨左旋四氢巴马丁在全脑缺血再灌注损伤时的作用机制。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点和材料：本研究的地点为华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科。材料由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供清洁级Wistar大鼠35只，雌雄不拘，体重180—200g，鼠龄4—6周。方法：建立大鼠急性脑缺血再灌注损伤模型，用原子分光光度仪检测脑组织电解质含量。结果：与假手术组比较脑缺血再灌注12h组钙[(218．66&;#177;11．88)μg／g，q=5．526，P&;lt;0．01]．锌[(72．45&;#177;0．830)μg／g，q=23．240，P&;lt;0．01]、钠[(5237．85&;#177;106．48)μg／g，q=7．956，P&;lt;0．01]、钾[(15421．52&;#177;264．86)μg／g，q=3．805，P&;lt;0．05]．铁[(151．27&;#177;10．21)μg／g，q=3．392，P&;lt;0．05]含量增高，镁[(617．71&;#177;13．91)μg／g，q=5．009，P&;lt;0．01]含量降低；24h钙[(295．63&;#177;64．69)μg／g，q=12．251，P&;lt;0．01]、锌[(74．44&;#177;0．47)μg／g，q=27．354，P&;lt;0．01]含量进一步增高，镁[(587．14&;#177;10.90)μg／g，q=10．499，P&;lt;0．01]含量进一步降低，钠[(5056．68&;#177;100．18)μg／g，q=5．269，P&;lt;0．01]、钾[(15116．52&;#177;631.96)μg／g，q=4．156，P&;lt;0．05]含量仍升高，铁[(118．79&;#177;14.22)μg／g，q=2．515．P&;gt;0．05]含量与假手术组接近。左旋四氢巴马丁在脑缺血再灌注12h和24h均能抑制脑组织钙[(175．67&;#177;2．70)μg／g，q=3．756，P&;lt;0．05；(190．76&;#177;4．60)μg／g，q=9．163，P&;lt;0．01]、锌[(66.77&;#177;1．14)μg／g．q=11．758，P&;lt;0．01；(69．94&;#177;0．98)μg／g．q=9．304，P&;lt;0．01]、钠[(4841．94&;#177;179．00)μg／g，q=4．206，P&;lt;0．05；(4251.05&;#177;194.31)μg／g，q=3．183．P&;gt;0．05]含量的上升，并提高脑组织镁[(706．21&;#177;25．92)μg／g，q=15．888，P&;lt;0．01；(662．80&;#177;9．74)μg／g，q=13．585，P&;lt;0．01]和钾[(16294．68&;#177;102．48)μg／g，q=5．274，P&;lt;0．01；(16577．51&;#177;152．46)μg／g．q=3．339，P&;gt;0．05]的含量，降低铁[(86．90&;#177;2．89)μg／g，q=11．607，P&;lt;0．01；(84．85&;#177;321)μg／g，q=11．795，P&;lt;0．01)含量。结论：左旋四氢巴马丁可抑制脑缺血再灌注期间脑组织钙、锌、钠含量的上升，提高镁和钾含量，降低铁含量。     

心力衰竭大鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α的变化

目的：研究心力衰竭大鼠心肌组织表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。方法：将Wistar大鼠60只随机分为3组：假手术组、心力衰竭组和治疗组。结扎大鼠左冠状动脉复制心肌梗死后心力衰竭模型，用免疫组化和蛋白印迹(Western blot)方法检测心肌组织TNF-α表达情况。结果：心力衰竭组大鼠血液动力学状况较假手术组显著下降(t=3．11～10．78，P&;lt;0．01)。心力衰竭组与治疗组心肌组织TNF-α蛋白的表达量[吸光度(A)值分别为8．04&;#177;0．17，7．10&;#177;0．10]明显高于假手术组(3．20&;#177;0．12)(t=104．08，111．43，P&;lt;0．01)，3组比较，心力衰竭组TNF-α表达量最高（t=21．32，P&;lt;0，01)。结论：心力衰竭大鼠心肌组织表达TNF-α明显升高，心力衰竭时心肌组织是TNF-α的重要来源之一。     

褪黑素对肺炎小鼠心肌的保护作用

目的：了解褪黑素对肺炎小鼠心肌细胞线粒体形态和心脏功能的影响，以探讨在肺炎时应用自由基清除剂对肺外器官的保护作用。方法：雄性NIH小鼠48只随机分为4组：生理盐水对照组(以生理盐水注入气管模拟制作肺炎模型)、肺炎组(经气管注入细菌悬液制作肺炎模型)、褪黑素+肺炎组(在肺炎模型基础上每日经腹腔注射褪黑素溶液进行干预)、溶媒+肺炎组(在肺炎模型基础上每日经腹腔注射褪黑素溶液的溶媒作为对照)。各组动物观察72h后检测血流动力学指标，取心肌组织制备光镜和电镜标本，剩余心肌组织制备匀浆，检测心肌组织中丙二醛含量、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)活性和铜锌一超氧化物歧化酶(cu，Zn-superoxide dismutase，Cu,Zn-SOD)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，同时检测血浆中TNF-α含量；电镜观察心肌线粒体形态改变。结果：肺炎后小鼠心脏功能受损、心肌组织中丙二醛、TNF-α含量增加(F=3．15-8.03，P&;lt;0．01-0.05)；T-SOD[肺炎组、生理盐水对照组：(110．3&;#177;27．4)，(152.16&;#177;27．4)kNU／g]，Cu，Zn-SOD[肺炎组、生理盐水对照组：(22.89&;#177;4.17)，(30.50&;#177;6.96)kNU／g]活性降低(F=4．05，P&;lt;0．05；F：5．78，P&;lt;0.01)；ATP含量降低(F=2．91。P&;lt;0．05)；心肌组织线粒体损伤明显(F=8．55。P&;lt;0．01)。褪黑素干预可部分抑制上述改变(F=2．91～8．55，P&;lt;0．01～0．05)。结论：在肺炎小鼠中，褪黑素通过降低心肌脂质过氧化、保护心肌抗氧化能力、保护心肌线粒体等作用进而保护小鼠心脏功能。     

大鼠心肌梗死模型中心肌组织胶原代谢变化对心室重塑的意义

目的：观察大鼠心肌梗死模型胶原的变化规律，认识心室重塑及心脏功能变化的机制。方法：实验选用SD大鼠68只，随机将其分为对照组(n=10)、手术对照组(n=10)、心肌梗死后1d组(n=12)、心肌梗死后1周组(n=12)、心肌梗死后2周组(n=12)、心肌梗死后4周组n=12)。通过结扎68只SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。分别于术后第1天，及1，2，4周取心肌组织，采用羟脯氨酸消化法和免疫组化分别测定胶原总量和Ⅰ／Ⅲ胶原比例变化。结果：心肌梗死后2，4周组大鼠心肌Ⅰ／Ⅲ胶原比例(2．12&;#177;0．62，2．18&;#177;0．71)明显高于对照组(2．71&;#177;0．30)(t=2．84，2．79，P&;lt;0．05)。心肌梗死后2，4周组大鼠心肌胶原【(37．16&;#177;2．67)，(38．19&;#177;1．41)mg／g】明显高于对照组【(35．61&;#177;1．52)mg／g】(t=3．12．5．23，P&;lt;0．01)。手术对照组、心肌梗死后1d、1周组与对照组大鼠心肌胶原含量、Ⅰ／Ⅲ胶原比例比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：SD大鼠心肌梗死后心肌组织内胶原总量增加，Ⅰ／Ⅲ胶原比例减少，这种胶原代谢变化规律是心室重塑发生机制重要组成部分。     

旋转磁场作用对大鼠骨钙代谢的影响

背景：已有研究证明旋转磁场干预能使大鼠骨密度显著增加，并且能维持相当长的一段时间而不下降，且与性激素无关。目的：研究旋转磁场对大鼠骨钙含量的影响，以及与血清骨碱性磷酸酶(bone—specific alkaline phosphatase，BAP)和尿脱氧吡啶交联(deoxypyridinoline crosslinks，DPD)的相关性。设计：以实验动物为对象的随机对照实验。单位：一所大学生命科学院。材料：实验于2004—03／10在深圳市微生物基因工程重点实验室完成。健康成年SD大鼠90只，雌性60只，体质量(259&;#177;70)g．雄性30只，体质量(351&;#177;104)g。按雌雄随机分9组，雌性假手术组、去卵巢常钙对照组、去卵巢低钙对照组，去卵巢低钙实验组、去卵巢常钙实验组、去卵巢低钙中药实验组、雄性对照组、雄性低钙实验组、雄性常钙实验组。每组10只。干预：雌性大鼠除假手术组以外均切除卵巢，去卵巢对照组单纯去卵巢，去卵巢实验组手术15d体内残存雌激素代谢尽后，开始旋转磁场处理15d，1次／d，2h／次。雄性大鼠除对照组外均行磁场处理15d，1次／d，2h／次。分别给予常钙(含钙0．26％的食物)、低钙(含钙0．1％的食物)和辅以中药(补骨脂、黄芪、淫羊藿、肉苁蓉免煎粉剂等)饲料饲养。旋转磁场处理后，继续饲养15d，处死后取其股骨测量各组大鼠骨钙含量，取血清测量BAP含量，取尿液测DPD含量。主要观察指标：各组大鼠骨钙含量及血清BAP和DPD变化。结果：纳入90只大鼠，实验过程中死亡4只，进入结果分析86只。①经旋转磁场处理后大鼠骨钙含量增高：去卵巢低钙中药实验组及去卵巢低钙对照组分别为(0．226&;#177;0．015)，(0．206&;#177;0．015)g／g，两组比较t=4．63，P&;lt;0．05；雄性常钙实验组及雄性对照组分别为(0．206&;#177;0．031)，(0．199&;#177;0．014)g／g，两组比较t=4．21，P&;lt;0．05。②经旋转磁场处理后大鼠血中BAP含量增高：去卵巢常钙实验组及去卵巢常钙对照组分别为(20．52&;#177;1．78)，(15．68&;#177;3．68)U／L，两组比较t=4．76，P&;lt;0．05；雄性低钙实验组及雄性对照组分别为(17．69&;#177;3．78)，(8．53&;#177;2．54)U／L，两组比较t=4．59，P&;lt;0．05。③经旋转磁场处理后实验组大鼠尿中DPD下降：去卵巢低钙中药实验组及去卵巢低钙对照组分别为(86．97&;#177;37．19)，(401．57&;#177;79．34)nmol／L，两组比较t=7．45，P&;lt;0．01；雄性常钙实验组及雄性对照组分别为(97．87&;#177;31．97)，(168．71&;#177;53．19)nmol／L，两组比较t=8．31，P&;lt;0．01。结论：磁场能够在短时间内(15d)有效的促进大鼠的骨钙含量增加，且增加与血BAP升高及尿DPD下降成正相关。