经瞳孔温热疗法对大鼠视神经钳夹视网膜神经节细胞的保护作用

目的探讨经瞳孔温热疗法（TTT）阈下反应对BN大鼠视神经钳夹后视网膜神经节细胞（RGCs）的保护作用。方法采用阈下TTT对BN大鼠视网膜进行照射后3d,通过逆行标记RGCs的方法,对TTT＋视神经钳夹组（A组）、TTT＋假手术组（B组）、单纯视神经钳夹组（C组）和空白对照组（D组）在视神经钳夹后1、2、4周进行RGCs计数并比较;检测视网膜TTT阈下反应的热休克蛋白70（HSP70）表达;观察TTT阈下反应对视网膜的影响。结果视神经钳夹后4周,A组RGCs数显著高于C组（P=0.006）,而1周和2周时2组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;各时间点B组和D组的RGCs数差异无统计学意义（P〉0.05）。视网膜经阈下TTT干预后,HSP70表达高于对照眼。阈下TTT照射能引起视网膜组织形态上的改变。结论阈下TTT可显著提高视神经钳夹4周后RGCs的存活数量;其保护机制可能与诱导视网膜内源性HSP70表达、启动内源性保护机制有关。     

糖尿病大鼠视网膜神经细胞损伤机制的研究

目的 观察糖尿病大鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体（GLAST）、谷氨酰胺合成酶（GS）及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化、视网膜神经细胞凋亡的检测以及神经营养因子NT-3的表达,探讨糖尿病（DM）对视网膜神经细胞损伤的机制。设计 实验研究。研究对象 Sprague-Dawley（SD）大鼠82只。 方法 大鼠随机分为正常对照组12只,糖尿病模型组70只。链脲佐菌素诱导实验性DM大鼠模型。RT-PCR法检测视网膜GFAP mRNA表达水平;TUNEL法检测视网膜神经节细胞（RGC）及内核层细胞的凋亡并计数凋亡细胞数量;免疫组织化学技术LSAB法检测GFAP、GLAST、GS、NT-3在视网膜的表达,观察DM大鼠视网膜RGC及内核层细胞功能的改变,用图像分析仪测量免疫组化的显色强度。主要指标 GFAP、GLAST、GS和NT-3的表达量,视网膜内核层和RGC细胞凋亡数。结果 （1）与正常组（1.00±0.02）相比,模型组GFAP阳性表达量（5.22±1.34）明显增加（P=0.000）, GLAST、GS、NT-3阳性表达明显降低。（2）大鼠视网膜凋亡阳性细胞仅见于RGC层和内核层,模型组视网膜内核层细胞及RGC凋亡数量（36.00±6.02,11.48±2.08）比正常组（16.33±2.34,5.34±0.52）显著增加（P均=0.000）。（3）DM大鼠视网膜GFAP mRNA表达（7.00±0.37）比正常组（0.29±0.08）明显增加（P=0.000）。（4）GFAP阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈正相关（r=0.88、0.85,P=0.021、0.028 ）;GLAST阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关（r=-0.91、-0.89, P=0.014、0.020）,GS阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关（r=-0.93、-0.90, P=0.007、0.009）;NT-3阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关（r=-0.74、-0.71, P=0.036、0.041）。结论  糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡增加与Müller细胞的过度反应性增生及神经营养因子的缺失有关,高浓度谷氨酸的兴奋性毒性作用以及神经营养因子NT-3的缺失是其视网膜神经细胞损伤的重要机制。     

金雀异黄酮对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的　探讨金雀异黄酮（GEN）对大鼠视网膜缺血-再灌注（I/R）损伤的保护作用。方法　选取30只健康SPF级大鼠，按照随机数字表法将其分为假手术组、I/R组和I/R+GEN组，每组各10只。I/R组和I/R+GEN组大鼠采用前房灌注生理盐水升高眼压法制备视网膜I/R损伤大鼠模型，I/R组大鼠术后每天给予注射生理盐水（1 mL·kg^-1·d^-1）；I/R+GEN组大鼠术后每天给予注射GEN （40 mL·kg^-1·d^-1）；假手术组大鼠行相应假手术后每天予以注射生理盐水（1 mL·kg^-1·d^-1），连续7 d后，颈椎脱臼法处死各组大鼠，取眼部组织。HE染色观察各组大鼠视网膜的形态以及内丛状层（IPL）、内核层（INL）和神经节细胞层（GCL）厚度；免疫荧光分析观察各组大鼠视网膜神经节细胞（RGC）的存活率；TUNEL染色检测各组大鼠视网膜细胞凋亡水平；检测各组大鼠视网膜组织中过氧化氢酶（CAT）、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平以反映视网膜氧化应激状态；Western blot分析三组大鼠视网膜中NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达。结果　I/R组、I/R+GEN组和假手术组大鼠视网膜总厚度分别为(114.37±7.32）μm、（155.31±6.83）μm和（178.98±13.65）μm（t=14.284，P<0.01），I/R组低于假手术组和I/R+GEN组，差异均有统计学意义（均为P<0.01）。I/R组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为（18.95±5.06）μm、（17.62±4.69）μm和（19.03±4.74）μm，I/R+GEN组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为（20.69±8.13）μm、（25.74±6.78）μm和（26.71±7.85）μm，假手术组大鼠视网膜IPL、INL和GCL厚度分别为（11.73±3.15）μm、（11.97±3.56）μm和（12.59±3.24）μm（均为P<0.05），I/R组与假手术组和I/R+GEN组三个指标比较差异均有统计学意义（均为P<0.01）。I/R组、I/R+GEN组和假手术组大鼠视网膜中RGC相对存活率分别为（26.87±3.12）%、（73.46±7.80）% 和（100.00±5.64）%（t=16.825，P<0.01），I/R组RGC相对存活率低于假手术组和I/R+GEN组，差异均有统计学意义（均为P<0.01）。I/R组、I/R+GEN组和假手术组大鼠视网膜中CAT、MDA、SOD含量总体比较差异均有统计学意义（均为P<0.01），I/R组与I/R+GEN组和假手术组三个指标比较差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示，三组大鼠视网膜中NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达总体比较差异均有统计学意义（均为P<0.01），组间两两比较差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　GEN可通过提高视网膜细胞抗炎和抗氧化能力抑制视网膜细胞凋亡，从而起到对大鼠视网膜I/R损伤的保护作用。     

热休克蛋白72对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的探讨热休克蛋白72(heat shock proteiu,11SP 72)对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞(1GCs)损伤的保护作用.方法右眼前房内灌注平衡盐溶液制作大鼠急性高眼压性RGC损伤模型;用热休克反应或腹腔内注射硫酸锌诱导模型大鼠RGCs中HSP 72表达,观察HSP72表达以后,模型大鼠RGC密度的改变情况,并与术处理的模型大鼠RGC密度相比较.结果正常大鼠RGC密度为2 504±181个/mm2;急性高眼压模型大鼠RGC密度为2 015±111个/mm2.热休克反应组和硫酸锌注射组RGC密度分别为2 207±200个/mm2和2 262±155个/mm2,显著高于模型组(P热休克=0.036,P硫酸锌=0.019);IISP 72阴性对照组与模型组RGC密度差异无显著意义(P槲皮黄酮 热休克=0.260,P槲皮黄酮 硫酸锌=0.748).结论热休克反应和腹腔内硫酸锌注射在急性高眼压模型大鼠RGCs中诱导产生的HSP72;可能对急性高眼压性RGC损伤具有保护作用.     

MK-801对大鼠慢性高眼压视网膜神经节细胞的保护作用

目的：探讨MK-801对大鼠慢性高眼压视网膜神经节细胞(retinal ganglial cells, RGC)的保护作用。 方法：制备SD大鼠慢性高眼压模型,36只SD大鼠随机分为空白对照组、慢性高眼压＋生理盐水对照组、慢性高眼压＋MK-801处理组,各组12 只。观察并比较各组大鼠在不同时间点（处理后1, 4, 7和10d）谷氨酸含量、视网膜总厚度和内层厚度、RGC数目及RGC凋亡情况。 结果：在各时间点,慢性高眼压大鼠（MK-801处理组和生理盐水对照组）视网膜谷氨酸含量均较空白对照组高（P<0.05）; MK-801处理组视网膜谷氨酸含量比同期生理盐水对照组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。HE染色表明MK-801处理组和空白对照组视网膜总厚度和内层厚度均大于生理盐水对照组（P＜0.05）,RGC数目高于生理盐水对照组（P＜0.05）。MK-801处理组RGC 层凋亡阳性细胞的表达少于生理盐水对照组。 结论：MK-801可通过阻断谷氨酸介导的神经毒性作用,对慢性高眼压RGC起到保护作用。     

川芎嗪对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 研究川芎嗪对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(retina ganglion cells,RGC)凋亡的保护作用.方法 健康SD大鼠30只,随机分为正常组、高眼压组和川芎嗪治疗组,每组10只.高眼压组和治疗组分别采用上巩膜静脉烧灼法制作高眼压模型,正常对照组不做处理.造模成功后7d治疗组给予川芎嗪腹腔注射,正常组与高眼压组给予等量的生理盐水腹腔注射.造模3周后取三组大鼠眼球,行视网膜HE染色、TUNEL原位细胞凋亡检测和Bcl-2免疫组织化学检测.结果 造模后高眼压组、川芎嗪治疗组各时间点眼压与正常组比较,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05),而两组间各时间点比较,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).正常组、高眼压组、川芎嗪治疗组大鼠视网膜RGC层TUNEL阳性细胞数分别为0、9.00±0.89、3.50±1.89,三组间差异有统计学意义(F =86.160,P=0.000);三组间两两比较,差异均有统计学意义(均为P =0.000).三组大鼠RGC层Bcl-2阳性表达光密度值分别为0.373±0.090、0.375±0.146、0.390±0.268,三组差异有统计学意义(F=84.658,P=0.000);三间组两两比较,差异均有显著统计学意义(均为P=0.000).结论 川芎嗪通过上调Bcl-2蛋白的表达可明显抑制慢性高眼压大鼠RGC凋亡,从而发挥RGC保护作用.     

微脉冲半导体激光照射对正常大鼠视网膜损伤的观察

目的观察810 nm微脉冲半导体激光照射对正常棕色挪威大鼠（BN 大鼠）视网膜的损伤。方法使用不同能量及负载系数（duty cycle, D C）的810 nm微脉冲半导体激光对130只BN大鼠眼进行照射。分别于激光照射后第1、3、7、1 4、28 d进行彩色眼底照相、荧光素眼底血管造影及组织病理学观察，并检测热休克蛋白(HSP-70)在视网膜的表达情况，用TdT介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检查细胞凋亡 。结果阈值及阈上能量条件下，低DC时激光照射部位无光学显微镜下的组织病理学改变，高DC时出现可累及视网膜内核层组织的严重损伤；微脉冲半导体激光照 射后1 d大鼠视网膜内核层细胞HSP-70阳性表达细胞即较正常视网膜明显增加，3 d时达到高峰，以后逐渐下降，14 d时恢复近正常水平。HSP-70阳性细胞数量 随激光能量提高而增加。TUNEL染色可见激光照射部位凋亡细胞主要存在于视网膜色素上皮（RPE）层、外核层、内核层，甚至脉络膜层，其数量随激光能量增高而增多。在激光照射后第3 d，凋亡细胞数量最多。结论810 nm微脉冲半导体激光照射后，视网膜损伤程度与激光能量及DC呈正相关。低能量高负载系数（50 mW，50％）或高能量低负载系数（100 mW，5％～15％）时，损伤限于RPE层，避免了神经上皮层的损伤。激光照射后HSP-70高表达及细胞凋亡可能在组织损伤修复过程发挥重要作用。 （中华眼底病杂志，2008，24：122-126）     

阈下能量经瞳孔热疗对正常大鼠视网膜的影响

目的 研究正常棕色挪威大鼠(BN大鼠)视网膜在810 nm激光阈下能量经瞳孔热疗(TTT)后的改变。方法 雄性BN大鼠36只，使用810 nm激光，采用不同阈下能量对BN大鼠进行TTT。分别于TTT后第1、3、7、14 d进行彩色眼底照相和眼底荧光造影(FFA)。TTT后6、12h，1、3、7、14d各处死6只大鼠，进行组织病理学观察。6、12h和1 d的组织用TdT介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检查细胞凋亡。结果 TTT后第1 d可见大部分光斑处视网膜灰白色水肿。第3 d视网膜水肿减轻，RPE脱色素。其后视网膜逐渐出现色素沉着。FFA中可见到不同程度的高荧光。组织病理学切片上可见所有在眼底照相上曾出现灰白水肿的病灶，视网膜结构均有显著破坏。TUNEL染色可见视网膜全层均有细胞凋亡。TTT能量最低组6 h时凋亡细胞最多；激光斑旁视网膜较激光斑中央视网膜凋亡细胞多。结论 TTT阈下能量可引起不可逆的视网膜损伤，即使无病理改变也能引起视网膜细胞的凋亡。     

经瞳孔温热疗法诱导大鼠热休克蛋白60在视盘中的表达

目的探讨经瞳孔温热疗法（TTT）阈下刺激诱导大鼠视盘中热休克蛋白（HSP）60的表达,探讨TTT对视盘组织超微结构的影响。方法采用810nm二极管激光对12周龄的BN大鼠56只右眼视盘进行阈值下TTT照射,选择激光参数为光斑直径0.5mm、持续时间60s、能量60mW;另设8只正常大鼠为对照。实验鼠分别于TTT照射后24h、72h和1周过量麻醉处死,实验眼的视盘组织切片制备后应用免疫组织化学染色法鉴别BN大鼠视盘TTT照射后HSP60的表达;Western blot法对TTT干预后HSP60在视盘组织中的表达进行半定量分析,并以吸光度（A）值表示。透射电镜下观察TTT照射后1周实验眼视盘组织的超微结构变化。结果免疫组织化学染色显示,HSP60在正常大鼠视盘局部呈弱阳性表达,TTT干预后24h、72h及1周HSP60的阳性染色明显增强,72h最强;Western blot蛋白质表达半定量分析显示,HSP60在正常大鼠视盘中的表达量为21458.13±156.32,在TTT干预后24h、72h及1周表达量分别为46907.24±10099.20、61848.02±2714.49、40738.01±5670.12,较正常大鼠视盘中的表达量明显上调,差异均有统计学意义（t=0.002、t=0.000、t=0.001,P〈0.01）,72h表达最强。阈下TTT干预后1周透射电镜下可见视盘神经纤维轴索部分髓鞘板层离散,个别轴索神经微丝、微管有溶解现象,有轻度轴膜下水肿,但神经纤维密度无明显减少。结论 TTT阈下刺激可诱导大鼠视盘中HSP60的表达,并对正常组织的超微结构产生轻度影响。     

金丝桃素对兔急性高眼压视网膜的保护作用

目的 探讨蛋白激酶C抑制剂金丝桃素对兔急性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响以及对视网膜的保护作用.方法 将新西兰大白兔随机分成处理组、对照组和正常组.处理组向玻璃体腔内注射0.1 mL的金丝桃素,对照组向玻璃体腔内注射0.1 mL生理盐水,48 h后经前房灌注升高眼压达100 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),持续90 min,24 h后取材.正常组不做上述处理直接取材.高效液相色谱法检测视网膜谷氨酸含量;光镜、电镜观察视网膜超微结构的变化,并采用医学图像分析系统计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)、测量视网膜总厚度及内层厚度;TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡.结果 处理组、对照组和正常组视网膜谷氨酸含量分别为(56.6±2.1)×10-6 mmol·g-1、(84.1±2.7)×10-6 mmol·g-1和(17.1±2.3)×10-6 mmol·g-1,处理组视网膜谷氨酸含量明显低于对照组(P＜0.05);3组长450 μm视网膜片段的RGC数分别为(22.30±0.83)、(15.50±0.56)和(25.50±0.67),处理组和正常组RGC数均明显高于对照组(P＜0.05),而RGC层及内核层内凋亡的细胞数明显少于对照组.结论 金丝桃素能减缓兔急性高眼压视网膜谷氨酸水平的升高、减轻RGC的凋亡,对视网膜具有一定的保护作用.     

不同激光强度经瞳孔温热疗法对色素兔视网膜细胞凋亡的影响

目的 观察不同激光能量的经瞳孔温热疗法（TTT）对色素兔视网膜的病理损伤及对细胞凋亡的影响。 方法 将14只有色家兔随机按不同激光能量分为空白组、50、70、90、110、130、150 mW组，每组2只兔4只眼行TTT治疗照射后,分别于24、48 h后取视网膜组织进行光学显微镜检查及用原位末端转移酶标记（TUNEL）技术和流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果 直接检眼镜下激光反应斑颜色随能量增加由灰变白逐渐变浅，即由灰白——白——浓白，直径逐渐增大。苏木素 伊红（HE）染色：50~70 mW组光学显微镜下视网膜各层结构无明显改变；90~130 mW组视网膜结构完整,视锥、视杆细胞肿胀，内颗粒层可见少量的固缩核和细胞浆空泡化。以上能量组激光照射后24、48 h，光学显微镜下视网膜结构与空白对照组无明显差别。150 mW组激光照射后24 h视网膜组织各层肿胀、变性，感光细胞内外节部分缺失；而激光照射后48 h视网膜组织可见明显坏死，全层均可见细胞缺失。TUNEL检测结果显示，各能量组外颗粒层均可见阳性细胞，随激光能量的增加而增加，并逐渐累及内颗粒层和神经节细胞层。流式细胞仪检测结果显示，激光照射后24 h，各能量组均可见细胞凋亡峰。 结论 兔视网膜在能量为50~70 mW的TTT照射后，视网膜组织未见明显改变，但感光细胞凋亡显著增加。随着TTT激光能量增加，视网膜组织出现肿胀、变性甚至坏死。细胞凋亡逐渐累及内颗粒层和神经节细胞层。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 249-252)     

Protective effects of catalase on retinal ischemia/reperfusion injury in rats

Retinal ischemia/reperfusion (I/R) injury causes profound tissue damage, especially retinal ganglion cell (RGC) death. The aims of the study were to investigate whether catalase (CAT) has a neuroprotective effect on RGC after I/R injury in rats, and to determine the possible antioxidant mechanism. Wistar female rats were randonmized into four groups: normal control group (Control group), retinal I/R with vehicle group (I/R with vehicle group), retinal I/R with AAV-CAT group (I/R with AAV-CAT group), and normal retina with AAV-CAT group (normal with AAV-CAT group). One eye of each rat was pretreated with recombinant adeno-associated virus containing catalase gene (I/R with AAV-CAT group or normal with AAV-CAT group) and recombinant adeno-associated virus containing GFP gene (I/R with vehicle group) by intravitreal injection 21 days before initiation of I/R injury. Retinal I/R injury was induced by elevating intraocular pressure to 100 mmHg for 1 h. The number of RGC and inner plexiform layer (IPL) thickness were measured by fluorogold retrograde labeling and hematoxylin and eosin staining at 6 h, 24 h, 72 h and 5d after injury. Hydrogen peroxide (H₂O₂), the number of RGC, IPL thickness, malondialdehyde(MDA), 8-hydroxy-2-deoxyguanosine (8-OHdG), CAT activity and nitrotyrosine were measured by fluorescence staining, immunohistochemistry and enzyme-linked immunosorbent assay analysis at 5 days after injury. Electroretinographic (ERG) evaluation was also used. Pretreatment of AAV-CAT significantly decreased the levels of H₂O₂, MDA, 8-OHdG and nitrotyrosine, increased the catalase activity, and prevented the reduction of a- and b- waves in the I/R with AAV-CAT group compare with the I/R with vehicle group (p < 0.01). Catalase attenuated the I/R-induced damage of RGC and IPL and retinal function. Therefore, catalase can protect the rat retina from I/R-induced injury by enhancing the antioxidative ability and reducing oxidative stress, which suggests that catalase may be relevant for the neuroprotection of inner retina from I/R-related diseases.     

577nm阈下微脉冲激光与577nm激光光凝对兔视网膜组织影响的比较

背景 近年来研究表明,577 nm阈下微脉冲激光治疗视网膜疾病可达到传统577 nm激光光凝的治疗作用且对视网膜组织损伤小,但其具体作用机制和敏感的靶细胞尚未完全阐明. 目的 探讨和比较577 nm阈下微脉冲激光与577 nm激光光凝视网膜后成年中华黑兔视网膜组织形态学变化,为577 nm阈下微脉冲激光光凝在临床上的应用提供依据.方法 采用抽签法按照视网膜光凝条件不同将26只中华黑兔分为正常对照组(2只)、577 nm激光组(6只)和阈下微脉冲激光组(18只),其中阈下微脉冲激光组按照激光工作负载率的不同亚分为9％、12％和15％阈下微脉冲激光组,每组各6只,正常对照组不做任何处理.光凝后行彩色眼底照相及OCT检查,摘取兔眼球壁行苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察兔脉络膜和视网膜组织结构的变化.结果 彩色眼底照相和OCT显示正常对照组兔眼视网膜组织结构清晰.9％阈下微脉冲激光组OCT扫描可见视网膜神经上皮层稍模糊;12％阈下微脉冲激光组光凝斑处视网膜神经上皮层轻度水肿,视网膜色素上皮(RPE)层稍模糊;15％阈下微脉冲激光组可见光凝斑处视网膜神经上皮层明显水肿,RPE层局限性隆起;各阈下微脉冲激光组彩色眼底照相均未见光凝斑.577 nm激光组兔眼彩色眼底照相可见灰白色光凝斑,OCT扫描层面可见视网膜呈多灶性隆起,视网膜各层组织结构模糊,伴浆液性神经上皮层脱离.视网膜组织病理学检查可见,与正常对照组兔眼相比,9％和12％阈下微脉冲激光组兔眼脉络膜血管变形或出血,但视细胞形态结构、双极细胞层和视网膜神经节细胞(RGC)层未见明显改变;15％阈下微脉冲激光组视细胞扁平状膜盘肿胀,双极细胞层和RGC层未见明显改变;577 nm激光组兔眼视细胞层、双极细胞层和RGC层结构紊乱,RPE层变薄.结论 577 nm阈下微脉冲激光对脉络膜层和RPE层具有高度选择性,视网膜光凝后对视网膜神经上皮层的损伤程度轻微,既可发挥治疗作用,又不损伤视网膜神经上皮;577 nm激光视网膜光凝可对视网膜全层造成损伤.     

恒河猴经瞳孔温热疗法与热休克蛋白相关研究

目的探讨恒河猴经瞳孔温热疗法（transpupillary thermotherapy，TTT）治疗后视网膜和脉络膜组织热休克蛋白70（heat shock protein 70，HSPT0）表达。方法利用恒河猴做动物模型。于1TIrr治疗后不同时间点（1h、1d、1周、2周、1月、4月）摘除双眼固定。应用免疫组化技术，分析TTT治疗对猴眼视网膜和脉络膜组织HSP70的影响。结果TTT治疗后，于1d起，在强反应光斑边缘视网膜和脉络膜有HSP70的表达，4个月时仍有弱表达。弱反应光斑1d时，在视网膜全层及脉络膜均有HSP70表达，4个月时消失。同时,TTT治疗可以引起视网膜不同程度组织病理学的损害。结论TTT可以引起视网膜、脉络膜组织病理学损害。局部温度的升高会诱导视网膜、脉络膜内源性HSP70的产生，并且这种表达在激光治疗后1～4个月的猴眼中仍可以存在。     

Interleukin-6 in retinal ischemia reperfusion injury in rats

PURPOSE: To study the role of interleukin (IL)-6 after retinal ischemia-reperfusion (I/R) injury in rats. METHODS: Intraocular pressure of adult male Lewis albino rats was raised to create retinal ischemia for 1 hour. Retinal reperfusion was reestablished, and the animals were killed at various time points after the injury. Their eyes were enucleated and processed for immunohistochemistry to detect IL-6 and ED-1 (a marker of microglial/phagocytic cells), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) of IL-6 protein, and semiquantitative real-time RT-PCR for IL-6 mRNA. The neuroprotective effect of IL-6 was evaluated by giving intravitreal injections of 150 or 300 ng rat recombinant IL-6 to eyes immediately after I/R injury and counting cresyl violet-stained retinal ganglion cell layer cells (RGCLCs) and fluorochrome-labeled retinal ganglion cells (RGCs) on flat preparations of retinas at 7 days. RESULTS: IL-6-positive cells appeared after I/R injury in the inner plexiform layer (IPL) and the inner nuclear layer (INL). Their numbers were significantly higher 18 hours after the injury, and most of these cells were also ED-1 positive. ELISA showed noticeable increases in endogenous retinal IL-6 protein levels 8 hours after I/R injury. Semiquantitative real-time RT-PCR showed significant increases in endogenous retinal IL-6 mRNA levels between 2 and 18 hours. Exogenously added IL-6 prevented between 50% and 70% of RGC loss after I/R injury. CONCLUSIONS: IL-6 is upregulated after retinal I/R injury, and its expression by microglia/phagocytic cells may protect RGC layer neurons from I/R injury. Exogenously added IL-6 protects the inner retina after I/R injury.     

经瞳孔温热疗法后视网膜和脉络膜的细胞凋亡研究

目的探讨经瞳孔温热疗法（TTT）对视网膜、脉络膜层细胞凋亡表达的影响。方法利用恒河猴做动物模型，于治疗后不同时间点摘除双眼。应用组织学及TUNNEL检测技术，研究TTT治疗与细胞凋亡的相互关系，及对视网膜、脉络膜的组织病理学影响。结果正常猴眼视网膜及脉络膜均未见细胞凋亡发生。TTT治疗后，可见光斑中央细胞坏死、周边细胞凋亡发生。1h至4周，均可见凋亡阳性细胞，4个月时，仍可见少量凋亡细胞存在。同时，TTT治疗可引起视网膜不同程度的组织病理学损害。结论TTT可引起视网膜组织病理学损害。局部温度的升高会诱导视网膜脉络膜细胞凋亡的产生，减少坏死和炎症的程度。     

腺病毒载体介导的色素上皮衍生因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察重组腺病毒介导的色素上皮衍生因子(Ad-PEDF)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:选用健康大鼠96只,随机分为正常组、缺血再灌注组、缺血再灌注+Ad-CMV组,缺血再灌注+Ad-PEDF组,以前房加压的方法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型,缺血再灌注+Ad-CMV组,缺血再灌注+Ad-PEDF组分别玻璃体腔注射Ad-CMV或Ad-PEDF1μL(滴度3.8×109/PFU),每组按照时间点12,24,72,168h,为4亚组,光学显微镜观察视网膜组织切片情况,并测量视网膜内层厚度及神经节细胞层神经节细胞数量。以TUNEL方法观察大鼠视网膜神经节细胞凋亡情况。结果:Ad-PEDF组视网膜内层厚度均超过缺血组及缺血+Ad-CMV组,Ad-PEDF组神经节细胞数目多于缺血组及Ad-CMV组,Ad-PEDF组视网膜神经节细胞凋亡细胞少于缺血组及Ad-CMV组,凋亡程度减轻,上述差异均具有显著性(P<0.05)。结论:腺病毒介导的色素上皮衍生因子玻璃体腔注射能够恢复大鼠视网膜缺血再灌注损伤所致的视网膜内层厚度降低,神经节细胞密度减少,具有保护作用。