Caspase-9在髁突软骨及长骨生长板软骨中表达变化的对比

目的 观察Caspase-9在大鼠髁突软骨与长骨生长板软骨发育中的表达变化, 探讨Caspase-9在软骨细胞发育中的意义.方法 建立SD大鼠不同发育阶段 (E15dP30d) 髁突软骨与长骨生长板软骨发育的动物模型, 采用免疫组化检测Casepase-9在2种软骨中的表达变化.结果 大鼠髁突软骨Caspase-9阳性表达强于生长板软骨 (P<0.05) , 且生长板软骨阳性细胞的分布规律与髁突基本一致.胎鼠Caspase-9阳性主要表达于增殖层;出生后主要表达于成软骨层及肥大层.结论 Caspase-9参与了髁突软骨及生长板软骨的生长发育, 由其所介导的细胞凋亡可能在软骨发育中发挥重要作用.且Caspase-9对于髁突软骨和生长板软骨的发育可能存在某些相同或相似的分子机制.     

母源性十溴联苯醚对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响

目的 研究Wistar母鼠在孕前和孕期喂灌十溴联苯醚(BDE-209)对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响.方法 20只雌性Wistar大鼠,随机分成观察组和对照组各10只.观察组雌鼠胃灌BDE-209 1 500 mg/(kg·d),对照组胃灌等量的纯花生油,30 d后按雌雄比例1:2合笼,雌鼠继续经口给药,方法同前,直至分娩后停止胃灌.出生后21 d处死雌性子鼠,取右侧卵巢、膝关节,观察组织学改变,采用免疫组化与图像分析技术.测定卵母细胞GDF-9,软骨表层2型胶原蛋白的表达水平.结果 观察组子代雌鼠卵母细胞GDF-9含量较对照组明显减少(P<0.01);膝关节骺板软骨增厚,软骨表层2型胶原蛋白表达明显减少(P<0.05).结论 孕前和孕期喂灌BDE-209可造成子代大鼠卵巢和软骨发育异常.     

母源性BDE-209对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响*

目的 研究wistar母鼠在孕前和孕期喂灌BDE-209对子代大鼠卵巢和软骨发育的影响。方法 20只雌性Wistar大鼠,随机分成观察组和对照组各10只。观察组雌鼠胃灌BDE-209（1500mg/kg.d）造成孕前和孕期的暴露，对照组胃灌等量的纯花生油,30天后合笼，直至分娩后停止胃灌。出生后21天处死雌性子鼠后,取右侧卵巢、膝关节，观察组织学改变,采用免疫组化与图像分析技术,测定卵母细胞GDF-9,软骨表层2型胶原蛋白的表达水平。结果 观察组子代雌鼠卵母细胞GDF-9含量较对照组明显减少(P<0.01);膝关节骺板软骨增厚，软骨表层2型胶原蛋白表达明显减少（P<0.05）。结论 孕前和孕期喂灌BDE-209可造成子代大鼠卵巢和软骨发育异常。     

细胞凋亡在Meckel's软骨消失中的作用研究

目的 观察细胞凋亡在SD大鼠Meckel's软骨上的变化,初步探讨细胞凋亡在Meekel’s软骨和下颌骨发育中的意义.方法 用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞在E13 ～ 19 dSD胎鼠的下颌骨发育过程中Meckel's软骨中的变化.结果 E13 ～ 19 d在Meckel's软骨嘴突软骨细胞有零星凋亡细胞出现,软骨膜上可观察到少量凋亡细胞.E17 ～ 19 d Meckel's软骨前段骨化,近骨化处Meckel's软骨软骨细胞TUNEL染色“++”.Meckel's软骨前段远离骨化处和Meckel's软骨中段Meckel's软骨软骨细胞TUNEL染色“+”.E17 ～ 19 d Meckel's软骨前段和Meckel's软骨中段Meckel's软骨膜崩解,软骨膜细胞TUNEL染色“++”,可见多个凋亡细胞聚集成团现象.骨化的Meckel's软骨内也观察到凋亡细胞的出现,TUNEL染色“+”.结论 Meckel’s软骨软骨膜细胞的消亡可能是以凋亡的形式消失,只有一部分Meckel's软骨软骨细胞通过凋亡的形式消失.     

固骼生对体外培养鼠鼻中隔软骨细胞增殖及骨化的初步研究

目的探讨固骼生（45S5）对体外培养鼠鼻中隔软骨细胞增殖及向成骨细胞分化的促进作用。方法利用体外细胞培养技术建立孕21 d SD大鼠鼻中隔软骨细胞培养体系,根据培养基的不同分为实验组（培养基中放入45S51mg/ml）和空白对照组。在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态;采用MTT染色法检测软骨细胞增殖变化;第8、12、15、18d取材分光比色检测碱性磷酸酶（ALP）;第13d透射电镜下观察45S5周围软骨细胞基质的钙化等成骨指标变化。结果实验组软骨细胞增殖明显高于对照组;第12、15d ALP的分泌明显高于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;第13d透射电镜下可观察测45S5周围软骨细胞基质的钙化结节致密电子层。结论45S5可促进体外培养鼠鼻中隔软骨细胞增殖及向成骨细胞分化。     

兔同种胎软骨移植的组织和细胞学观察

目的在于观察兔同种胎软骨移植后的不同时期组织和细胞学变化，为临床应用提供可靠依据，所用方法为将妊娠２６天的新鲜兔胎软骨移植到２７只成年同种家兔的面部骨膜下在不同时期切取标本进行光镜和电镜观察。结果显示，兔胎软骨移植后的生长方式亿于一般软骨－间质生长和软骨膜下生长，在移植后半年，兔胎软骨的生长止倾向，作者认为，新鲜的软骨移植可以作为骨诱导材料和支架材料进行临床使用。     

去势大鼠关节软骨病理变化的研究

目的研究去势导致骨质疏松SD大鼠模型胫骨近端关节软骨的病理变化,探讨雌激素水平降低对关节软骨退变的影响.方法 48只8月龄SD大鼠随机分为实验组和对照组.3个月后造成骨质疏松模型,分别于2、4、8、12周后处死大鼠,切取胫骨上端标本,进行大体病理观察及I、II、III型胶原和sox9免疫组织化学研究.结果 HE染色显示2、4周对照组和实验组的软骨厚度、软骨细胞数量相近,关节面平整,潮线完整连续.8周时,实验组与对照组相比软骨厚度变薄(P<0.05),关节面有局部破坏不光滑,潮线欠完整连续,软骨细胞数量基本相近;12周时,实验组与对照组相比软骨厚度明显变薄(P<0.05),软骨细胞明显增多,关节面不光滑有剥脱,潮线明显不连续;8、12周时,Ⅱ型胶原的表达明显减少,sox9的表达在各个时间点无明显差异;8、12周时,与实验组相比对照组的Mankins’评分显著降低(P<0.05).结论骨质疏松情况下关节软骨的结构、代谢等会发生改变,雌激素水平降低可以导致大鼠关节软骨退化.     

甲状旁腺激素相关蛋白对发育中的Meckel’s软骨作用的研究

目的观察SD大鼠下颌骨发育过程中甲状旁腺激素相关蛋白（PTHrP）在Meckel’s软骨上时空的变化,初步探讨PTHrP在Meckel’s软骨发育中的意义.方法用免疫组化染色法及原位杂交染色法检测E13-19dSD胎鼠的下颌骨发育过程中,PTHrP及PTHrPmRNA在Meckel’s软骨上的表达.结果 E13-15d在Meckel’s软骨前段PTHrP蛋白强阳性表达,在细胞核、胞浆均表达,在肥大软骨细胞核上表达更明显,而且PTHrPmRNA强阳性表达的位置与PTHrP蛋白一致.E17-19d Meckel’s软骨前段骨化,E17d在临近成骨处的Meckel’s软骨软骨细胞PTHrP蛋白弱阳性表达,且位于肥大软骨细胞核内,PTHrPmRNA阴性表达.E19dPTHrP临近成骨处蛋白染色阴性表达,PTHrPmRNA阴性表达;在前段远离骨化处PTHrPmRNA,PTHrP蛋白强阳性表达,细胞核上表达明显.结论 PTHrP在Meckel’s软骨前段软骨细胞中的表达存在时空特异变化,提示PTHrP蛋白可能由SD大鼠Meckel＇s软骨软骨细胞合成,并作为一种自分泌因子调节Meckel’s软骨细胞的增殖和分化.     

大鼠功能性下颌前伸后髁突软骨骨化前后PLC-γ1的变化研究

目的 探讨磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)在功能性下颌前伸后大鼠髁突后部软骨骨化过程中的作用机制.方法 60只4周龄健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,适应性饲养1周,建立SD大鼠下颌前伸模型,随机等量分为2组,实验组24 h/d佩戴自制下颌前伸斜面导板矫治器,对照组不...     

大鼠膝关节不稳定性OA模型的软骨及软骨下骨改变

目的 通过建立大鼠膝关节前交叉韧带切断骨性关节炎(OA)动物模型,探讨该模型中软骨及软骨下骨病理变化.方法 取SD大鼠30只随机分成3组(术后2、6周和10周组).每只大鼠右膝行前交叉韧带切断,造成膝关节不稳定动物模型,对侧为假手术侧.分别将每组动物于术后2、6和10周处死,取胫骨近段,比较各组骨关节大体形态及病理变化.光镜下观察指标有改良的Mankin评分、骨组织形态计量学参数.免疫组化法观察MMP-13在软骨细胞中的表达.结果 在造模后2、6周和10周软骨退变呈进行性发展.Mankin评分增高、MMP-13表达逐渐增强,与假手术侧相比有统计学意义(P＜0.01).软骨下骨形态计量学分析显示,造模后早期软骨下骨骨量轻度减低(P＜0.05),之后骨量逐渐增加(P＜0.01).结论 大鼠的前交叉韧带切断能够造成动物膝关节OA样改变,表现出软骨下骨吸收、骨重建的变化特点.     

mTOR在SD大鼠TMJOA髁突软骨中表达变化的实验研究

  目的  明确mTOR在SD大鼠TMJOA髁突软骨中的表达变化。  方法   采用偏侧咀嚼的方法建立SD大鼠TMJOA模型，并设立相应假手术组。建模后2、4、8周分别取右侧髁突。使用HE染色、番红O-固绿染色进行病理学检查；通过免疫组织化学染色检测SOX9、mTOR的表达量。  结果   苏木精-伊红（HE）染色和番红O-固绿染色显示对照组标本髁突软骨结构层次清晰，表面平滑完整，蛋白多糖分布均匀。随着时间推移，实验组（TMD组）髁突软骨结构出现明显的退行性病变（P < 0.05），且病损在4周时最高。免疫组织化学染色显示，在实验组大鼠髁突软骨组织中SOX9的表达水平在2周（P < 0.01）、4周（P < 0.05）、8周（P < 0.05）依次下降且均低于对照组，mTOR的表达水平在2周（P < 0.05）、4周（P < 0.001）时下降，但在8周（P < 0.05）时相对上升。  结论   随着炎症进展，mTOR在SD大鼠TMJOA髁突软骨中呈现出早期下调，晚期上调的趋势，在将保护性自噬转变为破坏性的凋亡中发挥了关键作用。     

GDF5在大鼠颞下颌关节发育早期髁状突软骨中作用的研究

目的通过观察生长分化因子-5（GDF-5）在大鼠颞下颌关节发育早期髁状突软骨中表达的时空变化特点,探讨GDF-5在髁状突软骨发育中的意义.方法建立大鼠胚胎（E）13、15、17、19、21 d的颞下颌关节发育模型,应用免疫组化法检测GDF-5在颞下颌关节早期发育的不同时期髁状突软骨中的表达.结果免疫组织化学检测GDF-5在髁状突软骨的发育过程中具有时空特异性,GDF-5在E13 d的髁状突细胞凝聚区中开始表达,在E15 d的增殖层及成软骨细胞层表达较强,之后表达减弱;GOF-5在肥大细胞层表达由弱至强又减弱;GDF-5在髁状突软骨不同发育时间、不同分化阶段的表达水平不同.结论 GDF-5参与调控髁状突软骨细胞增殖、分化及成熟的过程.     

带线锚钉缝合固定治疗髌骨软骨骨折的疗效

目的 研究带线锚钉固定修复髌骨软骨骨折的临床效果.方法 选取2016年7月至2018年6月髌骨软骨骨折病例50例,其中男18例,女32例,年龄17 ～ 28岁,均为外伤致急性髌骨外侧脱位伴髌骨软骨骨折,术前Lysholm评分为(63.8±7.2),VAS评分为(8±1.7).均采取带线锚钉缝合固定方法修复髌骨软骨骨折....     

基于UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术研究膝痹宁对KOA模型大鼠的软骨保护效应

  目的  运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS/MS)技术分析膝痹宁的药物活性成分, 通过干预膝骨关节炎(KOA)模型大鼠代谢因素探讨膝痹宁软骨保护效应的作用机制。  方法  制备膝痹宁水提物, UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术分析膝痹宁的活性成分。将大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组, 提取大鼠软骨组织, HE染色、番红O-固绿染色观察组织结构形态; qPCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、PPARγ辅助激活因子1α(PGC1α)及基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平; 取各组大鼠血清完成代谢组学分析。  结果  经鉴定, 膝痹宁含活性成分56种; 组织学切片提示膝痹宁具有软骨保护作用, 并能上调KOA大鼠软骨组织PPARγ、PGC1α的mRNA和蛋白表达水平(P < 0.05, P < 0.01), 降低MMP3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平(P < 0.05, P < 0.01);此外, 代谢组学研究发现, 膝痹宁对13种KOA差异代谢物存在干预作用, 涉及10条代谢通路。  结论  膝痹宁具有多种药物活性成分, 其KOA软骨保护效应与药物活性成分对KOA的代谢调控有关。      

miR-219-5p靶向SOX5在口腔癌中的作用初探

  目的  研究miR-219-5p 与SOX5在口腔鳞状细胞癌中是否存在差异性表达,并探讨miR-219-5p 对SOX5的靶向调控作用,  方法  运用口腔鳞状细胞癌细胞株SCC4及SCC9,人正常皮肤成纤维细胞系（HF）作为对照,对miR-219-5p与SOX5在个细胞系中的表达情况进行检测（RT-qPCR、Western blot）;并在SCC4及SCC9细胞株中验证miR-219-5p对SOX5表达的靶向调控作用。  结果  与正常人纤维细胞相比,miR-219-5p的表达水平显著降低,而SOX5的表达水平显著增加,差异有统计学意义（P < 0.05）;miR-219-5p与SOX5的表达水平具有负相关（P < 0.05）;在SCC4及SCC9细胞中,miR-219-5p通过结合3' 非编码区（3'-UTR）靶向调控SOX5的表达。  结论  miR-219-5p可能通过对SOX5的靶向调控参与了口腔鳞状细胞癌的发生发展,为协助临床预后评估和/或筛选治疗的新候选药物提供了科学依据。     

MSCT三维重建与MRI对下颌骨髁突骨折的诊断效果比较

  目的  观察多层螺旋CT(MSCT)扫描三维重建检查与MRI检查对于不同特征下颌骨髁突骨折的鉴别诊断效果。  方法  以自2019年6月—2021年6月于衢州市中医医院及浙江大学医学院附属第二医院就诊并接受手术治疗的150例下颌骨髁突骨折患者为研究对象，分别于术前对全部患者进行MSCT扫描三维重建检查与MRI检查，统计2种检查方法对下颌骨髁突骨折类型和骨折移位情况的诊断灵敏度、特异性和准确度，以及对于软组织损伤情况的诊断符合性。  结果  MSCT扫描三维重建检查与MRI检查对于髁头骨折、髁突颈部骨折和髁突下骨折等不同下颌骨髁突骨折类型的诊断灵敏度、特异性和准确度差异均无统计学意义(均P＞0.05)。MSCT扫描三维重建检查与MRI检查对于原位骨裂、弯曲移位和错动移位骨折等不同下颌骨髁突骨折移位情况的诊断灵敏度、特异性和准确度差异均无统计学意义(均P＞0.05)。MRI检查对于韧带撕裂和髁突表面软骨损伤的诊断符合性[81.97%(50/61)和80.49%(66/82)]均显著高于MSCT扫描三维重建检查水平[63.93%(39/61)和65.85%(54/82)]，χ2=5.587、4.473；P=0.018、0.034。  结论  MSCT扫描三维重建检查对于下颌骨髁突骨折类型和移位情况的诊断能力可与MRI检查媲美，而MRI对于软组织损伤诊断能力更优，临床可通过2种方法联合应用，以提高下颌骨髁突骨折及周围软组织损伤的综合诊断效能。      

MRI测量正常成人距骨关节面软骨的厚度

  目的  通过MRI测量正常成人距骨表面软骨厚度,得出正常成人距骨软骨厚度的参数以及与性别、年龄、体重、身高的关系。  方法  选择踝关节无关节炎、无外伤史的成人100名,男、女各50名,18～60岁,行MRI检查,通过MRI测量前、中、后距骨关节面软骨厚度,测量结果采用SPSS25.0统计学软件包进行统计学分析,P < 0.05表示差异有统计学意义。  结果  男性前、中、后距骨关节面软骨厚度分别为（1.00±0.18）mm、（1.40±0.21）mm、（0.87±0.18）mm;女性前、中、后距骨关节面软骨厚度分别为（0.96±0.19）mm、（1.29±0.20）mm、（0.86±0.15）mm;男性和女性距骨前、后关节软骨面厚度,差异无统计学意义（P > 0.05）,距骨中关节面软骨厚度,差异有统计学意义（P < 0.05）,男性与女性年龄,差异无统计学意义（P > 0.05）。  结论  男性距骨中关节面平均软骨厚度大于女性;前后关节面软骨厚度无差异;男、女性身高、体重、年龄与前、中、后关节面软骨厚度均无相关性;在距骨软骨损伤时对需要修复的软骨量提供依据,在距骨解剖假体设计时加入相应软骨厚度。     

血管内皮生长因子在新生鼠胫骨生长板软骨细胞中的表达

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）在鼠生长板软骨细胞增殖、分化和矿化过程中的自分泌作用。方法：新生鼠（1～2d）10只．切取干骺部软骨组织，采用免疫组织化学方法（5只）和RT—PCR方法（5只），检测VEGF及其受体Flt-1和KDR/Flk-1在胫骨生长板中的表达。结果：免疫组织化学染色VEGF、Fit-1和KDR／Flk-1在生长板的上肥大区、下肥大区和矿化区中的软骨细胞表达强阳性，在增殖区少数软骨细胞中呈阳性表达，在静止区软骨细胞中表达阴性。RT—PCR检测的5只鼠中除1只不表达Flt-1外，VEGF（251bp）、Flt-1（272bp）和KDR/Flk-1（252bp）在软骨组织中均清晰表达。结论：VEGF及受体Flt-1和KDR／Flk-1在生长板软骨中的表达具有高度一致性，并且随着软骨细胞的分化成熟表达逐渐增强。提示VEGF在生长板软骨细胞的增殖、分化和矿化过程中，可以自分泌作用方式起重要调节作用。     

SD大鼠髁状突颈部骨折对大鼠髁状突软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的研究发育期SD大鼠髁状突颈部骨折对下颌髁状突软骨细胞增殖和凋亡活性的影响.方法18只4周龄SD大鼠,分为髁状突骨折组及空白对照组,分别于术后1周、3周、5周时脱颈处死,取骨折组手术侧、非手术侧及空白对照组髁状突软骨,分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察髁状突软骨细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和凋亡细胞数.结果在各时间点,手术侧、非手术侧的PCNA阳性细胞数存在统计学差异(P<0.01).术后3、5周,空白组与手术侧PCNA阳性细胞数有统计学差异(P<0.01);术后3周,非手术侧大鼠髁突软骨中凋亡细胞数明显增多,手术侧凋亡细胞数随时间推移明显降低;术后1周,手术侧的凋亡细胞数明显多于非手术侧(P<0.01);术后3周,非手术侧的凋亡细胞数明显多于手术侧(P<0.01);术后1、5周,空白组与手术侧凋亡细胞数有显著性差异(P<0.01).结论一侧髁状突颈部骨折导致两侧髁状突所受应力失衡,影响两侧髁状突软骨细胞增殖与凋亡的平衡,进而影响下颌骨及颌面部的发育.