热休克蛋白70与汉坦病毒持续性感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞

目的 探讨热休克蛋白70（HSP70）过表达可能有助于汉坦病毒（HTNV）持续感染。 方法 在HTNV持续性感染过程中,通过Westen blotting及RT-PCR检测大脑皮层星形胶质细胞中HSP70的表达情况,并通过免疫荧光显微技术、AnnexinV 及RT-PCR检测细胞凋亡。 结果 与对照组相比,感染HTNV 76-118或 SEOV L99 的星形胶质细胞HSP70蛋白的表达增加,且在HTNV 76-118感染后3d或SEOV L99感染后2d HSP70蛋白表达达到峰值（n=15,P＜0.01,P＜0.05）;感染HTNV 76-118及SEOV L99上调星形胶质细胞HSP70基因的表达,且在HTNV 76-118感染后2~5d或SEOV L99感染后2~4d HSP70基因表达达到峰值（n=15,P＜0.01,P＜0.05）。HTNV76-118或SEOV L99感染过程中,星形胶质细胞无细胞病变效应,并且病毒复制未诱导细胞凋亡。 结论 HTNV感染星形胶质细胞激活了HSP70,这种改变可能抑制细胞凋亡,促进病毒持续性感染。     

热休克蛋白70与汉坦病毒持续性感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞（英文）

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)过表达可能有助于汉坦病毒(HTNV)持续感染。方法在HTNV持续性感染过程中,通过Westen blotting及RT-PCR检测大脑皮层星形胶质细胞中HSP70的表达情况,并通过免疫荧光显微技术、Annexin V及RT-PCR检测细胞凋亡。结果与对照组相比,感染HTNV 76-118或SEOV L99的星形胶质细胞HSP70蛋白的表达增加,且在HTNV 76-118感染后3d或SEOV L99感染后2d HSP70蛋白表达达到峰值(n=15,P0.01,P0.05);感染HTNV 76-118及SEOV L99上调星形胶质细胞HSP70基因的表达,且在HTNV76-118感染后2~5d或SEOV L99感染后2~4d HSP70基因表达达到峰值(n=15,P0.01,P0.05)。HTNV76-118或SEOV L99感染过程中,星形胶质细胞无细胞病变效应,并且病毒复制未诱导细胞凋亡。结论 HTNV感染星形胶质细胞激活了HSP70,这种改变可能抑制细胞凋亡,促进病毒持续性感染。     

汉滩病毒部分核蛋白基因原核表达产物 的免疫及其保护作用

目的 探讨汉滩病毒（HTNV）部分核蛋白（NP）基因（37－294bp)原核表达产物NP AA1－86多肽的免疫原性及其免疫保护作用。方法 大肠杆菌表达的HTNV部分核蛋白多肽NP AA1－86混合福氏佐剂,腹腔注射免疫BALB／c小鼠,IFA检测抗体应答;^3H-TdR掺入及4h ^51Cr释放试验检测免疫小鼠脾细胞对HTNV的特异淋巴细胞增殖转化指数及细胞毒T淋巴细胞（CTL）杀伤功能;免疫小鼠脾细胞转输感染HTNV A9株的乳鼠,观察对乳鼠致死性的免疫保护作用。结果 免疫后1周小鼠即出现抗体应答反应,抗体滴度最高达1：12800,与重组完整NP免疫组差异无显著性（P＞0．05）;免疫小鼠的淋巴细胞增殖转化指数、CTL杀伤率较对照组明显增高（P＜0．01）,与完整NP免疫组差异无显著性（P＞0．05）,CTL杀伤率随效：靶比例的增高呈逐渐上升趋势;免疫小鼠脾细胞转输可部分保护病毒致死性感染的乳鼠,保护率约25％。结论 大肠杆菌表达的汉滩病毒部分核蛋白多肽NP AA1－86不仅包含NP几乎所有的体液免疫表位,同时含有部分细胞免疫表位,对汉滩病毒感染可产生部分免疫保护作用。     

热休克蛋白在高温处理后鼠胚心脏的表达

目的：探讨热休克蛋白在高温处理后金黄地鼠胚心脏的表达变化。方法：将金黄地鼠孕鼠于受孕第8d置42℃水浴持续20min，定时剖腹取胎，制备石蜡切片。利用免疫组织化学(SABC法)染色，观察心脏正常发育和异常分化过程中热休克蛋白(HSP70和HSP90)的表达。结果：高温处理后8h，实验组鼠胚内皮细胞及心胶质HSP70和HSP90的表达较对照组明显增强；16h，表达最强；24h，仍较对照组强；48h，和对照组的表达无显著性差异。结论：高温诱导金黄地鼠胚心脏热休克蛋白表达增强，对心脏的异常发育具有保护作用。     

汉滩病毒结构蛋白昆虫细胞融合表达产物的免疫原性评价

目的：研究汉滩病毒（HTNV）囊膜糖蛋白G1与核蛋白（NP）部分片段在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学特性，为HTNV基因工程疫苗的研制提供依据。方法：构建含有HTNV G1S0.7嵌合基因的重组杆状病毒Bac-G1S0.7，用其感染的Sf9细胞免疫Balb/c小鼠。用间接免疫荧光法、ELISA法、微量细胞培养中和试验及T淋巴细胞增殖试验对被免疫小鼠的体液免疫及细胞免疫应答效果进行检测。结果：Bac-G1S0.7感染的昆虫细胞免疫小鼠后，测得免疫鼠血清抗HTNV抗体滴度最高达1：3200，含有特异性抗HTNV NP及抗HTNV糖蛋白G1的抗体，被免疫小鼠中有部分产生了较低滴度的中和抗体，免疫鼠脾细胞对HTNVNP或糖蛋白的增殖反应指数均高于阴性对照组。结论：G1S.07嵌合基因的昆虫细胞表达产物具有较好的免疫原性，可刺激机体同时产生针对HTNV NP与囊膜糖蛋白G1的细胞及体液免疫应答。     

人肝癌组织中p53与HSP70相互作用的初步研究

目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用SDS PAGE及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白的存在形式。结果 :用免疫组织化学法检测到 12例肝癌组织中有 3例为双阳性 ,用抗HSP70mAb免疫共沉淀的样品 ,可检测到 p5 3蛋白。用抗p5 3mAb免疫共沉淀的样品也可检测到HSP70蛋白。结论 :人肝癌中p5 3与HSP70以复合物的形式而存在 ,此可为肝癌的发病机制及免疫治疗的研究提供新的思路     

热休克蛋白70在诱导肿瘤免疫中的效应

目的：研究不同剂量的热休克蛋白70（HSP70）对诱导小鼠抗肿瘤免疫效应及耐受的机理。方法：不同剂量的纯化HSP70免疫小鼠后2周再接种HcaF肿瘤细胞，观察实验组与对照组肿瘤形成的情况，结果：10μgHSP70免疫后的小鼠100％获长期生存，肿瘤全部消退；5μgHSP70免疫组可见部分抗肿瘤效应，而20μg、40μg及60μgHSP70不能抑制肿瘤形成，这3组小鼠肿瘤形成的指标与对照组无差别，结论：HSP70作为肿瘤抗原在诱导抗肿瘤免疫中具有双重性，可能与其活化T细胞的方式有关，该发现对于研究应用HSP70治疗人类恶性肿瘤时注意使用注意防止不适宜的剂量引起负效应有参考意义。     

HSP70在早期妊娠大鼠子宫中的表达及己烯雌酚的诱导作用

目的探讨在早期妊娠大鼠子宫中热休克蛋白70(hearshockprotelns,HSP70)的表达变化以及己烯雌酚(dithylstilbestrol,DES)对子宫HSP70表达的诱导作用。方法采用免疫组织化学和图像分析技术研究正常大鼠未孕及已孕的子宫。结果①孕鼠子宫HSP70的阳性表达较未孕鼠明显增强,差异有显著性(P<0.01);②小剂量(1.25滋g/50g)大剂量(5滋g/50g)DES均可诱导大鼠子宫HSP70免疫反应阳性细胞数量显著增加(P<0.01)。结论热休克蛋白70在早期妊娠大鼠子宫内膜固有层的基质细胞及蜕膜内蜕膜细胞的表达明显增高,DES对子宫HSP70。表达具有明显诱导作用。     

热休克蛋白-多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。肿瘤细胞表面的热休克蛋白－多肽复合物也可直接激活γδ＋Ｔ细胞和ＮＫ细胞     

热休克蛋白—多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。肿瘤细胞表面的热休克蛋白－多肽复合物也可直接激活γδ＾＋Ｔ细胞和ＮＫ细胞。     

免疫小鼠巨噬细胞的抗汉坦病毒感染作用

用四甲基偶氮唑蓝比色法测定了汉坦病毒对小鼠腹腔巨噬细胞细胞活力的抑制作用，发现其抑制率的高低与感染时间及细胞内的病毒抗原量具有相关性。重组汉坦病毒核壳蛋白和重组糖蛋白免疫小鼠巨噬细胞再接种ＨＴＮＶ后细胞活力与未感染巨噬细胞相比，未见明显降低，细胞内病毒抗原阴性，表明免疫小鼠的巨噬细胞具有抵抗汉坦病毒感染的作用。     

Association of HSP70 with the adenovirus type 5 fiber protein in infected HEp-2 cells

Although maximal synthesis of HSP70 is induced early (6-12 hr) after adenovirus type 5 (Ad5) infection of HEp-2 or HeLa cells, the total amount of HSP70 appears to be increased at late times of infection (18-24 hr). Since virion structural proteins also accumulate at these times, we investigated the possible interaction between Ad5 structural proteins and HSP70 by immunoprecipitation of infected cell extracts with antibodies to either ATP-affinity-purified HSP70 or to CsCl-gradient-purified Ad5 virions. We found that HSP70 and a 62-kDa Ad-specific protein coimmunoprecipitated from infected cell extracts. Antibody which recognizes one of these two proteins does not cross-react with the other. Thus, the association between HSP70 and the 62-kDa protein appears specific. Using different antisera to specific adenovirus structural proteins, we have identified the 62-kDa protein as the Ad5 fiber protein.     

肾综合征出血热病毒结构蛋白的纯化及免疫学特性分析

应用从肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血清中提取的ＩｇＧ与活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联，制备亲和层析柱，用此亲和层析柱从ＨＦＲＳＶ感染的小白鼠乳鼠鼠脑中提取出２种分子量为６７０００和５５０００的病毒结构蛋白。经ＥＬＩＳＡ证明，此病毒结构蛋白能与ＨＦＲＳ患者血清ＩｇＧ及抗ＨＦＲＳ病毒的ＭｃＡｂ反应，效价为１６０。与６株抗ＨＦＲＳＶＭｃＡｈ试验表明，此病毒结构蛋白能与Ｈ７株反应。血凝试验证明，此病毒蛋白不能凝集鹅红细胞、鸽血球和人＂Ｏ＂型血红细胞。将纯化的病毒结构蛋白免疫家兔，证明其有较强的免疫原性，可刺激家兔产生特异性抗体；微量中和试验及乳鼠中和试验证明，中和效价为２５６，说明纯化的病毒结构蛋白具有中和抗原位点；免疫血清对感染乳鼠有一定保护作用。     

汉滩病毒核蛋白纯化及其免疫学特性的研究

目的　研究汉滩病毒核蛋白及其免疫学特性,研制新一代的肾综合征出血热(HFRS)亚单位疫苗。方法　用亲和层析法纯化重组杆状病毒表达的汉滩病毒核蛋白及野生汉滩病毒76-118的核蛋白,以聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹实验(Westernblot)鉴定纯化蛋白。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,分别以福氏佐剂(FCA)和氢氧化铝［Al(OH)     

抗家鼠型肾综合征出血热病毒单克隆抗体对感染乳鼠保护作用的初步研究

以家鼠型HFRS病毒R22株100LD_(50)感染2～4日龄乳鼠。于感染后0、48、96及120h分别经腹腔注射对该株病毒具有中和活性的单一McAb或混合McAb,同时设该病毒免疫血清、单注射该病毒和Sp2/0腹水3种对照,观察McAb对感染乳鼠的保护作用,观察时间为35d。结果在感染后96h内注射单一McAb、混合McAb及免疫鼠血清的保护率均可达100％,而Sp2/0腹水对照组与病毒对照组的乳鼠均在感染后第13～16d发病死亡。在死亡乳鼠的脑,肺组织中检出了HFRS病毒抗原,而在保护存活乳鼠的脑、肺组织中均未检出病毒抗原。McAb对感染乳鼠的保护率与其浓度相关。在感染后24h分别注射不稀释、10~(-1)、10~(-2)和10~(-3)稀释的混合McAb,其保护率依次为100％、88.7％、55.6％和16.7％。     

汉坦病毒感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞

目的 建立汉坦病毒（HTNV）76-118株或汉城病毒（SEOV）L99株感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系,并检测其对汉坦病毒的易感性。 方法 通过免疫荧光显微技术、免疫印迹法、反转录聚合酶链反应检测星形胶质细胞对汉坦病毒的易感性,并通过反转录聚合酶链反应检测病毒S片段和GFAP基因表达情况。 结果 HTNV 或SEOV感染星形胶质细胞后病毒核衣壳蛋白（NP）和GFAP的表达增加,且GFAP和NP共定位,两者可能相互作用,同时病毒S片段和GFAP基因表达增加。 结论 HTNV或SEOV能有效感染和激活星形胶质细胞,GFAP可能调节血脑屏障结构或功能的完整性、病毒NP合成及病毒复制。     

Neuro-invasion of Chandipura virus mediates pathogenesis in experimentally infected mice

Neuro-tropism is a major feature in many viral infections. Chandipura virus produces neurological symptoms in naturally infected young children and experimentally infected suckling mice. This study was undertaken to find out the neuro-invasive behaviour of Chandipura virus in suckling mice. The suckling mice were infected with the virus via footpad injection. Different tissues were collected at 24-h intervals up to 96-h post infection and processed for virus quantification and histological study. Further confirming the virus predilection to nerves tissues, the adult mice were inoculated with the virus via different routes. The suckling mice experimental results revealed a progressive replication of virus in spinal cord and brain. The progressive-virus replication was not observed in the other tissues like kidney, spleen, liver etc. Histo-pathological lesions noticed in the spinal cord and brain tissues suggested the extensive damages in these tissues. In adult mice experiment, the virus replication observed only in the brain of the mice infected via intra-cerebral route. From this study, we conclude that nervous tissues are predilection sites for Chandipura virus replication in suckling and adult mice. In suckling mice, virus might transmit through nervous tissues for dissemination. In contrast, the adult mice the nervous terminal might not pick up the virus through footpad infection. The pathogenesis in mice might be due to the virus replication mediated damage in the central nervous system.     

Host age and cell type influence measles virus protein expression in the central nervous system

Measles virus infection of the central nervous system (CNS) of children can result in a slow, progressive fatal disease, subacute sclerosing panencephalitis (SSPE). The pathogenesis of persistent measles virus infection of the CNS has been studied by comparing viral protein expression in suckling or weanling hamsters infected with the HBS strain of measles virus. Suckling animals develop a rapidly progressive fatal encephalitis while weanling animals survive and are persistently infected. Viral nucleocapsid (NP) and hemagglutinin (H) proteins have been examined during acute infection in suckling and weanling animals. Viral H protein expression is selectively inhibited in infected neurons of weanling animals, while infected ependymal cells retain the capability to express H protein at the cell surface; suckling animals express high levels of both proteins. Anti-measles antibodies are not responsible for the inhibition of H protein since immunosuppression does not restore protein expression. The cell-associated virus which is recovered late in infection by co-cultivation with Vero cells expresses all viral proteins. These results suggest that intact viral genome is present in persistent infections, and cell type or state of differentiation of infected cells may be instrumental in expression of viral proteins which can influence lytic or persistent outcome of infection.