灯盏花乙素通过调节线粒体融合-分裂平衡抑制氧糖剥夺/复糖复氧诱导的N2a细胞焦亡

目的: 探讨灯盏花乙素对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的N2a细胞焦亡的影响及作用机制。方法: 建立N2a细胞OGD/R损伤模型,设立对照组、模型组、灯盏花乙素给药组和线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组。通过CCK-8检测N2a细胞增殖能力,检测各组细胞培养基中LDH和IL-1β水平,通过JC-1探针检测线粒体膜电位,Western blot检测线粒体融合分裂关键蛋白(Drp-1、Mfn-1、Mfn-2、OPA-1)和细胞焦亡标志蛋白(Caspase-1、NLRP-3和GSDMD)表达。结果: 与对照组相比,OGD/R可显著降低N2a细胞活力,灯盏花乙素可明显提高N2a细胞活力。与模型组相比,灯盏花乙素可减少LDH的释放,降低Caspase-1和IL-1β水平,提高线粒体膜势能,降低Drp-1的表达水平,上调Mfn-1、Mfn-2和OPA-1的表达,并减少细胞焦亡关键蛋白NLRP-3和GSDMD的表达。进一步给予Drp-1抑制剂Mdivi-1,与模型组相比,Mdivi-1可明显提高线粒体膜势能,减少Caspase-1、NLRP-3和GSDMD的表达。结论: 灯盏花乙素可通过抑制线粒体过度分裂,改善线粒体融合-分裂失衡与功能异常,进而缓解OGD/R所致N2a细胞焦亡。     

IVF/ICSI助孕后早期流产患者蜕膜组织焦亡相关因子表达水平的研究

目的 探讨体外受精（IVF）/卵胞浆内单精子注射（ICSI）助孕妊娠后早期流产患者蜕膜组织中焦亡相关因子的表达及作用。方法 选取行IVF/ICSI助孕妊娠后早期流产患者102例（研究组），同期因意外妊娠行人工流产术的患者100例（对照组），收集蜕膜组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法及Western blot法检测蜕膜组织中焦亡相关因子Nod样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素（IL）-1β、胱天蛋白酶1(Caspase1)、gasdermin D(GSDMD)mRNA及蛋白表达，TUNEL法检测蜕膜组织中细胞焦亡情况，Pearson法分析蜕膜组织中细胞焦亡率与NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD蛋白水平的相关性。结果 与对照组相比，研究组蜕膜组织中NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD mRNA及蛋白水平、蜕膜组织中细胞焦亡率升高（P<0.05）；研究组患者蜕膜组织中细胞焦亡率与NLRP3、IL-1β、Caspase1、GSDMD蛋白表达水平均呈正相关（r分别为0.429、0.474、0.498、0.540，均P<0.05）。结论 ...     

狐臭柴茎挥发油体外抗炎活性及基于NF-κB和MAPKs信号通路作用机制的研究

目的:探究狐臭柴茎挥发油的体外抗炎活性及其作用机制。方法:通过水蒸气蒸馏法制备狐臭柴茎挥发油,采用GC-MS对其化学成分进行分析。通过Griess法和ELISA法测定挥发油对LPS诱导RAW264.7细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平的影响;qRT-PCR检测iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达;Western blot测定挥发油对iNOS、COX-2、NF-κB和MAPKs信号通路蛋白的影响。结果:从挥发油中共鉴定出74种化学成分,其中主要的化学成分是茅术醇(13.50%)。挥发油显著抑制NO、TNF-α和IL-6的分泌(P＜0.01),同时降低了促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)和促炎酶(iNOS和COX-2)的mRNA表达水平(P＜0.01)。Western blot研究表明挥发油能下调NF-κB信号通路细胞核p65蛋白表达、p65和IκBα磷酸化(P＜0.05或P＜0.01)。此外,还降低了MAPKs信号通路p38、JNK和ERK蛋白的磷酸化(P＜0.01)。结论:狐臭柴茎挥发油对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型具有较好的抗炎效果,其内在的分子机制与下调NF-κB和MAPKs信号通路有关。     

过表达SOCS3对西格列汀改善胰岛素抵抗作用的影响

目的:探究过表达SOCS3对西格列汀(sitagliptin,SITA)在改善脂质代谢和氧化应激,以减轻棕榈酸(palrnitic acid,PA)介导的HepG2细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)中的作用。方法:MTT法检测PA与SITA对肝癌细胞HepG2增殖活性的影响;将HepG2分为4组:Control组,PA组,PA+SITA+pEX-RB-NC组和PA+SITA+pEX-RB-SOCS3组;油红O染色检测细胞中脂质的积聚水平,RT-PCR检测细胞中SREBP1c和PPARα的mRNA表达,DCFH-DA法检测细胞中ROS的水平,RT-PCR与试剂盒检测细胞中CAT与GPx的mRNA表达与酶活性;Western blot试验检测细胞IR通路中p-IRS-1^Ser307/IRS-1、p-AKT^Ser473/AKT、p-GSK3β^Ser9/GSK3β的比值。结果:与Control组相比,SITA能削弱PA诱导的HepG2细胞活力损伤(P＜0.05),且PA组、PA+SITA+pEX-RB-NC组和PA+SITA+pEX-RB-SOCS3组中富含大量红色脂滴,SREBP1c与PPARα的mRNA水平、ROS、CAT与GPx表达及p-IRS-1^Ser307/IRS-1、p-AKT^Ser473/AKT、p-GSK3β^Ser9/GSK3β比值均明显升高(P＜0.05);但与PA组相比,PA+SITA+pEX-RB-NC组除CAT、GPx及p-IRS-1^Ser307/IRS-1、p-AKT^Ser473/AKT、p-GSK3β^Ser9/GSK3β比值升高外(P＜0.05),其他检测指标均显著降低(P＜0.05),PA+SITA+pEX-RB-SOCS3组中上述指标均无明显改变(P＞0.05)。结论:SITA可抑制脂质代谢和氧化应激,从而以减轻PA介导的肝细胞IR,而该作用能够被过表达SOCS3所抵消。     

小檗碱调控AMPK-TSC1/LC3-Ⅱ信号通路促进高糖高脂应激下NIT-1胰岛β细胞的自噬

目的：观察小檗碱（berberine,BBR）对高糖高脂应激条件下的NIT-1胰岛β细胞自噬的影响并探讨其潜在的分子机制。方法：分别采用高浓度葡萄糖（25 mmol·L^-1）和软脂酸（0.25 mmol·L^-1）诱导NIT-1胰岛β细胞建立高糖、高脂模型,予以小檗碱处理,用放射免疫法检测胰岛素水平,通过电镜观察自噬体的形成;然后予以腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激动剂AICAR,腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂Compound C,自噬诱导剂雷帕霉素（Rapa）进行干预,Western blot方法检测各组细胞AMPK的活化、自噬相关蛋白结节性硬化复合物1（TSC1）、微管相关蛋白1轻链蛋白3（LC3-Ⅱ）的表达。结果：在高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞中,小檗碱可以促进胰岛素的分泌和自噬体的形成,促进自噬相关蛋白TSC1,LC3-Ⅱ的表达,并活化其上游的AMPK。结论：小檗碱在高糖高脂的应激条件下可能通过促进自噬来发挥保护胰岛β细胞功能的作用,其分子机制可能与小檗碱调控AMPK-TSC1/LC3-II信号通路相关蛋白有关。     

基于细胞焦亡探讨补阳还五汤配方颗粒对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的抑制作用

目的:探讨补阳还五汤对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌纤维化抑制作用与细胞焦亡的关系。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组,以及补阳还五汤低、高剂量组(6,36 g·kg^-1·d^-1),每组9只。除对照组外,其余各组小鼠均单次腹腔注射柯萨奇B3病毒复制VMC模型。造模成功后,对照组和模型组小鼠均灌胃等容生理盐水,各给药组小鼠均灌胃相应药液,每日1次,连续28 d,于实验过程中观察各组小鼠的一般情况。以病毒接种当日为第0天,分别于第7、14、28天检测其心脏质量与体质量比值(HW/BW);采用苦味酸天狼猩红染色法观察其心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的分布情况,并计算Ⅰ型/Ⅲ型胶原蛋白比值;Tunel染色检测心肌细胞凋亡率,并计算凋亡指数;于第30天时,采用Western blot法检测其心肌组织中NLRP3、Caspase-1蛋白的相对表达量。结果:与对照组比较,模型组小鼠出现烦躁、拱背、对刺激反应减轻、体质量减轻甚至精神萎靡等现象;HW/BW、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值(第7~28天各时间点)、心肌细胞凋亡指数,以及心肌组织中NLRP3、Caspase-1的相对表达量均显著升高(P＜0.05);与模型组比较,各给药组小鼠上述症状具有不同程度改善,其HW/BW(第7天除外)、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值(第7天除外)、心肌细胞凋亡指数(补阳还五汤低剂量组第7天除外),以及NLRP3、Caspase-1的相对表达量的相对表达量均显著降低(P＜0.05)。结论:补阳还五汤通过抑制心肌胶原蛋白增生,调节Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值,抑制NLRP3、Caspase-1的表达,发挥对VMC心肌纤维化的抑制作用。     

菊苣酸对大鼠软骨关节炎的作用及机制

目的: 探究菊苣酸(cichoric acid)对大鼠软骨关节炎的作用及机制。方法: 分离大鼠膝关节处软骨原代细胞,利用白细胞介素1β(interleukin 1 beta, IL-1β)和肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor alpha, TNF-α)诱导软骨关节炎细胞模型,给予低中高剂量的菊苣酸和姜黄素干预。免疫荧光分析Type Ⅱ collagen表达水平,甲苯胺蓝染色和阿利新蓝染色观察干预后软骨关节炎细胞变化,β-半乳糖苷酶染色进行衰老检测,TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Western blot检测FOXO4 (forkhead box O4)、p53 (tumor protein P53)和Type Ⅱ collagen蛋白表达水平,生化检测超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD),丙二醛(Malondialdehyde, MDA)和一氧化氮(nitric oxide, NO)含量。结果: 分离得到大鼠软骨原代细胞,IL-1β和TNF-α诱导细胞炎性,甲苯胺蓝染色和阿利新蓝染色面积增加,大鼠软骨关节炎细胞构建成功。与模型组相比菊苣酸高剂量组,甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色、β-半乳糖苷酶染色和TUNEL染色平均光密度比值,MDA含量、NO含量,FOXO4和Type Ⅱ collagen蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),p53蛋白表达水平,SOD含量显著增加(P＜0.05)。结论: 菊苣酸阻止软骨关节炎导致的细胞衰老,抑制软骨关节炎导致的细胞凋亡,进而阻止原代细胞中软骨关节炎的进展,其机制与菊苣酸下调FOXO4蛋白参与的衰老进程相关。     

百秋李醇对幽门螺杆菌致小鼠胃炎的保护作用

目的: 探讨百秋李醇对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染小鼠胃炎的保护作用及其作用机制。方法: 采用化学致癌剂和幽门螺杆菌联合诱导法建立胃炎模型, 将C57BL/6小鼠分为正常组、模型组、阳性对照组(铋剂四联疗法)、百秋李醇高剂量组(40 mg·kg^-1)、百秋李醇低剂量组(20 mg·kg^-1)。灌胃给药, 连续治疗4周后, 行快速尿素酶试验, 评价胃组织中幽门螺杆菌的定植程度; 酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度, 免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应法测定胃黏膜Wnt2、β联蛋白(β-catenin)及核因子κB(NF-κB)的蛋白及基因表达。结果: 各给药组小鼠胃黏膜的腺体排列、炎性细胞浸润及不典型增生等病变现象均有显著减轻, 百秋李醇高、低剂量组对幽门螺杆菌根除率分别为78%、70%, 与模型组相比组间差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比, 百秋李醇高、低剂量组小鼠血清IL-8和TNF-α水平均有显著降低(P＜0.01);与模型组相比, 百秋李醇高、低剂量组小鼠胃黏膜Wnt2、β-catenin和NF-κB蛋白及基因表达均有显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论: 百秋李醇可通过抑制NF-κB信号转导通路及Wnt/β-catenin信号转导通路的持续活化及相关炎性细胞因子的高表达, 减轻胃黏膜炎症反应, 防止胃黏膜细胞上皮-间质样转化的发生, 从而阻止或延缓胃肠癌前病变的进程。     

逆萎康含药血清调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路抑制MC细胞的上皮间质转化

目的：逆萎康（NWK）含药血清对MC细胞（MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系（GES-1）恶性转化）上皮间质转化（EMT）的影响及可能机制。方法：用不同浓度含药血清作用于MC细胞,采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、p-AKT Ser⁴⁷³、β-catenin、α-SMA、GSK-3β、p-GSK-3β Ser⁹、AKT蛋白的表达影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测C-myc基因的表达影响。结果：与空白组比较,蛋白质印迹实验表明,逆萎康含药血清、AKT抑制剂GSK690693（10 μmol·L^-1）使得β-catenin、p-AKT Ser⁴⁷³、E-cadherin和p-GSK-3β Ser⁹在蛋白水平的表达下调（P<0.05）,而α-SMA、N-cadherin和vimentin在蛋白水平上的表达上调（P<0.05）,但GSK-3β和AKT这两种蛋白的表达差异不显著;qRT-PCR结果证实逆萎康含药血清可以抑制C-myc mRNA（P<0.05）的表达,并且加入抑制剂后抑制作用增强,差异具有显著性。结论：逆萎康通过抑制AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的活化,抑制MC细胞的EMT过程。     

雷公藤甲素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞线粒体自噬、NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的影响

目的 探究雷公藤甲素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（FLSs）线粒体自噬、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响。方法 将FLSs细胞和类风湿关节炎FLSs细胞进行传代培养。将类风湿性关节炎FLSs细胞采用0、10、20、40 ng/mL雷公藤甲素进行处理。采用蛋白质印迹法（Western blotting）检测线粒体自噬相关蛋白LC3B、p62、PHB2、NLRP3的蛋白表达。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测炎症因子白细胞介素（IL）-1β和IL-18的水平。采用流式细胞术检测细胞焦亡情况,并采用Western blotting法检测焦亡相关蛋白GSDMD和GSDMD-N表达。结果 采用10、20、40ng/mL雷公藤甲素处理类风湿关节炎FLSs后,雷公藤甲素各剂量组均能显著减弱类风湿关节炎FLSs细胞的线粒体自噬相关蛋白LC3B的表达,上调p62和PHB2的表达;NLRP3表达水平均显著降低,IL-1β和IL-18水平显著降低;细胞焦亡率显著降低;GSDMD蛋白表达显著上升,GSDMD-N蛋白表达下降（P<0.05、0.01、0.001）,且呈剂量...     

京尼平苷对高糖高脂诱导的胰岛β细胞胰岛素分泌的影响

目的研究京尼平苷对高糖高脂诱导的胰岛β细胞胰岛素分泌的影响。方法用高糖高脂孵育大鼠胰岛β细胞(INS-1)及原代大鼠胰岛,同时用京尼平苷干预,用放射免疫法检测胰岛素分泌量。结果京尼平苷增加高糖高脂孵育后INS-1细胞的数量;京尼平苷促进高糖高脂孵育后INS-1细胞的胰岛素分泌;京尼平苷改善高糖高脂孵育后原代大鼠胰岛的胰岛素分泌,且通过胰高糖素样肽-1(GLP-1)受体发挥作用。结论京尼平苷通过GLP-1受体调节高糖高脂诱导后胰岛β细胞的胰岛素分泌。     

我国居民对执业药师立法支持度现状及其影响因素:一项全国范围大样本横断面研究

目的:了解中国居民对执业药师立法的支持度及其影响因素。方法:通过问卷对抽取的120个城市的居民进行横断面研究,采用多重线性回归分析居民对执业药师立法意愿得分的相关因素。结果:中国居民对于执业药师立法支持度平均得分为69.04分。本科及以上学历(β＝0.04)、轻度焦虑(β＝0.03)、重度压力(β＝0.05)居民对执业药师立法支持度较高,P均＜0.01;中重度抑郁(β＝－0.02,P＜0.01)居民对执业药师立法支持度较低。家庭健康状况(β＝0.30)、自我健康感觉(β＝0.25)、自我管理能力(β＝0.13)、健康素养(β＝0.12)和领悟社会支持(β＝0.09)均对居民执业药师立法支持度得分产生显著的正向影响(P＜0.01)。结论:文化程度、焦虑、压力、抑郁、家庭健康状况、自我健康感觉、自我管理能力、健康素养和社会支持均是影响居民对执业药师立法态度的主要因素。     

罗汉果苷V通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病状态成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探索罗汉果苷V(mogroside V,MV)对糖尿病状态下成骨细胞增殖分化的影响及其可能的作用机制。方法:构建糖尿病大鼠模型,分离培养正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞。CCK8法检测不同质量浓度MV对糖尿病大鼠成骨细胞的毒性和增殖活性,并筛选出适宜的MV浓度用于后续实验;取正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞,分别设立正常对照组、高糖组及MV+高糖组,茜素红染色及定量分析检测成骨分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关因子ALP、OCN及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Runx2,β-catenin,Axin2,Lef1及Osterix的mRNA表达。结果:0~0.4 g·L^-1质量浓度范围内MV对糖尿病状态成骨细胞均未表现出毒性,且浓度为6.25×10^-3g·L^-1时促进细胞增殖活性最强;与高糖组相比,MV+高糖组(含质量浓度为6.25×10^-3g·L^-1 MV)成骨分化能力增强,ALP、OCN、Runx2、β-catenin、Lef1、Osterix的表达显著升高,Axin2的表达显著降低。 结论:罗汉果苷V可促进糖尿病状态成骨细胞增殖与分化,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

利拉鲁肽对高糖诱导的H9c2心肌细胞焦亡的保护作用

目的 研究利拉鲁肽(LRG)对高糖诱导的H9c2心肌细胞焦亡的保护作用和机制。方法 分别用不同剂量的LRG和高糖处理细胞48 h,挑选出LRG最佳干预剂量。将H9c2细胞分为6组：对照组、高糖组和低、中、高剂量LRG(LRG-L、LRG-M、LRG-H)组、LRG-H+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率；用流式细胞术检测细胞焦亡情况；用酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平；用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症体相关基因表达；用蛋白质印迹法检测NLRP3炎症体、自噬、沉默信息调节因子1/腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Sirt1/AMPK/mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果 对照组、高糖组、LRG-L组、LRG-M组、LRG-H组、LRG-H+3-MA组细胞焦亡率分别为(1.62±0.74)%、(15.30±0.98)%、(12.68±0.66)%、(9.70±0.67)%、(7.24±0.83)%、(13.66±0.70)%...     

小肠结肠炎综合征小鼠肠黏膜中NLRP3表达与炎症分子关系的研究

目的 探讨食物蛋白诱导的小肠结肠炎综合征（FPIES）小鼠肠黏膜细胞中炎症小体NOD样受体热蛋白结 构域相关蛋白3（NLRP3）表达水平,明确NLRP3异常与炎症分子及细胞焦亡的关联性。方法 利用卵清蛋白灌胃建 立食物蛋白诱导FPIES小鼠模型;实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和Western blot方法检测肠黏膜细胞NLRP3、 炎症分子及细胞焦亡通路分子的表达水平;采用药物干预黏膜细胞,分别抑制和激活NLRP3,Western blot方法检测 肠黏膜细胞炎症分子及细胞焦亡通路分子表达的改变情况。结果 FPIES小鼠肠黏膜细胞中NLRP3、炎症分子及细 胞焦亡通路分子表达水平显著上调（P＜0.05）;激活NLRP3表达,可以诱导炎症分子及细胞焦亡通路分子表达显著 上调,抑制NLRP3表达,可以显著上调炎症分子转化生长因子（TGF）-β和肿瘤坏死因子（TNF）-α表达（P＜0.05）。结论 FPIES小鼠肠黏膜细胞NLRP3表达与炎症反应及细胞焦亡密切相关,是调控FPIES肠道病理表型的上游靶标分子。     

白藜芦醇通过SIRT1激活ADAM10促进APPα代谢

目的：探讨白藜芦醇可否通过SIRT1激活解整合素金属蛋白酶10（ADAM10）促进APPα代谢抑制Aβ分泌。方法：选取过表达人瑞典突变淀粉样前体蛋白APP695sw的细胞模型,分别设立DMSO空白对照组、SIRT1激活剂白藜芦醇组和SIRT1抑制剂EX527组。给药后,ELISA法分别检测细胞培养上清中sAPPα和Aβ的含量,免疫印记Western Blot法检测细胞SIRT1和ADAM10的蛋白水平。结果：与对照组比较,白藜芦醇组细胞培养上清sAPPα的含量增高,Aβ含量下降,sAPPα/Aβ比值增大,细胞SIRT1和ADAM10蛋白水平增高;而抑制剂EX527组与对照相比,细胞培养上清sAPPα的含量降低,Aβ含量升高,sAPPα/Aβ比值减小,细胞SIRT1和ADAM10蛋白水平降低;抑制剂下调SIRT1后各项指标与激动剂组呈现相反的趋势（P<0.05）。结论：白藜芦醇可通过SIRT1激活ADAM10,促进APP进行α非淀粉样代谢途径,增强sAPPα分泌并抑制Aβ产生。     

鹿茸多肽对阿霉素诱导H9c2细胞损伤保护作用的研究

目的：探讨鹿茸多肽对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤的保护作用与其作用机制。方法：培养H9c2细胞，采用CCK-8方法考察ADR和PAP对H9c2细胞存活率的影响，选择最优给药时间与浓度，分成4组，空白对照组（BCG组）、阿霉素诱导组（ADR组）、鹿茸多肽组（PAP组）、阿霉素与鹿茸多肽联合诱导组（ADR+PAP组），ELISA检测H9c2上清液中cTnT和cTnI的含量，免疫荧光法检测Caspase9的表达水平，Western blot法检测各组细胞相关蛋白TGF-β₁、SMAD7、PKC表达。结果：与BCG组比较，ADR组cTnT和cTnI含量显著升高（P<0.05），Caspase9活性表达降低，TGF-β₁蛋白表达升高（P<0.01），SMAD7、PKC蛋白表达降低（P<0.01），PAP组无显著性差异（P>0.05），与ADR组比较，ADR+PAP组cTnT和cTnI含量减少（P<0.05），Caspase9活性表达升高，TGF-β₁蛋白表达降低（P<0.05），SMAD7、PKC蛋白表达升高（P<0.01，P<0.05）。结论：鹿茸多肽可以对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤有保护作用，其作用机制可能与调控TGF-β₁、SMAD7、PKC蛋白表达量有关。     

鹰嘴豆芽素A干预TXNIP-Wnt通路改善ox-LDL诱导脑血管内皮细胞凋亡的机制研究

目的：讨论鹰嘴豆芽素A改善ox-LDL诱导脑血管内皮细胞凋亡的作用机制。方法：将大鼠脑血管内皮细胞RBECs分为对照组、氧化型低密度脂蛋白ox-LDL诱导模型组及鹰嘴豆芽素A低、中、高剂量干预组。其中ox-LDL诱导是给予100 μg·mL^-1 ox-LDL诱导RBECs细胞凋亡,鹰嘴豆芽素A干预组是给予低、中、高剂量（25,50,100 μmol·L^-1）鹰嘴豆芽素A进行药物干预。免疫荧光法检测各组脑血管内皮细胞Dil细胞膜荧光标记的ox-LDL （Dil-ox-LDL）荧光强度的变化;Western blot法检测RBECs细胞中TXNIP、NLRP3、Wnt5a、β-catenin及bax、bcl-2、cleaved caspase-3的蛋白表达水平;免疫荧光法检测TXNIP、NLRP3蛋白在细胞中的定位表达。进一步转染siRNA-TXNIP沉默RBECs细胞中TXNIP,考察鹰嘴豆芽素A对于TXNIP介导的Wnt通路及凋亡相关蛋白表达的影响。结果：ox-LDL可诱导RBECs细胞凋亡,同时诱导NLRP3、Wnt5a、β-catenin及凋亡蛋白表达显著升高。不同剂量的鹰嘴豆芽素A干预后,均可降低RBECs细胞中Dil-ox-LDL的荧光强度,并且能够抑制TXNIP由细胞核向细胞质转移,同时显著降低凋亡蛋白bax和cleaved caspase-3的表达水平,并升高bcl-2表达。沉默TXNIP后能够明显减弱鹰嘴豆芽素A对NLRP3、Wnt5a、β-catenin蛋白的抑制作用,并减弱鹰嘴豆芽素A对ox-LDL诱导RBECs细胞凋亡的改善作用。结论：鹰嘴豆芽素A能够改善ox-LDL诱导的脑血管内皮细胞凋亡,其机制可能与TXNIP介导的Wnt信号通路的激活相关。     

姜黄素对糖尿病大鼠心肌自噬,凋亡及AMPK-mTOR信号通路的影响

目的:基于心脏组织AMPK/mTOR信号通路、自噬和凋亡来探讨姜黄素(curcumin,Cur)对糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用。方法:50只雄性SD大鼠被随机分为3组:正常对照组(Con,n=10)给予正常饮食以及等量生理盐水腹腔注射;糖尿病模型组(DM,n=40)大鼠给予高糖高脂饮食联合连续5 d腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ) (35 mg·kg^-1·d^-1),给药组(Cur+DM),部分糖尿病大鼠(n=20)在其饮用水中给予Cur(300 mg·kg^-1·d^-1)进行干预16周。HE染色观察大鼠心脏组织形态改变;透射电镜观察大鼠心脏组织粒体形态变化;TUNEL染色,免疫组织化学和蛋白印迹等方法检测心脏组织自噬、凋亡,AMPK/mTOR信号通路等相关蛋白的表达情况。结果:与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠心肌肥大,线粒体嵴稀疏、断裂,自噬及相关蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡及相关蛋白表达水平显著增加(P<0.05),P-AMPK/AMPK蛋白表达水平降低(P<0.05)而P-mTOR/mTOR增加(P<0.05)。与糖尿病模型组比较,给药组大鼠心肌肥大水平和线粒体断裂程度减轻,自噬及相关蛋白表达水平增加(P<0.05),细胞凋亡及相关蛋白表达水平减轻(P<0.05),P-AMPK/AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),而P-mTOR/mTOR减少(P<0.05)。结论:姜黄素可能通过活化AMPK/mTOR信号通路增强糖尿病大鼠心脏组织自噬水平,减轻心脏组织细胞凋亡,从而改善糖尿病大鼠心脏损伤。     

α-硫辛酸对高糖环境下大鼠INS-1细胞的保护作用

目的 观察α-硫辛酸对高糖环境下INS-1细胞的抗氧化作用及对胰岛素分泌的影响,探讨α-硫辛酸对胰岛β细胞的保护作用.方法 INS-1细胞分为3组:对照组(11.1 mmol/L葡萄糖处理)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖处理)和观察组(30 mmol/L葡萄糖+200 μmol/L α-硫辛酸处理).分组培养48 h后检测活性氧生成的情况,行葡萄糖刺激胰岛素分泌试验(GSIS)测定胰岛素含量,测定各组氧化应激相关指标,测定核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶l(NQO1) mRNA表达情况.结果 高糖组细胞存活率、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶1(GPX-1)和过氧化氢酶(CAT)含量低于对照组(P＜0.05),活性氧和丙二醛含量高于对照组(P＜0.05).观察组细胞存活率、SOD、GPX-1和CAT含量高于高糖组(P＜0.05),活性氧和丙二醛含量低于高糖组(P＜0.05).高糖组基础胰岛素分泌和GSIS试验胰岛素分泌量以及SOD、GPX-1、CAT、HO-1和NQ01 mRNA表达低于对照组(P＜0.05).观察组基础胰岛素分泌和GSIS试验胰岛素分泌量以及SOD、GPX-1、CAT、Nrf2、HO-1和NQO1mRNA表达高于高糖组(P＜0.05).结论 α-硫辛酸显著降低胰岛β细胞在高糖环境下的氧化损伤,增强胰岛β细胞GSIS的功能,对胰岛β细胞具有保护作用.