影响生物瓣寿命因素的探讨

目前生物瓣的主要问题是如何延长其使用寿命（其中还由多种素引起的原发性组织衰坏），我们认为衰坏的原因之一是由于处理过程生物瓣组织结构的完整性受到破坏所至，本文取狗心名片１０个（０．５ｃｍ＾２），在不同时间内行常规电镜处理及扫描电镜观察，结果（１）新鲜心包浆膜面有一层致密纤细的微绒毛覆盖；（２）４－８小时心包表面呈片状脱落；（３）２０小时后表面绒毛短缩，集聚成“珊瑚”状。细胞间隙变大，胶原纤维暴露...     

内皮细胞和平滑肌细胞联合种植研究

内皮细胞在人工器官表面的种植是当前组织工程学研究领域的热点课题这一，平滑肌细胞是内皮细胞的周细胞，对内皮细胞的形态结构，生理功能，再生和修复有重要影响。本文综述了进行内皮细胞和平滑肌细胞联合种植的定义，方法及联合种植后内皮细胞功率变化的研究概况，并对研究中有解决的问题作了进一步的分析和探讨。     

机械应力对牛心包瓣原发性损坏的影响

引起牛心包瓣原发性损坏的生理学和病理学因素与机械学因素同等重要。从我院再次手术中收集到的22只失效瓣膜来看,在瓣架尖端区和侧边区的损坏发生率分别占30.3％和36％,撕裂、磨损和钙化的发生率分别占25.8％、18％和31.6％。牛心包片的弯曲试验和牛心包瓣的显微镜观察表明,由于经戊二醛处理的牛心包片的拉伸弹性模量是压缩模量的25倍,因此当牛心包片弯曲变形时,弯曲内侧必然出现挤压屈服,并逐渐发展到楔状挤压。牛心包瓣临床失效的形式及其分布提示,瓣叶损坏主要是由于瓣叶在启闭活动过程中的这种弯曲挤压引起的。因此在改进牛心包瓣时,应考虑机械应力,特别是弯曲变形的应力对瓣膜损坏的影响。     

内皮细胞和平滑肌细胞联合种植研究

内皮细胞在人工器官表面的种植是当前组织工程学研究领域的热点课题之一。平滑肌细胞是内皮细胞的周细胞,对内皮细胞的形态结构、生理功能、再生和修复有重要影响。本文综述了进行内皮细胞和平滑肌细胞联合种植的意义、方法及联合种植后内皮细胞功能变化的研究概况,并对研究中有待解决的问题作了进一步的分析和探讨。     

AKP与生物瓣钙化的研究Ⅱ：从植入材料的组织学变化研究 …

本文在血磷与生物材料钙化关系的研究基础上,从生物瓣材料植入体内后的组织学变化,探讨了ＡＫＰ与生物瓣钙化的关系。组织学和超微结构研究表明;生物瓣组织在主体内后有进行性形态学变化,包括形成包囊,刺激组织增生和细胞浸润,包囊诱使细胞变性,细胞 生中使ＡＫＰ活力升高,变性 死的降解成分便成为钙结晶的成核部位,ＡＫＰ使局部ＰＯ４＾３－积累,促进钙化发生。由此本文探讨了生物瓣钙化中ＡＫＰ的发生机理和ＡＫＰ与钙     

AKP与生物瓣钙化的研究Ⅰ血磷与生物瓣材料的钙化

本文通过对植入生物瓣材料的大鼠血液的生化分析,探讨了ＡＫＰ与生物瓣钙化的关系,获得了一些有价值的结论为生物瓣的缓 钙化提供了十分有用的依据。     

AKP与生物瓣钙化的研究Ⅱ从植入材料的组织学变化研究AKP与生物瓣钙化的关系

本文在血磷与生物材料钙化关系的研究基础上,从生物瓣材料植入体内后的组织学变化,探讨了ＡＫＰ与生物瓣钙化的关系。组织学和超微结构研究表明：生物瓣组织在植入体内后有进行性形态学变化,包括形成包囊,刺激组织增生和细胞浸润,包囊诱使细胞变性,细胞在变性中使ＡＫＰ活力升高,变性和坏死细胞的降解成分便成为钙结晶的成核部位;ＡＫＰ使局部ＰＯ３－４积累,促进钙化发生。由此本文探讨了生物瓣钙化中ＡＫＰ的发生机理和ＡＫＰ与钙化的关系。     

大鼠肝血窦内皮细胞的分离培养及其免疫细胞化学研究

应用胶原酶经门静脉插管灌注，Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心及体外培养等方法，从大鼠肝分离出高纯度的肝血窦内皮细胞，纯度达９０％以上。电镜观察细胞表面有大量圆形窗孔，胞质内有丰富的穿内皮通道。肝血窦内皮细胞可与抗体包被的羊红细胞粘着形成花环，表明细胞表面保存良好的ＦＣ受体。     

滑膜细胞中波形蛋白的形态学研究

用免疫组织化学、激光共聚焦扫描和粘附式细胞仪上进行三维图像重建，观察了波形蛋白在体外培养人腱鞘滑膜细胞内的分布。结果显示：波形蛋白呈海绵状立体结构，分布于整个细胞质空间；认为波形蛋白的分布与培养细胞在不同生长时期的形态变化密切相关。     

内皮细胞微丝结构与血管内皮完整性关系的探讨

为证实内皮细胞微丝与血管内皮完整性之间的直接关系，用Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ－ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ显示了体外培养的牛主动脉内皮细胞形成一微密单层细胞后的微丝形态及用细胞毒素Ｂ孵育单层内皮细胞后的细胞形态及微丝的变化。结果表明：内皮细胞内的微丝结构ＤＰＢ是维持内皮细胞之间连接的重要结构。文内还对内皮细胞微丝结构与动脉粥样硬化早期病变的关系进行了讨论。     

大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养

目的培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,为内皮细胞的体外研究提供实验材料。方法利用机械吹打法和酶消化法分别分离出肠绒毛固有层,采用植块培养法培养原代内皮细胞,依次以局部消化法和差速黏附法进行纯化,细胞鉴定采用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测和硝酸银染色。结果成功分离培养出大鼠的肠黏膜微血管内皮细胞,纯化后的细胞可传到18代以上。结论为肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养建立了一种操作简单、成本低廉的方法。     

人参总皂甙对培养鼠肝枯否细胞免疫活性的影响

分离Ｗｉｓｔａｒ乳鼠肝枯否细胞并作体外培养，取细胞生长良好的培养瓶分为正常组，损伤组，实验组及阳性对照组。正常组为接种后３天定时更换培养液者，损伤组为更换５ｍｏｌ／Ｌ浓度ｃｃＩ４培养基后继续培养６０ｍｉｎ者；实验组为损伤同时加入０．５％人参总皂甙２滴者；阳性对照组为损伤同时加入ＰＨＡ１００μｇ／ｍｌ者。将各组培养瓶继续培养６０ｍｉｈ后取出细胞生长盖玻片，检测各组枯否细胞免疫活性。结果，正常组与损伤     

血小板内皮细胞黏附分子1、细胞间黏附分子3和CD44在体外淋巴管新生中的作用

目的 探讨内皮黏附分子血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1)、细胞间黏附分子3(ICAM-3)和CD44对淋巴管新生的作用。方法 用狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞。标记内皮细胞的PECAM-1、ICAM-3和CD44，在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察。内皮细胞用肿瘤坏死因子(TNF-Ⅱ)或脂多糖(LPS)刺激后，再阻断PECAM-1、ICAM-3和CD44，作细胞计数和计算迁移率。制备三维凝胶淋巴管形成模型，观察管状结构的形成，测量其长度和面积，并在透射电镜下观察其特征。结果淋巴管内皮细胞表达PECAM-1：ICAM-3和CD44。在对照组以及TN-α和LPS刺激组，分别阻断PECAM-1、ICAM-3和CD44后，内皮细胞的迁移率降低，管样结构的长度和面积减少。阻断PECAM-1或CD44后，细胞的增殖数目降低，但阻断ICAM-3后细胞的增殖数目无明显变化。在半薄和超薄切片上，淋巴管内皮细胞形成的管状结构具有毛细淋巴管的形态特征。结论 体外培养的淋巴管内皮细胞表达PECAM-1、ICAM-3和CD44，这些黏附分子参与了淋巴管内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成等淋巴管新生过程。     

乳鼠心肌膜微血管内皮细胞的体外培养

目的 改进心肌膜微血管内皮细胞的体外培养方法,为进一步研究其结构和功能提供实验数据.方法 选取10～15d龄的SD大鼠,采用植块法培养原代心肌膜微血管内皮细胞,在继代培养中通过差速消化和差速贴壁方法、结合倒置显微镜下形态学的观察进行继代培养和纯化,利用免疫细胞化学方法检测第Ⅷ因子相关抗原对培养细胞进行了鉴定.结果 成功培养了大鼠心肌膜微血管内皮细胞,细胞呈多边形或鹅卵石状;免疫细胞化学染色第Ⅷ因子相关抗原显阳性.结论 改良了心肌膜微血管内皮细胞的体外培养方法,获得了较高纯度的心肌膜微血管内皮细胞,可用于进一步的科学研究.     

新生大鼠颅骨成骨性细胞体外生长过程研究

为了解定鼠颅骨成骨性细胞在体外的发育分化过程是否与体内成内细胞表型相似，我们用分次酶消化法分离新生大鼠颅骨成骨性细胞，进行形态学观察、碱性磷酸酶（Ａ１Ｐ）活性表现、细胞对甲状旁膛素（ＰＴＨ）的反应和形成钙化骨基质结节等研究。结果表明，新生大鼠颅骨细胞在体外培养过程中有两个明显的生长阶段，即增生期和分化成熟期。在增生期细胞数目逐渐增多，形态不规则，胞膜上的ＡＩＰ活性低，对ＰＴＨ反应逐渐增强。在分化成     

体外培养人胎儿雪旺氏细胞的增殖及其细胞动力学研究

新鲜和液氮保存3个月的人胎儿雪旺氏细胞体外培养8天,细胞数量增加一倍,培养液中加入二丁基环磷酸腺苷和牛脑垂体浸出液,细胞增倍时间缩短近一倍.流式细胞计测定结果显示,培养早期,S期、G2+M期细胞所占比例<5%,随着培养时间的延长,其比例逐渐增加,第6天达高峰,环磷酸腺苷和垂体浸出液作用3天,S期、G2期+M期比例达15%.实验结果表明:人胎儿雪旺氏细胞在体外增殖缓慢,环磷酸腺苷和垂体浸出液能刺激雪旺氏细胞分裂;冷冻复苏后的雪旺氏细胞其生长特征以及对环磷酸腺苷和垂体浸出液的反应与新鲜细胞相同.     

gadd153基因对卵巢癌细胞生长抑制作用的研究

目的　研究生长抑制ＤＮＡ损伤基因（ｇｒｏｗ ｔｈ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ＤＮＡ ｄａｍ ａｇｅ, ｇａｄｄ）对卵巢癌细胞生长抑制和凋亡的作用。　方法　ＲＴ－ＰＣＲ鉴定卵巢癌ＳＫＯＶ３ 和３ＡＯ细胞株ｇａｄｄ１５３ 基因表达。通过目的基因的克隆、载体构建技术,将目的基因ｇａｄｄ１５３ 重组于ｐｌＸＳＮ－ｎｅｏ 逆转录病毒表达载体;构建的ｐＬＸＳＮ－ｇａｄｄ１５３载体采用脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）（ＤＯＴＡＰ）的方法,分别转染ＳＫＯＶ３ 和３ＡＯ细胞株;经Ｇ４１８ 抗性筛选;ＲＴ－ＰＣＲ表达鉴定;足叶乙甙（ＶＰ１６）诱导,采用流式细胞仪分析（ＦＣＭ）的方法检测转染前后肿瘤细胞的生长抑制和凋亡。　结果　ＳＫＯＶ３－ｇａｄｄ１５３ 细胞生长抑制在Ｇ１／Ｇ０ 期,部分细胞进入凋亡的状态;３ＡＯ－ｇａｄｄ１５３ 细胞生长抑制,未引起凋亡。　结论　转染ｇａｄｄ１５３ 基因的肿瘤细胞系,诱导表达后可诱发肿瘤细胞生长抑制在Ｇ１／Ｇ０期,并有细胞进入凋亡状态。证实ｇａｄｄ１５３ 基因参与了细胞生长抑制和凋亡过程。