A型流感病毒对肺巨噬细胞自噬的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用

目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素组、空白组,干预12 h后,分别用激光共聚焦显微镜和透射电镜技术检测细胞自噬情况;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达。结果麻杏石甘汤含药血清能不同程度抑制流感病毒诱导的细胞自噬标志蛋白LC3的膜聚集,抑制细胞内自噬小体和自噬溶酶体的增加,以及LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,且呈现一定的量效关系。结论麻杏石甘汤可能通过抑制A型流感病毒诱导的细胞自噬,最终调控A型流感病毒的致病作用。     

基于含药肝孵育液法的麻黄—杏仁药对舒张支气管平滑肌的β2受体机制与效应成分验证

目的:分析麻黄-杏仁药对含药肝孵育液的解痉效应成分与效应指标之间的关联性,与分子对接及文献结果对比,进一步探讨含药肝孵育液法用于中药体外组织器官水平药理学研究的可行性。方法:采用HPLC法测定麻黄-杏仁药对含药肝孵育液中麻黄碱(X₁)、伪麻黄碱(X₂)、甲基麻黄碱(X₃)、苦杏仁苷(X₄)的含量;于乙酰胆碱和磷酸组胺预收缩的离体气管环痉挛模型,采用生物信号采集系统检测气管环张力变化,ELISA检测气管组织环磷酸腺苷(cAMP)与环磷酸鸟苷(cGMP)及二者比值变化;采用多元线性回归分析效应成分与效应指标的相关性;采用分子对接技术分析验证上述实验结果。结果:麻黄-杏仁药对能上调气管环舒张率(Y₁)和cAMP/cGMP比值(Y₂);以效应成分含量为自变量,效应指标变化为因变量,得回归方程分别为Y₁=0.238X₁-0.105X₂+0.675X₃-0.097X₄     

麻杏石甘汤2种方法提取物的兔血清高效毛细管电泳图谱比较研究

目的:比较麻杏石甘汤2种方法提取物(MEⅠ、MEⅡ)在体内吸收和代谢过程中的差异。方法:麻杏石甘汤2种方法提取物灌胃给予新西兰大白兔,于0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0h时取血4ml并制备血清,测绘高效毛细管电泳图谱,并以图谱间的欧氏距离为指标比较其吸收和代谢过程的差异。结果:MEⅠ在大白兔体内的吸收代谢速度比MEⅡ快。结论:采用高效毛细管电泳图谱研究中药复方药动学有一定的科学性和可行性。     

基于PI3K/PKB信号通路研究吡菲尼酮缓解肝纤维化的作用机制

目的基于磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(PKB)信号通路研究吡菲尼酮缓解小鼠肝纤维化程度的作用机制。方法选择65只小鼠,饲养7 d后将其中60只随机均分为模型组、健康组和吡菲尼酮组,每组20只,另留5只不入组。使用四氯化碳诱导模型组和吡菲尼酮组肝纤维化。成功建立肝纤维化模型后,吡菲尼酮组给予吡菲尼酮灌胃,模型组和健康组给予等量生理盐水灌胃。2周后处死小鼠,取肝脏组织进行苏木精-伊红(HE)、胶原纤维(Masson)染色,评估各组肝纤维化程度,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫印迹法测定PI3K和PKB的mRNA及蛋白表达量,检测小鼠血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平。结果模型组与吡菲尼酮组小鼠ALT及AST水平均明显高于健康组(P<0.05);模型组小鼠ALT及AST水平均高于吡菲尼酮组(P<0.05)。模型组小鼠PI3K mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及健康组(P<0.05);吡菲尼酮组PI3K mRNA和蛋白表达量高于健康组(P<0.05);模型组小鼠PKB mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及...     

安五脂素改善大鼠肝纤维化的效果及机制

目的 探讨安五脂素改善大鼠肝纤维化的效果及作用机制。方法 将50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,秋水仙碱片组(0.1 mg/kg),安五脂素高、低剂量组(2.8、0.7 mg/kg),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射50%CCl₄橄榄油混合溶液复制肝纤维化大鼠模型。造模结束后,各组大鼠从第9周开始灌胃相应药物或蒸馏水,每日1次,连续给药4周。实验期间观察大鼠一般情况;计算大鼠肝指数;采用比色法检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;采用HE染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理形态学和肝纤维化情况;采用Western blot法检测肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠饮食量下降,被毛稀疏、蓬乱,反应迟钝,体重增长速率减慢或体重降低;肝指数显著上升(P<0.01);大鼠血清中ALT、AST、MDA含量均显著升高,SOD含量显著降低(P<0.01);HE染色及Masson染色均观察到大...     

GLP-2基于PI3K/AKT信号通路对急性胰腺炎模型的干预作用研究

目的 研究胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2,GLP-2)基于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoionsitide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路对急性胰腺炎模型的干预作用.方法 选取30只Wistar雄性大鼠,选取10只分为...     

褐藻多糖基于PI3k/AKT信号通路对乳腺肿瘤大鼠的效果研究

目的研究褐藻多糖基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路对乳腺肿瘤大鼠的效果。方法通过建立乳腺肿瘤模型,分为正常组、模型组、低剂量褐藻多糖组、高剂量褐藻多糖组,每组15只。病理学观察,统计肿瘤体积、瘤数量、潜伏期、肿瘤细胞的增殖和周期,采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-5(interleukin-5,IL-5)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),Western blot检测PI3k、Akt、PTEN、SHIP蛋白。结果与正常组比较,模型组、低剂量褐藻多糖组、高剂量褐藻多糖组肿瘤体积、瘤数量、潜伏期、TNF-α、IL-6、IL-5、VEGF水平、PI3k、Akt、PTEN、SHIP表达较高(P<0.05)。与模型组比较,低剂量褐藻多糖组、高剂量褐藻多糖组肿瘤体积、瘤数量、TN...     

基于网络药理学和实验验证白藜芦醇治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的 通过网络药理学、分子动力学模拟探讨白藜芦醇对类风湿性关节炎的治疗作用及潜在机制,并进行实验验证。方法 使用TCMSP、Batman-TCM、SwissTarget Prediction数据库预测白藜芦醇的作用靶点;使用GeneCards和OMIM数据库预测类风湿性关节炎的潜在治疗靶点;使用STRING和Cytoscape3.8.0构建蛋白相互作用（PPI）网络,并进行MCC分析、MCODE分析、基因本体（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析,对KEGG通路和靶点之间绘制网络图;使用分子对接和分子动力学模拟方法对核心靶点与白藜芦醇进行模拟;构建类风湿性关节炎大鼠模型,Western blotting法检测p-磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、p-蛋白激酶B1（p-Akt1）和p-细胞外信号调节激酶（p-ERK）1/2的表达水平。结果 白藜芦醇有310个靶点,与类风湿性关节炎有207个交集靶点,MCC分析发现Akt1、PIK3CA、PIK3CB、促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）1、MAPK3、信号传导与转录激活因子3（STAT3）是其中核心基因。GO和KEGG富集分析发现,癌症通路、糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物–晚期糖基化终末产物受体（AGE-RAGE）信号通路、细胞凋亡和PI3K/Akt信号通路可能是白藜芦醇影响类风湿性关节炎的关键通路;分子对接和分子动力学模拟也发现Akt1、PIK3CA和MAPK1与白藜芦醇之间有很强的结合能力。动物实验发现,与对照组相比,模型组大鼠关节炎指数明显增加,而给予白藜芦醇后大鼠的关节炎指数明显下降;p-PI3K、p-AKT表达明显上升,p-ERK1/2的表达明显下降（P＜0.05、0.01）。结论 白藜芦醇能改善类风湿性关节炎大鼠的关节炎指数,并可能通过Akt1、PIK3CA和MAPK1等靶点和PI3K/Akt信号通路来发挥关键治疗作用。     

鱼腥草总黄酮调控PI3K/Akt信号通路诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的：探讨鱼腥草总黄酮调控磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的诱导作用。方法：取对数期MCF-7细胞,随机分为4组（5个复孔）,低、中、高剂量组分别用3,6,9 g·L^-1鱼腥草总黄酮处理,对照组用磷酸盐缓冲液（PBS）处理。干预48 h后进行细胞形态学观察;对比干预12,24,48 h时的细胞凋亡率;对比干预48 h时PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和PI3K、Akt、磷酸化Akt（pAkt）、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量。结果：Hoechst 33258染色结果显示,干预后3剂量组部分细胞体积缩小、染色质浓缩,出现凋亡小体,且中剂量组凋亡现象最为明显;细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最高、高剂量组其次、低剂量组其稍低、对照组最低,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;细胞凋亡率组内比较,对照组随时间的延长变化不显著（P>0.05）,3剂量组均随时间的延长显著增加（P<0.05）;PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最低、高剂量组其次、低剂量组稍高、对照组最高,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;Akt mRNA和蛋白相对表达量组间比较差异均不显著（P>0.05）。结论：鱼腥草总黄酮可促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡,其中浓度为6 g·L^-1时促凋亡作用最强,推测是通过下调PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白表达,上调Bax mRNA和蛋白的表达,与PI3K/Akt信号通路有关。     

鼠尾草酚对荷卵巢癌裸鼠移植瘤的作用研究

目的 探讨鼠尾草酚对荷卵巢癌裸鼠移植瘤的作用及可能的作用机制.方法 用裸鼠背部皮下接种人卵巢癌细胞株SKOV3的方法构建荷卵巢癌BALB/c-Nude裸鼠模型,将荷卵巢癌裸鼠随机分为模型组、阳性对照组与实验组,各18只.实验组裸鼠灌胃鼠尾草酚(20 mg·kg-1),阳性对照组灌胃顺铂(2 mg·kg-1),模型组灌胃...     

麻杏石甘汤联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的系统评价

目的 系统评价麻杏石甘汤联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎（MPP）的疗效及安全性。方法 检索中国学术期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库、维普中文期刊全文数据库（VIP）、中国生物医学数据库（CBM）,Cochrane Library、Embase和PubMed数据库中麻杏石甘汤联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的随机对照试验（RCT）,检索时间均为建库至2021年2月,使用Revman 5.4.1和Stata 14.0软件评价纳入文献质量并进行Meta分析。结果 共纳入13篇RCTs,包括1 240例患者,试验组总有效率［RR＝1.17,95% CI（1.12,1.23）,P＜0.000 01］优于对照组,且不存在发表偏倚（P=0.542）。试验组止咳时间［SMD＝−0.78,95% CI（−0.98,−0.58）］、退热时间［SMD＝−1.48,95% CI（−1.95,−1.01）］、肺啰音消失时间［SMD＝−0.96,95% CI（−1.23,−0.69）］、肺部胸片影像恢复时间［SMD＝−0.80,95% CI（−1.00,−0.61）］均短于对照组,差异有统计学意义（P＜0.000 01）。安全性评价得出试验组发生不良反应的次数［RR＝0.39,95% CI（0.24,0.64）,P=0.0002］少于对照组。结论 麻杏石甘汤联合阿奇霉素治疗小儿MPP较单用阿奇霉素疗效显著,安全性高,有良好的临床应用价值,由于存在一定局限性,上述结论需更多高质量的研究来进行验证。     

麻杏石甘汤合千金苇茎汤联合噻托溴铵对痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者呼吸困难指数评分、血清降钙素原及用力肺活量的影响

目的:探讨麻杏石甘汤合千金苇茎汤联合噻托溴铵对痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者呼吸困难指数评分(modified medical research council,mMRC)、...     

基于网络药理学和实验验证的黄芪六一汤药效组分促肾小管上皮细胞自噬抗糖尿病肾病的机制研究

目的 通过网络药理学分析及相关的动物实验探讨黄芪六一汤药效组分（HQD）调控肾小管上皮细胞自噬水平抗糖尿病肾病（DN）的机制。方法 采用 DN 大鼠模型考察 HQD 抗 DN 的作用。利用 SwissTargetPrediction 数据库获得 HQD 主要入血成分的相关靶点,并与 GeneCard、DisGeNET 和 OMIM 数据库中筛选的疾病靶点取交集;利用 STRING 数据库和Cytoscape 构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络获得核心靶点;采用 Metascape 数据库对交集靶点进行基因本体（GO）注释及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。利用 DN 大鼠模型对预测结果进行验证。结果 与对照组比较,HQD 能显著降低 DN 模型大鼠血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、24 h 尿白蛋白（24 h-U-Alb）值（P＜0.05）,抑制肾组织细胞凋亡（P＜0.05）。网络药理学研究显示 HQD 主要通过 STAT3、EGFR、VEGFA、JUN、TNF、AKT1、CASP3、mTOR、IL2 等关键靶点,作用于癌症通路、癌症中的蛋白多糖、PI3K-Akt 信号通路、MAPK 等信号通路;动物验证实验显示 HQD 能下调 PI3K/Akt/mTOR 信号通路相关蛋白的表达,上调肾脏组织自噬相关蛋白 Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ的表达（P＜0.05）,增加肾小管上皮细胞自噬体及自噬溶酶体数量。结论 HQD 抗 DN 的分子机制可能与抑制 PI3K/Akt/mTOR 信号通路激活,促进肾小管上皮细胞自噬水平,抑制细胞凋亡,减轻肾小管上皮细胞损伤有关。     

Effects of ginsenoside compound K combined with cisplatin on the proliferation,apoptosis and epithelial mesenchymal transition in MCF-7 cells of human breast cancer

Context: Breast cancer seriously harms the health of women and there are currently few therapeutic options for patients with breast cancer.

Objective: Effects of ginsenoside compound K (CK) in combination with cisplatin (DDP) on the proliferation, apoptosis, and epithelial mesenchymal transition (EMT) of MCF-7 cells were studied.

Materials and methods: MCF-7 cells were divided into CK (50?μmol/L) group, DDP (10?mg/L) group, CK (50?μmol/L)?+DDP (10?mg/L) group, and control (CON) group. The cells in the CON group were not treated with any drugs. Proliferation, apoptosis, expression of E-cadherin, N-cadherin, vimentin, protein kinase B (Akt), phosphorylated Akt (p-Akt), and level of fibronectin (FN) in MCF-7 cells were detected by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT), flow cytometry, western blotting, and enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA), respectively.

Results: The proliferation inhibition rates in CK, DDP, and CK?+?DDP groups at 48?h were 19.18?±?2.25, 21.34?±?2.84, and 43.37?±?5.62, respectively. The apoptosis rates were 2.85?±?0.56, 13.37?±?2.28, 20.04?±?2.92, and 30.78?±?4.64 at 24?h and 3.14?±?0.72, 20.36?±?3.28, 27.58?±?4.09, and 41.62?±?5.83 at 48?h in CON, CK, DDP, and CK?+?DDP groups, respectively. CK or DDP alone and their combination all could reduce the levels of N-cadherin, vimentin, p-Akt/Akt, and FN and elevate level of E-cadherin.

Discussion and conclusion: Both CK and DDP can inhibit the proliferation, EMT, and induce the apoptosis in MCF-7 cells, which may be related to the PI3K/Akt pathway. In addition, the combination of CK with DDP can produce a better effect.     

基于生物分子网络探讨桑白皮汤治疗慢性阻塞性肺疾病的作用机制

目的 利用生物分子网络探讨桑白皮汤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用机制.方法 通过中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)收集桑白皮汤的化学成分和成分对应的靶点,并利用Cytoscape软件构建中药-成分-靶点网络;通过GeneCards、TTD和DisGeNET数据库获取与COPD相关的靶点,对成分靶点和疾病...     

基于网络药理学和体外实验探讨淫羊藿素治疗多发性骨髓瘤的作用机制

目的 通过网络药理学、分子对接和体外实验探讨淫羊藿素治疗多发性骨髓瘤的作用机制。方法 利用Pharm Mapper、SEA、SwissTargetPrediction数据库收集淫羊藿素的作用靶点,通过DisGeNET、GeneCards、MalaCards数据库收集多发性骨髓瘤的疾病靶点。利用Venn分析获得作用靶点与疾病靶点的共有靶点并导入STRING数据库分析靶点间相互作用关系,再通过Cytoscape软件构建淫羊藿素与抗多发性骨髓瘤潜在作用靶点的可视化关系网络,然后对潜在作用靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,并对关键靶点进行分子对接验证。进一步对人多发性骨髓瘤U266细胞开展体外实验,CCK-8法检测淫羊藿素对U266细胞增殖的影响,q PCR和Western blotting检测淫羊藿素对关键通路中相关基因、蛋白表达的影响。结果 筛选得到淫羊藿素治疗多发性骨髓瘤的潜在作用靶点143个,其中的重要作用靶点主要有蛋白激酶B1(Akt1)、白蛋白(ALB)、连环蛋白β1(CTNNB1)、热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA...     

基于转录组学研究野黄芩苷对代谢相关脂肪性肝病的作用及潜在机制

目的 研究野黄芩苷对代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）大鼠的改善作用,并基于转录组学探讨潜在机制。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组和野黄芩苷低、高剂量（50、100 mg·kg^-1）组,采用高脂饮食（HFD）饲喂16周诱导NAFLD大鼠模型,从第8周开始按分组对应ig给药,实验结束后测定体质量及肝脏指数;采用试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇（TC）和三酰甘油（TG）水平;采用苏木素-伊红（HE）、油红O和Masson染色检查肝脏病理变化;采用转录组学技术分析肝脏基因表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠16周体质量、肝脏质量及肝脏指数明显增加（P＜0.01）;血清中ALT、AST、TC和TG水平明显升高（P＜0.01）;肝脏出现结构性损伤、脂肪变性及气球样变等病理改变,红色脂滴和蓝色胶原纤维明显变多。与模型组比较,野黄芩苷组大鼠16周体质量、肝脏质量及肝脏指数明显降低（P＜0.05、0.01）;肝损伤及血脂相关指标水平明显恢复（P＜0.05、0.01）;肝脏病理改变趋于正常,红色脂滴和蓝色胶原纤维减少。转录组学结果显示,对照组与模型组间有622个差异表达基因,模型组与野黄芩苷组间有579个差异表达基因,这其中有238个共有差异表达基因,并调控环磷酸鸟苷（cGMP）/蛋白激酶G（PKG）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、松弛素、晚期糖基化终末产物（AGE）-糖基化终末产物受体（RAGE）、钙、胰岛素抵抗和Hippo等信号通路。结论 野黄芩苷可能通过作用于肝脏238个基因,调控cGMP/PKG、PI3K/Akt、松弛素、AGE-RAGE、钙、胰岛素抵抗和Hippo等信号通路发挥对NAFLD大鼠的改善作用。     

基于PI3K/Akt信号途径探讨理气消瘿方对结节性甲状腺肿大鼠的作用机制

目的基于PI3k/Akt信号途径探析理气消瘿方对结节性甲状腺肿大鼠的机制研究。方法60只Wist-ar雄性大白鼠,随机分为空白对照组、模型组、优甲乐组、消瘿方组,每组15只。空白对照组坚持每日进行普通胃喂养并给予生理盐水灌胃,模型组完成造模后同样给予生理盐水灌胃,优甲乐组给予优甲乐溶液灌服,消瘿方组给予活血消瘿方灌服。比较四组大鼠PI3K、Akt信号通路分子表达量以及1个月内存活情况。结果空白对照组PI3K信号通路分子表达量为(1.00±0.01)低于模型组的(1.52±0.07)、优甲乐组的(1.41±0.07)、消瘿方组的(1.31±0.08),差异均具有统计学意义(t=28.482、22.457、14.892,P<0.05)。消瘿方组PI3K信号通路分子表达量明显低于模型组及优甲乐组,差异均有统计学意义(t=7.651、3.643,P<0.05)。空白对照组Akt信号通路分子表达量为(1.00±0.01)低于模型组的(2.14±0.08)、优甲乐组的(2.01±0.03)、消瘿方组的(1.67±0.07),差异均具有统计学意义(t=54.764、123.70、36.697,P<0.05)。消瘿方组Akt信号通路分子表达量均低于模型组、优甲乐组,差异均具有统计学意义(t=17.124、12.388,P<0.05)。空白对照组小鼠存活率100.00%明显高于模型组的33.33%、优甲乐组的53.33%,差异均具有统计学意义(P<0.05);空白对照组与消瘿方组大鼠存活率比较,差异无统计学意义(P<0.05)。结论结节性甲状腺肿的发生可能与PI3K/Akt信号通路蛋白分子表达量上调有关联,临床给予消瘿方治疗可抑制PI3KAkt信号通路激活达到一定治疗目的。     

槐耳颗粒缓解奥沙利铂诱导肝脏损伤的作用及机制研究

目的:探究槐耳颗粒对奥沙利铂(OXA)诱导的肝脏损伤的保护作用及内在机制.方法:采用70只雄性C57BL/6小鼠,随机分为7组,分别为正常对照组,模型对照组,药物对照组,槐耳低、中、高剂量组及阳性对照组.除正常对照组和药物对照组给予等体积的5％葡萄糖溶液外,其余各组腹腔注射(i.p)10mg·kg-1 OXA溶液造模,...     

脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌细胞MHCC97H生长和侵袭的抑制作用及机制研究

目的：观察脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌高转移细胞MHCC97H细胞生长和侵袭性的抑制作用。方法：不同浓度URB597（1、5、10μmol/L）作用于MHCC97H细胞后不同时间,应用MTT法及流式细胞仪检测该种细胞生长活力及凋亡细胞数目的改变;应用Transwell实验检测该种细胞的运动能力及侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测该种细胞内磷酸化Akt（p-Akt）和Akt表达量的变化。结果：上述3种浓度的URB597作用于该种细胞3-7d后,细胞活力明显降低,呈时间及剂量依赖性;10μmol/L URB597作用3-7d可显著增加凋亡细胞数目。URB597作用于细胞48h后,与对照组比较,5、10μmol/L URB597可显著抑制MHCC97H细胞侵袭能力（P〈0.01,P〈0.001）。3种浓度URB597作用于细胞24h后,5、10μmol/L URB597可显著下调细胞内p-Akt水平（P〈0.05,P〈0.01）。结论：URB597对体外生长的人肝癌细胞MHCC97H的生长和侵袭有明显抑制作用,该作用可能与其抑制磷酯酰肌醇-3激酶（PI3K）/Akt信号通路有关。