不同时期宫内手术修复腭裂山羊的面中部发育变化研究

目的通过观察先天性腭裂山羊模型,研究不同时期宫内修复对山羊面中部发育的影响。方法取24只8～12月龄雌性杂交波尔山羊,体重35～55kg,以配种日期定为孕0d,于孕30d经B超确认怀孕后随机将实验动物分为5组。取其中20只分别于孕31～42d肌肉注射左旋毒藜碱(15mg/d)制备先天性腭裂动物模型;其余4只作为正常对照组不作处理,待其正常生产。20只实验动物模型形成后随机分为实验1、2、3、4组(n=5),前3组分别于孕65、90、120d采用改良兰氏法对宫内1只胎羊行腭裂修复术;实验4组作为未修复对照组。小羊出生后1个月,采用CT颅面测量技术,测量上颌最前磨牙前方的两侧凹陷处间距(posterior premolar morphological measurement,PPMM),及以此线为基准测量上颌骨最前点至此线的垂直距离(anterior premolar morphological measurement,APMM),最后制作干颅行大体观察。结果小羊出生后1个月,实验1组PPMM、APMM与正常对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),与实验4组比较差异均有统计学意义(P<0.05);实验2组PPMM、APMM与正常对照组、实验4组比较差异均有统计学意义(P<0.05);实验3组PPMM与正常对照组和实验4组比较差异均有统计学意义(P<0.05),APMM与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但与实验4组比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验4组的5只腭裂小羊仅存活1～2个月。结论对孕65d胎羊行宫内修复腭裂后对面中部发育影响最小,越接近孕晚期修复对面中部发育影响越大,但修复手术越早流产风险越高。     

孕晚期宫内修补胎羊腹壁缺损的初步实验研究

目的探讨孕晚期行宫内手术修补胎羊腹壁缺损的可行性。方法取8只孕110～115 d的健康山羊,体重14～22 kg,随机分为两组,分别为可吸收缝线组(A组,3只)及生物型补片组(B组,5只)。两组首先切除胎羊全层腹壁分别制备大小约5 cm×1 cm及5 cm×2 cm的腹壁缺损模型后,分别采用可吸收缝线缝合及两层生物型补片修补腹壁缺损。观察术后母羊及出生后小羊一般情况;于出生后第10天处死小羊观察腹腔内粘连情况,并取切口瘢痕组织行生物力学测定和组织学观察。结果术后共3只母羊流产,其中A组1只,B组2只;其余母羊均顺利娩出小羊。A组小羊腹壁切口愈合好,瘢痕呈线形,腹腔内粘连轻;瘢痕厚度为4～5 mm。B组小羊腹壁切口均未完全愈合,腹腔内粘连轻;瘢痕厚度为3～4 mm。生物力学测定A组瘢痕组织皮条断裂力为16、20 N,B组为10、14、18 N。组织学观察示,A组瘢痕组织范围小;B组见皮肤溃疡面和其下的纤维结缔组织,伴炎性细胞浸润。结论 孕晚期行宫内手术修补胎羊腹壁缺损可行;对于腹壁缺损较小者可直接缝合修补,缺损较大者可采用生物型补片修补。     

孕晚期胎羊作为供肝来源的解剖可行性实验研究

目的探讨孕晚期胎羊的肝脏作为肝移植供肝来源的外科解剖可行性。方法从9只孕晚期胎羊中取出其肝脏,修肝,测量其重量、各管道外径等,并与16只新生羊的肝脏相比较。结果孕125～135 d胎羊的体重较小(1 000 g),血管较细、较脆,在修肝过程中缝线牵引时,肝上和肝下下腔静脉极易撕脱。孕142～145 d的胎羊体重达1 050～1 560 g,在修肝过程中肝上和肝下下腔静脉无牵引线撕脱现象,与出生9 d内新生羊的肝脏在管径上相差不大,可以直接进行外科吻合;其门静脉较小,可用其脐静脉与新生羊的门静脉进行外科吻合;动脉吻合宜将胎羊腹主动脉上开口处修剪成袢与受体的相应动脉吻合;胆道重建则选择胎羊胆囊与新生羊的小肠或总胆管吻合。结论体重小于1 000 g的胎羊(孕135 d以内)不宜作为肝移植的供体;而孕142～145 d胎羊的胎肝可作为1周内新生羊原位肝移植和较大新生羊辅助肝移植的供肝,在外科解剖上是可行的。     

持续弹力牵引成骨修复腭裂的实验研究

目的：应用持续弹力牵引成骨技术进行封闭腭裂、延长硬腭的实验研究，探讨以组织新生方式修复腭裂的可行性。方法：6个月龄杂种犬10只，随机分为空白对照组、实验对照组、实验组。实验组人工制备宽8mm、长25mm硬腭裂隙，腭骨水平板周围切骨，经5d的间歇期后安置记忆合金牵引器，向后、向中线牵引，达到预期结果后，牵引器继续保持8周。结果：实验对照组裂隙无明显变化。实验组裂隙逐渐缩窄，裂隙后部于2－3周封闭，裂隙前部缩窄为1－2mm的缝隙，同时硬腭向后延长；组织学证实骨牵引区域完全为新生骨组织所填充。结论：持续弹力牵引成骨能够诱导腭裂犬腭骨和附着的软组织新生，有效封闭腭部裂隙、延长硬腭。     

先天性膈疝动物模型的制作

目的　制作先天性膈疝的动物模型 ,为进一步研究先天性膈疝合并肺发育不良的病理改变及其处理奠定基础。　方法　妊娠 9.5天的 SD大白鼠随机分成实验组和对照组。实验组经胃一次性灌入 2 ,4-二氯苯基 - P-硝基苯醚 ,对照组经胃灌入等量食用油。妊娠 2 1天时剖腹产取出胎鼠 ,放大镜下观察膈疝形成情况 ,并分别测定胎鼠体重及双肺重量 ,光学显微镜下观察肺的组织学发育情况。　结果　有 2 5只胎鼠制成先天性膈疝模型 ,成功率为 5 8.1% ,实验组胎鼠双肺重量降低 ,组织学显示肺发育不良。　结论　用 2 ,4-二氯苯基 - P-硝基苯醚制作胎鼠膈疝模型具有简便、成功率高的优点 ,是进一步研究膈疝合并肺发育不良的病理改变及其治疗的理想手段     

硬腭两维牵张成骨的动物实验研究

目的：通过手术建立犬腭裂实验动物模型,探讨应用自行设计制作的腭骨外固定两维牵张器关闭硬腭骨裂隙和后退腭骨的可行性。方法：选择7只年龄在1～1.5岁的健康杂种犬作为研究对象。并采用随机分组的方法抽取2只为对照组,其余5只作为实验组。通过手术制造10mm×25mm的人工腭裂模型,观察对照组能否自然愈合。在实验组采用自行设计制作的硬腭两维骨牵张器,通过骨牵张关闭裂隙并延长硬腭骨,观察牵张过程。结果：实验犬术后均成活、健康状况良好,实验组牵张器固定牢靠,顺利关闭约10mm的间隙,硬腭骨延长约12mm,对照组裂隙无明显变化。结论：设计的硬腭两维牵张器,具有稳定可靠的牵张作用,可以同时关闭裂隙和延长硬腭骨,为修复腭裂提供了一种新的途径。     

应用外科技术建立山羊完全性腭裂模型的研究

目的 选择合适的外科手术方式,建立长期、稳定的完全性腭裂骨缺损动物模型.方法 取2个月龄山羊10只为实验对象,随机分成两个实验组,以两种不同的外科手术技术,形成硬腭部0.5 cm×10 cm全层、全长硬腭骨裂隙.分别在术后1周和32周,观察裂隙软、硬组织形态,并拍摄头颅CT及三维重建.结果 两个实验组山羊手术后均成活,健康状况良好,术后32周后,干骨标本见硬腭裂隙全长仍然存在,无自发骨性愈合,形态上可见裂隙前后较窄中间稍宽,3D-CT测量显示,骨缺损宽度比手术时增大.结论 此两种手术方式建立的腭裂骨缺损动物模型,经长期观察,裂隙均不能自行修复,效果相似.建立腭裂动物模型.具有充分的可行性.     

汉防己甲素对先天性膈疝大鼠模型胎仔肺内表皮生长因子及其受体的影响和意义

目的 探讨中药成分汉防己甲素（tetrandrine,TET）对大鼠先天性膈疝（congenital diaphragmatic hernia,CDH）模型胎仔肺内表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）及其受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的影响和意义。方法 实验组20只雌性SD大鼠于孕9．5d灌胃给予除草醚115mg／只;对照组4只灌胃给等量食用油。孕18．5d,实验组根据给药不同随机分为生理盐水组（normal solution group,NS组）、地塞米松组（dexamethasone group,Dex组）、汉防己甲素组（tetrandringe group,TET组）、地塞米松＋汉防己甲素组（D＋T组）,每组5只。孕21．5d对所有孕鼠行刮宫产,取出胎鼠两侧肺组织行大体观察、HE染色、EGF、EGFR免疫组织化学染色和图像分析。结果 正常对照组共产胎仔36只,无隔疝形成。实验组共产胎仔137只,CDH形成64只,致畸率46．7％。在Dex组、TET组和T＋D组,肺组织处于原始肺泡期或进一步成熟。EGF在NS组、Dex组、TET组、D＋T组及对照组的表达量依次递减（P〈0．05）,而EGFR在NS组、Dex组、TET组、D＋T组和对照组的表达量依次递增（P〈0．05）。结论 TET可使CDH胎鼠肺内EGF表达高峰提前,使EGFR表达上调,TET和Dex联合作用对促进EGF表达高峰提前及EGFR表达上调具有明显的协同效应。TET可以通过调节EGF及EGFR在肺内的表达而实现其促进肺组织细胞发育分化和改善肺血管构型的效应。     

孕羊深低温体外循环对胎羊温度和血流动力学及血气的影响

目的探讨孕羊深低温体外循环(CPB)对胎羊温度、血流动力学和血气的影响。方法5头健康怀孕山羊常规建立CPB,转流降温、复温各1 h。监测孕羊和胎羊的温度、心率、平均动脉压、血气值。结果孕羊最低温度(17．4±1．5)℃,胎羊最低温度(24．6±1．5)℃。降温期胎羊温度始终高于孕羊温度,复温期孕羊-胎羊温差逆转,转流结束胎羊温度低于孕羊温度。降温期胎羊心率逐渐减慢,复温期不能恢复正常心率。低温转流15 min,胎羊pH值从转流开始的7．30± 0．03降到7．17±0．07(P<0．05)、PO_2从转流开始的(32．5±4．0)mmHg(1 mmHg=0．133 kPa)降到(17．5±3．0)mm Hg(P<0．05),PCO_2从转流开始的(44．8±2．2)mm Hg升到(56．8±5．1)mm Hg(P<0．05),BE值从转流开始的(-3．2±0．6)升到(-5．7±1．3)(P<0．05),此后血气值进一步恶化,复温阶段胎羊血气值也没有好转。CPB结束胎羊存活率为60％。结论孕羊深低温CPB 影响胎盘的热交换和气体交换功能,对胎羊存活不利。     

四氯二苯二噁英致胎鼠腭裂作用机制的初步探讨

目的 探讨四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致胎鼠先天性腭裂的可能作用机制.方法 12只C57BL/6J孕鼠于妊娠第10天随机分为实验组和对照组,每组6只,实验组以TCDD 64 μg/kg灌胃,对照组以等量玉米油灌胃,于妊娠第18.5天在解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率.另取18只C57BL/6J孕鼠,于妊娠第10天随机分为实验组和对照组,每组9只,处理方法同前,根据标本采集时间不同,每组又分为妊娠第13.5、14.5和15.5天3个亚组,每个亚组3只,分别于妊娠第13.5、14.5和15.5天剪取胎鼠腭突组织提取RNA和DNA,采用RTPCR检测Smad 2～4及Smad 7 mRNA的表达情况、甲基化特异性PCR(methylmion specific PCR,MSP)检测转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)基因启动子甲基化水平.两样本间均数比较采用t检验.结果 TCDD成功诱导建立C57BL/6J胎鼠先天性腭裂模型,实验组腭裂发生率为100％,对照组无腭裂发生.在妊娠第13.5、14.5和15.5天,RT-PCR显示实验组Smad 2mRNA的相对表达值分别为0.263±0.088、0.296±0.016和0.159±0.027,对照组为0.180±0.042、0.282±0.029和0.165±0.018,差异无统计学意义(t=- 1.474、- 0.762、0.321,P＞0.05);实验组Smad 3 mRNA的相对表达值分别为0.453±0.153、0.551±0.160和0.328±0.049,对照组为0.375±0.126、0.510±0.145和0.259±0.035,差异无统计学意义(t=-0.678、- 0.336、-2.005,P＞0.05);实验组Smad 4 mRNA的相对表达值分别为0.675±0.174、0.577±0.070和0.396±0.066,对照组为0.557±0.138、0.587±0.080和0.441±0.054,差异无统计学意义(t=- 0.926、0.161、0.927,P＞0.05);实验组Smad 7 mRNA的相对表达值分别为0.283±0.050、0.320±0.068和0.169±0.045,对照组为0.207±0.043、0.288±0.051和0.155±0.040,差异无统计学意义(t=-2.003、-0.651、-0.391,P＞0.05).MSP显示实验组和对照组TGF-β3基因启动子均处于非甲基化状态.结论 TCDD可致C57BL/6J胎鼠发生先天性腭裂,其机制不是通过经典的TGF-β/Smad信号通路和TGF-β3基因甲基化修饰而发生作用.     

HA复合rhBMP-2转染的BMSCs对羊胫骨延长骨愈合的影响

目的 评价HA复合rhBMP-2的腺病毒(adenovirus mediated rhBMP-2,Adv-rhBMP-2)转染的羊BMSCs对骨痂延长骨愈合的影响. 方法 成年山羊19只,雌雄不限,体重15～20 kg.于每只羊髂嵴上穿刺抽取骨髓10 mL,常规传代培养BMSCs.取第3代BMSCs,以感染复数200转染腺病毒.取0.25%胰蛋白酶消化转染后3 d的细胞1×108个,与HA充分混匀制备Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA.建立山羊右侧胫骨延长模型,术后立即于截骨部位注射自体细胞复合物.按术后注入物质不同随机分成4组A组为Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA组(n=6),B组为Adv-rhBMP-2/BMSCs组(n=5),C组为Adv-β-gal/BMSCs/HA组(n=4),D组为空白组(n=4).术后第7天开始行胫骨延长,速度1 mm/d,共延长4周.术后5、8、12周摄X线片观察骨痂生长情况,12周处死动物,取标本分别行骨密度检测、生物力学测定、组织学观察和骨形态计量学分析. 结果 X线片检查示,术后5、8周A、B组骨痂生成量明显多于C、D组,X线片定量评分A、B组明显高于C、D组,差异均有统计学意义(P＜0.05);12周各组均在骨延长部位形成连续骨痂.骨密度测定术后12周A、B、C、D组延长部位骨矿物质含量分别为(4.175 ±1.921)、(2.600 ±0.638)、(2.425±0.826)和(1.175 ±0.574)g,骨矿物质密度分别为(0.612 ±0.196)、(0.630 ±0.159)、(0.450 ±0.166)和(0.266 ±0.113)g/cm2,A、B组显著高于C、D组(P＜0.05).生物力学测定A、B、C、D组最大载荷分别为(490.20 ±155.08)、(350.59±80.48)、(221.95±68.79)和(150.65±92.29)N,弹性模量为(178.24±105.80)、(105.88 ±27.09)、(81.18±48.67)和(50.35±47.64)Mpa,各指标A组显著高于C、D组(P＜0.05).组织学观察见A组骨延长处大量新生骨组织,骨小梁多为纵行网状排列.骨形态计量分析示A、B、C、D组新骨体积分别为72.35%±5.68%、67.58%±7.42%、49.63%±4.87%和38.87%±2.35%,A组新生骨生成量明显比D组多(P＜0.05). 结论 HA复合rhBMP-2修饰的BMSCs制备的组织工程骨可促进羊胫骨延长骨愈合.     

黄芪对梗阻性黄疸围手术期肝肾功能的保护作用

目的:研究黄芪注射液对梗阻性黄疸围手术期肝肾功能的保护作用.方法:以经手术证实的64例梗阻性黄疸为研究对象,34例为实验组(黄芪组),术后给予黄芪注射液30 mL加入生理盐水中静脉滴注7～10 d.对照组30例给予常规治疗.结果:术后3 d病人肌酐(Cr)、谷草转氨酶(AST)较术前明显增高,总胆红素(TBIL)、肌酐清除率(Ccr)明显降低;术后7 d,TBIL较术前明显降低,Cr及AST与术前比较差异无显著性,但对照组Ccr较术前仍明显降低,黄芪组内皮素(ET-1)较术前明显降低.两组同时段比较,黄芪组Cr、AST较对照组明显降低,Ccr较对照组明显增高.结论:黄芪注射液对梗阻性黄疸围手术期病人的肝肾功能起保护作用,可能与降低ET-1有关.     

富集骨髓基质干细胞复合多孔β-磷酸三钙促进骨缺损修复的实验研究

目的 评估富集骨髓基质干细胞(BMSCs)复合β-磷酸三钙(β-TCP)在促进骨缺损修复中的作用. 方法 抽取12只崇明山羊骨髓血,用梯度离心法分别将其中的BMSCs富集、分离后与β-TCP复合.12只山羊双侧股骨内髁钻孔,制备骨缺损模型.所有山羊左侧股骨内髁缺损通过富集BMSCs/β-TCP进行局部填充治疗(实验组),其中10只羊右侧股骨内髁缺损以单纯β-TCP颗粒填充治疗(对照组),2只羊右侧股骨内髁缺损旷置(空白组),评价富集效率.术后16周处死取材,将所得标本进行影像学观察和形态学计量,实验组和对照组之间进行比较. 结果 BMSCs富集后有核细胞数和碱件磷酸酶染色呈阳性的细胞集落形成单位(CFUs/ALP+)数均有显著提高,差异有统计学意义(P<0.05).X线侧位片和μ-CT形态计量分析显示实验组新生骨长入率(70.27%±8.47%)显著高于对照组(21.40%±5.77%),差异有统计学意义(t=11.97,P<0.05).X线侧位片、CT平扫与三维重建以及μ-CT图像均可见实验组疗效优于对照组. 结论 在促进骨缺损修复中,富集BMSCs/β-TCP的疗效优于单纯β-TCP颗粒,有良好的应用前景.     

μ受体在抗神经生长因子抗体减轻大鼠骨癌痛中的作用

目的 评价μ受体在抗神经生长因子抗体(anti-NGF)减轻大鼠骨癌痛中的作用.方法 实验一健康雌性SD大鼠60只,体重200～220 g,随机分为4组(n=15):假手术组(S组)、假手术+anti-NGF组(SN组)、骨癌痛组(P组)和骨癌痛+anti-NGF组(PN组).P组和PN组于左侧胫骨上段骨髓腔内注射10μl Walker256乳腺癌细胞(1×105个)制备骨癌痛模型;S组和SN组于左侧胫骨上段注射PBS 10μl.于肿瘤细胞接种后13 d时,进行鞘内置管.鞘内置管成功后3 d,SN组和PN组鞘内注射anti-NGF 10μg(用生理盐水稀释至10μl),S组和P组鞘内注射生理盐水10μl,2次/d,连续5 d.于肿瘤细胞接种前、肿瘤细胞接种后13、16、18、21 d时测定自发缩足次数(NSF)、热缩足潜伏期(PWL)和机械性痛阈(PWT).肿瘤细胞接种后21 d时,处死大鼠,取L4.5段脊髓背角和背根神经节,测定μ受体及其mRNA的表达.实验二健康雌性SD大鼠30只,体重200～220 g,随机分为2组(n=15):骨癌痛+anti-NGF组(PN组)和骨癌痛+纳洛酮+anti-NGF组(PNN组).于左侧胫骨上段骨髓腔内注射10μlWalker256乳腺癌细胞(1×105个)制备骨癌痛模型.于肿瘤细胞接种后13 d时,进行鞘内置管.鞘内置管成功后3 d,PN组鞘内注射鞘内注入anti-NGF 10μg(生理盐水稀释至25μl);PNN组鞘内注射纳洛酮10μg(生理盐水稀释至25μl),0.5 h后,鞘内注射anti-NGF 10μg(生理盐水稀释至25 μl),2次/d,连续5 d.于肿瘤细胞接种前、肿瘤细胞接种后13、16、18、21 d时测定大鼠NSF、PWL和PWT.结果 实验一与S组比较,SN组NSF、PWL和PWT差异无统计学意义,SN组和PN组μ受体及其mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),P组和PN组瘤细胞接种后13～21 d时NSF增加,PWL缩短,PWT降低,P组μ受体及其mRNA表达下调(P＜0.05或0.01);与P组比较,PN组肿瘤细胞接种后18～21 d时NSF减少,PWL延长,PWT升高,μ受体及其mRNA表达上调(P＜0.05或0.01).实验二与PN组比较,PNN组肿瘤细胞接种后18～21 d时NSF增加,PWL缩短,PWT降低(P＜0.05或0.01).结论 anti-NGF减轻大鼠骨癌痛与μ受体的激活有关.     

小剂量环孢素A联用细胞毒T淋巴细胞A4-Ig治疗器官移植排斥反应

目的　研究小剂量环孢素A(CsA)联用细胞毒T淋巴细胞A4 Ig(CTLA4 Ig)治疗器官移植排斥反应的效果。　方法　采用Ono′s方法建立大鼠心脏移植排斥反应动物模型 ,将实验动物分为 4组。A组 :对照组 ,未给予任何治疗 ;B组 :腹腔内注射CsA ,10mg·kg-1·d-1,连续 7d ;C组 :术后第 2天 1次性注射CTLA4 Ig 10 0 μg ;D组 :术后 1～ 7d连续腹腔内注射CsA ,2mg .kg-1.d-1,术后第 2天加用CTLA4 Ig 5 0 μg。观察移植心脏存活天数及术后IL 2含量和组织学变化。　 结果　A、B、C、D 4组大鼠移植心脏存活时间分别为 ( 7 2± 0 7)、( 19 4± 2 1)、( 3 1 6± 1 8)和 ( 2 4 6± 2 1)d ,与对照组相比 ,各治疗组大鼠心脏存活时间明显延长 ,差异有显著性意义 (q =3 2 7 83 ,P <0 0 5 ) ,D组与C组相比差异无显著性意义 (q =1 86,P >0 0 5 ) ;各治疗组术后IL 2含量明显减低 ,与对照组相比差异有非常显著性意义 (q=9 82 ,P <0 0 1) ;A、B、C和D组排斥反应分级分别为Ⅳ、Ⅲ、Ⅰ和Ⅰ级。　结论　CTLA4 Ig抗排斥反应能力比CsA强 ,小剂量CsA联合使用CTLA4 Ig能增强治疗排斥反应疗效 ,两者具有正协同作用。     

CTLA4-Ig对肝细胞移植大鼠免疫耐受的作用及其机制

目的 探讨细胞毒性淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4-Ig)诱导肝细胞移植大鼠免疫耐受的作用及机制.方法 10%D-氨基半乳糖(D-gal)一次性腹腔注射建立大鼠急性药物性肝衰竭模型;采用肝脏原位灌注法分离纯化肝细胞,经脾脏移植后随机分为两组.实验组腹腔一次性注射CTLA4-Ig,对照组不予处理.两组均分别于术后第1、3、5、7天采外周血观察白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)及肝功能变化;术后1周测两组大鼠外周血T细胞亚群,处死大鼠后取脾脏苏木素-伊红(HE)染色.结果 实验组谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBil)于术后第7天分别为(6.5±7.3)IU/ml、(5.1±1.6)mmol/L,低于对照组.术后治疗组IL-2含量明显下降,第7天达到(1. 3138±0.8508)ng/L,两组差异有统计学意义(P＜0.05);术后TNF含量两组之间差异无统计学差异(P＞0.05).外周血CD4+T细胞、CD4+/CD8+T细胞实验组分别为(37.3±7.2)%、(1.5±0.1)%,低于对照组(P＜0.05),CD8+T细胞两组差异无统计学意义(P＞0.05).术后第7天治疗组脾内仍可见肝细胞或肝细胞团,对照组见大量淋巴细胞浸润,但很少见肝细胞.结论 CTLA4-Ig能诱导经脾同种异体肝细胞移植大鼠免疫耐受,使急性肝衰大鼠肝功能得到改善.可能是抑制T淋巴细胞亚群,且主要是抑制CD4+T细胞,使CD4+/CD8+T细胞比值下降;抑制IL-2的分泌.

Abstract：

Objective To investigate the immunosuppressive effect of cytotoxic T Iymphocyte associated antigen 4 Ig fusion protein (CTLA4-Ig) in rat allograft hepatocyte transplantation model and the mechanisms. Methods Acute liver failure (ALF) model was established by intraperitoneal injection of 10% D-gal solution to SD rates. Collagenase perfusion was performed on SD rats to separate liver cells. SD rats with ALF were subjected to intrasplenic hepatocyte transplantation and randomly divided into two groups. The experimental group received intraperitoneal injection of CTLA4-Ig. The concentrations of interleukin (IL)-2 and tumor necrosis factor (TNF), liver function and histologicy were observed at the 1st,3rd, 5th, 7th day after operation and the T lymphocyte subsets were detected by using immunohistochemistry at the 7th day after operation. Results The levels of ALT and TBil were respectively (6. 5 ±7.3) IU/ml and (5.1 ± 1.6) mmol/L at the 7th day after operation and significantly decreased after injection of CTLA4-Ig ( P ＜ 0. 01 ). IL-2 concentration in the experimental group was ( 1.3138 ± 0. 8508 ) ng/L at the 7th day after operation and significantly decreased (P ＜0. 05). TNF had no significant difference between two groups after operation ( P ＞ 0. 05 ). T lymphocyte subsets, mainly CD4 + , in the experimental group was significantly decreased as compared with control group ( P ＜ 0. 05 ), so did the CD4 +/CD8 +. Histological changes: At the 7th day after operation, there were some hepatocytes in the spleen of the experimental group. But in the control group, the changes in the spleen were characterized by severe lymphocyte infiltration. There were no hepatocytes both groups. Conclusion CTLA4-Ig can induce rat allogeneic hepatocytes intrasplenic transplantation immune tolerance. It may improve the liver function of rats with ALF.CTLA4-Ig can decrease T lymphocyte subsets, mainly CD4 + and concentrations of IL-2.     

叩击式骨应力刺激仪预防废用性骨质疏松的实验研究

目的通过建立一种新的废用性骨质疏松山羊模型,观察叩击式骨应力刺激仪预防废用性骨质疏松的效果。方法4月龄山羊18只,随机分组:①对照组,②废用组,③治疗组。废用组和治疗组切断右侧坐骨神经。治疗组术后运用叩击式骨应力刺激仪进行治疗,叩击力为100N,频率为3Hz。每天3次,每次60min,每次间隔3h。治疗2～4个月后分别检测和分析山羊右侧胫骨骨密度、组织学及生物力学的变化。结果同对照组和治疗组相比,废用组胫骨的骨密度值及生物力学性能明显下降(P0.01);而治疗组与对照组也有差别(P0.05)。表现为:对照组治疗组废用组。组织病理学检查提示:HE染色见废用组骨小梁较对照组和治疗组明显减少、变细。Masson染色结果表明废用组骨基质矿化不良,骨基质中矿物成分较对照组和治疗组明显减少。结论切除山羊一侧坐骨神经可以建立起废用性骨质疏松模型。叩击式骨应力刺激仪对废用性骨质疏松有明显的防治效果。     

山羊腰椎内固定术中椎弓根螺钉植入深度对邻椎的影响

目的：观察脊柱内固定术中不同椎弓根螺钉植入深度对邻椎生物力学环境和退行性变的影响,探讨椎体内固定强度与邻椎病发生的关系。方法：雄性10月龄玻尔杂交山羊16只,体重为25～30 kg,随机分为对照组(N组)和3组内固定组,每组4只。内固定组建立L₄脊柱不稳定骨折病理模型,以椎弓根螺钉内固定脊柱L₃-L₅节段,按螺钉长度不同分为：长钉组(L组),内固定螺钉长度为25 mm; 中钉组(M组),螺钉长度为20 mm; 短钉组(S组),螺钉长度为15 mm,内固定后进行后路小关节融合;对照组不作任何处理。术后24周,制备对照组与内固定组L₃-S₁腰椎标本,测量上位未融合椎体(L₂)和椎间盘应变和应力,进行影像学、组织学观察,计算MRI指数。结果：与N组相比,L组标本L₂节段椎体、椎间盘的活动和应力均增加(P<0.05),MRI指数未见显着改变(P>0.05),髓核中出现多数退变细胞。M、S组标本上位邻椎受力和髓核退行性改变发生情况不显着(P>0.05).结论：在山羊腰椎内固定融合术中,局部坚强固定可能增加上位未融合节段的活动和承受的应力,促进椎间盘退行性变,导致邻椎病的发生。