钠/碘共同转运体(NIS)基因及其应用研究

钠/碘共同转运体(NIS)是甲状腺细胞膜上的一种糖蛋白,具有主动运输碘的功能。深入研究其基因结构及转录调控对甲状腺疾病和放射性碘治疗具有重要的意义。     

放射性碘-131胶囊分装机的研制开发

目的 研制开发一种新型医用放射性碘131胶囊分装机。方法 按照不同方剂量要求并利用计算机的控制原理实现自动化控制。结果 在生产过程中,能够对每粒胶囊实施实时检测控制,并能实现生产过程的自动管理记录。结论 该机的研发成功使患者可服用碘131胶囊,避免了服用碘-131液体对人体所带来的副作用。     

野生型p53基因对人肺癌细胞的生长抑制作用研究

ＧＬ细胞系是由人肺腺癌建立的癌细胞系，该细胞系ｐ５３基因第２４５密码子发生了Ｇ→Ｔ突变。我们将野生型（ｗｔ）及突变型（ｍｔ）ｐ５３基因分别导入ＧＬ癌细胞系中，对其细胞形态，生长速度，集落形成率以及裸鼠成瘤进行了研究。结果发现导入ｐ５３－ｗｔ后，细胞形态，生长速度，软琼脂生长情况并没有明显变化，但裸鼠成瘤试验发现导入ｐ５３－ｗｔ基因的ＧＬ癌细胞系，成瘤晚，生长速度明显减慢，其速度明显低于对照细胞系和导入ｐ５３－ｍｔ细胞系。而导入ｐ５３－ｍｔ细胞系，成瘤早，肿瘤生长速度明显加快。说明ｐ５３－ｗｔ基因可有效地抑制ＧＬ癌细胞的生长，而ｐ５３－ｍｔ基因则可促进ＧＬ癌细胞的生长。这一研究结果更进一步地证明了ｐ５３基因抗癌功能，对肺癌发生以及肺癌的防治都具有重要意义。     

Galectin-9基因转染诱导大鼠肾移植免疫耐受的实验研究

[目的]探讨半乳凝素-9(Galectin-9)在大鼠肾移植免疫耐受中的作用及意义。[方法]建立大鼠同种肾移植模型,分为Lentiviral-Galectin-9组、雷帕霉素组、对照组和Lentiviral组。lentiviral-Galectin-9组供肾移植前用含慢病毒lentiviral-Galectin-9的肾脏冷保存液经肾动脉灌注。分别观察肾功能测定、生存期,检测尿蛋白和血肌酐含量,移植肾病理检查并半定量评分,比较各组间的不同。[结果]Lentiviral-Galectin-9治疗组肾移植受体大鼠平均存活天数为30.2d,与对照组的存活时间比较差异显著。Lentiviral-Galectin-9治疗组的移植肾功能基本保持稳定。脾细胞增殖反应显示:Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组对供体脾细胞的刺激增殖反应显著低于对照组和Lentiviral组,Lentivi-ral-Galectin-9组对供体脾细胞的刺激增殖反应显著低于和雷帕霉素组,差异均有统计学意义。Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组的尿蛋白水平明显低于对照组和Lentiviral组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);Lentiviral-Galectin-9组与雷帕霉素组差异有统计学意义(P﹤0.05),对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。第6周和第12周时,Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组的血肌酐浓度明显低于对照组和Lentiviral组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);Lentiviral-Galectin-9组与雷帕霉素组差异有统计学意义(P﹤0.05),对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。移植术后12周时,Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组大鼠移植肾组织的间质炎症和纤维化、血管内膜增厚、肾小球硬化和小管萎缩等慢性损害明显轻于对照组和Lentiviral组,Lentiviral-Galectin-9组损害轻于雷帕霉素组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]慢病毒lentiviral载体可成功介导Galectin-9基因对大鼠肾脏的转染,并对移植肾起免疫保护作用、延长移植肾的存活时间。     

碘-131治疗青少年Graves病的疗效评价

对治疗的98例青少年Graves病病人随访观察5a,分别在治疗后3月、6月、12月及60月时的FT3、FT4及TSH的测定,通过对病人用药剂量、治疗效果进行统计分析,得出结论碘-131治疗青少年Graves病治愈率可达46.94%,明显高于抗甲状腺药物对本病的治愈率,但5a内甲低发生率亦高达26.53%,因此我们认为,对于青少年Graves病进行碘-131治疗的选择应该谨慎。     

重组腺病毒介导人野生型p53基因转染神经母细胞瘤细胞系的实验研究

目的 观察人野生型p53基因(wt-p53)转染对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响.结果 以携带绿色荧光蛋白的腺病毒质粒(Ad-GFP)转染SH-SY5Y细胞,通过流式细胞仪(FCM)判断转染效率.确定合适的感染倍数(MOI).分别以空病毒质粒(Ad)及携带wt-p53的腺病毒质粒(Ad-p53)转染SH-SY5Y细胞,即对照组和p53组;并以未转染的肿瘤细胞为空白对照(空白组).采用Western blot免疫印迹法检测p53蛋白的表达.观察转染前后细胞生长情况,绘制生长曲线,通过FCM分析细胞周期分布及细胞凋亡情况.结果 检测结果 表明腺病毒对SH-SY5Y细胞有较高的转染率,100MOI为合适的转染倍数.Ad-p53转染SH-SY5Y细胞后,wt-p53基因得到了高效表达.与空白组和对照组相比,p53组细胞生长曲线上升减缓,生长速度减慢,细胞凋亡增加,G1期细胞比例增加(P<0.01).结论 wt-p53基因转染可以有效抑制SH-SY5Y细胞的生长,这为p53基因修饰的肿瘤疫苗用于神经母细胞瘤的临床治疗提供了体外实验依据.     

人Kv1.5通道基因转染人胚胎肾细胞的研究

目的建立表达人Kv1.5通道的细胞模型。方法采用Lipofactamine 2000脂质体将人Kv1.5通道基因转染人胚胎肾细胞(HEK293),通过荧光显微镜和全细胞膜片钳技术观测人Kv1.5通道基因的表达。结果pcDNAHKv1.5真核表达载体转染HEK293细胞2d后,荧光显微镜可观察到人Kv1.5通道表达;3d后全细胞膜片钳技术记录到人Kv1.5通道基因编码的通道电流。结论pcDNAHKv1.5真核表达载体转染HEK293细胞为人Kv1.5通道的研究提供了良好的真核细胞表达系统和细胞模型。     

重组腺病毒Ad-Rb94基因联合放疗对人肝癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨重组腺病毒Ad-Rb94基因联合放射治疗对人肝癌细胞的联合抑瘤作用。方法 将重组腺病毒Ad-Rb94基因导入人肝癌细胞株HepG₂,观察联合放射治疗对细胞生长、细胞周期及凋亡的影响。结果 Ad-Rb94基因组、放疗组和Ad-Rb94基因联合放疗组HepG₂细胞的生长均受到抑制,尤其在转染后96h细胞存活数量最低,与Ad-lacZ组和空白对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。联合治疗组HepG₂细胞生长最为缓慢,Rb94基因转染后96hAd-Rb94联合放疗组的抑制作用均明显高于Ad-Rb94组和放疗组(P<0.05)。Ad-Rb94组、放疗组及Ad-Rb94联合放疗组HepG₂停留在G₂/M期的细胞增加,G₀/G₁期和S期细胞数量减少,凋亡细胞数量增加,其中以联合治疗组G₂/M期细胞和凋亡细胞所占比例最高。结论 Ad-Rb94基因联合放疗具有协同作用,有效地抑制肝癌细胞的生长。     

维甲酸应用于增强甲状腺癌病灶吸^131I功能的研究

目的探讨维甲酸在增强甲状腺癌病灶吸^131I功能方面的作用。方法36例甲状腺癌近全切术后患者分为对照组和实验组，对照组与实验组患者在术后进行第1次24h吸^131I率测量，2组患者在测量后立即进行激素替代治疗。同时实验组口服维甲酸6周，2组患者停药1周后进行第2次24h吸^131I率测量，对两次24h吸^131I率进行对比分析。结果实验组服用维甲酸后，第2次24h吸^131I率增加明显，与对照组第2次24h吸^131I率比较，差异有统计学意义；实验组第1次24h吸^131I率与第2次24h吸^131I率比较，差异有统计学意义。结论维甲酸能诱导甲状腺癌组织再分化，使甲状腺癌病灶的吸^131I能力恢复或增强。     

SHH基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

目的 探讨SHH基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的可行性.方法 利用电转法将SHH基因转染人大鼠骨髓间充质干细胞,在荧光显微镜下观察转染效率;分别绘制未转染及转染SHH基因后细胞生长曲线,观察转染对细胞的影响;采用PCR、RT-PCR、Western-blot检测转染后骨髓间充质干细胞中外源性SHH基因的表达情况.结果 生长曲线显示转染后骨髓间充质干细胞生长曲线指数生长期及平台期延后,在转染后第12天与未转染达到一致.转染后48 h(即将用于移植前),经荧光倒置显微镜观察转染效率为30％,PCR检测转染后骨髓间充质干细胞中SHH表达较未转染细胞明显升高,实时定量PCR检测其升高约7倍左右,通过Western-blot检测转染后SHH蛋白产物表达明显升高.结论 电转法能够有效将外源性SHH基因转染人大鼠MSC并能获得有效表达,为进一步大鼠缺血性心脏病模型的在体基因治疗提供了前提基础.     

Reflection of Dietary Iodine in the 24 h Urinary Iodine Concentration,Serum Iodine and Thyroglobulin as Biomarkers of Iodine Status: A Pilot Study

Background: The iodine status of the US population is considered adequate, but subpopulations remain at risk for iodine deficiency and a biomarker of individual iodine status has yet to be determined. The purpose of this study was to determine whether a 3 day titration diet, providing known quantities of iodized salt, is reflected in 24 h urinary iodine concentration (UIC), serum iodine, and thyroglobulin (Tg). Methods: A total of 10 participants (31.3 ± 4.0 years, 76.1 ± 6.3 kg) completed three, 3 day iodine titration diets (minimal iodine, US RDA, (United States Recommended Daily Allowance), and 3× RDA). The 24 h UIC, serum iodine, and Tg were measured following each diet. The 24 h UIC and an iodine-specific food frequency questionnaire (FFQ) were completed at baseline. Results: UIC increased an average of 19.3 μg/L for every gram of iodized salt consumed and was different from minimal to RDA (p = 0.001) and RDA to 3× RDA diets (p = 0.04). Serum iodine was different from RDA to 3× RDA (p = 0.006) whereas Tg was not responsive to diet. Baseline UIC was associated with iodine intake from milk (r = 0.688, p = 0.028) and fish/seafood (r = 0.646, p = 0.043). Conclusion: These results suggest that 24 h UIC and serum iodine may be reflective of individual iodine status and may serve as biomarkers of iodine status.     

碘缺乏与婴儿智能发育的研究

为了解婴儿碘营养状况对智能发育的影响，用碱灰化比色法测定了婴儿尿碘水平，又分别用新生儿２０项行为神经评分法及贝利婴幼儿发展量表评估了不同碘营养状况下０～０．５岁婴儿的智能发育。结果：１００例正常新生儿尿碘中位数为９４．５３μｇ／Ｌ。新生儿２０项行为神经评分中，行为能力３项低尿碘组评分明显低于正常尿碘组（Ｐ＜０．０１），２０项总评分两组间没有统计学差异（Ｐ＞０．０５）。０．５岁婴儿的智力发展指数和精神运动发展指数，低尿碘组明显低于正常尿碘组（Ｐ＜０．０５）。结果显示碘缺乏使婴儿智能的正常发育受到阻碍。     

调整食盐加碘量前后山东省儿童碘营养状况分析

[目的]分析食盐加碘量调整对学龄儿童碘营养水平的影响。[方法]对食盐加碘量为20~60 mg/kg的1995年、1997年、1999年和食盐加碘量为(35±15)mg/kg的2002年、2005年山东省碘缺乏病监测中儿童碘营养状况进行分析。[结果]食盐加碘量调整前后分别检测尿样1 051份、720份,尿碘中位数分别为269.4μg/L、213.9μg/L,推算的每人每天碘摄入量分别为404.1μg、320.8μg,尿碘<100μg/L者所占比例分别为14.94%、11.53%,尿碘≥300μg/L者所占比例分别为46.52%、27.22%(P<0.01)。盐加碘量调整前后分别调查8~10岁儿童3 668人2、400人,甲状腺肿大率(触诊法)分别为14.53%、5.08%(P<0.01)。[结论]调整食盐加碘量后儿童碘营养状况良好,儿童甲状腺肿大率明显下降。     

2012年从化市居民碘营养状况

目的调查从化市成人和孕妇碘营养状况,掌握从化市成人和孕妇碘缺乏防治效果,为今后制定防治措施提供更加科学、可靠的理论依据。方法采用单纯随机抽样方法,对从化市居民食用盐碘、饮用水碘、成人和孕妇尿碘进行测定。结果2012年从化市碘盐覆盖率为99．67％,碘盐合格率为93．31％,合格碘盐食用率为93．00％,盐碘含量中位数为27．75mg／kg;水碘含量中位数为19．25μg/L;成人尿碘中位数为188．5μg／L,孕妇尿碘中位数为169．5μg/L。结论从化市成人和孕妇尿碘中位数处于适宜水平,碘缺乏病防治措施落实,达到国家消除碘缺乏病标准要求。     

城乡居民碘营养及甲状腺疾病患病情况调查

目的了解杭州市城乡居民碘营养现况及甲状腺疾病患病情况。方法分别从杭州市城区和农村随机抽取3个调查点,每个调查点随机抽取100户居民,检测其家中食盐盐碘浓度,计算每日盐摄入量;采集尿样及血样,检测尿碘、血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、血清游离甲状腺素（FT4）和血清促甲状腺激素（TSH）。结果城区盐碘和每日盐摄入量中位数分别为29．40mg／kg和6．35g／d,农村盐碘和每日盐摄入量中位数分别为29．65mg／kg和8．50g／d;城区尿碘中位数为120．00μg／L,低于农村的188．73μg／L;城区临床甲减、亚临床甲减、临床甲亢、亚临床甲亢和甲状腺疾病总患病率分别为0．13％、10．13％、0．26％、0．52％和11．04％,农村临床甲减、亚临床甲减、临床甲亢、亚临床甲亢和甲状腺疾病总患病率分别为0．85％、3．12％、0．57％、1．99％和6．52％,城区亚临床甲减、甲状腺疾病总患病率高于农村,亚临床甲亢患病率则低于农村。结论杭州市城乡居民碘营养均处于适宜水平,城区居民尿碘水平低于农村,但亚临床甲减和甲状腺疾病总患病率高于农村。     

广州市萝岗区8～10岁学龄儿童碘营养水平

目的了解广州市萝岗区学龄儿童碘营养水平,为合理指导加碘水平提供科学依据。方法按东南西北中5个方位各抽取1所中心小学和1所农村小学,每所小学随机抽取20名8～10岁儿童的尿样,用砷铈催化分光光度法对尿样进行检验,结果用SPSS13.0软件分析处理。结果萝岗区8～10岁学龄儿童尿碘中位数为172.0μg/L,其中尿碘含量<50.0μg/L的占5.0%,<20.0μg/L的占1.0%,>200.0μg/L的占40.0%。农村小学和中心小学的尿碘构成比和中位数均有显著性差异,8岁组尿碘中位数显著高于10岁组,不同性别尿碘构成差异无统计学意义。结论萝岗区学龄儿童碘营养状况达到消除碘缺乏病标准,但碘营养水平有高于适宜量的趋势,同时部分儿童也存在碘缺乏危险,建议应加强连续动态监测,对不同碘营养状况地区儿童的补碘实施分类指导。     

湛江市沿海地区人群碘营养状况调查

目的了解湛江市沿海地区在碘盐供应后人群碘营养状况,评价碘缺乏病防治效果。方法选择已服食加碘盐的吴川市黄坡镇和未服食加碘盐的徐闻县迈陈镇作为调查点和对照点,采用分层随机抽样方法,各点分别随机抽查5个自然村的8~10岁学龄儿童甲状腺肿大率;检测婴幼儿、学龄儿童、孕妇、哺乳妇女和成人的尿碘,家庭饮用水水碘和盐碘含量;调查合格碘盐食用率。结果黄坡镇居民饮用水水碘中位数是9.9μg/L,8~10岁学生甲状腺肿大率为2.25%,人群尿碘中位数为142.7μg/L,盐碘中位数为33.1mg/kg,居民合格碘盐食用率为84.5%。迈陈镇居民饮用水水碘中位数是3.9μg/L,8~10岁学生甲状腺肿大率为10.35%,人群尿碘中位数为52.7μg/L。结论湛江市沿海地区为轻度缺碘地区,在基本未供应碘盐的迈陈镇,人群碘营养水平仍然处于本底水平,碘缺乏的危害依然存在。在碘盐供应比较落实的黄坡镇,人群的碘营养处于理想状态,碘缺乏已得到纠正。     

Iodine Intake Estimated by 24 h Urine Collection in the Italian Adult Population: 2008–2012 Survey

Monitoring the population iodine status is essential for iodine deficiency eradication. This study assessed the average dietary iodine intake and the iodine status of a random sample of the Italian general adult population. The study population included 2378 adults aged 35–79 years (1229 men and 1149 women) from all 20 Italian regions, participating in the Osservatorio Epidemiologico Cardiovascolare/Health Examination Survey 2008–2012 (OEC/HES), and were examined for iodine intake in the framework of the MINISAL-GIRCSI Programme. Dietary iodine intake was assessed by the measurement of 24 h urinary iodine excretion. The median daily iodine intake of the whole population was lower (96 µg/d, interquartile range 51–165) than the daily adequate iodine intake according to both EFSA and WHO recommendation (150 µg/d), with a significantly lower value among women (85 µg/d) compared with men (111 µg/d). Iodine intake diminished with age and increased with BMI (body mass index) in male but not in female participants, without achieving the adequate intake in any sex, age, or BMI category. In this random sample of Italian general adult population examined in 2008–2012, iodine intake still remained lower than the recommended values despite the implementation of a strategy of iodoprophylaxis based on salt iodization in 2005. These data represent a valuable reference for future monitoring of iodine status in our country.     

杭州市2000-2005年学龄儿童碘营养状况分析

目的了解杭州市实现消除碘缺乏病阶段性目标后,碘缺乏病病情及食盐加碘综合防治措施效果。方法采用儿童甲状腺肿大率、碘盐水平、尿碘水平指标进行综合评价。结果杭州市8～10岁儿童甲状腺肿大率为3.52%,加工厂、用户碘盐合格率分别为93.51%、96.83%,尿碘中位数均值为190.8μg/L。部分山区住校学生甲状腺肿大率大于10.00%。结论食盐加碘综合防治措施是持续消除碘缺乏病既经济又有效的方法。但应重视山区学龄儿童的碘营养状况,加强对该人群的监测,提高山区学龄儿童碘营养水平。     

妊娠期碘缺乏及补碘干预对后代神经智力发育的影响

  目的  调查中国高水碘和适水碘地区成年妇女膳食碘摄入量、碘来源以及贡献率,为指导不同水碘地区居民科学膳食提供依据。  方法  于2018年7 — 8月,在山东、河南两省选取1 320名18～60岁妇女开展食物频率问卷调查,记录膳食情况、饮水量和食盐摄入量,并结合食物碘、水碘及盐碘的实验室检测结果,计算日均膳食碘摄入量,根据中国膳食碘摄入量推荐标准对潜在风险进行评估。  结果  高水碘和适水碘地区成年妇女膳食碘摄入量分别为441.52和180.67 μg/d,介于推荐摄入量（RNI）和可耐受最高摄入量（UL）之间,均属于适宜水平。高水碘地区有18.12 %的被调查者碘摄入量高于UL,适水碘地区有27.14 %的被调查者碘摄入量低于RNI。2个地区碘盐食用率分别为8.96 %和25.93 %,对膳食碘的贡献率为0.03 %和8.39 %;水碘摄入量分别为383.06和93.06 μg/d,对膳食碘的贡献率为84.22 %和53.71 %,均有显著的地区差异。  结论  高碘和适碘地区成年妇女碘摄入量总体上是适宜和安全的,饮用水是膳食碘的主要来源,适碘地区碘盐食用率较低,导致部分人群存在碘缺乏的风险。