河南省结核分枝杆菌药物敏感性测试质量控制结果分析

目的 评价河南省Mtb药物敏感性测试的质量,规范并完善河南省结核病实验室药物敏感性室间质量保证体系。 方法 河南省6个受评估实验室按照《结核病诊断实验室检测规程》中比例法药敏试验要求对河南省结核病参比实验室下发的一线及二线药敏测试菌株58株进行比例法药敏试验,试验结果均报河南省结核病参比实验室(PRL),由PRL与标准结果比较并进行统计学分析。 结果 一线药物INH、RFP、S和EMB的一致性分别为91.0%（151/166）、95.8%(159/166)、89.2%(148/166)和77.1%(128/168);二线药物平均一致性达到了94.9%(683/720)。 结论 河南省6个评估实验室一线药的INH和RFP及四种二线药物敏感性检测均达到WHO和国家要求,EMB的敏感性检测水平有待进一步提高。     

噻唑蓝和刃天青法在一线抗结核药物药敏试验中的应用

目的评价噻唑蓝（3．（4,5-二甲基噻唑）-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝,MTT]和刃天青（resazurin）2种快速而价廉的药敏试验方法进行一线抗结核药物的药敏试验的可行性。方法分别用MTT和刃天青2种微孔板方法对64株结核临床分离菌株进行一线抗结核药物的药敏检测,并将结果与传统罗氏培养基的绝对浓度法的结果进行比较分析。结果MTT和刃天青2种微孔板方法所得利福平（RFP）、异烟肼（INH）、乙胺丁醇（EMB）、链霉素（SM）4种一线抗结核药物的药敏结果与传统绝对浓度法有较好的一致性,MTT法进行RFP、INH、EMB、SM药敏试验的敏感性分别为94．8％、93．8％、92．9％、90．6％,特异性分别为96．0％、93．8％、96．0％、87．5％,准确性分别为95．3％、93．8％、95．3％、89．1％;刃天青法进行RFP、INH、EMB、SM药敏试验的敏感性分别为92．3％、90．6％、92．9％、87．5％,特异性分别为96．O％、90．6％,94．0％、87．5％,准确性分别为93．8％、90．6％、93．8％、87．5％。4种一线抗结核药物应用MTT法与绝对浓度法的Kappa值为：RFP0．857,INH0．831,EMB0．714,SM0．792;应用刃天青法与绝对浓度法的Kappa值为：RFP0．871,INH0．826,EMB0．826,SM0．750。MTT和刃天青2种药敏方法4种一线抗结核药物的Kappa值为：RFP0．889,INH0．875,EMB0．787,SMO．844。结论MTT和刃天青是2种简单快速、价廉且敏感的药敏方法,有希望成为一线抗结核药物药敏试验的候选方法。     

174株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的分析我所183株痰培养阳性菌株的耐药情况。方法采用药敏比例法对183株阳性菌株进行菌种鉴定及药物敏感性试验。结果共分离出174株结核分枝杆菌,且4种一线抗结核药物异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)的总耐药率为25.3%,耐多药率为8.0%。4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为SM、INH、EMB、RFP。结论陕西省结核耐药情况仍较严重。     

中国西北四省(区)结核分枝杆菌分离株一线药物耐药状况及其影响因素分析

目的了解西北地区结核分枝杆菌耐药状况及其影响因素,为预防和控制耐药结核病提供基础科学依据。方法选取中国西北4省、自治区(甘肃、西藏、新疆、内蒙古)2005-2011年从结核病患者痰标本中分离培养的757株结核分枝杆菌(MTB),采用比例法检测MTB对4种一线抗结核药物链霉素(SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)和乙胺丁醇(EMB)的敏感性,结合病例背景资料分析相关影响因素。结果共检测了757株结核分枝杆菌,对SM、RFP、INH和EMB的耐药率分别为28.14%、26.68%、26.02%和7.53%,总的耐药率和耐多药率分别为40.55%和18.63%。西藏、新疆、甘肃和内蒙古的总耐药率和MDR率分别为64.42%和42.94%、40.48%和23.81%、41.61%和3.36%、27.90%和11.29%。χ2检验结果显示,各省份间菌株对INH、RFP和SM 3种药物的耐药率以及耐多药率差异有统计学意义(P0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,影响结核病耐药产生的主要原因是病例类型。复治病例发生耐药的危险性是新发病例的2.582倍(95%CI 1.869-3.566)。结论中国西北地区耐多药情况较为严重,特别是西藏和新疆。加强对结核病耐药性监测,规范化和针对性的全程治疗,防止疾病复发,是预防和控制耐药结核病的关键。     

骨结核病灶中抗结核药物浓度测定

本文报道骨结核病人手术取病灶234例,做四种抗结核药物浓度测定。用药后4小时血清浓度均达高峰,药物渗入病灶中高峰浓度:SM12小时8.04±4.22μg/ml,INH4小时1.62±0.62μg/ml,EMB4小时1.23±0.54μg/ml,RFP4小时5.83±1.15μg/ml。在病灶中维持抑菌浓度时间:SM4～24小时,RFP4～20小时,INH4～24小时,EMB4～8小时。所以,早期骨结核病人以药物治疗为主,但在骨与关节结核病灶内有死骨、脓肿、窦道,经久不愈或有脊髓压迫者,应列为手术适应症。     

应用硝酸盐还原试验快速检测结核分枝杆菌药物敏感性

目的评价硝酸盐还原试验(Nitrate Reducrase Assay,NRA)方法检测结核分枝杆菌分离株的药物敏感性的应用价值。方法通过应用NRA方法和绝对浓度法同时检测了492株结核分枝杆菌临床分离株和30株质控菌株对INH、RFP、SM、EMB的药物敏感性,以牛结核分枝杆菌标准株、结核分枝杆菌标准菌株H37Rv做阴阳性对照。并随机选择62株菌株进行重复试验。结果与绝对浓度法比较,NRA检测对INH、RFP、SM、EMB的耐药性的敏感性分别为91.6%、96.5%、92.2%、90.7%;特异性分别为96.0%、98.2%、97.3%、97.3%;一致率分别为95.0%、97.9%、96.2%、96.7%。重复试验符合率为100%。结论NRA是一种成本低、操作简单、快速、与绝对浓度法有较高一致率的药敏试验方法,具有良好的临床应用前景。     

应用硝酸盐还原试验快速检测结核分枝杆菌药物敏感性

目的评价硝酸盐还原试验(Nitrate Reducrase Assay,NRA)方法检测结核分枝杆菌分离株的药物敏感性的应用价值。方法通过应用NRA方法和绝对浓度法同时检测了492株结核分枝杆菌临床分离株和30株质控菌株对INH、RFP、SM、EMB的药物敏感性,以牛结核分枝杆菌标准株、结核分枝杆菌标准菌株H37Rv做阴阳性对照。并随机选择62株菌株进行重复试验。结果与绝对浓度法比较,NRA检测对INH、RFP、SM、EMB的耐药性的敏感性分别为91.6%、96.5%、92.2%、90.7%;特异性分别为96.0%、98.2%、97.3%、97.3%;一致率分别为95.0%、97.9%、96.2%、96.7%。重复试验符合率为100%。结论NRA是一种成本低、操作简单、快速、与绝对浓度法有较高一致率的药敏试验方法,具有良好的临床应用前景。     

雅安市280株结核分枝杆菌对抗结核药物的耐药情况分析

目的了解雅安市结核分枝杆菌对6种抗结核药物的耐药情况,为雅安市结核病防控工作提供参考数据。方法收集2014-09/2019-02雅安市结核病可疑患者痰培养分离株280株,采用比例法药敏试验对分离株进行6种抗结核药物敏感性试验,检测药物包括异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)、氧氟沙星(OFX)、卡那霉素(KM)。率的比较采用SPSS 23.0软件进行χ~2检验。结果 280株结核分枝杆菌中总耐药率为22.86%,单耐药率为13.21%,多耐药率为3.21%,耐多药率为6.23%。复治涂阳患者总耐药率和耐多药率均高于初治涂阳患者和涂阴培阳患者。任一耐药率排前3位的为INH、SM、OFX,单耐药排前3位的为OFX、INH、SM,多耐药排名第1位的为INH+SM,耐多药排名第1位的为INH+RFP。结论雅安市结核分枝杆菌耐药情况不容乐观,要加强对病人的治疗管理,规范用药,应积极推广分子生物学检测技术,将各种检测技术联合应用,尽早发现耐药患者,减少耐药结核病传播。     

耐多药肺结核病人痰菌耐药不均一性研究报告

目的　探讨耐多药肺结核病人痰菌是否存在耐药不均一性。方法　取 1例耐多药肺结核病人痰分离培养物制成的菌悬液 ,用 8 0 μm孔径醋酸纤维膜过滤得到单条结核菌分散存在的菌悬液 ,稀释后接种培养 ,挑取2 4个单菌落 ,再分别传代培养获得 2 4个结核菌的纯种。再采取中国标准绝对浓度法对 2 4个纯种菌株进行药物(INH、RFP、SM、EMB)敏感性试验 ,以敏感株H37Rv为对照。结果　从耐多药肺结核病人的分离株得到的 2 4个纯种结核菌中 ,对INH敏感 1个 ( 4 2 % )、低耐 2 2个 ( 91 6% )、高耐 1个 ( 4 2 % ) ;对RFP敏感 2个 ( 8 3 % )、低耐 2个( 8 3 % )、高耐 2 0个 ( 83 4% ) ;对SM敏感 1个 ( 4 2 % )、低耐 0个 ( 0 % )、高耐 2 3个 ( 95 8% ) ;对EMB全部敏感。结论　耐多药肺结核病人的痰菌对多种抗结核药物均存在耐药不均一性 ,敏感菌与耐药菌、低耐菌与高耐菌混合存在 ,敏感菌为极少数 ,耐药菌占绝大多数     

自动BACTEC960系统检测结核分枝杆菌药物敏感性的多中心评估分析

地点：巴西东南部3个分枝杆菌参比实验室。目的：评估自动化分枝杆菌生长指示管（MGIT）检测结核分枝杆菌药物敏感性的能力。设计：用自动BECTECMGIT960（M960）对95份结核分枝杆菌临床分离株进行链霉素（SM），异烟肼（INH）、利福平（RMP）、乙胺丁醇（EMB）的敏感性检测，并与BACTEC460（B460）、比例法（PM）、抗性比率法（RRM）的检测结果进行比较，其中88株以BACTEC460、比例法、抗性比率法中的至少两种方法获得一致结果作为最终结果，并与M960的结果相比较。结果：M960与B460的符合率为95．2％，与PM为96．6%,与RRM为93．4％；其中与RRM在SM上符合率最低，与B460在EMB上符合率最低。M960结果与最终结果的符合率为97．9％，INH与RMP的符合率为99．2%,SM与EMB的符合率分别为96．2%和96．9％，M960报告结果的平均时间为6．9d。结论：与比例法和抗性比率法相比，M960显示出了极大的优势，并且有助于患者的治疗。     

难治性肺结核分支杆菌耐药性和药物依赖性的实验观察

目的探讨难治性肺结核分支杆菌耐药性和药物依赖性。方法对难冶性肺结核病人痰标本培养分离的分枝杆菌65株（例）,进行低浓度、高浓度抗结核药物的耐药性和依赖性实验观察。结果65株分枝杆菌对SM、INH和RFP三种药物均耐药,EMB耐药率也较高（75．4％和69．2％）。分枝杆菌对sM依赖率分别为38．5％,INH为26．2％,RFP为18．5％,EMB为10．8％;同时依赖两种药物者为15．4％,三种药物为12．3％,四种药物为4．6％。结论难治性肺结核具有很高的耐药性和较高的依赖性。     

显微镜观察药物敏感性检测在分枝杆菌分离培养和药物敏感性测定中的应用研究

目的评价显微镜观察药物敏感性检测(MODS,microscopic observation drug suscepti-bility assay)方法用于分枝杆菌分离培养和直接药物敏感性测定的应用前景。方法应用MODS方法对113例涂片镜检阳性患者痰标本进行分离培养,同时进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇4个药物的直接药物敏感性测定,以罗氏法分离培养和间接绝对浓度法作为对照,对分离培养和药敏结果进行对比分析,并通过DNA序列分析对不一致药敏结果进一步验证。结果 MODS与罗氏法分离培养的阳性率均为83.2%,污染率分别为0%和2.7%,两方面差异无统计学意义,两者的符合率为93.6%(kappa值:0.75),培养的敏感性、特异性分别为95.7%、81.3%。MODS的分离培养中位数时间为10 d(第95百分位数为21.5 d),罗氏分离培养的中位数时间为25 d(第95百分位数为39.3d)。MODS与间接绝对浓度法的耐药株检出率分别为49.5%、47.8%,符合率为95.5%(kappa值:0.91)差异无统计学意义,MODS检测的敏感性、特异性分别为97.7%、93.3%。MODS对结核分枝杆菌检测的敏感性、特异性、符合率分别为异烟肼(100%、84.5%、89.8%);利福平(100%、100%、100%);链霉素(94.6%、98.0%、96.6%);乙胺丁醇(100%、73.8%、75.0%)。对于利福平、链霉素的药物敏感性检测两种方法有相当高的一致性,而对异烟肼、乙胺丁醇的检测一致性较低。结论 MODS方法是一种操作简单、成本低廉、快速、敏感的诊断和药物敏感性检测方法。适合发展中国家和经济欠发达地区,在我国结核病防控工作中,具有广泛的应用前景。     

Quality assurance programme for drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis in the WHO/IUATLD Supranational Reference Laboratory Network: five rounds of proficiency testing, 1994-1998.

SETTING: Quality assurance for the WHO/IUATLD Global Tuberculosis Drug Resistance Surveillance Programme. OBJECTIVE: To implement an ongoing proficiency-testing programme for drug susceptibility testing (DST) of Mycobacterium tuberculosis within the WHO/IUATLD Supranational Reference Laboratories Network (SRLN). DESIGN: Five culture panels, each consisting of 10 duplicate drug-susceptible and drug-resistant clinical isolates (100 strains) of M. tuberculosis were tested for resistance to streptomycin (SM), isoniazid (INH), rifampicin (RMP) and ethambutol (EMB). DST procedures included the proportion, absolute concentration and resistance ratio methods, as well as the radiometric BACTEC 460 method. RESULTS: The efficiency, sensitivity and specificity of M. tuberculosis DST as well as the intra-laboratory reproducibility showed that the laboratories tested susceptibility to RMP and to INH very reliably, with values ranging from 97% to 99%. The testing of SM and EMB was less dependable, with values ranging from 90% to 95%. The sensitivity of testing of EMB increased from 60% in Round 1 to 98% in Round 5, without a concomitant decrease in specificity. CONCLUSIONS: This study has shown that regular proficiency testing can significantly improve the quality of DST, even in the most sophisticated TB laboratories. Mean DST efficiency levels of 92% for both SM and EMB and 97% and 99% for INH and RMP, respectively, are proposed as reasonable performance goals for the SRL network. Efficiency, consistently lower than these values, would require remedial action. Efficiency levels lower than mean -1 standard error, i.e., 80% for SM and EMB, 89% for INH and 95% for RMP, should always be considered as sub-standard performance for DST.     

河南省结核病耐药监测实验室质控分析

目的评价河南省结核病耐药监测中实验室工作质量。方法南朝鲜西太区跨国参比室（ＳＲＬ）对河南省结核病防治研究所参比室（ＰＲＬ）先后进行了３次自ＳＲＬ至ＰＲＬ及１次自ＰＲＬ至ＳＲＬ的药敏试验质控，菌株是含耐药及敏感的结核分支杆菌临床分离菌株。试验的４种药物为链霉素、异烟肼、利福平及乙胺丁醇，采用ＬＪ培养基、比例法。结果３次自ＳＲＬ至ＰＲＬ的质控试验中，４药大部分敏感性大于特异性，且异烟肼及利福平的敏感性均为１００％；异烟肼在３次试验中平均准确性达９８％，利福平虽然在第一次质控中准确性仅７０％，但在随后两次质控中均达９３％。与西太区同步质控的其他国家参比室结果（含河南ＰＲＬ）相比，除西太区链霉素特异性较河南高外（８４％比７５％，Ｐ＜０．０５），余特异性之间、敏感性之间无显著性差异。自ＰＲＬ至ＳＲＬ的质控试验显示出与自ＳＲＬ至ＰＲＬ类似的特征，链霉素、异烟肼及利福平的一致性均达９０％以上。结论河南省耐药监测的实验室工作质量符合监测指南要求。     

Blood agar for susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis against first-line drugs.

OBJECTIVE: To evaluate the performance of blood agar for the susceptibility testing of 50 Mycobacterium tuberculosis clinical isolates against isoniazid (INH), rifampicin (RMP), streptomycin (SM) and ethambutol (EMB). DESIGN: The activity of the drugs was determined by the proportion method on blood agar instead of Middlebrook 7H10 agar according to Clinical Laboratory Standard Institute recommendations. The final concentrations of INH, RMP, SM and EMB were 0.2 microg/ml, 1 microg/ ml, 2 microg/ml and 5 microg/ml, respectively. RESULTS: The results were compared with the radiometric proportion method as the reference, and the agreements were determined as 100% for INH and RMP, 92% for SM and 96% for EMB. The specificity, sensitivity, positive predictive value and negative predictive value were 90.4% and 97.5%, 100% and 90%, 66.6% and 90% and 100% and 97.5% for SM and EMB, respectively, while these values were 100% for INH and RMP. The results of susceptibility testing were obtained on the 14th day of incubation. CONCLUSION: According to this preliminary study, our results suggest that blood agar can be used as an alternative medium for the susceptibility testing of M. tuberculosis strains against INH, RMP, SM and EMB in resource-limited countries. However, further studies are needed before implementating the method in diagnostic laboratories.     

山东省滨州市123例肺结核患者痰结核菌耐药情况分析

目的探讨肺结核患者痰结核菌的耐药情况。方法采用痰结核分支杆菌培养并做药物敏感性试验检测。结果肺结核患者耐药率为58.54%;耐异烟肼（INH,H）37.4%、利福平（RFP,R）13.8%、链霉素（SM,S）56.1%、乙胺丁醇（EMB,E）2.4%。至少耐异烟肼和利福平两种药的比例为16.26%。结论肺结核耐药情况严重,尤其是耐多药比例偏高,应引起足够重视。     

External quality control of Mycobacterium tuberculosis drug susceptibility testing: results of two rounds in endemic countries.

SETTING: Quality assurance for the World Health Organization (WHO)/International Union Against Tuberculosis and Lung Disease (The Union) global tuberculosis (TB) drug resistance surveillance programme. OBJECTIVE: To monitor the quality of drug susceptibility testing (DST) in different countries. METHODS: In 2002-2003 and 2005-2006, 20 Mycobacterium tuberculosis strains were sent by the WHO/Union Supranational Reference Laboratory of Rome to TB reference laboratories in Albania, Bahrain, Kosovo, Mozambique, Oman, Qatar and Turkey for external quality control (EQC). RESULTS: In 2002-2003, the specificity, sensitivity, efficiency, reproducibility and predictive values for resistance/susceptibility were >or=90% for streptomycin (SM), isoniazid (INH) and ethambutol (EMB). In 2005-2006, all statistical values were >or=96% for SM, INH, rifampicin and EMB. CONCLUSION: EQC improved the quality of M. tuberculosis DST in the participating countries.     

南京地区结核分枝杆菌耐药监测疫情趋势分析

目的了解南京地区胸科医院结核病患者结核分枝杆菌对临床常用9种药物的耐药情况。方法对我院分离的结核分枝杆菌采用绝对浓度法对9种抗结核药物:链霉素、异烟肼、乙胺丁醇、利福平、对氨基水杨酸、丁胺卡那霉素、卷曲霉素、左氧氟沙星、对氨基水杨酸异烟肼进行药敏试验,同时用PNB、TCH进行菌种初步鉴定。结果 10014株结核分枝杆菌中,总耐药率38.42%(3847/10014),单耐药率最高为利福平(27.35%),最低为卷曲霉素(0.50%);2017株耐多药结核分枝杆菌对另外7种药物单耐药率最高为链霉素(56.22%),最低为卷曲霉素(1.69%),对9种药物全耐者有3株。结论结核分枝杆菌对多种药物耐药率高,应加强抗结核药物耐药性监测,根据药敏试验结果选择科学有效的化疗方案。