肺腺癌中EGFR突变特异性抗体的表达及其意义

目的：探讨表皮生长因子受体（ epithe1ia1 growth factor receptor,EGFR）突变特异性抗体在肺腺癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学（ immunohistochemistry,IHC）法检测171例已知EGFR突变情况[扩增阻滞突变系统-PCR（ amp1ification refractory mutation system-PCR,ARMS-PCR）法检测]的肺腺癌中EGFR基因19、21号外显子突变特异性蛋白（ EGFR-19、EGFR-21）和非突变蛋白（ EGFR-P）的表达,分析EGFR-19、21表达与临床病理特征的关系,检验IHC与ARMS-PCR法检测结果的一致性。结果 EGFR突变蛋白表达与低分化腺癌（微乳头型、实体型）有关（ P=0.021）;EGFR-21高表达与肿瘤侵犯胸膜有关（P=0.005）。IHC法检测EGFR-19、21表达与ARMS-PCR法检测EGFR突变具有一致性（Kappa值均>0.4）;EGFR-19、21的敏感性、特异性分别为65.0%、89.4%和70.0%、97.6%。结论肺腺癌中EGFR突变蛋白表达与组织分化差、胸膜侵犯有关,提示其可作为预后不良的指标;IHC法检测EGFR突变特异性蛋白可用作EGFR突变初筛手段。     

肺腺癌胸水细胞块EGFR基因突变检测分析

目的探讨肺腺癌胸水细胞块中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变检测的临床价值。方法采用ARMS-PCR法检测143例肺腺癌细胞块和269例肺腺癌组织块中EGFR的29种突变类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者49例的一致性。结果细胞块EGFR突变型71例,阳性率49.65%(71/143);组织块EGFR突变型131例,阳性率44.26%(131/269);49例有组织块对照的细胞块EGFR结果一致性有36例,一致率达73.47%(36/49),其中细胞块EGFR的阳性率44.90%(22/49),组织块阳性率67.34%(33/49)。结论肺腺癌胸水细胞块EGFR的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的肺腺癌患者原发灶组织发生EGFR突变的概率较高。     

肺腺癌患者恶性胸腔积液中EGFR突变状况分析

目的 探讨原发性肺腺癌患者恶性胸腔积液中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变情况.方法 收集恶性胸腔积液标本109例,同时选取该患者的纤维支气管镜或经肺穿刺活检晚期标本109例,提取DNA后,采用RT-PCR法和基因测序法同时进行EGFR 19、21外显子突变检测.结果 两种标本中EGFR突变率分别为56.88%、53.21%,胸腔积液中的突变率与晚期患者活检组织标本相比无明显差异(P=0.35).结论 胸腔积液中的EGFR突变率与其活检组织突变率接近,在晚期肺癌患者临床活检取材困难时,胸腔积液可以作为检测EGFR突变的另一种资源.     

应用ARMS检测不同类型的肺腺癌标本EGFR基因突变

目的：探讨应用扩增阻滞突变系统（ amp1ification re-fractory mutation system,ARMS）法检测不同类型肺腺癌标本表皮生长因子受体（ epithe1ia1 growth factor receptor,EGFR）基因突变的特点。方法收集80例山东省西部地区肺腺癌患者肿瘤标本（胸水细胞块、肺活检、手术切除组织）,采用ARMS法检测EGFR基因19、20、21号外显子突变状态,并分析EGFR突变与标本类型、患者性别、年龄、吸烟状态及家族史等的关系。结果肺腺癌中,总EGFR突变率为41.25%,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织 EGFR 突变率分别为43.14%、31.25%、46.15%（ P =0.649）。EGFR 突变标本中,21号外显子错义突变（L858R）发生比例最高（59.58%,19/33）,其次为19号外显子缺失（19de1）（39.39%,13/33）,二者同时突变占3.03%（1/33）;女性与男性的突变率差异有显著性（54.55% vs 25.00%,P=0.008）;吸烟与不吸烟患者的突变率差异有显著性（25.81% vs 51.02%,P=0.026）。结论在肺腺癌中,胸水细胞块、肺活检、手术切除组织等标本均可用于EGFR基因突变检测,21号外显子L858R突变最常见;女性、不吸烟患者突变率明显高于男性、吸烟患者。     

四川地区肺腺癌中EGFR基因19、21外显子突变研究

目的探讨EGFR基因19、21外显子突变与肺癌组织学类型、人种、年龄、性别、是否吸烟和所在地域的关系。方法收集65例四川地区肺腺癌患者石蜡包埋组织样本,选用针对19、21外显子的野生型和突变型基因的特异性引物,采用等位基因特异性寡核苷酸PCR法(allele-specific oligonucleotide polymerase chain reaction,ASO-PCR)检测突变。结果 65例肺腺癌样本中,35例发生19、21外显子突变(53.85%),其中19外显子缺失突变13例(20%),21外显子L858R错义突变23例(35.38%);男性38.24%(13/34),女性70.97%(22/31);吸烟者31.25%(5/16),非吸烟者61.22%(30/49);≤60岁的患者为57.14%(16/28),>60岁的患者为51.35%(19/37)。结论 65例四川地区原发肺腺癌中EGFR基因19、21外显子突变在女性、非吸烟患者中更常见(P<0.05),其中21外显子L858R突变率高于19外显子缺失率(P<0.05)。与文献报道比较,肺腺癌EGFR基因总突变率较其他类型肺癌高,且高于白种人。     

EGFR突变肺腺癌同侧乳腺转移1例

<正>患者女性,52岁。无明显诱因出现咳嗽咳痰、痰中带血,伴胸痛1个月。胸部CT示右肺上叶见团块状软组织影,大小3.6 cm×3.0 cm, 边缘见毛刺及胸膜牵拉;两侧肋骨、肩胛骨、胸骨体及部分腰椎骨质破坏;右侧乳腺有一肿块,大小2.4 cm×1.3 cm, 右侧腋窝及纵隔内见肿大淋巴结。行右侧乳腺肿块穿刺活检,病理报告：(右侧乳腺)浸润性导管癌,Ⅲ级伴大汗腺化生。     

EGFR与PDGFR-α在肺腺癌中的表达及意义

目的探讨血小板衍生生长因子受体（PDGFR-α）和表皮生长因子受体（EGFR）与肺腺癌发生发展的关系。方法免疫组化SP法检测PDGFR-α与EGFR在60例肺腺癌原发灶和24例正常支气管黏膜中的表达。结果 PDGFR-α主要在肺腺癌细胞质表达,少数在细胞核表达;EGFR主要表达于肿瘤细胞的细胞膜上,细胞浆中也有表达。二者均在肺腺癌细胞中过度表达（P〈0.05）。PDGFR-α的阳性表达率在肺腺癌高分化组明显高于低分化组（P〈0.05）,而EGFR在肺腺癌高分化组和低分化组中的表达相仿（P〉0.05）。结论 PDGFR-α的阳性表达与肺腺癌的分化程度呈正相关,EGFR的阳性表达与肺腺癌的分化程度无相关性。     

心包积液中发现肺腺癌EGFR双突变1例

患者女性,80 岁,2017 年4月无明显诱因下出现胸闷、气短、乏力,并伴咳嗽、咳痰,痰液呈白色黏液,20 天后患者自述胸闷症状逐渐加重,至当地医院查胸部CT示心包积液,为求进一步治疗来我院就诊.自诉7 个月前在当地医院查胸部CT示左下肺占位,两肺转移瘤可能,接受当地医院治疗(具体不详).入院后行CT胸部平扫发...     

量子点多重荧光染色技术在肿瘤标志物检测中应用的研究进展

纳米技术在恶性肿瘤检测和诊断中已有广阔的应用前景。新型荧光半导体纳米晶体量子点具有荧光强度高、稳定性好和发射光谱可调等理化特性,经生物分子修饰后,可与肿瘤标志物结合,用于同时检测多种肿瘤标志物。     

肺腺癌EGFR突变与病理组织学亚型及CT影像学特征的关系

目的 探讨肺腺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变与病理组织学亚型及CT影像学特征的关系.方法 采用ARMS检测96例肺腺癌患者的EGFR突变,分析其与临床因素、病理组织学亚型及CT影像学特征的关系;同时分析与EGFR突变具有相关性的病理组织学亚型及与CT...     

量子点探针辅助的近红外荧光成像技术在肿瘤显影中的应用

肿瘤早期检测是精准并高效诊疗癌症的关键因素。荧光成像技术凭借其高灵敏度、高时空分辨率、无电离辐射和无创实时成像等优点,在生物医学领域,尤其在肿瘤检测方面展现出了广泛的应用前景。近红外光穿过生物组织时,受到的吸收和散射较少,因此在生物成像方面体现了高信噪比和强组织穿透能力。在众多荧光探针中,近红外发光的量子点探针因其量子产率高、抗光漂白性强、发射光可调和稳定性良好等特点在荧光成像方面显示出突出的优势。本文基于量子点探针的近红外荧光成像技术在肿瘤显影中的应用,介绍了量子点优异的光学性能,并重点讨论了硫化铅（PbS）和硫化银（Ag2S）近红外发光量子点探针在肿瘤成像方面的研究进展,并对近红外发光量子点探针的应用前景进行了展望。     

涎腺癌组织中EGFR和HER-2表达及临床意义

目的 探讨黏液表皮样癌、腺样囊性癌和腺泡细胞癌中EGFR和HER-2基因/蛋白表达及临床意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测80例涎腺癌(黏液表皮样癌30例、腺样囊性癌30例、腺泡细胞癌20例)和30例良性多形性腺瘤中EGFR和HER-2蛋白表达;采用荧光原位杂交技术检测涎腺癌中EGFR和HER-2基因扩增.结果 (1)涎腺癌中EGFR和HER-2蛋白阳性率分别为71.25％和32.5％,高于良性多形性腺瘤组(P均＜0.05),其中以黏液表皮样癌中EGFR和HER-2蛋白阳性率最高,EGFR蛋白的表达强度最高(P均＜0.05).(2)EGFR和HER-2蛋白表达与涎腺癌患者性别、年龄、肿瘤最大直径、肿瘤分化程度、组织学亚型无关(P均＞0.05);涎腺癌中EGFR和HER-2蛋白表达无相关性(rs =0.166,P＞0.05).(3)涎腺癌中EGFR基因高多体扩增的总阳性率为18.75％ (15/80),其中黏液表皮样癌13例,腺样囊性癌2例,阳性率分别为43.3％和6.7％,相应蛋白表达强度均为(++)或(+++),表达强度和基因扩增之间呈明显正相关(rs =0.491,P＜0.01);涎腺癌中未检测到HER-2基因扩增及17号染色体多体.(4)EGFR蛋白(++/+++)组和基因扩增组患者的生存时间比蛋白(-/+)组和无基因扩增组均明显缩短(P均＜0.05).结论 黏液表皮样癌高频率、高强度表达EGFR,并发生高多体基因扩增,可作为其分子靶向治疗的靶点.黏液表皮样癌、腺样囊性癌和腺泡细胞癌中HER-2蛋白弱表达,未检测到基因扩增.     

肺腺癌EGFR基因19、21号外显子突变分析

目的 探讨肺腺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因19、21号外显子突变特点及其临床意义.方法 对肺腺癌手术组织提取DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)和直接测序法检测EGFR基因19号与21号外显子突变状态,分析与临床病理参数之间的相关性.结果 在54例被测肺腺癌肿瘤中,发现29例患者存在EGFR基因突变,占53.7％ (29/54).其中,19号外显子突变13例(24.1％),均为缺失突变;21号外显子突变病例为16例(29.6％),均为L858R点突变.高、中分化肿瘤的EGFR突变率均达60％以上,明显高于低分化肿瘤突变率44％.结论 肺腺癌存在较高频率的EGFR基因突变,在高、中分化肿瘤的突变率有高于低分化肿瘤的趋势.     

两种突变特异性抗体用于肺腺癌EGFR基因突变的评价

目的：验证EGFR 19delE746-A750和21L858R突变抗体的灵敏度和特异性以及免疫组织化学与RT-PCR方法的一致性,并探讨免疫组化在肺腺癌EGFR基因突变状态评价中的应用。方法：采用免疫组织化学方法对139例经过RT-PCR验证EGFR基因突变状态的病例进行检测。并采用SPSS19.0软件对两种方法的检测结果进行一致性分析。结果：与RT-PCR结果相比,EGFR delE746-A750和L858R突变抗体的总体敏感性为78.5%,特异性为93%。分别分析EGFR delE746-A750和L858R特异抗体,前者的敏感性和特异性分别是64.3%和97.8%,后者为90.3%和95.2%。采用SPSS19.0软件进行Kappa检验显示免疫组化和RT-PCR的结果高度一致。结论：EGFR delE746-A750和L858R突变抗体具有良好的灵敏度和特异性,结合全自动免疫组化仪进行EGFR基因突变检测是一种经济便捷可靠的方法。     

免疫组织化学和荧光原位杂交检测肺腺癌ROS1表达的对比

目的比较免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和荧光原位杂交(fluorescent in situhybridization,FISH)技术在检测肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因的差异性和一致性,评估IHC在临床上的应用价值。方法应用IHC和FISH技术对332例肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因进行检测,比较两者检测的结果和相关性,并探讨ROS1融合基因与临床病理特征之间的关系。结果 332例肺腺癌中FISH阳性者13例,阴性者319例,ROS1融合基因阳性率为3.9%;ROS1蛋白表达结果:0者312例,1+者2例,2+者5例,3+者13例,ROS1蛋白过表达率为6.0%;经FISH检测312例ROS1蛋白表达为0的标本无ROS1融合基因,2例1+的标本中也无ROS1融合基因;5例2+的标本中有2例ROS1融合基因,13例3+的标本中11例有ROS1融合基因;IHC检测0和1+、2+、3+标本FISH检测阳性符合率分别为0(0/314)、40%(2/5)和84.6%(11/13);IHC检测ROS1蛋白为2+~3+的标本中72.2%(13/18)显示ROS1融合基因,0~1+患者中无1例有ROS1融合基因(Kappa系数=0.831,P0.01);IHC检测ROS1蛋白表达的敏感性和特异性分别100%和98.4%。结论 IHC检测ROS1蛋白表达和FISH检测ROS1融合基因,两种方法有较高的符合率,一致性较好,IHC有较高的敏感性和特异性,可作为临床检测肺腺癌ROS1融合基因的简单而有效的方法。     

肺腺癌组织中CPNE1蛋白的表达及临床意义

目的探讨Copine 1(CPNE1)蛋白在肺腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测CPNE1蛋白在186例肺腺癌组织及30例正常肺组织中的表达;采用RT-PCR技术检测肺腺癌组织及正常肺组织中CPNE1 mRNA的表达。结果在186例肺腺癌组织中68例CPNE1低表达(36.56%),118例呈CPNE1高表达(63.44%),CPNE1在正常组织中均呈低表达。相关性分析结果显示,CPNE1表达与肺腺癌分期、远处转移有关(P0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小等无关。RT-PCR结果显示,肺腺癌组织中CPNE1的表达量显著高于正常肺组织。结论 CPNE1蛋白在肺腺癌组织中的表达较正常肺组织高,且与淋巴结转移、临床分期有关。CPNE1蛋白表达与肺腺癌的发生、发展及预后密切相关,有望成为肺腺癌预后评估的重要指标。     

量子点免疫荧光技术检测EMMPRIN、MMP-2和 P53蛋白在人肺癌组织中的表达意义

目的: 本研究利用新型免疫荧光标记试剂-量子点(QDs)结合组织芯片技术检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN/CD147)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和P53 蛋白在人肺癌组织中的表达,并探讨EMMPRIN与肺癌恶性生物学行为的关系。方法: 利用QDs免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术分别检测人肺癌组织芯片中EMMPRIN、MMP-2和P53蛋白的表达,并利用QDs免疫荧光双标法同时检测了EMMPRIN与P53蛋白的共表达。结果: EMMPRIN、MMP-2和P53蛋白表达在肺癌组织的阳性率分别为:70.00%、77.14%和72.86%,与非癌变肺组织相比,差异均显著(P<0.05);而且与肺癌的TNM分期、淋巴结转移均显著相关(P<0.05),但与其它的临床病理特征均明显无关(P>0.05)。EMMPRIN和MMP-2、P53蛋白表达之间均呈显著正相关(P<0.01)。结论: EMMPRIN、MMP-2和P53蛋白均与肺癌的发生有关,EMMPRIN可能与MMP-2、P53协同促进肺癌的恶性进展。     

仿生量子点脂质体纳米探针的合成

目的:合成仿生量子点脂质体纳米探针（PEG-LP-QDs）,优化合成条件并初步探究PEG-LP-QDs的性质,为PEG-LP-QDs在体内示踪、肿瘤成像、多重检测等生物医学领域的应用奠定基础。 方法:采用薄膜分散法,以磷脂酰胆碱、聚乙二醇（PEG）-磷脂酰乙醇胺、胆固醇为膜材,包裹一定量的油溶性ZnCdSe/ZnS量子点（QDs）合成PEG-LP-QDs;通过透射电子显微镜(TEM)、纳米颗粒追踪技术（NTA）、荧光分光光度计鉴定并分析PEG-LP-QDs的形貌、粒径和荧光强度,进而优化合成温度及QDs数量。 结果:根据合成的LPs粒径与QDs的荧光强度变化,选取40 ℃为最佳合成温度;TEM和NTA结果证实PEG-LP-QDs合成成功,粒径集中分布于128 nm左右;且当加入10 μL浓度为3 mg/mL的QDs时,PEG-LP-QDs的荧光强度达到最大值。 结论:成功合成新型PEG-LP-QDs,具有良好的生物相容性和独特的发光特性,其在生物医学领域中的应用价值有待进一步研究。     

量子点在生物医学中的应用

量子点系统研究是近年来的热门话题。量子点特殊的光学性质使得它在生物化学、分子生物学、细胞生物学、基因组学及蛋白质组学研究中有着极大的应用前景。就其光学特性、制备方法作了简单概述，并着重阐述了量子点作为荧光探针在生物医学方面的研究进展。