肝细胞癌中微小RNA mir219启动子区异常甲基化和表达下调

目的:微小RNA(microRNA)异常在肿瘤发生发展中起重要作用,本研究探讨microRNA mir219在肝细胞癌中的异常甲基化和异常表达,可能参与肝细胞癌的发生发展过程.方法:采用pyrosequence、TA克隆测序等方法检测正常肝组织、肝细胞癌细胞株和肝癌标本中mir219上游预测启动子区域甲基化,Taqman实时定量Rt-PCR测定肿瘤组织表达.结果:与正常肝脏组织相比,肝癌细胞株、肝癌标本中mir219上游预测启动子区域中茎环区和上游1kb区域的CpG岛存在高度甲基化.肝癌细胞株、肝癌标本中mir219表达显著下调,与其异常甲基化相关.结论:肝癌中微小RNA mir219茎环序列上游1094 bp区域存在启动子区异常甲基化,表达下调,提示mir219异常可能在肝细胞癌发生发展巾起重要作用,是潜在的抑癌基因.     

DNA甲基化和非编码RNA在肝细胞癌转移复发中的研究进展

转移和复发是影响肝细胞癌（肝癌）患者生存的主要因素,目前,肝癌的复发转移机制取得了一些进展,表观遗传学调控在DNA甲基化/羟甲基化修饰、组蛋白修饰、染色质重塑及非编码RNA表达等方面起重要作用,其中DNA甲基化和非编码RNA在肝癌转移复发中的作用研究较多,笔者简要综述DNA甲基化和非编码RNA在肝癌转移复发中的研究进展.     

微小RNA在结肠癌中的研究进展

结肠癌是世界三大最常见癌症之一,其发病机制已被广泛研究。而近年来微小RNA(microRNA,miRNA)与肿瘤的相关性研究已成为热点。miRNA参与了包括肿瘤的发生发展和肿瘤细胞凋亡增殖等相关机制的调控。最近的研究显示miRNA可作为新的肿瘤生物标记物,从而对肿瘤的化疗敏感性及预后进行预测。然而,在临床应用miRNA之前还有许多问题有待解决。通过更为广泛的研究以及数据的积累找出更适合作为生物标记物的miRNA,并能更好的了解其在结肠癌中的作用。文中对miRNA作为结肠癌的诊断、预后及药物反应预测的生物标志物的潜在作用进行总结与阐述。     

微小RNA在骨肉瘤中的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是指长度约21～25 nt的某些特殊的小型非编码RNA组成的家族。miRNA在转录后水平通过促进靶mRNA降解或抑制翻译过程而发挥负性调控作用。miRNA与肿瘤的发生、发展关系密切。文中综述miRNA的主要特点及其在骨肉瘤中的研究进展。     

微小RNA在宫颈癌中的研究进展

微小RNA(miRNAs)是近年来发现的一类长度约22个核苷酸的编码小分子RNA,它通过促使靶mRNA降解或抑制其翻译来调节靶基因的表达,在细胞的分化、增殖,个体发育,机体代谢以及肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,是女性第二大恶性肿瘤以及与癌症相关死亡的原因,严重威胁女性健康。miRNAs在宫颈癌组织及血清中表达上调或下调,推断其可能参与宫颈癌的发生、发展,在宫颈癌的发生、发展过程中起着癌基因或抑癌基因的作用。     

肝细胞癌中BLU基因甲基化状态

目的了解肝细胞癌（HCC）中BLU基因的甲基化状态及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术，检测50例HCC癌组织及相应的癌旁组织，4个HCC细胞系，8例肝血管瘤旁和4例供肝组织，了解BLU基因在上述组织中的甲基化状态，并分析其与临床资料间的相关性。结果4例供肝组织均未发生甲基化，8例肝血管瘤旁组织有1例发生甲基化，4个HCC细胞系有3个出现甲基化。50例HCC癌组织及其相应的癌旁组织中，分别检测到33例（66％）、18例（36％）发生甲基化；癌组织与癌旁组织甲基化率比较，差异有显著性（P=0．003）；肝功能Child B级患者甲基化率高于Child A级患者（P=0．041）；甲基化阳性患者的肿瘤直径大于阴性患者（P=0．004）；甲基化阳性患者的半年无瘤生存率低于阴性患者，但差异无显著性（P=0．058）。结论BLU基因甲基化是HCC中的频发事件，可能参与HCC的发展。     

微小RNA及其在泌尿系统肿瘤中的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)突变、缺失或表达水平的异常会导致生理的异常与疾病的发生,它与人类肿瘤的发生密切相关,具有类似于癌基因或抑癌基因的作用,参与肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭、转移及凋亡等调控过程。其表达谱可作为肿瘤诊断和预后的指标,并可望成为肿瘤诊疗的新靶点。文中主要讨论miRNA及其     

微小RNA在免疫调节中的作用研究进展

微小RNA(miRNA)是一类新发现的内源性非编码RNA分子,能在转录后水平调控基因的表达.研究证实,miRNA在细胞增殖、发育、分化、凋亡、代谢、信号转导以及肿瘤发生中发挥重要的调节作用.近年来,一系列的miRNA已被证实参与了免疫反应调控,如固有性免疫应答,T、B淋巴细胞的分化,病原体感染与免疫及炎症的免疫调控等.文中就miRNA在固有性与获得性免疫应答中的调控作用作一综述.     

MicroRNA与肝癌预后的研究进展

近年来,虽然医疗技术和水平有了长足发展,但是肝细胞癌仍保持较高的死亡率,特别是晚期肝癌患者生存期短。因此,寻找有效的和非侵入性的肝癌预后标志物势在必行。MicroRNA参与了细胞发育、分化、凋亡等多种生物过程,在转录后调控中扮演着重要角色,与癌症等复杂疾病的发生发展密切相关。已有大量研究表明,microRNA的表达谱在一定程度上能够较好地反映肝癌的预后情况。因此,分析比较不同样本来源的microRNA与肝癌预后之间的关系,有助于更好地研究肝癌发生发展的内在机理,为肝癌的临床治疗提供新的思路。本文主要比较了肝癌组织和血液样本中microRNA预后标志物与预后特征、生存率之间的关系。这对于肝癌非侵入性预后生物标志物的选择和研究具有重要的指导意义。     

肝癌DNA甲基化的研究进展

肝癌的发生同其他人类肿瘤一样,都是由表观遗传学异常和基因改变共同引起,DNA甲基化是表观遗传学上研究最为深入的一种机制。在肝癌的发生发展过程中,抑癌基因等肿瘤相关基因的高甲基化和整个基因组水平的低甲基化起着重要作用,肝癌的甲基化研究对肝癌的早期诊断和病情预后的监测及其防治具有重要意义。在此对肝癌DNA甲基化特征及其临床意义进行阐述。     

Stat3 mRNA靶向MicroRNA重组质粒的构建及其在HepG2肝癌细胞系中的表达

目的构建并筛选靶向信号转导和转录激活因子3（Stat3mRNA）的微小RNA（MicroRNA）表达质粒。观察其在肝癌细胞系HepG2中对Stat3表达的影响。方法针对人Stat3mRNA设计3条MicroRNA序列,经退火成互补双链,将双链DNA插入线性质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR质粒中,分别构建重组表达质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1、2、3等3组质粒,并测序鉴定。脂质体法转染重组质粒至人肝癌HepG2细胞中,观察转染效果。RT-PCR和Western blot分别检测Stat3mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖能力。结果成功构建靶向Stat3的MicroRNA重组质粒,经测序证实插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致,转染人肝癌HepG2细胞后,荧光显微镜下可观察到带有绿色荧光的HepG2细胞。流式细胞仪检测3组质粒的转染效率分别为：76%、73%和63%。RT-PCR分析pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1、2、3的抑制率分别为：73.5%、47.2%和39.6%,下调Stat3蛋白的比例分别为：89.1%、71.6%、67.3%。其中pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1的下调效应最明显。MiR-1质粒转染组的细胞凋亡率升高,增殖受抑制,与阴性对照质粒组和未转染组比较,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。结论成功构建了靶向Stat3的MicroRNA表达质粒,其对肝癌HepG2细胞Stat3的表达及增殖有显著抑制。     

乙肝病毒X蛋白对肝癌细胞组蛋白H3K4甲基化修饰的影响及机制

【目的】 探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)与肝癌细胞组蛋白H3K4位点甲基化修饰的关系及其可能的机制?【方法】构建稳定表达HBx基因的HepG2-hbx及载体对照细胞系HepG2-vc,同时培养用于阳性对照的肝癌细胞系HepG2.2.15及阴性对照细胞系HepG2;用酶标法检测各组细胞组蛋白H3K4位点甲基转移酶活性,比较HBx对H3K4位点甲基转移酶活性的影响;qRT-PCR检测各组细胞中H3K4位点特异性甲基转移酶SMYD3 ( SET and MYND domain containing3 )基因转录水平变化;Western-blot 检测SMYD3蛋白表达水平变化;免疫组化方法检测84例肝癌组织(包含:HbsAg(+)58例,HbsAg(-)26例)中SMYD3与组蛋白H3K4me3表达情况并对结果进行统计分析?【结果】稳定表达HBx基因的肝癌细胞系其组蛋白H3K4位点甲基化活性显著高于对照组细胞(P < 0.05),且SMYD3表达上调(P < 0.05);肝癌组织组蛋白SMYD3表达与患者是否存在HBV感染有关,并且促进H3K4甲基化修饰?【结论】 HBx上调肝癌细胞组蛋白H3K4位点甲基转移酶活性,这可能与其介导的SMYD3表达上调有关,并且在肝癌组织中由HBx介导的SMYD3上调也增强了组蛋白H3K4甲基化修饰?     

miRNA-769-5p在乙型肝炎相关肝细胞癌中的表达

目的:研究乙型肝炎相关性肝细胞癌中异常表达的微小RNA(miRNAs)及其与肝细胞癌患者根治术预后的关系。方法:通过Taqman低密度芯片(TLDA)分析了显微切割福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本中的肝细胞癌组织及癌旁组织中miRNA的表达,并在48例样本中验证了其中1个差异表达的miRNA(miR-769-5p)及与肝细胞癌患者根治性切除术预后的关系。结果:miR-769-5p在癌组织较癌旁组织中高表达,在48例显微切割的有、无早期复发肝细胞癌样本中验证了该结果并分析了miR-769-5p与肝细胞癌患者根治术预后的关系,结果发现miR-769-5p在早期复发者的癌组织中表达高于无早期复发者。但是,肿瘤中miR-769-5p的表达水平与复发时间及总生存时间无关。进一步分析发现miR-769-5p的表达可能与肿瘤的数目相关,而与肿瘤大小、包膜及肿瘤的分期无关。结论:miR-769-5p在乙型肝炎相关肝细胞癌组织中较癌旁组织高表达,且其表达水平可能与肿瘤的数目相关。     

The Epigenetics of Hepatocellular Carcinoma: A New Horizon

Epigenetic changes refer to stable alterations in gene expression with no underlying modifications in the genetic sequence itself. It has become clear that not only gene variations but also epigenetic modifications may contribute to varied diseases, including cancer. This review will provide an overview of how epigenetic factors, including genomic DNA methylation, histone modifications, and miRNA regulation, contribute to hepatocellular carcinoma (HCC) dissemination, invasion, and metastasis. Additionally, the reversal of dysregulated epigenetic changes has emerged as a potential strategy for the treatment of HCC, and we will summarize the latest epigenetic therapies for HCC.     

中央二区切除治疗肝细胞癌手术方法探讨

目的探讨中央二区切除治疗肝细胞癌的手术方法。方法回顾性分析14例中央二区肝细胞癌切除的临床资料,14例肝细胞癌患者均伴有肝炎后肝硬化,术前肝功能,ChildA11例,ChildB3例。肿瘤最大直径5～8cm。结果全部病例采用中央二区切除(Ⅴ,Ⅷ,Ⅳ段),成功地切除所有的肿瘤,术中出血120～300ml,所有患者术中未输血,无术中死亡。术后并发症:膈下积液1例,右侧胸腔积液1例。随访全部病例,随访时间1～3年,其中2例复发。结论中央二区肝切除技术是治疗肝细胞癌的手术方法之一。熟悉肝门及Couinaud氏的肝段解剖,采用CUSA及双极电凝切开肝实质是手术成功的关键。     

原发性肝癌术后早期复发密切相关microRNA的筛选及应用

【目的】 利用microRNA芯片技术分析比较两组不同复发倾向肝癌患者的miRNA表达谱,并在更大样品的基础上进行实验验证?【方法】收集10例原发性肝癌组织标本根据术后复发情况分2组:早期复发组与非早期复发组,运用microRNA芯片技术筛选出差异表达显著的microRNAs?结合文献报道,选择mir-144?mir-502-3p作为其他82例肝癌组织标本qReal-time PCR验证的检测指标?并利用生物信息学方法预测其靶基因?【结果】本研究共筛选获得7个差异表达的microRNAs?与非早期复发组相比,在早期复发组中有4个表达上调,3个表达下调?qReal-time PCR验证与microRNA芯片筛选的结果一致?生物信息学方法预测miR-144靶基因可能为Rb1,miR-502-3p靶基因可能为SET?【结论】 microRNA芯片筛选的mir-144?mir-451?mir-486-5p?mir-602?mir-551b?mir-96?mir-502-3p与原发性肝癌术后早期复发密切相关?     

逆行肝切除术等在大肝癌综合治疗中的应用研究

目的：探讨大肝癌有效切除合理手术方式和合理治疗方法。方法：通过对80例大肝癌患者术前多项因素综合判定肝储备能力,将患者分为4组,Ⅰ组为可切除组,行逆行肝切除结合置泵栓塞化疗等综合治疗;Ⅱ组为可切除组,于项目之前完成的常规肝切除结合置泵栓塞化疗等综合治疗;Ⅲ组为不能切除组,采用开腹射频消融结合置泵栓塞化疗等综合治疗;Ⅳ组为不愿开腹手术,行介入栓塞化疗等综合治疗。每组20例患者。结果：Ⅰ组1年内生存15例,死亡5例,1年生存率75％;3年内生存8例,死亡12例,3年生存率40％。Ⅱ组1年内生存13例,死亡7例,1年生存率65％;3年内生存4例,死亡16例,3年生存率20％。Ⅲ组1年内生存8例,死亡12例,1年生存率40％;3年内无生存病例。Ⅳ组1年内生存仅2例,死亡18例,1年生存率10％;3年内无生存病例。结论：（1）逆行肝切除术等综合治疗大肝癌较常规手术明显降低术后并发症,提高生存率。（2）对于不能切除的大肝癌,射频消融结合置泵栓塞化疗等综合治疗大肝癌较其他综合治疗方法有较好的疗效。