冷冻保存对人类卵子结构与功能的影响

人类卵子冷冻保存后的存活率、受精率和胚胎发育率尚低,其原因与冷冻-解冻过程对卵子结构与功能造成了损伤有关。本文综述了冷冻保存对人卵透明带、卵膜、纺缍体、线粒体、染色体和微丝等的影响。     

封闭式拉细麦管法玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床结果观察

玻璃化是个物理概念，即水或溶液的温度快速降至-100℃～-110℃时，形成一种高粘度介与液态和固态之间非晶体、透明的玻璃化状态，其特点是：分子不按晶格结构排列，为无定性结构；分子不重新排列，不发生剧烈运动，水溶液中含有电解质或其他可溶性成分转变成玻璃态时，其均一的分散系统未被破坏，溶液浓度不发生改变或改变很小。     

人类胚胎超快速冷冻保存的初步研究

198 7年 ,Ｔｒｏｕｓｏｎ等[1] 最先用鼠胚建立了胚胎的超快速冷冻方法 ,并认为可获得与常规的慢速冷冻方法相似的冻存效果 ,同时具有耗时短、易操作和花费低等优点。到 1990年才有人类胚胎利用相同冷冻技术保存获得妊娠的报道[2 ] 。我室于 1996年开始在部分因不孕症行体外受精 胚胎移植(ＩＶＦ ＥＴ)者中 ,开展人类胚胎超快速冷冻的研究 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1.研究对象 :选择 1996年 5月～ 1998年 6月在我室接受ＩＶＦ ＥＴ治疗后的 2 1例患者共 6 5个剩余胚胎。2 .方法 :(1)ＩＶＦ ＥＴ :方法见文献 [3]。于取卵后 4 8ｈ…     

人类卵母细胞的冷冻保存

<正>由于冷冻保存技术和体外受精—胚胎移植技术的发展,人的精液和胚胎已被成功地冷冻保存,并在临床中应用.至于人类卵母细胞的冷冻保存也已被Chen等证实,但仍处于实验阶段.尽管如此,卵母细胞的冷冻保存必将成为生育助孕术不可缺少的一项技术,也将对人类的计划生育和优生研究有重要意义.     

卵子冻存技术

在治疗不孕症的控制性超促进排卵过程中，会得到多个卵子，因此迫切 求发展卵子的冻存技术。本文综述了卵子冻存的技术原理，提示了提高冻成功率的可能骈总结了冻存的方法，结果和意义，提出虽然 目前卵子冻存技术还有许多问题亟待解决，但仍不失为一种具有广阔应用前景的技术，有待探索和研究。     

人类胚胎活检和着床前遗传学诊断

1978年首例试管婴儿（IVF）的诞生标志着人类助孕技术新纪元的开端。传统IVF主要适合于输卵管阻塞性不孕症，近年，受人推崇的显微授精技术使男性不育的治疗有了突破性进展[1，2]。在此基础上，胚胎活检和分子生物学技术的结合，又开拓了着床前遗传学诊断（preim－plantationgeneticdiagnosis，PGD）的崭新领域[3]。欲从1～2个细胞中获得准确的信息，必须采用高灵敏度和特异性的检测方法。多聚酶链反应（polyrnerasechainreaction，PCR）和荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）能基本满足此要求[4]。PCR主要用于…     

人类胚胎培养室体系质量控制

体外受精（IVF）中心最主要的目的是为不孕夫妇提供良好的服务,而培养患者胚胎的人类胚胎培养室的工作表现是达到这一目的的关键因素之一。只有活力良好的胚胎才能获得成功的妊娠。现在越来越多的证据表明,配子收集和胚胎发育阶段的外部条件会影响胚胎发育。胚胎的发育和活力会受到外界污染物和环境条件波动的影响,比如挥发性有机物（VOCs）、环境温度、二氧化碳浓度和pH值等。IVF培养室进行质量控制活动的目的就是确保所有方法和操作的可重复性,从而为胚胎培养提供稳定的理想环境。     

人卵与胚胎玻璃化冷冻技术

目前人类体外受精 胚胎移植 (IVF ET)技术广泛使用慢速冷冻 快速解冻方法进行人卵及胚胎的冷冻保存 ,但此法耗时、需要昂贵的程序化冷冻仪 ,并且对卵子冷冻效果较差。近年发展起来的玻璃化冷冻方法使用较高浓度的冷冻保护剂和超快速的冷冻速率 ,更简单、快速、高效。本文就这一方法的基本原理、冷冻和解冻速率、冷冻保护剂等方面作一综述。     

人卵细胞冷冻保存后经显微注射授精的初步研究

建立人卵细胞冷冻保存以及融解后受精和发育颇具实用价值。本文采用慢冷、快融法，结合使用丙二醇和蔗糖作为冷冻保护剂，对２８５个临床ＩＶＦ未受精卵进行冷冻保存，３天至４０天时间不等。冷冻存活率为５４．７３％，其中未成熟卵子５１．７２％，成熟卵子５５．５０％，二者无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。冷冻损伤的卵子中，细胞膜损坏为９６．８９％，透明带破裂为１３．１８％。选择冻融后形态结构正常的１２６个成熟卵子进行胞浆内单个精子注射（ＩＣＳＩ），受精率达４２．０６％，其中５０．９４％受精卵子进一步发育成２～８细胞胚胎。来源于常规ＩＶＦ未受精卵的再次受精率为４０．７４％，来源于ＩＣＳＩ未受精卵的再次受精率为３６．７３％。作者认为，必要时可以借助显微操作技术进行胚胎活检，了解部分染色体畸变情况，使卵子冷冻保存技术安全地应用于临床。     

子宫直肠陷凹内卵子精子移植

<正> 体外授精、胚胎移植(IVF-ET)技术的推广,为不孕夫妇带来了福音,解决了他们的难题。但是,由于IVF-ET的应用需要高精密仪器和具备先进的技术,这使IVF—ET的开展受到条件的限制。为了寻求更简便易行的方法,科学家们做了多方努力。1984年,Asch报告了配子输卵管内移植(GIFT)在临床上运用获     

HLA-G蛋白在人类着床前胚胎的表达

目的:探讨HLA-G在人类胚胎早期发育和免疫耐受中的作用和意义。方法:以体外受精-胚胎移植技术助孕过程中剩余的、自愿捐赠的人类早期胚胎作为研究对象,采用免疫荧光染色技术,检测人类着床前胚胎HLA-G蛋白的表达。结果:采用MEM-G/9单抗进行了HLA-G免疫荧光染色,20个2-8-细胞期的人类早期胚胎中15个胚胎HLA-G蛋白检测阳性;3个桑椹胚和5个囊胚均为阳性。结论:着床前人类早期胚胎表达HLA-G蛋白。     

人类卵子体外培养成熟后冻存研究

目的探讨体外培养成熟的人类卵子冻存的可行性。方法中山大学附属第一医院从2003年3月至2003年9月在ICSI治疗周期中共收集到101个GV期卵子和53个MI期卵子,根据卵子发育阶段不同将不成熟卵子分为GV期组和MI期组,体外培养成熟后应用慢速冷冻方法进行卵子冷冻,解冻后用ICSI受精并进行胚胎体外培养,分别比较GV期组和MI期组卵子的复苏率、受精率、优质胚胎率和囊胚发育情况。结果经体外培养后GV期组和MI期组分别有64个和44个卵子成熟,GV期组卵子体外成熟率为634%(64/101),显著低于MI期组的830%(44/53)(P<005),冷冻后复苏率分别为719%(46/64)和818%(36/44),受精率分别为609%(28/46)和639%(23/36),优质胚胎率分别为536%(15/28)和652%(15/23),在统计学上差异均无显著性意义。结论在ICSI治疗周期中的GV期和MI期的卵子经体外成熟后可以成功地进行冷冻保存。     

人类白细胞抗原G及其异构体mRNA在人类着床前胚胎的表达

目的研究人类白细胞抗原G（human leukocyte antigen，HLA-G）及其异构体mRNA在人类着床前胚胎的表达，探讨HLA-G在人类胚胎早期发育中的作用和意义。方法第四军医大学唐都医院妇产科生殖医学中心2003-01-2005-12期间，以体外受精-胚胎移植技术助孕过程中剩余的患者自愿捐赠的人类早期胚胎作为研究对象，采用巢式RT-PCR检测早期胚胎HLA-G及其异构体mRNA的表达。结果检测20个受精后2—3d的人类卵裂期胚胎，2、4、6、8细胞期胚胎各5个，有7个胚胎表达HLA-G及其部分的异构体mRNA。检测5个受精后4d的人类桑葚胚，全部表达HLA-G及其部分的异构体mRNA。检测25个受精后6d的扩张期囊胚，全部受检囊胚均表达HLA-G mRNA，但异构体表达不同。在受检的25个扩张期囊胚中，20个表达HLA-G1（表达率80．0％），4个表达G2（表达率16．0％），25个表达G3（表达率100％）、24个表达G4（表达率96．0％），5个表达G5（表达率20．0％），8个表达G6（表达率32．0％）。结论着床前的人类胚胎表达HLA-G及其异构体mRNA，其阳性表达胚胎的比例，随着胚胎发育的进程而增加。HLA-G异构体在人类着床前胚胎差异表达。     

卵子发育障碍原发性不孕姐妹2例

目的:报道2例IVF治疗中卵子发育障碍原发性不孕姐妹患者。方法:对本院收治的2例卵子发育障碍原发性不孕患者姐妹进行回顾性总结与分析。结果:均采用常规GnRHa长方案促排卵,取卵日卵泡穿刺镜检仅见卵丘颗粒细胞团,均未见到卵子,补救性hCG治疗亦未取得卵子,诊断为卵子发育异常。追问病史得知其祖父母为表兄妹近亲婚配。患者(妹妹)行受卵治疗,宫内单胎成功妊娠。结论:门诊IVF治疗建病历时应详细询问患者家族史,供卵方案是目前IVF治疗卵子发育障碍原发性不孕较常用且有效的方法。     

代谢组学预测卵子质量与胚胎发育潜能研究进展

辅助生殖技术(ART)为不孕不育症患者带来了诞生新生命体的希望,然而在体外受精(IVF)中,超过80%的胚胎着床失败,为提高成功率,各生殖中心进行多胚胎移植,由此多胎妊娠随之增加,而多胎妊娠出生的新生儿早产、死产、低出生体重、出生缺陷及母亲高血压等并发症均较自然     

人类胚胎干细胞的研究近况

人类胚胎于细胞（human embryonic stemcell，hES）研究始于1998年，它已成为继人类基因组计划后生命科学中最活跃的研究领域。利用hES细胞修复或替代因各种因素所造成的人体组织器官缺损和功能障碍是人类疾病治疗模式划时代的革新。用于细胞替代治疗的hES细胞必须具备安全性、有效性、免疫豁免性三大特点，因而很多研究集中于以下课题：（1）纯化hES细胞培养环境，避免动物源性物质的污染。（2）hES细胞诱导分化为各种成体细胞及其前体细胞以及移植。（3）体细胞核移植与hES细胞系的建立。（4）hES细胞与基因治疗。     

人类卵母细胞冷冻的研究现状

卵母细胞的冷冻保存是在胚胎冷冻基础之上发展起来的另一项很有潜力的生殖技术。冷冻损伤是卵母细胞冷冻保存的主要障碍。影响人卵母细胞冷冻的因素很多，主要是形态学和物理方面的因素。尽管现阶段卵母细胞冻贮的方法仍然以慢速冷冻法为主，但随着玻璃化技术的不断发展，玻璃化技术将成为人类卵母细胞冻贮的主要方法。     

卵胞浆内单精子注射对胚胎冷冻保存的影响

人类早期胚胎的冷冻保存 (冻存 )可以提高累积妊娠率 ,降低患者的费用。在卵巢过度刺激综合征的治疗周期中 ,冻存新鲜胚胎可避免妊娠加重卵巢过度刺激的危险[1] 。目前进行冻存的胚胎均通过常规体外受精和卵胞浆内单精子注射 (ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ,ＩＣＳＩ)两种方法获得。ＩＣＳＩ操作过程是否会对胚胎的冻存造成影响仍有争议[2 ,3 ] 。我们通过分析冻存胚胎植入的妊娠结局 ,旨在探讨ＩＣＳＩ对胚胎冻存的影响 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1 研究对象及分组 :自 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 0…     

配子及胚胎冷冻对子代远期健康影响的研究进展

目前应用于临床的生育力保存手段主要包括:卵子冷冻保存、精子冷冻保存、胚胎冷冻保存、睾丸组织冷冻保存以及卵巢组织冷冻保存.随着冷冻保存技术的不断发展与应用,基于各种生育力保存技术出生的子代逐年增多.有研究表明,通过冻融配子或胚胎出生的子代孕产结局与新鲜周期存在差异.本文对生育力保存技术的临床应用,冷冻复苏技术对配子、胚胎...     

缩短人精卵共同孵育时间对体外受精-胚胎移植中胚胎质量与临床结果的影响

在常规进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的过程中，精子和卵子共同孵育的时间平均为16～20h。在此期间，大量已获得受精能力的精子围绕着卵冠丘的复合体、高浓度的精子代谢产物以及因精子穿透卵丘而驱散的颗粒细胞、部分退化和死亡的精子，可能析出一些不利于胚胎发育的物质。已有研究表明，人类精-卵相互作用和受精发生在性交后20