不规则抗体影响血型鉴定95例特异性分析

目的 通过对95例影响血型鉴定的不规则抗体特异性的分析,探讨不规则抗体影响患者血型鉴定的特点.方法 对2013年1月至2014年12月间45157例申请输血患者进行血型鉴定及不规则抗体筛查,对其中不规则抗体筛查结果阳性并干扰血型反定型的样本进行16系谱细胞抗体鉴定,明确抗体类型及其特异性.通过筛查献血员红细胞表面抗原选择与抗体对应抗原阴性的红细胞制备反定型细胞进行血型鉴定,以排除不规则抗体对血型反定型的干扰.以不规则抗体对应抗原阴性红细胞做交叉配血试验,进一步验证血型鉴定结果.结果 95例样本(男27例,女68例)因MNSs、RH、Lewis、P、Duffy、Kidd、Kell血型系统的不规则抗体干扰血型鉴定.其中不规则抗体产生最多的是MNS系统55例,占57.89％;其次为RH系统10例,占10.53％;Lewis系统8例,占8.42％;P系统2例,占2.11％;Duffy系统1例,占1.05％;Kidd系统1例,占1.05％;Kell血型系统1例,占1.05％;MNS系统与RH系统联合2例,占2.11％;未鉴定出抗体特异性15例,占15.79％.95例样本中IgM类76例,占80％,IgG类19例,占20％.结论 影响血型鉴定的不规则抗体以IgM类为主,少量高效价的IgG类抗体也可影响血型鉴定.     

抗体包被免疫磁珠的研制及其应用

１９７９年,JohnUgelstad等〔１〕成功地制备了一种均匀性和粒度适宜的聚苯乙烯微球。将其磁化并与抗体连接后,即成为一种分离细胞效果极佳的免疫磁珠—Dynabeads。从此,免疫磁珠得到广泛应用〔２,３〕,并引发了生物分离技术上的一次革命。免疫磁珠的主要特点有：⑴分离速度快、效率高、可重复性好;⑵操作简单、不需要昂贵的仪器设备;⑶不影响被分离细胞或其它生物材料的生物学性状和功能。迄今,我国尚没有生产高质量免疫磁珠的能力,而进口磁珠的价格昂贵,因而限制了免疫磁珠在我国生物医学研究领域中的应用。我们在综合了国内…     

红细胞血型不规则抗体筛选及其特异性鉴定

目的:观察ABO以外血型不规则抗体产生的频率及其特异性,为患者提前选择储备不含相应抗原的血液,以保证患者及时安全和有效的输血治疗。方法:应用抗人球蛋白法、凝聚胺法及微柱凝胶法对拟输血患者和供血者血清进行血型不规则抗体筛选、特异性鉴定及效价测定。结果:在12860例被检血清标本中检出血型不规则抗体阳性者125例,阳性率为0.97%,其中患者为1.1%(123/10904),献血员为0.1%(2/1956)。在125例血型不规则抗体中,Rh血型系统抗体102例(81.6%),MNSs血型系统抗体20例(16%),Lewis血型系统抗体2例(1.6%),Kidd血型系统抗体1例(0.8%)。Rh血型系统单一抗体79例(63.2%),Rh血型系统混合抗体23例(18.4%),Rh血型系统与其他血型系统的复合抗体11例(8.8%)。结论:在输血前对受血者和供血者血液进行血型不规则抗体筛选、特异性鉴定及效价测定,输注不含相应抗原的血液,对确保输血安全及有效均有重要的临床意义。     

拟输血患者血型不规则抗体检测结果的回顾性分析北大核心CSCD

目的探讨拟输血患者血型不规则抗体的检出及分布情况,以指导临床合理安全用血。方法应用盐水法、抗人球蛋白法和微柱凝胶技术对58 565例拟输血住院及急诊患者进行血型不规则抗体检测,对阳性结果进一步采用谱细胞进行抗体特异性鉴定。结果共检出不规则抗体阳性351例,检出率为0.60%(351/58 565)。鉴定出特异性抗体282例,检出率为0.48%(282/58 565);自身抗体36例,检出率为0.06%(36/58 565);无法鉴定抗体特异性共33例,占0.06%(33/58 565)。不同性别患者不规则抗体的检出率比较:女性患者222例,阳性率为0.73%(222/30 582)显著高于男性患者129例,阳性率为0.46%(129/27 983)。结论拟输血患者有必要进行不规则抗体筛查和特异性鉴定,避免免疫性输血反应的发生。     

新生儿溶血病红细胞血型免疫性抗体的特异性分析

目的:观察母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)红细胞血型免疫性抗体的检出率及其特异性.方法:采用试管法和微柱凝胶法对母婴血标本进行ABO、Rh血型鉴定及不规则抗体筛查,对有黄疸症状的新生儿血标本进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验、抗体放散试验、抗体特异性鉴定及其效价测定.结果:在298例由红细胞血型免疫性抗体引起的HDN患儿中,检出抗A 62例(20.8％),抗B 65例(21.8％),抗A+抗AB 87例(29.2％),抗B+抗AB 6例(2.0％);抗M4例(1.3％),抗N1例(0.3％);抗D4例(1.3％),抗E7例(2.3％),抗cE 3例(1.0％).由ABO及MN血型免疫性抗体引起HDN者,直接抗人球蛋白试验多为弱阳性,由Rh血型免疫性抗体引起HDN者,直接抗人球蛋白试验多为强阳性;微柱凝胶法的凝集强度高于试管法;HDN患儿出生后24 h内阳性检出率为91.5％.结论:HDN血型免疫性抗体的特异性主要为ABO系统的抗A、抗B、抗AB,其次为Rh系统的抗E、抗D、抗cE及MN系统的抗M、抗N.     

抗人红细胞血型A抗原单链抗体原核表达及活性测定

目的 构建并表达抗人红细胞血型A抗原单链小分子抗体（single-chain Fv)蛋白。方法 设计合成抗重、轻链可变区引物,通过重叠延伸拼接PCR技术,在50A mAb VH和VL基因间引入连结短肽,体外构建50A ScFv基因并进行序列分析;将克隆入表达载体pET-28a中,在大肠杆菌中诱导表达;并以免疫印迹测定重组蛋白的生物学活性。结果 序列分析表明,50A ScFv基因全长747bp,编码249个氨基酸;重组体表达产物聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,融合蛋白的相对分子质量（Mr)为29000左右,与预期的结果一致,表达产物主要以不溶性包涵体形式存在;光密度扫描结果表明,重组蛋白占菌体总蛋白的16．2％,免疫印迹试验显示,重组小分子抗体保留了亲本mAb的特异性亲和力。结论 成功地构建50A ScFv基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为进一步研制基因工程血型检定抗体奠定了基础。     

抗S抗体的血型血清学检测及其临床意义分析

目的 分析抗S抗体的血型血清学检测及其临床意义.方法 采用微柱凝胶法(MGT)对患者进行ABO及RhD血型鉴定和抗体筛选,对抗体筛选阳性、正反定型不一致或交叉配血不合的血标本,采用试管盐水法(NS)及间接抗人球蛋白试验(LAT)进行复检和直接抗人球蛋白试验(DAT).确定抗体特异性后,筛选不含相应抗原的献血者血液与患者...     

ABO血型抗体缺乏分析及临床输血

目的 探讨ABO血型抗体缺乏的血清学特点、临床分析、临床安全输血.方法 对4例血型抗体缺乏患者采用血型血清学方法进行ABO血型鉴定、吸收放散试验、唾液中血型物质测定.结果 4例患者均为分泌型,抗-A缺乏2例,抗-B缺乏1例,抗-A、抗-B均缺乏1例.结论 正常人抗体缺乏见于免疫耐受现象,在紧急输血时以O型洗涤红细胞为宜.     

HIV抗体纳米免疫磁珠快速检测试剂的研制

目的 研制一种用纳米免疫磁珠层析技术用以检测HIV抗体的快速诊断试剂.方法 运用碳二亚（EDC）将重组的HIV抗原gp41、gp36偶联到200 nm的超顺磁纳米颗粒上,在硝酸纤维素（NC）膜上包被gp41、gp36抗原,制备成免疫层析检测卡,然后对检测卡进行性能分析评估.结果 对HIV抗体国家参考品血清盘（胶体金类）检测,符合要求;对20份HIV抗体阳性和600份抗体阴性临床血清检测,灵敏度为100%,特异性为98.5%.检测卡室温保存12个月性能稳定.结论 研制出一种纳米免疫磁珠HIV抗体检测试剂,具有检测简便、快速、稳定性好和适于现场检测等特点.     

血型抗体减弱或缺乏导致ABO血型正反定型不相符的检测分析

目的 分析血型抗体减弱或缺乏的原因及其对ABO血型鉴定的影响和处理方法.方法 采用正反定型、抗体增强方法、吸收放散试验、抗球蛋白试验、不规则抗体筛选及交叉配血试验对患者进行血型血清学检测.结果 病例1、2、3、4正定型为O型,病例1、2反定型抗A、抗B抗体在常规方法中与Ac、Bc不凝集,病例3抗B抗体在常规方法中与Bc...     

AB0血型抗体效价的检测与母儿血型不合的疗效观察

母儿血型不合是婴幼儿溶血病的重要原因 ,严重影响我国出生人口素质。为此 ,我们在遗传优生咨询门诊病人中 ,除了针对病因进行有关的产前诊断以外 ,还开展了母儿血型不合 -ABO血型抗体效价的检测和治疗 ,取得满意疗效 ,报告如下。资料与方法病源来自院门诊妇产科 ,优生遗传咨询门诊及外院转诊患者。女方为O型血 ,男方为A型、B型、AB型血 ,包括孕前、孕期及产后。采用盐水试管凝集法 ,进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。不完全抗体快速反应剂采用南京天鼎生物技术研究所生产。 1∶6 4以下为正常 ,>1∶6 4为异常。结果检测 6 6 4例…     

HIV抗体纳米免疫磁珠快速检测试剂的研制

目的 研制一种用纳米免疫磁珠层析技术用以检测HIV抗体的快速诊断试剂.方法 运用碳二亚(EDC)将重组的HIV抗原gp41、gp36偶联到200 nm的超顺磁纳米颗粒上,在硝酸纤维素(NC)膜上包被gp41、gp36抗原,制备成免疫层析检测卡,然后对检测卡进行性能分析评估.结果 对HIV抗体国家参考品血清盘(胶体金类)检测,符合要求;对20份HIV抗体阳性和600份抗体阴性临床血清检测,灵敏度为100%,特异性为98.5%.检测卡室温保存12个月性能稳定.结论 研制出一种纳米免疫磁珠HIV抗体检测试剂,具有检测简便、快速、稳定性好和适于现场检测等特点.     

HIV抗体纳米免疫磁珠快速检测试剂的研制

目的 研制一种用纳米免疫磁珠层析技术用以检测HIV抗体的快速诊断试剂.方法 运用碳二亚(EDC)将重组的HIV抗原gp41、gp36偶联到200 nm的超顺磁纳米颗粒上,在硝酸纤维素(NC)膜上包被gp41、gp36抗原,制备成免疫层析检测卡,然后对检测卡进行性能分析评估.结果 对HIV抗体国家参考品血清盘(胶体金类)检测,符合要求;对20份HIV抗体阳性和600份抗体阴性临床血清检测,灵敏度为100%,特异性为98.5%.检测卡室温保存12个月性能稳定.结论 研制出一种纳米免疫磁珠HIV抗体检测试剂,具有检测简便、快速、稳定性好和适于现场检测等特点.     

夫妇ABO血型不合产前抗体检查的临床意义

新生儿溶血病是一种血型抗原免疫后产生的溶血性贫血,在胎儿、新生儿都可以发病。目前在每个人体内已发现的14个血型系统79个血型抗原中发生新生儿溶血病的,以ABO系统为最多,其次为Rh系统,其他如MN系统等少见的血型不合也可以引起本病。产前夫妇血型不合的抗体检查是及早发现和     

孕妇产前血型抗体水平与新生儿溶血病的关系

目的:探讨O型血孕妇IgG血型抗体效价与新生儿溶血病(HDN)发生率的关系及药物干预作用。方法:200例O型血RhD阳性孕妇从妊娠16周开始检测其血清中IgG抗A(B)效价,≥1∶64者给予茵栀黄口服液治疗,≥1∶256者加用静脉推注高渗糖和复合维生素,4周后复查抗体效价,观察孕妇效价变化及足月顺产儿HDN的发生情况,分析孕期IgG抗A(B)效价与HDN发生率的相关性及药物干预效果。结果:200例孕妇末次IgG抗A(B)效价1∶64、1∶64、1∶128、1∶256、≥1∶512占比分别为46.00%(92例)、20.50%(41例)、18.50%(37例)、9.50%(19例)、5.50%(11例)。效价≥1∶64的108例孕妇分娩的新生儿中,有24例发生HDN,发生率为22.2%,抗体效价升高与HDN发生率明显正相关(r=0.577,P0.01),药物干预可使IgG抗A(B)效价明显降低。结论:O型血孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价越高,HDN的发生率也越高;药物干预能显著降低IgG抗A(B)效价。     

81例抗M抗体的鉴定及其对血型血清学检测的影响

目的 分析抗M抗体的特异性鉴定结果及其对血型血清学检测的影响和处理对策.方法 采用微柱凝胶法对患者血标本进行ABO及RhD血型鉴定,采用盐水法及间接抗人球蛋白法对患者血清进行抗体筛选,对ABO血型正反定型不相符、交叉配血不合或抗体筛选阳性的患者血标本,采用盐水法和间接抗人球蛋白法进行复检、吸收放散试验、抗体特异性鉴定、...     

抗I抗体引起ABO血型正反定型不符及原因分析北大核心CSCD

目的探讨患者血清中抗I抗体的血清学特点及其对输血相容性检测的影响。方法在输血相容性检测中,出现正反定型不符和交叉配血不合的患者血标本,将其红细胞用37℃生理盐水反复洗涤后,进行复查血型和直接抗人球蛋白试验;对其血清进行冷凝集素吸收试验和不规则抗体筛选,对抗体筛选阳性的患者血标本进行抗体特异性鉴定、抗体性质及抗体效价测定。结果 6例患者ABO血型鉴定结果为:A型2例、B型3例、O型1例。患者血清标本在输血相容性检测中与反定型红细胞、自身红细胞、成人O型红细胞,在4℃、22℃发生1+～2+意外凝集,与脐血O型红细胞不发生凝集,与抗体筛选细胞在37℃不凝集,说明该抗体为抗I抗体。患者直接抗人球蛋白试验抗Ig G阴性、抗C3d阳性。将患者血清用2-巯基乙醇处理后,再与成人O型细胞、脐血O型细胞在4℃、22℃进行抗体检测,结果均不凝集,说明该抗体性质为Ig M型。抗体效价4℃为1∶128～1∶512、22℃为1∶32～1∶64、37℃为0。结论对输血相容性检测中出现意外凝集的患者血标本,采用37℃生理盐水洗涤红细胞、抗人球蛋白试验、冷凝集素吸收试验、不规则抗体筛选及特异性鉴定;并在37℃条件下进行血型鉴定和交叉配血试验,可保证检测结果的准确性和输血安全。     

孕妇ABO血型抗体效价检测与治疗

目的探讨AB0血型抗体效价异常与不良孕产史的关系及治疗效果。方法采用盐水试管凝集法,进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测;对抗体效价异常者进行中西医结合治疗。结果 228例孕妇中,血清效价≥1:128者有183例,异常检出率为80.26%;通过治疗三个疗程治愈175例,治愈率95.63%;三个疗程显效5例,占2.73%;总有效率为98.36%,效果满意。结论对有自然流产、死胎、早产、死产及新生儿溶血等不良孕产史的、女方为O型血的夫妇,开展ABO血型抗体效价检测对预防和治疗母婴血型不合溶血病有积极作用。     

夫妇血型不合的孕妇产前免疫性抗体检测分析

目的:探讨夫妇血型不合的孕妇免疫性IgG抗体效价异常率及临床意义, 观察凝聚胺法(MPT)检测孕妇血清中IgG抗A(B)及Rh血型抗D抗体的灵敏度和特异性.方法:常规检测夫妇ABO及RhD血型, 对夫妇ABO及Rh血型不合的孕妇血清进行不规则抗体筛选及特异性鉴定;用MPT法检测孕妇血清中IgG抗A(B)及Rh抗D抗体效价.结果:在986例夫妇ABO血型不合的孕妇血清中, MPT法检出IgG抗A(B)效价≥1∶ 64者528例(53.5%), 传统试管法检出512例(51.9%), 两者比较无统计学意义(P＞0.05);在15例RhD阴性孕妇中检出抗D抗体11例(73%).结论:产前对夫妇进行ABO、 RhD血型及IgG抗A(B)和抗D效价检测, 发现异常及时进行治疗, 可减少母婴血型不合新生儿溶血病的发生率;MPT法检测IgG抗A(B)及抗D抗体效价, 操作简便, 结果准确.     

多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用

目的： 建立用多聚抗原肽（multiple antigen peptides, MAP）包被磁珠制备单表位抗体的方法.方法： 通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP, 将其作为免疫原免疫小鼠, 获得多克隆抗血清.将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠（immunomagnetic beads, IB）, 通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体, 荧光偏振（fluorescence polarization, FP）法鉴定抗体的特异性, SDS-PAGE鉴定抗体纯度, 紫外分光光度法测定其回收率.结果： 合成的MAP具有较强的免疫原性, 免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶ 12 800.MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100 mg/L, 包被效率最高可达79%.应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体, 经鉴定与其他抗原表位无反应性, 其纯度为95%, 抗体的回收率为5.8%.结论： MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体, 其性质类似单克隆抗体.这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景.