阿昔莫司对脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的：探讨阿昔莫司对脂多糖诱导的脓毒症大鼠心肌损伤及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法：将50只SD大鼠分为正常对照组、模型组、阿昔莫司组、Nrf2通路抑制剂全反式维甲酸组（ATRA组）、阿昔莫司+ATRA组,每组10只。通过腹腔注射脂多糖（5 mg/kg）建立脓毒症大鼠模型。检测并比较各组大鼠一般状况、血清心肌损伤标志物、血脂水平变化、心肌组织氧化应激及炎症因子水平、心肌组织病理改变、心肌细胞凋亡与细胞核中Nrf2表达情况,以及HO-1、核因子-κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、脂蛋白脂肪酶（LPL）、超氧化物歧化酶2(SOD2)、过氧化氢酶（CAT）、A类清道夫受体（SR-A）、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达。结果：与模型组比较,阿昔莫司组大鼠无死亡,多呼吸较为平缓,精神萎靡症状缓解,心肌组织病理损伤缓解,心肌细胞凋亡率、血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶、心肌肌钙蛋白Ⅰ、甘油三酯、游离脂肪酸及心肌组织中丙二醛、活性氧簇、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α水平均降低,血清中总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低...     

丙泊酚对体外循环大鼠Nrf2/HO-1通路及肠屏障损伤的影响

目的 探究丙泊酚对体外循环(CPB)大鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO)-1通路及肠屏障损伤的影响。方法 SD雄性大鼠72只采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、CPB组、Nrf2激活剂(Hesperin)组(10 mg/kg)、丙泊酚高、中、低剂量(40、20、10 mg/kg)组,每组12只。制备CPB模型,CPB组大鼠在CPB开始前20 min开始静脉输注生理盐水;Hesperin组、丙泊酚各剂量组在CPB开始前20 min开始静脉输注相应剂量的丙泊酚注射液。CPB转流2 h后,进行肠道微循环测试;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆二胺氧化酶(DAO)活性、D乳酸(D-LA)、内毒素(ET)含量;生化法检测肠组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;苏木素-伊红染色(HE)观察肠组织病理变化;免疫组织化学法观察肠屏障功能相关紧密连接蛋白(ZO)-1和occludin表达;Western印迹检测肠组织Nrf2、HO-1蛋白表达。结果 与Sham组相比,CPB组微血管直径明显缩小,...     

Nrf2/ARE/HO-1通路:阿尔茨海默病神经保护的潜在靶点

<正>近年研究表明,调节Nrf2/ARE/HO-1通路在各种神经系统疾病中具有神经保护作用。通过遗传学或药理学手段上调Nrf2或HO-1的表达,在动物模型和细胞体系中具有神经保护作用。因此有必要就Nrf2/ARE/HO-1在阿尔茨海默病(AD)中作用的研究进行梳理。本文对Nrf2/ARE/HO-1在AD中作用的研究历史进行了梳理。调节Nrf2/ARE/HO-1通路的激活     

虎杖苷通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠急性心肌梗死后心肌细胞损伤

目的研究虎杖苷对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞损伤的保护作用及分子机制。方法 SD雄性大鼠随机分为Sham组、AMI组、虎杖苷组、虎杖苷+ZnPP组。后3组通过左冠状动脉前降支结扎的方式建立AMI模型。虎杖苷为每天40 mg/kg灌胃,血红素加氧酶1(HO-1)抑制剂Zn PP为每天20 mg/kg腹腔注射。造模后第8天,检测各组心功能超声指标左心室射血分数(LVEF)、左室内压力变化最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、血清心肌损伤指标、心肌梗死面积、心肌氧化应激指标及核因子E2相关因子2(Nrf2)/HO-1表达情况。结果与Sham组比较,AMI组LVEF、+dp/dtmax、-dp/dtmax及心肌超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量均明显降低,心肌梗死面积及血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量及心肌丙二醛(MDA)的含量及Nrf-2、HO-1的表达水平均明显增加(P0. 05)。与AMI组比较,虎杖苷组LVEF、+dp/dtmax、-dp/dtmax及心肌SOD、GSH-Px的含量及Nrf-2、HO-1的表达水平均明显升高,心肌梗死面积及血清LDH、CK、CK-MB含量及心肌MDA的含量均明显降低(P0. 05)。与虎杖苷组比较,虎杖苷+ZnPP组LVEF、+dp/dtmax、-dp/dtmax及心肌SOD、GSH-Px的含量均明显降低,心肌梗死面积及血清LDH、CK、CK-MB含量及心肌MDA的含量均明显增加(P0. 05)。结论虎杖苷能够减轻大鼠急性心肌梗死后心肌细胞损伤,该效应可能由Nrf2/HO-1通路的激活介导。     

虾青素调控Nrf2/HO-1/NQO1通路减轻心肌缺血再灌注大鼠氧化应激损伤

目的 研究虾青素对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠氧化应激损伤的影响及其机制。方法 将SD大鼠分为假手术组、心肌I/R组和虾青素低、中、高剂量组,采用冠状动脉结扎法建立心肌I/R大鼠模型,虾青素低、中、高剂量组分别灌胃25、50、100 mg/kg虾青素,其余组灌胃生理盐水。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态;TUNEL染色检测大鼠心肌组织中细胞凋亡率;Western印迹法检测大鼠心肌组织中核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1/醌氧化还原酶(NQO1)通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比,心肌I/R组血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显著升高(P<0.05),血清GSH-Px活性及心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平显著降低(P<0.05),心肌组织出现明显的病理损伤;使用虾青素后,大鼠血清CK-MB、cTnI水平、MDA含量及心肌组织中细胞凋亡率显...     

穿心莲内酯调控Nrf2/HO-1通路减轻百草枯诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化损伤

目的 探讨穿心莲内酯(Andrographolide)减轻百草枯(PQ)诱导的小鼠Ⅱ型肺泡细胞(MLE-12)氧化应激损伤。方法 常规培养MLE-12细胞,分为对照组、PQ组、0.1%DMSO+PQ组和穿心莲内酯+PQ组;给予25μmol·L^-1穿心莲内酯预处理6 h,后给予800μmol·L^-1 PQ干预24 h。CCK-8检测细胞活性;RT-qPCR和Western blot检测Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白水平;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞内的活性氧(ROS)水平。结果 PQ能够降低MLE-12细胞活性,并呈剂量依赖性;PQ为200μmol·L^-1、400μmol·L^-1、800μmol·L^-1、1200μmol·L^-1和2000μmol·L^-1对应细胞活性为89.5%、74.27%、58.65%、37.65%和26.83%。浓度为25μ...     

通络熄风汤介导Nrf2/HO-1信号通路改善糖尿病心肌损伤的作用机制

目的:观察通络熄风汤对2型糖尿病模型大鼠心肌细胞损伤的作用及其对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路介导的细胞氧化应激的影响。方法:将大鼠分为正常组、模型组及中药组。利用链脲佐菌素(STZ)注射法构建糖尿病大鼠模型。中药组给予中药配方颗粒通络熄风汤悬浮液灌胃治疗,正常组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,连续8周。采用透射电镜观察心肌组织的超微结构。检测超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)水平;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)和实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌细胞Nrf2/HO-1蛋白及mRNA表达水平。结果:与模型组比较,中药组大鼠体质量及血糖指标改善,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,中药组大鼠心肌细胞组织超微结构得到恢复,ROS水平降低,SOD水平,Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:通络熄风汤通过激活Nrf2/HO-1信号减轻心肌组织细胞氧化应激损伤,提高抗氧化酶活性,保护心脏功能。     

基于Nrf2/HO-1及NF-κB途径探讨积雪草酸对急性心肌梗死大鼠的影响及其作用机制

目的研究积雪草酸对急性心肌梗死大鼠的影响及作用机制。方法取健康SD大鼠,使用左冠状动脉前降支结扎的方法制备急性心肌梗死模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、积雪草酸低、中、高剂量组,每组10只,假手术组只穿线不结扎,积雪草酸低、中、高剂量组分别给予25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg积雪草酸工作液灌胃,假手术组和模型组给予等量的生理盐水,每日一次,连续给药28天。记录手术前、手术后即刻、给药1、3、7、10、14、21及28天各组大鼠心电图ST段变化,采用TUNEL检测心肌细胞凋亡,HE染色观察大鼠心肌组织病理形态变化,采用ELISA检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量;低温取心室组织,采用荧光定量聚合酶链反应检测大鼠心肌组织Nrf2/HO-1和NF-κB mRNA的表达,采用Western blot检测大鼠心肌组织Nrf2/HO-1和NF-κB蛋白的表达。结果造模后急性心肌梗死大鼠心电图ST段明显抬高,给予积雪草酸治疗后心肌梗死大鼠心电图ST段呈现不同程度的下降趋势(P0.05或P0.01); HE染色结果显示,模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,且有大量炎性细胞浸润,细胞核溶解、消失,甚至坏死;积雪草酸各剂量组大鼠心肌细胞紊乱程度减轻,细胞核溶解现象改善,炎性细胞浸润减少;与假手术组相比,模型组心肌凋亡细胞显著增加(P0.05),大鼠血清LDH、CK-MB、MDA含量均显著升高(P0.01),血清SOD水平显著下降(P0.01),Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01),NF-κB mRNA和蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组相比,积雪草酸各剂量组心肌凋亡细胞显著减少(P0.05),大鼠血清LDH、CK-MB、MDA含量均显著降低(P0.01),血清SOD水平显著升高(P0.01),Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达显著升高(P0.05),NF-κB mRNA和蛋白表达显著降低(P0.05)。结论积雪草酸能够改善急性心肌梗死大鼠的心肌损伤,其可能是通过调节Nrf2/HO-1及NF-κB途径信号通路来实现的。     

青蒿琥酯通过Nrf2/HO-1/NQO1通路改善血管性认知障碍的实验研究

目的 基于Nrf2/HO-1/NQO1通路探讨青蒿琥酯对血管性认知障碍大鼠学习记忆功能的影响及机制。方法 27只雄性大鼠,随机分为假手术组、溶剂对照组和青蒿琥酯组,每组9只。通过结扎双侧颈总动脉建立血管性认知障碍大鼠模型,溶剂对照组和青蒿琥酯组在造模后分别给予5%NaHCO₃和50 mg/kg青蒿琥酯腹腔注射,持续给药28 d。给药后通过Morris水迷宫检测各组大鼠的学习记忆功能,检测各组大鼠海马内的超氧歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;通过劳克坚牢蓝(LFB)染色显示神经髓鞘损伤情况;通过Western Blot检测大鼠海马中Nrf2、 HO-1和NQO1等蛋白表达水平。对上述3组检测结果进行统计学分析和比较。结果 与假手术组相比,溶剂对照组找到平台的潜伏期显著增加(P<0.05),而穿过平台位置的次数显著减少(P<0.05);与溶剂对照组相比,青蒿琥酯组大鼠找到平台的潜伏期显著降低(P<0.05),而穿过平台位置的次数显著增加(P<0.05)。LPB染色显示,血管性认知障碍大鼠胼胝体区域可见明...     

虎杖苷通过激活Nrf2/HO-1信号抑制氧化应激诱导的心肌细胞损伤

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞损伤模型中,虎杖苷对心肌细胞的保护作用及机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞损伤模型,MTT检测细胞生存能力;Western印迹检测细胞蛋白表达;试剂盒检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果MTT实验筛选药物剂量为100μmol/L;H2O2有效刺激剂量为100μmol/L;虎杖苷预处理抑制了H2O2诱导的细胞活性下降,抑制了H2O2诱导的细胞凋亡。虎杖苷促进了核因子E2相关因子(Nrf)2和血红素加氧酶(HO)-1蛋白的表达,降低了SOD的水平,同时使MDA水平升高。Nrf2抑制剂ML385与虎杖苷同时预处理后细胞凋亡得到抑制,同时Nrf2和HO-1蛋白的表达水平下降,SOD的水平升高而MDA水平下降。结论虎杖苷抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡,其机制与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

肺炎支原体LAMPs经PI3K/Nrf2诱导人单核细胞表达HO-1

目的 探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)脂质相关膜蛋白(lipid-associated membrane protein,LAMPs)对人单核细胞表达血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的影响,并探讨可能的调控机制。方法 体外培养THP-1细胞,用不同浓度的LAMPs作用后,分别采用realtime-PCR和Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白的表达。同时采用不同浓度的放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)预处理细胞,观察其对HO-1表达的影响,以证实HO-1的表达是否通过转录和翻译水平;提取LAMPs作用前后的核蛋白,凝胶迁移率实验检测Nrf2的核转位、Western blot检测Akt的磷酸化情况;同时采用PI3K抑制剂LY294002处理细胞,观察其对LAMPs诱导Nrf2核转位及HO-1表达的影响;最后采用 siRNA干扰Nrf2表达,以证实Nrf2是否参与调控HO-1表达。结果 (1)0~5 μg/mL LAMPs能以剂量依赖性方式诱导THP-1表达HO-1 mRNA和蛋白;(2)5 μg/mL LAMPs能诱导THP-1细胞Akt磷酸化,并能增强其DNA结合活性;PI3K抑制剂LY294002处理后,可明显抑制LAMPs诱导的HO-1表达和Nrf2核转位;(3)干扰Nrf2表达后,可明显下调LAMPs诱导THP-1细胞表达HO-1。结论 LAMPs可诱导THP-1细胞表达HO-1,其机制可能与PI3K/Nrf2通路有关。     

核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在酒精性肝病中的作用

酒精性肝病(ALD)在我国的发病率逐年上升,国民的疾病负担日益增加。肝细胞的氧化应激反应是ALD的重要致病机制。核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路是人体重要的内源性抗氧化应激通路,在氧化应激作用下,Nrf2被激活并发挥其转录活性诱导HO-1高表达。HO-1是体内重要的氧化应激反应蛋白,与其血红素酶解产物(胆红素、CO、铁)共同发挥着抗炎、抗氧化及调控细胞凋亡的作用。本文将对近年来Nrf2/HO-1信号通路在ALD中的研究进展进行综述,力求为ALD的发生发展寻找理论依据及治疗切入点。     

丙泊酚对大鼠肝缺血再灌注致急性肺损伤时Nrf2和HO-1表达的影响

目的 探讨丙泊酚对大鼠肝缺血再灌注所致急性肺损伤时核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响.方法 健康SD大鼠24只,雌雄不限,体重220～ 250 g,随机分成三组:假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)和丙泊酚组(P组).SH组暴露肝门,但不阻断;IR组用无创血管夹阻断肝门30 min,开放再灌注180 min,制备肝缺血再灌注肺损伤模型;P组于阻断肝门前经尾静脉注射丙泊酚20 mg/kg,20 mg·kg-1 ·h-1静脉维持至大鼠死亡,余同IR组.各组于再灌注180 min后处死大鼠取肺组织,称重后计算肺湿干重比,免疫组织化学和Western印迹测定Nrf2和HO-1蛋白表达,光镜下观察肺组织病理结果.结果 与SH组比较,IR组和P组Nrf2和HO-1蛋白表达水平及肺湿干重比升高(P＜0.05);与IR组比较,P组Nrf2、HO-1表达水平升高(P＜0.05),肺湿干重比降低(P＜0.05).P组肺组织病理学损伤程度较IR组减轻.结论 丙泊酚预先给药可通过上调Nrf2和HO-1的表达水平,从而减轻肝缺血再灌注损伤所致的急性肺损伤.     

核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号在川崎病诱发心肌损伤中的作用

目的 探讨核因子E2相关因子（Nrf）2/血红素加氧酶（HO）-1信号通路在川崎病（KD）诱发心肌损伤中的作用。 方法 60只4周龄SD大鼠随机分为对照组、干酪乳杆菌细胞壁成分（LCWE）模拟川崎病组（KD）和叔丁基对苯二酚（TBHQ）干预KD组（KD+TBHQ）,每组20只;对照组腹腔注射生理盐水0.5 ml,KD组和KD+TBHQ组腹腔注射LCWE 0.5 ml（1 mg/ml）。4周后,小动物超声检测大鼠心脏功能,酶联免疫吸附法（ELISA）检测心肌组织内丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和Caspase-3的活性,Western blot检测心肌组织内Nrf2和HO-1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。 结果 注射LCWE 4周后,成功制备KD模型鼠。同时发现,与对照组相比,KD组左室射血分数（LVEF）和短轴缩短率（FS）均明显降低（P < 0.05）,心肌组织凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax比值显著降低（P < 0.05）,Caspase-3活性明显升高（P < 0.05）,心肌组织中MDA含量增加,而SOD活性降低（P < 0.05）,Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低（P < 0.05）;而应用Nrf2激动剂TBHQ后,可显著改善KD引起的心肌损伤,并且明显降低心肌组织氧化应激程度（P < 0.05）。 结论 KD抑制心肌中Nrf2/HO-1信号,导致氧化应激程度增强,引起细胞凋亡增加,进而引发心脏损伤,TBHQ激活Nrf2可明显改善KD的上述作用。     

游泳训练通过激活Nrf2/ARE/Glo-1通路改善糖尿病大鼠认知功能障碍

目的研究游泳训练对糖尿病模型大鼠学习记忆能力的改善作用及可能的分子机制。方法将雄性SD大鼠分为正常组、糖尿病模型(DM)组、低强度游泳(LM)组、中强度游泳(MM)组、高强度游泳(HM)组。各游泳组进行不同强度的无负重游泳训练。8 w后,采用Morris水迷宫实验检测游泳训练对大鼠的空间学习记忆能力的影响。随后取材,可见光分光光度法测定大鼠海马中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和谷胱甘肽(GSH)水平,荧光分光光度法测定大鼠海马内晚期糖基化终末产物(AGEs)含量,Western印迹法检测大鼠海马中乙二醛酶(Glo)-1、核转录因子(NF)-E2相关因子(Nrf)2表达水平。结果与DM组相比,MM组大鼠的学习记忆能力明显增强。各游泳组T-SOD酶活力和GSH水平较DM组明显升高,而MM、HM组AGEs相对含量明显降低。MM、HM能显著诱导Nrf2核转位,并且促进Glo-1表达。结论中高强度游泳训练能够提高DM大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与激活Nrf2/ARE/Glo-1通路有关。     

熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性胆管炎患者疗效及对血清Nrf2和HO-1水平的影响

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)治疗原发性胆汁性胆管炎和肝硬化(PBC)患者疗效及对血清核因子相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)水平的影响.方法 2017年1月～2020年1月我院诊治的原发性胆汁性胆管炎患者31例和原发性胆汁性肝硬化患者34例(Child A级15例,Child B级12例,Chil...     

血红素加氧酶-1对慢性肾功能衰竭大鼠高血压的影响

目的 建立大鼠慢性肾功能衰竭高血压模型，研究血红素加氧酶-1(HO-1)对慢性肾功能衰竭大鼠血压的影响，并探讨血红素加氧酶-1在慢性肾衰血压调节中的作用和机制。方法 5／6肾切除法建立慢性肾功能衰竭，大鼠随机分成3组：①正常组，②肾衰组，③Hemin组(肾衰 HO-1诱导剂组)。检测术后第6、8、10周的血压，第10周血清尿素氮、肌酐、血浆和肾组织丙二醛(MDA)，双波长分光光度法测量血浆内源性CO的水平，观察第10周肾脏病理改变，免疫组织化学方法检测肾组织HO-1的表达，应用RT-PCR和Western Blot检测肾组织HO-1 mRNA和蛋白质的表达。结果 诱导慢性肾功能衰竭大鼠体内HO-1表达可以：①明显升高血浆内源性CO水平(P＜0．05)；②减少血浆和肾组织MDA；③明显降低慢性肾功能衰竭大鼠血压(P＜0．01)；④降低血清尿素氮、肌酐(P＜0．01)；⑤减轻肾小球系膜增生、间质损害。结论 HO-1可以通过释放内源性CO和减少血浆氧化应激水平而降低慢性肾衰大鼠血压，此外它还可能具有降压效应以外的肾脏保护作用。     

还原型谷胱甘肽对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖及核转录因子NF-E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路的影响

目的 探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖及核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响.方法 分别用浓度为0、1、2、5、10 mmol/L的GSH作用于经0.1 μg/ml脂多糖活化的大鼠HSC-T6细胞24h后,四甲基偶氮唑盐比色法检测HSC-T6增殖情况,放射免疫法检测细胞上清液中透明质酸(HA)及Ⅳ型胶原的含量,实时荧光定量PCR检测Nrf2和HO-1的mRNA表达水平,免疫细胞化学染色法检测HSC-T6中Nrf2和HO-1的蛋白质表达情况,分光光度计检测HO-1的活性变化.两两比较采用t检验,两变量间的关系采用曲线拟合方法. 结果 GSH能抑制HSC-T6增殖,1、2、5、10 mmol/L组的吸光度值分别为0.79±0.02、0.74±0.03、0.70±0.02、0.62±0.01,均低于0mmol/L组的0.88±0.03(t值分别为3.16、6.09、7.17、11.94,P值均＜0.05).GSH 1、2、5、10mmol/L组的HA表达量分别为(372.98±11.01)μg/L、(320.76±16.37) μg/L、(284.46±13.17)μg/L、(239.08±16.95)μg/L,明显低于0 mmol/L组的(415.74±14.52)μg/L(t值分别为4.07、7.52、11.59、13.71,P值均＜0.05);Ⅳ型胶原表达量分别为(191.27±17.49)μg/L、(163.85±16.26) μg/L、(133.03±13.14)μg/L、(103.31±12.52) μg/L,也低于0mmol/L组的(251.47±14.06) μg/L(t值分别为4.65、7.58、10.66、13.63,P值均＜0.05).0 mmol/L组HSC-T6中Nrf2 mRNA相对表达量(1.21±0.11)低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为1.51±0.06、1.92±0.08、2.69±0.07、3.43±0.07),Nrf2蛋白表达的累积吸光度值(17.84±0.61)也低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为23.85±0.20、27.90±0.32、33.69±0.75、38.64±0.38); HO-1 mRNA相对表达量(1.25±0.09)低于1、2、5、10 mmol/L组(分别为1.43±0.08、1.73±0.07、2.10±0.08、2.64±0.07),HO-1蛋白表达的累积吸光度值(16.77±0.31)也低于1、2、5、10 mmol/L组(20.75±0.30、24.84±0.24、28.89±0.19、33.88±0.19),差异均有统计学意义(P值均＜0.05).HO-1的活性也随GSH浓度增加而上升.结论 GSH可抑制HSC-T6增殖,减少其细胞外基质HA及Ⅳ型胶原分泌,其机制可能与GSH对HSC-T6的Nrf2/HO-1信号通路调控有关.     

重组人促红细胞生成素对急性脑缺血大鼠脑梗死体积及Nrf2、HO-1表达的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对急性脑缺血大鼠脑组织中核因子E2相关性因子2(Nrf2)及血红素加氧酶(HO-1)表达的影响,探讨rhEPO的抗氧化作用机制.方法 随机将36只雄性SD大鼠分为假手术组、缺血组和rhEPO治疗组.采用线栓法制作大鼠永久性局灶性脑缺血(pMCAO)模型.rhEPO治疗组在缺血2 h后腹腔注射rhEPO 5 000 IU/kg,模型组和假手术组在等时间点给予等量的生理盐水.TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)法测量脑梗死体积,免疫组化方法 测定脑组织中Nrf2及HO-1的表达.结果 rhEPO治疗组与缺血组相比,脑梗死体积减小,各组脑组织中Nrf2及HO-1的表达量按假手术组、缺血组、rhEPO治疗组依次增高,各组间差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 急性脑缺血后,脑组织中Keap1-Nrf2/ARE抗氧化系统被激活,rhEPO可能通过激活该氧化系统而发挥脑保护作用.