子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子及其受体c-Met的表达

OBJECTIVE: To study the role of hepatocyte growth factor (HGF) and its receptor (c-Met) in the pathogenesis of endometriosis. METHODS: In situ hybridization and immunohistochemistry method was used to examine HGF mRNA and protein expression in eutopic and ectopic endometrium obtained from 54 women in reproductive age with endometriosis confirmed by laparoscopy and histological examination (including 28 cases of stages I/II and 26 of stages III/IV) and from the endometrium of 24 healthy fertile women. RESULTS: In patients with endometriosis, the positivity rate of HGF/c-Met expression was similar in the eutopic and ectopic endometria, but the number of positive cells and expression intensity were much higher in ectopic endometrium. The positive expression rate varied little between the proliferative and secretory stages of the endometrium. Compare with the healthy controls, patients with endometriosis of stages I/II and III/IV had significantly elevated positivity rate of HGF and c-Met expressions in either eutopic and ectopic endometrium, but without significant difference between the two patient groups (P<0.01). The rate of strong c-Met protein expression was significantly higher in III/IV endometriosis than in the controls, without statistical difference between other groups. CONCLUSION: The expressions of HGF and c-met gene are correlated with the pathogenesis of endometriosis, which is preceded by eventful changes in the biological behavior of the eutopic endometrium.     

子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子及其受体c-Met的表达

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法 采用mRNA原位杂交和免疫组织化学技术检测经腹腔镜手术及病理证实的54位子宫内膜异位症妇女(Ⅰ/Ⅱ期患者28例,Ⅲ/Ⅳ期患者26例)在位和异位内膜组织及24例正常对照组妇女在位内膜HGF、c-Met的分子和蛋白表达。结果 子宫内膜异位症患者在位内膜HGF、c-met基因和蛋白阳性表达与异位内膜一致,但阳性切片中,异位内膜阳性细胞数及表达强度高于在位内膜。增生期和分泌期的内膜细胞HGF/c-Met mRNA和蛋白的表达相近,无明显差异。对照组、Ⅰ/Ⅱ期患者在位、异位内膜与Ⅲ/Ⅳ患者在位、异位内膜比较,HGF、c-met基因和蛋白阳性表达频率依次上升,组间差异显著(P<0.01)。Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期患者在位和异位内膜与对照组比较,HGF、c-met基因和蛋白阳性表达频率有显著差异;Ⅰ/Ⅱ期患者与Ⅲ/Ⅳ期患者比较,HGF/c-Met阳性表达频率和表达强度均无显著差异。Ⅲ/Ⅳ期患者c-Met强阳性表达频率与对照组比较,有显著差异。结论 HGF、c-met基因和蛋白表达与子宫内膜异位症发病机制相关,在位内膜性质的改变可能是子宫内膜异位症发病机制的关键环节。     

子宫内膜异位症患者腹水与血清中肝细胞生长因子的检测

Scatter factor (hepatocyte growth factor, SF/HGF) is a multifunctional polypeptide growth factor that plays an important role in tumor proliferation, angiogenesis and invasiveness. The aim of this study was to investigate the role of HGF in endometriosis and their relationship. Peritoneal fluid and serum samples of 126 women of reproductive age receiving laparoscopy (72 with endometriosis and 54 without endometriosis) were obtained and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed to measure HGF concentrations. The results revealed that the concentrations of HGF were significantly elevated in women with endometriosis stages I/II and III/IV as compared with HGF level in the control group (peritoneal fluid levels of 0.337+/-0.065, 0.458+/-0.160, 0.915+/-0.113, P<0.001; serum level of 0.335+/-0.663, 0.456+/-0.151, 0.907+/-0.170, P<0.001 respectively). A positive correlation was found between peritoneal fluid and serum levels of HGF, which varied little with phases of the menstrual cycle. Comparisons of the women in the same menstrual cycle between the three groups revealed that increased levels of HGF in patients with advanced endometriosis were not attributed to the cycle phase. Our results indicated that the degree of endometriosis was positively correlated with HGF concentration in peritoneal fluid and serum. Therefore, the detection of serum HGF concentration may be useful in classifying endometriosis, and may also help in selecting the optimal treatment methods.     

肝细胞生长因子在子宫内膜异位症的表达及其与血管内皮生长因子的关系

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在子宫内膜异位症(内异症)发生发展过程中的作用及HGF与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测33例异位子宫内膜组织和10例正常子宫内膜组织中的HGF和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果异位内膜HGF表达的平均光度值为0.264±0.026,正常内膜HGF表达为0.219±0.017,两者比较有显著性差异(P<0.05);异位内膜中HGF的表达与VEGF表达呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论HGF在异位内膜的血管生成中具有重要作用;HGF和VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥协同作用。     

肝细胞生长因子与基质金属蛋白酶-2在子宫内膜异位症在位子宫内膜的表达及意义

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)及基质金属蛋白酶2(MMP2)与子宫内膜异位症发病机理的关系。方法:采用链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)法检测45例盆腔子宫内膜异位症妇女(实验组)及30例非子宫内膜异位症妇女(对照组)的在位子宫内膜的HGF与MMP2的免疫表达水平。结果:盆腔子宫内膜异位症妇女在位子宫内膜的HGF与MMP2表达水平均高于对照组,差异有显著性(P均<0.01),且两者均呈正相关(实验组r=0.902,对照组r=0.949)。结论:类似肿瘤的转移和入侵机制,HGF及MMP2与子宫内膜异位症的发病有关。     

子宫内膜异位症猕猴动物模型的建立

目的构建子宫内膜异位症(EM)猕猴动物模型。方法选择5只健康、月经规律的雌性猕猴(4只实验猴、1只对照猴),在月经第8~15天,雌激素高峰的第3~5天,手术将猕猴的子宫内膜种植到盆腔子宫腔以外的部位,对照猕猴用大网膜取代内膜种植。在术后第2、4个月动物月经周期的第8~15天开腹或腹腔镜探查。结果术后第2个月探查,4只实验猴中,3只异位内膜种植存活,其中2只形成异位囊肿。术后第4个月,对2只已形成EM的猕猴行腹腔镜再次探查,其盆腔粘连,异位内膜生长情况与术后第2个月基本相似;3只形成EM的猕猴精神状态、饮食、体质量增长情况均较对照猕猴差,2只发生肠套叠死亡。结论本研究根据种植学说原理成功地构建了子宫内膜异位症猕猴动物模型,但猕猴的个体差异是模型是否成功的一个关键因素,因而认为遗传因素是子宫内膜异位症发病中的另一重要机制,子宫内膜异位生长对机体的整体机能有较为明显的影响。     

子宫内膜异位症猕猴动物模型的建立

目的 构建子宫内膜异位症(EM)猕猴动物模型。方法 选择5只健康、月经规律的雌性猕猴(4只实验猴、1只对照猴)，在月经第8～15天，雌激素高峰的第3～5天，手术将猕猴的子宫内膜种植到盆腔子宫腔以外的部位，对照猕猴用大网膜取代内膜种植。在术后第2、4个月动物月经周期的第8～15天开腹或腹腔镜探查。结果术后第2个月探查．4只实验猴中，3只异位内膜种植存活，其中2只形成异位囊肿。术后第4个月，对2只已形成EM的猕猴行腹腔镜再次探查。其盆腔粘连，异位内膜生长情况与术后第2个月基本相似；3只形成EM的猕猴精神状态、饮食、体质量增长情况均较对照猕猴差，2只发生肠套叠死亡。结论本研究根据种植学说原理成功地构建了子宫内膜异位症猕猴动物模型。但猕猴的个体差异是模型是否成功的一个关键因素。因而认为遗传因素是子宫内膜异位症发病中的另一重要机制，子宫内膜异位生长对机体的整体机能有较为明显的影响。     

子宫内膜异位症患者腹水与血清中肝细胞生长因子的检测

扩散因子(肝细胞生长因子)(SF/HGF)是一种多功能的生长因子,与肿瘤细胞的增生、血管生成、侵袭性密切相关。本研究的目的是探索HGF在子宫内膜异位症发病机制中的作用及HGF与子宫内膜异位症发生发展的关联。本研究应用酶联免疫吸附反应技术检测了126位妇女(其中72位为子宫内膜异位症患者,54为正常对照)血清及腹水中HGF浓度。与对照组比较,Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中的HGF浓度升高,3组妇女腹水中HGF浓度分别为(0.337±0.065)、(0.458±0.160)、(0.915±0.113)ng/ml 。血清中HGF浓度分别为(0.335±0.663)、(0.456±0.151)、(0.907±0.17)ng/ml。Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中HGF浓度与Ⅰ/Ⅱ期患者和对照组比较,差异有统计学意义。三组妇女血清与腹水的HGF浓度均呈正相关。HGF浓度与月经周期无明显相关。处于同一月经周期的患者与正常妇女血清及腹水HGF浓度比较,显示HGF浓度的升高主要是子宫内膜异位症的发生和发展相关,与月经周期无明显相关。     

表皮生长因子受体在子宫内膜异位症在位与异位内膜组织中的表达

子宫内膜异位症是指有生长功能的子宫内膜出现在子宫腔被覆粘膜以外的身体其他部位 ,是一种雌激素依赖性疾病。近年来研究认为 ,雌激素对宫内膜的作用是通过局部组织产生肽类生长因子如ＥＧＦ以自分泌或旁分泌的方式作用于相应受体而促进细胞的增殖。本文通过研究ＥＧＦ受体 (ＥＧＦ -Ｒ)在有或无子宫内膜异位症的患者在位与异位内膜上的表达 ,从而对ＥＧＦ -Ｒ在子宫内膜异位发病机制的作用作一初探性研究。1　材料与方法1 1　临床资料　研究组 :选用 1997年 3月～ 1999年 8月就诊于第三军医大学三所附属医院 ,因子宫内膜异位症行卵巢切除(…     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法：应用免疫组织化学(SABC)法，检测70例异位内膜组织和30例正常子宫内膜组织(对照组)中VEGF的表达。结果：VEGF在异位内膜组织及对照组中的阳性表达率分别为77．14％和43．33％(P＜0．001)，强阳性表达率分别为25．71％和3．3％(P＜0．01)。而VEGF在卵巢子宫内膜异位症组和子宫腺肌症组中的阳性表达率分别为77．78％和76．47％(P＞0．05)。结论：异位内膜组织中VEGF的过度表达与异位内膜组织的血管生成密切相关，VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥作用。     

肝细胞生长因子及其受体在胃癌组织中的表达

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体(c-Met)在胃癌组织中表达的意义.方法 采用即用型免疫组化染色法检测44例胃癌、20例慢性浅表性胃炎、10例慢性萎缩性胃炎和16例胃溃疡组织中HGF/c-Met的表达.结果 慢性浅表性胃炎组织细胞内均无HGF/c-Met表达,HGF在胃癌、慢性萎缩性胃炎和胃溃疡组织中表达阳性率分别为72.7%(32/44)、20%(2/10)和37.5%(6/16),胃癌HGF阳性率显著高于慢性萎缩性胃炎组(P＜0.005)及胃溃疡组(P＜0.025);c-Met在胃癌、慢性萎缩性胃炎和胃溃疡组织中表达阳性率分别为77.3%(34/44)、40%(4/10)和37.5%(6/16),胃癌c-Met阳性率也显著高于慢性萎缩性胃炎组(P＜0.05)及胃溃疡组(P＜0.025).结论 胃癌组织中存在HGF和c-Met的共同表达,可能是促进肿瘤恶性演变的生物学行为,也为胃癌的治疗提供一条新的有效途径.     

鼻息肉组织中肝细胞生长因子及血管内皮生长因子的表达

目的:检测鼻息肉组织中肝细胞生长因子(HGF)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法:采用免疫组织化学方法分别检测30例鼻息肉标本和20例正常下鼻甲黏膜标本中HGF与VEGF的表达.结果:鼻息肉组织中可见大量嗜酸性粒细胞浸润.鼻息肉组织中HGF和VEGF蛋白的阳性表达率分别为83.3%和76.7%,均高于正常对照组(30.0%和10.0%,P<0.05),且在鼻息肉血管内皮细胞及间质浸润的炎症细胞中2者的表达呈正相关(r=0.630,P<0.05;r=0.514,P<0.05).结论:鼻息肉组织中HGF和VEGF的表达增强,提示2者可能协同参与鼻息肉的形成.     

肝细胞生长因子在白血病儿童中的表达

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在白血病儿童血清及骨髓间充质干细胞(MSCs)培养上清液中的表达及意义.方法 采用细胞贴壁法获取足量的MSCs,通过荧光倒置显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测免疫表型的方法对MSCs进行鉴定,应用酶联免疫吸附实验检测白血病患儿和非感染血液病儿童(对照组)的外周血清及白血病患儿MSCs培养上清液中的HGF水平.结果 白血病初诊及复发患儿MSCs培养上清液中HGF的浓度为849.98(564.04 ～3 113.7) pg/mL,而白血病完全缓解期患儿为290.00(83.54 ～ 644.27) pg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).白血病初诊及复发患儿血清中HGF浓度为1 172.03 (464.24 ～5 134.40) pg/mL,白血病完全缓解期患儿血清中HGF浓度为324.38 (98.25～785.76) pg/mL,对照组血清中HGF浓度为301.77(78.25～607.44) pg/mL,白血病初诊及复发患儿血清中HGF浓度高于白血病完全缓解期患儿及对照组,(P＜0.05);而白血病完全缓解期患儿与对照组血清中的HGF浓度相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 白血病患儿外周血清中能检测到HGF的异常表达,HGF水平与白血病病情、疗效有一定的相关性.体外培养的白血病患儿骨髓MSCs能分泌HGF,其中来自白血病初诊患儿的MSCs分泌HGF尤为显著,提示HGF的高分泌参与白血病骨髓微环境的功能异常.     

肝细胞生长因子在甲状腺乳头状癌的表达及其与淋巴管生成的关系

目的:探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织的表达及其与肿瘤淋巴管生成的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测52例PTC和20例癌旁正常甲状腺组织HGF表达和特异性淋巴管内皮标志物D2-40标记的微淋巴管密度(micro-lymphatic vessel density,MLVD),结合PTC的临床病理参数作相关统计学分析。结果:PTC癌组织HGF、MLVD较癌旁正常甲状腺组织明显增高(P<0.01),有无淋巴结转移组间差异有统计学意义(P<0.05);HGF表达与癌旁MLVD之间呈明显的正相关关系(P<0.01)。结论:HGF的过表达和MLVD增高与PTC发生、发展有关;HGF可促进肿瘤淋巴管生成。     

血管内皮细胞生长因子受体在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜组织、34份卵巢子宫内膜异位囊肿组织、15份腹膜红色病变组织、4份腹壁子宫内膜异位灶组织,以33例非内异症患者的在位子宫内膜组织作为对照,比较不同组织中Flt1、KDRmRNA及蛋白的阳性表达率和表达强度的差异。结果Flt1、KDR蛋白质除在血管内皮细胞中表达外,还在子宫内膜的腺细胞和间质细胞中表达。Flt1、KDR在内异症患者子宫内膜的阳性表达率分别为94.3%,91.4%,高于卵巢巧克力囊肿(分别为74.3%,77.1%)两者比较P<0.05,与同期非内异症患者在位子宫内膜组织(93.8%,90.6%,P>0.05)的表达率相仿。Flt1、KDR在内异症患者在位子宫内膜组织的核酸水平[吸光度(A)比值]分别为2.4±1.2,3.0±1.4;蛋白质水平灰度值分别为31±17,36±24;同期卵巢巧克力囊肿组织中的核酸水平(A)比值分别为1.5±0.9,1.8±1.0;蛋白质水平灰度值分别为17±6,20±11(P<0.05);对照组子宫内膜组织的核酸水平(A)比值分别为1.9±0.8,2.3±1.3;蛋白水平灰度值为24±18,25±16(P>0.05)。结论VEGF可能通过子宫内膜细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。内异症患者的异位子宫内膜中Flt1、KDR的表达可能与血管形成相关。     

散结镇痛胶囊对子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子的影响

目的：探讨散结镇痛胶囊对子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子的影响。方法将132例子宫内膜异位症患者随机分成观察组和对照组,各66例。对照组患者给予孕三烯酮胶囊治疗,观察组患者给予散结镇痛胶囊治疗。比较两组患者的疗效,疼痛评分,泌乳素（ PRL）、雌二醇（E2）、癌抗原125（CA125）、脂联素、肝细胞生长因子、天冬氨酸转氨酶（ AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果治疗后,观察组患者治疗有效率明显高于对照组（P <0.05）,观察组患者的各项疼痛评分均显著低于对照组（P <0.05）;观察组患者的 PRL 及 E2水平均明显低于对照组（P <0.05）;观察组患者的脂联素水平显著高于对照组,而肝细胞生长因子水平明显低于对照组（P <0.05）;观察组患者的 AST 及 ALT 水平均显著低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论散结镇痛胶囊能够有效减轻子宫内膜异位症患者的疼痛,改善内分泌紊乱,调节脂联素和肝细胞生长因子的表达,促进患者康复。     

人肝细胞生长因子在CHO细胞中的表达

以ｐＲＣ／ＣＭＶ作为真核细胞表达性载体，用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＸｂａⅠ将ＨＧＦｃＤＮＡ全序列定向重组到ｐＲＣ／ＣＭＶ的多克隆位点上。筛选得到的重组质粒以磷酸钙ＤＮＡ共沉淀的方法转染ＣＨＯ细胞，经８００ｍｇ／Ｌ的Ｇ４１８筛选，获得阳性细胞克隆。用ＨＣＣ－７９０２细胞及原代培养的成年大鼠肝细胞对转染阳性细胞培养基收集上清进行活性测定。３Ｈ－ＴｄＲ掺入等分析证明，它能有效地抑制体外培养的人肝癌细胞的生长，并可明显刺激鼠肝细胞ＤＮＡ的合成。结果表明，重组人ＨＧＦ基因在ＣＨＯ细胞中成功地获得表达，为基因工程大量制备和纯化ＨＧＦ奠定了基础     

肝细胞生长因子mRNA在牵张成骨过程中的表达

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)mRNA在兔下颌骨牵张成骨(DO)过程中的表达。方法 选取新西兰大白兔40只分为牵张组与骨折对照组,每组20只,牵张组行两侧下颌骨切开术,经7?d间歇期后以0.5mm/12h的速度牵张,7d后固定,骨折对照组不牵张,分别于术后第1、2、3、5、7周末各处死4只动物。采用HE染色和原位杂交进行组织学分析并检测HGF的表达。结果 HGFmRNA在术后1周开始出现少量表达,位于牵张间隙内炎性细胞的细胞浆,术后3周时阳性表达强度达到峰值,牵张组与骨折对照组之间阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05),术后5周时基本检测不到目的基因的阳性表达,牵张组与骨折对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 DO过程中HGFmRNA在机体内出现阳性表达,且牵张力可促进该因子的阳性表达强度。