奥沙利铂联合NK4基因对大肠癌HCT116细胞凋亡的影响

目的观察奥沙利铂联合NK4基因对HCT116细胞增殖、凋亡的影响。方法使用Effectene转染试剂,将pcDNA3．1-NK4质柱转染至大肠癌HCT116细胞中,常规条件下培养24h。不同奥沙利铂药物浓度处理HCT116细胞,CCK-8法测定细胞的OD值,分析在不同奥沙利铂药物浓度下对HCT116细胞毒性的影响;检测奥沙利铂最低药物浓度联合NK4基因对HCT116细胞凋亡的影响。结果当奥沙利铂药物浓度为12．5μg／mL时,显著抑制细胞的增殖;奥沙利铂（12．5μg／mL）联合NK4基因处理组与奥沙利铂处理组此较,显著诱导HCT116细胞的凋亡,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论与奥沙利铂组相比,奥沙利铂联合NK4基因后HCT116细胞的凋亡率显著升高。     

氯喹联合顺铂对结肠癌HCT116细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨氯喹(CQ)联合顺铂(DDP)对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法将HCT116细胞分组为16组:空白对照组(不加药物)、5个浓度(5,10,20,40,80μmol·L^-1)氯喹-1组至氯喹-5组,5个浓度(2,4,8,16,32μmol·L^-1)顺铂-1组至顺铂-5组和5个浓度(20μmol·L^-1氯喹+2,4,8,16,32μmol·L^-1顺铂)联合-1组至联合-5组,各组均培养24 h。用噻唑蓝法检测细胞的存活率,用PI单染流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡相关蛋白的表达水平(灰度值)。结果空白对照组、氯喹-1组至氯喹-5组、顺铂-1组至顺铂-5组和联合-1组至联合-5组于24 h的细胞存活率分别为(100.00±1.05)%,(99.65±1.98)%,(97.43±0.72)%,(83.88±0.51)%,(69.65±3.33)%,(51.87±0.49)%,(98.55±1.50)%,(92.33±0.50)%,(81.66±4.29)%,(70.41±0.50)%,(48.34±1.50)%,(78.61±4.37)%,(59.01±3.52)%,(37.23±0.57)%,(32.88±3.96)%和(21.09±2.57)%。空白对照组、氯喹-3组、顺铂-3组和联合-3组的细胞凋亡率分别为(1.63%±0.50%),(15.97%±1.40%),(24.83%±2.12%)和(47.23±4.29)%;这4组的Bcl-2相对表达量分别为1.11±0.01,0.92±0.03和0.73±0.08,0.46±0.07;这4组的Bax蛋白相对表达量分别为0.18±0.01,0.27±0.03,0.46±0.09和0.58±0.04。氯喹联合顺铂能显著减少抗凋亡Bcl-2蛋白的表达,并上调促凋亡Bax蛋白的表达。联合组与单用组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05);各给药组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论氯喹可以增强顺铂对HCT116细胞的增殖抑制作用,同时可以增强顺铂诱导结肠癌细胞的凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax有关联。     

奥沙利铂联合化疗治疗晚期结肠癌的临床研究

目的奥沙利铂联合化疗治疗晚期结肠癌的疗效。方法将45例结肠癌患者随机分成实验组和对照组,实验组采用奥沙利铂联合常规化疗,对照组采用常规化疗。结果实验组的疗效明显优于对照组(P<0.05),实验组的肾毒性和神经毒性等不良反应要低于对照组(P<0.05)。结论对晚期结肠癌患者采用奥沙利铂联合化疗可以增强患者的疗效,改善患者的预后。     

紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blotting法检测细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)和自噬相关蛋白Beclin-1、p62的mRNA及其蛋白表达水平。结果:与空白对照比较,10、20、40μg/mL紫草素作用48 h后HCT116细胞的增殖抑制率和凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。10、20、40μg/mL紫草素作用于HCT116细胞48 h后均可不同程度地升高细胞中LC3、Beclin-1、p62 mRNA及其蛋白的表达水平,除10μg/mL紫草素作用后细胞中LC3 m RNA表达水平升高不显著外,其余指标水平与空白对照比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:紫草素可诱导人结肠癌细胞HCT116发生凋亡,并激活其自噬途径。     

下调miR-346表达增强奥沙利铂对结肠癌SW620细胞杀伤作用

目的观察miR-346表达对奥沙利铂(Oxaliplatin,OHP)诱导的结肠癌细胞杀伤作用的影响,并探讨其机制。方法给予miR-346 mimic及miR-346 inhibitor转染SW620细胞,采用MTT法观察miR-346 mimic组、miR-346 inhibitor组、MOCK组(空白对照)、OHP组及OHP+miR-346 inhibitor组细胞增殖率;给予0、0.5、5、50、500μmol/L的OHP,或以上浓度OHP+miR-346mimics共同培养SW620细胞72 h,比较细胞存活率。DAPI染色法观察OHP处理的转染miR-346 inhibitor的SW620细胞核固缩及破碎比例;Western blot法检测不同干预下SW620细胞中凋亡相关蛋白表达。结果miR-346 mimic对SW620细胞增殖具有促进作用。miR-346 inhibitor对SW620细胞增殖具有抑制作用。OHP+miR-346 inhibitor对SW620细胞增殖具有抑制作用,与MOCK组及OHP组比较,在72 h和96 h时差异有统计学意义(P<0.05)。OHP(50μmol/L或500μmol/L)+miR-346 inhibitor组SW620细胞存活率低于OHP组(P<0.05)。SW620细胞给予不同干预措施培养48 h后,OHP(50μmol/L)+miR-346 inhibitor共同处理SW620细胞凋亡率高于MOCK组、miR-346 inhibitor组或OHP组(P<0.05)。OHP+miR-346 inhibitor组的SW620细胞核固缩及破碎比例高于OHP组或MOCK组(P<0.05)。与MOCK组比较,miR-346 mimics组caspase-9及Bcl-2蛋白水平升高,Apaf-1及Bax蛋白水平下降(P<0.05);OHP+miR-346 inhibitor组caspase-9及Bcl-2蛋白水平下降,Apaf-1及Bax蛋白水平升高(P<0.05);与miR-346 inhibitor或OHP组比较,OHP+miR-346 inhibitor组caspase-9及Bcl-2蛋白水平下降(P<0.05)。结论下调miR-346表达通过调控凋亡相关蛋白增强奥沙利铂对结肠癌细胞的杀伤作用。     

雷公藤甲素对人结肠癌HCT116细胞增殖、自噬和凋亡的影响

目的探究雷公藤甲素(TP)对人结肠癌HCT116细胞增殖的的影响和可能的抑制机制。方法取TP不同浓度、不同时间作用HCT116细胞,MTT检测细胞的存活率,流式细胞术检测TP对细胞凋亡的影响,免疫印迹检测蛋白LC3-Ⅱ表达,MDC检测细胞自噬。结果 TP能够抑制HCT116细胞的增殖,不同浓度的TP作用HCT116细胞48 h后,LC3-Ⅱ的水平随着TP浓度的增加而升高,呈浓度依赖性;用40nmol·L~(-1)TP作用HCT116细胞,LC3-Ⅱ蛋白水平随作用时间的延长而增加,呈时间依赖性,同时荧光显微镜观察到HCT116细胞中酸性自噬囊泡的数量增多。TP+3-MA作用HCT116细胞48 h,与对照组比较TP组细胞凋亡率下降;与TP组比较TP+3-MA组细胞凋亡率明显下降。TP+RAPA作用HCT116细胞24 h,与对照组比较TP组细胞凋亡率增加;与TP组比较TP+RAPA组细胞凋亡率明显增加。结论TP能够抑制人结肠癌HCT116细胞的增殖,诱导HCT116细胞凋亡,提示自噬和凋亡间可能有协同关系。     

积雪草酸通过改变自噬作用促进胶质瘤细胞T98G凋亡的实验研究

目的研究积雪草酸对T98G细胞凋亡及自噬的影响。方法 MTT法分析积雪草酸对T98G细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞自噬;Western blot检测凋亡和自噬通路相关因子的表达。结果积雪草酸对T98G细胞增殖有抑制作用,IC50值为46.3μmol·L-1。Annexin-V/7-AAD双染和Western blot结果显示,积雪草酸可引起Akt表达下调、线粒体膜电位下降和Caspase-3激活,进而诱导T98G细胞凋亡。同时,AA可抑制T98G细胞自噬,表现为降低MDC荧光强度,抑制Beclin-1、LC3-Ⅱ、Atg表达。通过氯喹上调Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达,积雪草酸抑制自噬作用被阻断,同时促凋亡作用也明显降低。结论积雪草酸可同时诱导T98G细胞凋亡和抑制自噬,并且抑制自噬作用能够促进细胞凋亡,进而抑制T98G细胞增殖。     

培美曲塞联合奥沙利铂治疗晚期结肠癌的临床观察

目的探讨培美曲塞联合奥沙利铂对晚期结肠癌治疗的临床疗效。方法选择2010年9月~2013年10月收治的62例晚期结肠癌患者为研究对象,随机分为对照组31例,观察组31例,对照组使用奥沙利铂治疗,观察组使用培美曲塞联合奥沙利铂治疗,对两组患者治疗后结局进行分析。结果观察组治疗后缓解率为19.35%,对照组为3.23%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者HAMA焦虑评分、HAMD抑郁评分、VEGFA水平、NRS疼痛评分明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论培美曲塞与奥沙利铂联合化疗,可有效缓解晚期结肠癌症状,消除患者的负面情绪,具有重要临床价值。     

尼卡地平对结肠癌细胞HCT116/L耐药的逆转作用研究

目的 探究尼卡地平逆转耐奥沙利铂结肠癌细胞HCT116/L耐药的疗效及其机制.方法 采用MTT法分别检测尼卡地平和奥沙利铂在HCT116/L和HCT116细胞上的药敏性,并检测尼卡地平能否逆转奥沙利铂耐药.采用流式细胞仪(FCM)检测HCT116/L细胞凋亡和细胞内罗丹明-123的浓度.结果 奥沙利铂在耐药细胞HCT1...     

氧化苦参碱通过Wnt/β-catenin信号通路诱导结肠癌HCT116细胞凋亡和焦亡作用研究

目的 探究氧化苦参碱诱导结肠癌HCT116细胞死亡的作用机制。方法 将结肠癌HCT116细胞随机分为对照组和氧化苦参碱（2、4、8、12、16、20、30、40 mmol·L^-1）组,通过CCK-8法检测各浓度氧化苦参碱作用24、48 h对结肠癌细胞存活率的影响;光学显微镜下观察氧化苦参碱（15、20、25 mmol·L^-1）对HCT116细胞形态的影响;通过Hoechst染色法和Annexin V/PI双染流式细胞术法观察氧化苦参碱对HCT116细胞凋亡的影响;JC-1染色观察细胞线粒体膜电位的变化;Western blotting法检测各组细胞成熟体半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、BCL2关联X蛋白（Bax）、细胞色素C （Cyt-C）、消化道皮肤素E （GSDME）、细胞周期蛋白1（cyclin-D1）、骨髓细胞瘤病毒癌基因（c-Myc）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、β-连环素（β-catenin）、生存素（survivin）的蛋白表达情况。结果 与对照组比较,氧化苦参碱可以明显降低HCT116细胞的存活率,且存在剂量及时间相关性,作用24、48h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为18.80、10.75 mmol·L^-1;氧化苦参碱组形状正常的HCT116细胞明显减少,均出现部分类圆球形的细胞,并且折光率明显降低;经Hoechst染色后氧化苦参碱组HCT116细胞的蓝色荧光明显加深,且相对集中,流式细胞术结果显示细胞凋亡率显著增加（P<0.05、0.01）;JC-1染色结果表明氧化苦参碱可以降低HCT116细胞线粒体膜电位;氧化苦参碱组Bcl-2、β-catenin、c-Myc、cyclin D1和survivin蛋白表达水平显著下降（P<0.05、0.01）,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP、Cyt-C、GSDME蛋白表达水平及Bax/Bcl-2显著上升（P<0.05、0.01）。结论 氧化苦参碱可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路,促进线粒体依赖的细胞内源性凋亡和细胞焦亡发挥抗结肠癌作用。     

卡培他滨联合奥沙利铂治疗复发性大肠癌

目的探讨卡培他滨联合奥沙利铂治疗晚期结直肠癌的近期疗效及不良反应。方法对30例晚期大肠癌给予卡培他滨1 250 mg·m^-2分早晚服用,连服14 d,奥沙利铂150 mg·m^-2化疗第一天静脉注射,21 d一周期。2个周期后评价疗效,同时进行不良反应评估。结果 30例患者均予评价疗效,完全缓解0例,部分缓解15例,稳定9例,进展6例,总有效率50%,临床控制率80%,不良反应主要为手足综合症,恶心,呕吐,粒细胞减少等,多为Ⅰ～Ⅱ级。结论卡培他滨联合奥沙利铂治疗晚期大肠癌疗效好,不良反应可耐受,值得临床推广。     

5-Methoxyflavanone induces cell cycle arrest at the G2/M phase, apoptosis and autophagy in HCT116 human colon cancer cells

Natural flavonoids have diverse pharmacological activities, including anti-oxidative, anti-inflammatory, and anti-cancer activities. In this study, we investigated the molecular mechanism underlying the action of 5-methoxyflavanone (5-MF) which has a strong bioavailability and metabolic stability. Our results show that 5-MF inhibited the growth and clonogenicity of HCT116 human colon cancer cells, and that it activated DNA damage responses, as revealed by the accumulation of p53 and the phosphorylation of DNA damage-sensitive proteins, including ataxia-telangiectasia mutated (ATM) at Ser1981, checkpoint kinase 2 (Chk2) at Thr68, and histone H2AX at Ser139. 5-MF-induced DNA damage was confirmed in a comet tail assay. We also found that 5-MF increased the cleavage of caspase-2 and -7, leading to the induction of apoptosis. Pretreatment with the ATM inhibitor KU55933 enhanced 5-MF-induced γ-H2AX formation and caspase-7 cleavage. HCT116 cells lacking p53 (p53^−/−) or p21 (p21^−/−) exhibited increased sensitivity to 5-MF compared to wild-type cells. 5-MF further induced autophagy via an ERK signaling pathway. Blockage of autophagy with the MEK inhibitor U0126 potentiated 5-MF-induced γ-H2AX formation and caspase-2 activation. These results suggest that a caspase-2 cascade mediates 5-MF-induced anti-tumor activity, while an ATM/Chk2/p53/p21 checkpoint pathway and ERK-mediated autophagy act as a survival program to block caspase-2-mediated apoptosis induced by 5-MF.     

卡培他滨片联合奥沙利铂注射剂治疗晚期结肠癌患者的临床研究

目的 观察卡培他滨片联合奥沙利铂注射剂治疗晚期结肠癌患者的临床疗效及安全性.方法 将97例晚期结肠癌患者随机分为对照组49例和试验组48例.对照组给予130 mg·m-2奥沙利铂,静脉滴注,于2～3 h内滴完,第1天;试验组在对照组治疗的基础上,给予1250 mg·m-2卡培他滨,bid,口服,第1～14天.2组患者均...     

TNP-470对人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的　探讨TNP 4 70对体外培养的人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法　采用MTT法检测TNP 4 70对体外培养的Lovo细胞的生长抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡百分率。结果　TNP 4 70对Lovo细胞生长具有抑制作用 ,并存在量效和时间依赖性。流式细胞仪分析表明 :G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降 ,增值指数 (PI)下降 ,凋亡率上升 ,电镜下可见典型的细胞凋亡形态改变。结论　TNP 4 70对Lovo细胞的增殖具有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞和凋亡有关     

三维适形放疗联合奥沙利铂化疗治疗肝转移癌的临床观察

目的分析三维适形放疗(three-dimensional conformal radiotherapy 3-DCRT)联合奥沙利铂化疗治疗肝转移癌的临床疗效。方法 30例肝转移癌静脉滴入奥沙利铂130 mg/m2,第1天静脉滴入;5-氟尿嘧啶300 mg/m2和亚叶酸钙200 mg/m2第1～5天静脉滴入,间隔3周重复,共2个疗程。同步进行三维适形放疗,设4～6个弧形或非共面适形固定野照射,参考剂量曲线选定为80%。放疗处方剂量45～55 Gy,中位剂量50 Gy3,～4 Gy/次,3次/周。结果治疗后3～6个月内复查增强CT或MRI,30例中,3例完全缓解(CR),16例部分缓解(PR),7例无变化(NC)4,例恶化(PD),总有效率(CR+PR)为63.3%,肿瘤局部控制率为78.5%,中位生存期15个月,1、2、3年生存率分别为65.3%、31.1%和10.6%,全组无严重并发症发生。结论三维适形放疗联合奥沙利铂治疗肝转移癌能提高肿瘤局部照射剂量和增加肿瘤局部控制率,是一种安全、有效的治疗手段。     

DZNep inhibits the proliferation of colon cancer HCT116 cells by inducing senescence and apoptosis

EZH2 is over-expressed in human colon cancer and is closely associated with tumor proliferation, metastasis and poor prognosis. Targeting and inhibiting EZH2 may be an effective therapeutic strategy for colon cancer. 3-Deazaneplanocin A (DZNep), as an EZH2 inhibitor, can suppress cancer cell growth. However, the anti-cancer role of DZNep in colon cancer cells has been rarely studied. In this study, we demonstrate that DZNep can inhibit the growth and survival of colon cancer HCT116 cells by inducing cellular senescence and apoptosis. The study provides a novel view of anti-cancer mechanisms of DZNep in human colon cancer cells.KEY WORDS: EZH2, Human colon cancer HCT116 cells, DZNep, Anti-cancer mechanisms     

腹腔静脉联合化疗对老年进展期结肠癌临床疗效观察

目的：观察腹腔静脉联合化疗对老年进展期结肠癌的临床疗效。方法：腹腔静脉联合化疗组40例采用氟脲苷、喜树碱腹腔化疗联合草酸铂、氟脲苷、CF静脉滴注方案，静脉化疗组40例采用草酸铂、氟脲苷、CF静脉滴注方案，4wk为一疗程，连用6个疗程，然后评定疗效。结果：腹腔静脉联合化疗组40例，总有效率为65．0％，无进展中位生存期14．3个月；静脉联合化疗组总有效率为42．5％，无进展中位生存期10．8个月。两组有效率差异有统计学意义（P〈0．05），联合化疗组无进展中位生存期优于对照组（P〈0．05）。结论：腹腔静脉联合化疗是治疗老年进展期结肠癌的一种安全、有效的方法。