耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类药物的耐药性分析

目的 了解临床耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性,以合理使用氟喹诺酮类抗菌药物,采取有效措施控制耐药株的出现.方法 采用K-B和MIC法测定耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对8种常见氟喹诺酮类抗菌药物的敏感性.结果 共分离出耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌276株,对加替沙星、莫西沙星、吉米沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、帕珠沙星、司帕沙星的耐药率分别为46.38％、43.48％、42.72％、55.43％、65.22％、61.96％、52.54％、53.62％,且均明显高于头孢他啶敏感株(P＜0.05);呼吸道、非呼吸道标本的耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对加替沙星、莫西沙星、氧氟沙星、司帕沙星的耐药率不同,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率较高,呼吸道、非呼吸道标本分离株对多种常见氟喹诺酮抗菌药物的耐药率不同.     

主动外排抑制剂对耐氟喹诺酮的表皮葡萄球菌MIC的影响

目的 探讨耐药表皮葡萄球菌中是箭存在主动外排系统，以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法 应用琼脂稀释法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株在加入主动外排抑制剂利血平和碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后对环丙沙星、司帕沙星的最低抑菌浓度（MIC）变化情况。结果 加入CCCP及利血平后表皮葡萄球菌敏感株及多数耐药株对环丙沙星、司帕沙星的MIC变化不大，而利血平可以使耐药菌SR79对环丙沙星的MIC减小8倍。结论 表皮葡萄球菌中可能存在针对氟喹诺酮药物的主动外排系统。     

大肠埃希菌体外对氟喹诺酮类药物交叉耐药的研究

目的探讨大肠埃希菌在体外对氟喹诺酮类药物的交叉耐药性。方法采用多步诱导法,对32株临床分离的氟喹诺酮类敏感大肠埃希菌分别进行环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星的诱导性耐药试验;用琼脂稀释法测定药物敏感性。结果22株大肠埃希菌诱导出稳定的高耐氟喹诺酮菌株;与原株比较,耐药株的MIC分别增加了32-3 000倍,三种氟喹诺酮药物诱导的耐药株对三种药物存在交叉耐药性;进行测序的1株诱导高度耐药菌株的gyrA发生Ser83→Leu、Asp87→Asn,parC发生ser80→Ile的氨基酸替换,而测序的一株敏感菌株未发现氨基酸改变。结论在低浓度抗菌药物的长期压力下,可诱导大肠埃希菌产生对氟喹诺酮类药物的获得性耐药,氟喹诺酮药物之间存在交叉耐药性。     

表皮葡萄球菌主动外排氟喹诺酮的实验研究

目的探讨耐药表皮葡萄球菌中是否存在主动外排系统,以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制.方法应用琼脂稀释法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株在加入主动外排抑制剂利血平和碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后,对环丙沙星、司帕沙星的最低抑菌浓度（MIC）变化情况.结果加入CCCP及利血平后,表皮葡萄球菌敏感株及多数耐药株对环丙沙星、司帕沙星的MIC变化不大,而利血平可以使耐药菌SR79对环丙沙星的MIC减低7倍.结论表皮葡萄球菌中可能存在针对氟喹诺酮药物的主动外排系统.     

泵抑制剂对耐氟喹诺酮类肺炎克雷伯菌耐药逆转作用的研究

目的了解肺炎克雷伯菌临床分离株外排泵的分布以及泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对该菌氟喹诺酮类(FQNs)敏感性的影响。方法用琼脂二倍稀释法检测抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),及CCCP存在时,71株肺炎克雷伯菌对FQNs敏感性变化。结果以司帕沙星、环丙沙星、加替沙星和左氧氟沙星作为抗生素,分别有5.6%,2.8%,4.2%,4.2%的菌株在5μg/ml CCCP存在条件下MIC降低至原值1/4及以上,CCCP降低部分肺炎克雷伯菌株对氟喹诺酮的耐药性。泵阳性株存在于耐药和非耐药菌株中,集中于耐药性较高的菌株。结论外排泵是肺炎克雷伯菌菌对氟喹诺酮类耐药的原因之一。泵抑制剂可部分逆转这种耐药性。     

氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌norA基因表达的影响研究

目的研究氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌norA基因表达的影响。方法荧光测定法研究氟喹诺酮类药物在临床分离的金黄色葡萄球菌SAUz及其诱导耐药菌中的蓄积量及能量抑制剂羰氰氯苯腙（CCCP）对蓄积量的影响，应用狭线杂交法检测细菌norA基因转录水平。结果氟喹诺酮类药物在诱导耐药菌SAUz-16中的蓄积量明显低于其亲代株SAUz，加入CCCP后，亲水性氟喹诺酮类药物在SAUz-16菌体中蓄积量增加，但仍未达到亲代株的稳态水平，诱导耐药菌SAUz-16norA基因转录水平高于其亲代菌SAUz。结论氟喹诺酮类药物可导致norA基因表达增加，norA基因表达增加导致的氟喹诺酮类药物泵出增加是药物在金黄色葡萄球菌菌体内蓄积量减少的原因之一。     

8种氟喹诺酮类药物的体外敏感性

目的比较大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌对8种氟喹诺酮类药物的体外抗菌活性. 方法按NCCLS推荐的标准纸片扩散法(K-B法)对69株大肠埃希菌、84株铜绿假单胞菌和82株金黄色葡萄球菌进行8种三代氟喹诺酮药物的体外敏感性实验. 结果对于大肠埃希菌和铜绿假单胞菌,环丙沙星的体外抗菌活性最强;对于金黄色葡萄球菌,虽环丙沙星的敏感率低于氧氟沙星、左氧氟沙星及司帕沙星等,但并未提示差异有显著性(P>0.05). 结论 8种帕喹诺酮类药物显示明显的交叉耐药性,环丙沙星的体外敏感性结果对于临床应用三代氟喹诺酮类药物具有一定的指导意义.     

氟喹诺酮类药物对鲍氏不动杆菌防耐药变异浓度测定

目的研究4种氟喹诺酮类药物对鲍氏不动杆菌耐药突变株的选择能力,比较其防耐药变异能力。方法肉汤法富集1010CFU/ml鲍氏不动杆菌和34株临床分离菌,采用平板稀释法对加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星对鲍氏不动杆菌的MIC99、暂定防耐药变异浓度及防耐药变异浓度(MPC)进行测定。结果加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星、环丙沙星对鲍氏不动杆菌的MPC分别为1.2、2.8、5.6和12.8μg/ml;细菌耐药选择指数分别为3.4、4、8和16μg/ml;加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星对34株鲍氏不动杆菌临床分离菌MPC值分别为0.5、1、8和4μg/ml,选择指数分别为4、4、8和8μg/ml。结论加替沙星和左氧氟沙星限制鲍氏不动杆菌耐药突变菌株的选择能力强于环丙沙星和帕珠沙星。     

5种氟喹诺酮类药物对大肠埃希菌防耐药变异选择浓度测定

目的研究5种氟喹诺酮类药物对大肠埃希菌耐药突变株的选择能力,比较其防耐药变异能力. 方法肉汤法富集1010CFU/ml大肠埃希菌(ATCC25922)和25株临床分离菌,采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星、左氧沙星和环丙沙星对大肠埃希菌的MIC99、暂定防变异浓度(MPCpr)及MPC. 结果莫西沙星、加替沙星、左氧沙星、帕珠沙星、环丙沙星对大肠埃希菌(ATCC25922)的MPC分别为0.072、0.048、0.09、0.09、0.06μg/ml.细菌耐药选择指数(MPC/MIC99)分别为4、6.8、6.9、9、12.环丙沙星、加替沙星、帕珠沙星、莫西沙星对25株大肠埃希菌临床分离菌MPCpr90值分别为2、1、2、1μg/ml, 选择指数(MPCpr90/MIC90)分别为16、4、16、2. 结论莫西沙星和加替沙星限制大肠埃希菌耐药突变菌株的选择能力强于环丙沙星和帕珠沙星.     

氟喹诺酮类耐药表皮葡萄球菌的筛选及其特点

目的：建立应用四环素筛选氟喹诺酮类（FQNs)非特异性耐药表皮葡萄球菌的方法，并探讨耐药性经质粒介导传播的可能性。方法：选择培养对四环素高度耐药的突变菌株，并从中选择环丙沙星（CPLX）和司帕沙星（SPLX）耐药菌株，用K－B纸片法评价耐药性的遗传稳定性；提取细菌质粒DNA进行琼脂糖凝胶电泳，结合细菌对FQNs的敏感性分析质粒与FQNs耐药的联系。结果：经过4次筛选后，所获得的突变菌株全部对两种FQNs耐药（MIC≥1μg/ml)，其中有1／3菌株达到中等程度耐药水平（MIC≥4μg/ml)，在空白MH琼脂平板上连续培养10代后，细菌对两种FQNs的耐药性虽有下降但仍维持在中度耐药水平；耐药菌中含有17kbp的可自主复制质粒，敏感菌和质粒消除菌则检测到质粒存在。结论：敏感的表皮葡萄球菌经四环素选择培养后可获得对FQNs非特异性耐药的菌株，与耐药性相关的基因定位于细菌质粒，并可能经由质粒介导传播。     

铜绿假单胞菌的耐药性及其耐氟喹诺酮机制的研究

目的：了解铜绿假单胞菌的耐药性及其耐氟喹诺酮的机制。方法：用纸片扩散法测定626株铜绿假单胞菌对11种抗生素的耐药性。琼脂稀释法测定40株耐环丙沙星的铜绿假单胞菌对环丙沙星和左氧氟沙星的最低抑菌浓度（MIC），聚合酶链反应－限制性长度多态性分析检测耐环沙星的铜绿假单胞菌的gyrA基因和parC基因突变，结果：626株铜绿假单胞菌中耐环丙沙星的180株（28．8％），耐左氧氟沙星的219株（35．0％），40株耐环丙沙星的铜绿假单胞菌有30株（75％）发生gyrA基因83位点突变，26株（65％）发生parC基因87位点突变，两种突变同时发生的25株（62．5％），结论：铜绿假单胞菌的耐药性日趋严重，临床分离的铜绿假单胞菌耐氟喹诺酮的机制大多为药物作用靶位gyrA和parC的基因突变。     

Factors Related to Increasing Prevalence of Resistance to Ciprofloxacin and Other Antimicrobial Drugs in Neisseria gonorrhoeae, United States

Using data from the Gonococcal Isolate Surveillance Project, we studied changes in ciprofloxacin resistance in Neisseria gonorrhoeae isolates in the United States during 2002-2007. Compared with prevalence in heterosexual men, prevalence of ciprofloxacin-resistant N. gonorrhoeae infections showed a more pronounced increase in men who have sex with men (MSM), particularly through an increase in prevalence of strains also resistant to tetracycline and penicillin. Moreover, that multidrug resistance profile among MSM was negatively associated with recent travel. Across the surveillance project sites, first appearance of ciprofloxacin resistance in heterosexual men was positively correlated with such resistance for MSM. The increase in prevalence of ciprofloxacin resistance may have been facilitated by use of fluoroquinolones for treating gonorrhea and other conditions. The prominence of multidrug resistance suggests that using other classes of antimicrobial drugs for purposes other than treating gonorrhea helped increase the prevalence of ciprofloxacin-resistant strains that are also resistant to those drugs.     

大肠埃希菌对氟喹诺酮类的耐药性及其机制研究

目的 探讨大肠埃希菌(ECO)对氟喹诺酮类药物的耐药率及耐药机制.方法 K-B法测定100株ECO对5种氟喹诺酮抗菌药物的耐药性,试管稀释法测定耐环丙沙星和左氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC);错配PCR技术检测耐环丙沙星ECO gyrA基因和parC基因的突变.结果 100株ECO中耐环丙沙星有65株;环丙沙星MIC50、MIC90分别是32、128 μg/ml,左氧氟沙星MIC50、MIC90是16、64 μg/ml;基因位点结果显示,耐环丙沙星的65株中,有60株发生gyrA、parC一个或多个基因位点的突变,有5株未发生突变.结论 gyrA、parC基因突变是该地区ECO,对氟喹诺酮类药物耐药的重要机制,且基因突变位点越多其耐药程度越高.     

1996—2008年南宁地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星的耐药性监测

目的监测南宁地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星的耐药性。方法收集广西皮肤病防治研究所1996年1月-2008年12月性病门诊就诊患者泌尿生殖道分泌物标本中分离的970株淋病奈瑟菌,采用琼脂稀释法测定其对环丙沙星的最低抑菌浓度（MIC）。结果970株淋病奈瑟菌对环丙沙星的总耐药率为81.96%,历年的耐药率不同,呈明显上升趋势（χ2=394.49,P＜0.005）;1996年、2000年、2005年、2008年的耐药率分别为19.56%、93.81%、98.75%、100.00%,在1999年以前耐药率迅速上升,2000年以后保持较高水平。环丙沙星的MIC50值上升很快,1996年为0.125 mg/L,2000年为4 mg/L,2006年为8 mg/L;MIC90值也保持较高水平。结论南宁地区淋病奈瑟菌对环丙沙星耐药严重,环丙沙星等喹诺酮类药物在该地区已不适合作为治疗淋病的一线药物,应加强对淋病奈瑟菌耐药性的连续监测。     

广西壮族自治区1994-2013年伤寒流行病学特征及菌株耐药分析

目的 分析1994-2013年广西地区伤寒流行特征、菌株耐药特征及其变迁。方法 采用描述流行病学方法分析1994-2013年广西地区伤寒疫情报告资料,对分离自伤寒病例475株沙门菌,利用纸片扩散法及肉汤微量稀释法检测抗菌药物最小抑菌圈和抑菌浓度（MIC）,依据CLSI 2012版敏感判定标准,判定菌株的耐药情况。结果 20年间广西地区共报告伤寒病例57 928例,年均发病率为6.29/10万,病死率为0.03%。<20岁人群发病较高,发病无性别差异,病例以农民和学生为主,主要分布在广西北部地区,全年均有发病,发病高峰在5-10月。2001-2013年发生13起大的暴发疫情,传播方式以水型为主。475株菌对第三代头孢类抗生素头孢噻肟和氟喹诺酮类诺氟沙星的敏感率为100%,对四环素、氯霉素、氨苄西林、庆大霉素的敏感率约为98%,对环丙沙星的敏感率为89.89%;对链霉素、复方新诺明的敏感性较低,为67.73%和65.89%。发现1株环丙沙星耐药、47株环丙沙星敏感性降低的菌株。暴发株与散发株耐药情况无差别。有28株菌耐≥3种抗生素,首次发现1株同时对氨苄西林、氯霉素、链霉素、复方新诺明、四环素、萘啶酸（ACSSxT-NAL）耐药的多重耐药菌株。多耐药株多见于伤寒小范围暴发疫情。结论 广西地区伤寒发病水平仍较高,且菌株出现对临床常用的氟喹诺酮类药物敏感性降低及多重耐药现象,应加强疫情及耐药监测。     

珠海地区淋球菌耐药性监测及耐药质粒分型

目的 监测珠海地区2015-2016年淋球菌临床分离株对常用抗菌药物的敏感性,了解质粒介导的TEM-1和tetM基因分子流行情况.方法 用琼脂稀释法测定淋球菌对7种抗菌药物(青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、大观霉素和阿奇霉素)的最低抑菌浓度(MIC).采用纸片酸度法测定产青霉素酶淋球菌(PPNG),PCR方法分别扩增TIEM-1和tetM耐药质粒基因片段,电泳分析其耐药质粒型别.结果 93株淋球菌中检出PPNG共26株(27.96％)、耐四环素淋球菌(TRNG)24株(25.81％).93株淋球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、阿奇霉素的耐药率分别40.86％、75.27％、100.00％、7.53％,青霉素低敏率为51.61％;未发现对大观霉素、头孢曲松、头孢克肟耐药菌株,但对头孢克肟的低敏率达到30.11％.耐药质粒分型结果PPNG亚洲型15株(57.69％),非洲型11株(42.31％),未检出多伦多/里约型;TRNG荷兰型23株(95.83％),美国型1株(4.17％).结论 珠海地区淋球菌对四环素、环丙沙星、青霉素耐药率较高,但对头孢曲松和大观霉素敏感率高,可作为治疗淋病的首选药物;PPNG以亚洲型和非洲型为主,TRNG以荷兰型为主,偶见美国型.     

Increasing antimicrobial resistance of Vibrio cholerae OI biotype E1 tor strains isolated in a tertiary-care centre in India

The antimicrobial susceptibility patterns are on constant change with the recent emergence of multidrug-resistant strains of most bacteria. Results of recent studies in India showed that most isolates of Vibrio cholerae O1 were resistant to the commonly-used antibiotics. The study was conducted to determine the antibiotic susceptibility patterns of V. cholerae O1 isolated during 2008-2010 at the hospital of the Jawaharlal Nehru Institute of Post Graduate Medical Education and Research, Puducherry, India. In total, 154 strains of V. cholerae O1 from 2,658 stool specimens were reported during January 2008-December 2010--34 in 2008, 2 in 2009, and 118 in 2010. The isolates of V. cholerae O1 were subjected to antimicrobial susceptibility testing using the Kirby-Bauer method. The antibiotic disks tested were tetracycline (30 microg), furazolidone (100 microg), ampicillin (10 microg), ceftriaxone (30 microg), and ciprofloxacin (5 microg). Escherichia coli ATCC 25922 was used as the control organism. The minimum inhibitory concentrations (MICs) of ceftriaxone, ciprofloxacin, and tetracycline were determined using the agar dilution method for all the strains. The E-test method was used for the strains which had either intermediate resistance or were resistant to the antibiotics by the agar dilution method. The results of the agar dilution corroborated the results of the E-test. The MIC of ceftriaxone in 151 strains was <2 microg/mL while it was 16 microg/mL in three strains; the latter three strains were resistant to ceftriaxone by the disc-diffusion test. The MIC of ciprofloxacin in 150 strains was <0.5 microg/mL while the MIC of tetracycline was <1 microg/mL. In the remaining four strains, the MIC of tetracycline was >32 microg/mL, and the MIC of ciprofloxacin was >8 microg/mL. These four strains were resistant to both tetracycline and ciprofloxacin by the disc-diffusion test and were exclusive of the three ceftriaxone-resistant strains. The majority of the isolates were obtained from children aged 0-5 year(s)-70.3% (83 of 118) and 41.2% (14 of 34) were reported in 2010 and 2008 respectively. Since treating severe cases of cholera with antibiotics is important, the continuing spread of resistance in V. cholerae to the most important agents of therapy is a matter of concern. Also, chemoprophylaxis with antimicrobial agents is likely to become even more difficult.