乌药叶提取物对高脂血症模型大鼠降脂作用以及肝脏LKB1-AMPK通路的影响

目的 考察乌药叶提取物对高脂血症大鼠模型降血脂作用以及对肝脏LKB1-AMPK通路相关蛋白表达的影响。方法 采用高脂饲料诱导的混合型高脂血症大鼠模型,以高、低剂量（1.6,0.8 g·kg^-1以生药量计）的乌药叶提取物灌胃,阳性药组给予非诺贝特20 mg·kg^-1,连续8周。分别在4,8周后检测血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。实验末处死大鼠,解剖取肝脏,计算肝脏指数,油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,Western blotting检测肝脏LKB1-AMPK通路相关蛋白的表达。结果 连续给药4周,与模型组相比,阳性药组血清TG水平有显著降低（P<0.05）。连续给药8周,与模型组相比,高剂量组能显著降低血清中TC、TG、LDL-C的水平（P<0.01或P<0.05）。与对照组比,高、低剂量组和模型组肝脏指数均极显著升高（P<0.01）;与模型组比,高、低剂量组有降低的趋势,但差异无统计学意义。肝组织油红O染色结果显示,模型组肝细胞脂质蓄积严重,脂肪变性程度高,高剂量组肝细胞脂质蓄积和脂肪变性程度均有不同程度的改善。高、低剂量组均可显著提高模型大鼠肝脏AMPKα蛋白磷酸化水平。结论 乌药叶提取物能够降低血清脂质水平,改善肝细胞脂质蓄积,并且增加AMPKα蛋白磷酸化水平,激活AMPKα,从而促进脂质代谢。     

山楂叶黄酮对高脂血症小鼠的调脂保肝作用及其对肝组织HMGCR、LDLR表达的影响

目的 观察山楂叶黄酮（hawthorn leaf flavonoids,HLF）对实验性高脂血症模型小鼠血脂水平、肝功能及、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMG-CoA reductase,HMGCR）、低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor,LDLR）表达的影响。方法 KM小鼠50只,随机分为正常对照组、模型对照组、HLF低剂量组（1.5 g·kg^-1）、HLF高剂量组（3.0 g·kg^-1）、辛伐他汀组,每组10只。正常对照组给予基础饲料,其他各组给予高脂饲料,实验期间自由采食饮水,各组灌胃给予相应药物,连续5周。分别于造模给药2周、5周后,各组小鼠眼眶取血检测总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平,末次给药采血后解剖取肝脏,HE染色法观察小鼠肝组织病理形态学变化,免疫组化法检测肝组织HMGCR、LDLR的表达水平。结果 与正常对照组比较,造模5周后,模型对照组小鼠血清TC、TG、LDL-C、ALT及AST显著升高,HDL-C显著降低,肝脏脂肪变性明显,肝组织HMGCR表达水平升高、LDLR表达水平下降。与模型对照组比较,给药5周后,HLF 1.5,3.0 g·kg^-1剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C、ALT及AST显著降低,HDL-C显著升高,肝组织病理变化均改善,肝组织HMGCR表达水平下降、LDLR表达水平升高,其中以3.0 g·kg^-1更为显著。结论 HLF能降低高脂血症模型小鼠血脂水平,改善肝功能,减轻肝脏脂肪病变,其作用机制可能是通过下调HMGCR表达抑制胆固醇生物合成,并上调LDLR表达促进胆固醇的代谢,进而调节脂质代谢紊乱。     

衢枳壳黄酮对高脂血症金黄地鼠降血脂作用及其机制研究

目的 研究衢枳壳黄酮（pure total flavonoids from Qu Aurantii Fructus,PTFC）对高脂血症金黄地鼠降血脂作用并初步探讨其潜在机制。方法 48只金黄地鼠随机分为6组（n=8）：正常组,模型组,非诺贝特阳性对照组（100 mg·kg^-1·d^-1）,PTFC低、中、高剂量组（25,50,100 mg·kg^-1·d^-1）。高脂饮食喂养金黄地鼠6周,并于第3周起同时给予药物灌胃干预,连续干预4周。高脂饲料喂养造模6周末,处死大鼠,称量大鼠体质量及肝脏质量计算肝脏指数,生化法及ELISA法检测血清生化及炎症指标,血清及肝组织MDA含量和SOD活性。HE染色检测肝脏组织病理学改变,qRT-PCR及Western blotting检测肝脏及脂肪组织PPAR-α、PPAR-γ的mRNA及蛋白表达。结果 与高脂血症模型组金黄地鼠相比,PTFC中、高剂量组的金黄地鼠血清TC、TG、LDL-c、IL-6、TNF-α水平显著下降（P<0.05或P<0.01）;PTFC高剂量组血清ALT、AST、GLU水平均明显下降（P<0.05或P<0.01）;PTFC低、中、高剂量组金黄地鼠的血清、肝脏SOD活性均显著增强,MDA含量则显著降低（P<0.01）。HE染色显示,与模型组比较,各用药组金黄地鼠的肝脂肪变性均得到不同程度的改善。qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,与模型组相比,PTFC给药低、中、高剂量组金黄地鼠肝脏和脂肪中PPAR-α、PPAR-γ的mRNA和蛋白表达水平也显著升高（P<0.05或P<0.01）。结论 PTFC能够起到降低血脂的作用,其可能是通过改善脂质水平,降低氧化应激和炎症反应,激活PPAR-α、PPAR-γ来实现对高脂血症金黄地鼠脂质代谢的改善作用。     

泻心汤及其有效成分组合物抗动脉粥样硬化作用的比较研究

目的：在抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）主要药理作用环节比较泻心汤（XXD）与有效成分组合物（CECs）的效应,为阐明泻心汤抗AS效应物质基础提供依据。方法：选用转基因Fli1：eGFP品系斑马鱼幼鱼,通过喂食高胆固醇饲料10 d建立AS模型,实验分为空白组、模型组、阳性对照组（辛伐他汀,0.1 μmol·L^-1）、泻心汤组（50,250,500 mg·L^-1）及有效成分组合物组（2.962、14.81、29.62 mg·L^-1）,实验结束后,测定斑马鱼甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、丙二醛（MDA）及超氧化物岐化酶（SOD）的含量,观察斑马鱼血管中胆固醇积累的情况。结果：与模型组比较,泻心汤及有效成分组合物能够明显降低斑马鱼TG、TC、LDL-c水平,提高HDL-c水平（P<0.05或P<0.01）;降低MDA水平,提高SOD水平（P<0.05或P<0.01）;抑制血管中胆固醇的积累（P<0.05或P<0.01）,且有效成分组合物的效应强度可达到泻心汤的80%以上。结论：有效成分组合物在调节脂质水平、改善抗氧化能力及抑制血管中胆固醇积累等药理作用环节能较好的代表泻心汤发挥抗AS作用,可认为是泻心汤抗AS的主要效应物质。     

荷丹三七降脂片对高脂血症大鼠脂代谢及Nrf2、γ-GCS基因mRNA表达的影响

目的：探讨荷丹三七降脂片对高脂血症大鼠血脂代谢的影响。方法：将72只大鼠随机分为正常对照组、高脂血症模型组、荷丹三七降脂片高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组（辛伐他汀）6个小组,每小组12只。采用高脂饲料建立大鼠高脂血症模型,连续给药30 d后,测体质量、肝脏湿重和肝脏系数;取血测定各剂量组高脂血症大鼠血清中总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）水平;测定肝组织的抗氧化指标：超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）;采用实时荧光定量RT-PCR法测定高脂血症大鼠肝组织中核因子NF-E₂相关因子（nuclear factor erythroid 2-related factor₂,Nrf₂）、谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS） mRNA表达;显微镜下观察肝组织形态学变化;通过小鼠急性毒性试验记录小鼠状况。结果：与模型组比较,荷丹三七降脂片各剂量组显著降低TC、TG、LDL-C、MDA水平（P<0.01,P<0.05）;显著升高SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC （P<0.01,P<0.05）以及肝组织中的Nrf₂、γ-GCS mRNA表达显著升高（P<0.01,P<0.05）并明显减轻肝组织病理损伤;急性毒性试验表明荷丹三七降脂片无毒性。结论：荷丹三七降脂片安全无毒,对高脂血症大鼠具有良好的辅助降血脂及肝脏保护作用,其可能作用机制是通过调节Nrf₂基因表达的作用,促进γ-GCS表达,进而启动机体的抗氧化防御系统,减轻氧化应激对机体的损害作用。     

不同工艺提取的大黄外用对肺炎支原体感染小鼠肺部炎症的影响

目的 探讨不同工艺提取的大黄外用对肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）感染小鼠JAK2/STAT3信号通路的影响,探究其改善小鼠肺部炎症的效应靶点。方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、生粉组、醇提组,每组10只。除正常组小鼠外,其余3组采用滴鼻法进行MP感染。造模后,将各组对应药物贴于小鼠背俞穴区30 min·d^-1,连续敷药7 d。给药后第7天取材,光镜下观察小鼠肺组织、皮肤病理切片,计算肺组织病理评分、肺指数,采用ELISA法检测血清及肺组织中IL-6含量,Western blotting及qPCR检测STAT3、JAK2蛋白和mRNA的表达。结果 MP感染后小鼠肺泡间隔增厚,细支气管壁增厚,炎性细胞浸润,小鼠肺指数、肺组织炎症病理评分、血清及肺组织中IL-6含量、肺组织中STAT3和JAK2的蛋白表达及mRNA含量均升高（P<0.05）。治疗后小鼠肺指数、肺组织炎症病理评分、血清及肺组织中IL-6含量均降低（P<0.05）,且醇提组作用效果较生粉组明显,但血清中含量差异不显著。与模型组比较,醇提组、生粉组STAT3、JAK2蛋白及mRNA含量下降（P<0.05）。结论 大黄醇提物外用可有效改善MP感染小鼠肺部炎症,下调IL-6、JAK2及STAT3的表达,为其治疗MP肺炎提供了参考。     

维生素C通过调节PPAR-α靶基因抑制高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝小鼠

目的 探讨维生素C是否通过调节PPAR-α靶基因抑制高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）小鼠模型。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、NAFLD组和维生素C组。每组均为10只小鼠。对照组采用普通饲料连续喂养15周;NAFLD组采用高脂饲料连续喂养15周;维生素C组采用高脂饲料及维生素C连续喂养15周。喂养15周后,利用代谢测量、组织学和基因表达检查NAFLD相关因素。结果 与NAFLD组小鼠相比,补充维生素C可抑制NAFLD小鼠体质量增加（P<0.05）。同时,维生素C组小鼠循环维生素C浓度显著高于NAFLD组（P<0.05）。维生素C可抑制肝脏脂肪变性（P<0.05）。同样,维生素C也可使NAFLD小鼠肝脏炎症、纤维化和凋亡相关基因mRNA水平降低（均P<0.05）。此外,维生素C小鼠血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平低于NAFLD小鼠（均P<0.05）。最后,维生素C还能提高肝脏PPAR-α介导脂肪酸β氧化基因mRNA水平（均P<0.05）。结论 维生素C对NAFLD小鼠体质量增加、肝脏甘油三酯积累,以及肝脏炎症、纤维化和凋亡有抑制作用,这一过程可能部分是通过上调PPAR-α靶基因表达介导的。     

MMI-0100对DDC诱导的胆汁淤积性肝损伤的治疗作用研究

目的 探讨MMI-0100对3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶（DDC）诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤的治疗作用。方法 15只Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组（DDC）,治疗组（DDC+MMI-0100）,每组5只。对照组小鼠给予正常饮食2 周,其余2组小鼠给予0.1% DDC饮食喂养1周后,再给予正常饮食1周,同时治疗组小鼠在DDC饲养1周后,每天经腹腔注射MMI-0100进行治疗,注射量剂量为500 μg·kg^-1,连续注射1 周;对照组和模型组小鼠给予等量无菌生理盐水。观察并记录各组小鼠肝脏大体情况,HE和Masson染色观察肝脏的病理改变,免疫组化检测胆管增生指标CK19和Ki67,实时定量PCR检测肝脏纤维化相关基因α-SMA的表达。结果 与模型组相比,治疗组小鼠肝脏纤维化病变减轻（P<0.01）,炎症细胞浸润减少（P<0.01）,肝脏组织Knodell Score评分降低（P<0.01）,同时胆管增生相关指标CK19和Ki67表达降低（P<0.05）,肝脏α-SMA的mRNA表达水平降低（P<0.01）。结论 MMI-0100对DDC诱导的小鼠原发性硬化性胆管炎有良好的治疗作用。     

金花茶叶醇提物通过调节胆固醇逆向转运关键蛋白的表达抑制动脉粥样硬化

目的：探讨金花茶叶醇提物调节胆固醇逆向转运（RCT）关键蛋白细胞质膜微囊蛋白-1（caveolin-1）、清道夫受体B1（SR-B1）、A1型三磷酸腺苷结合盒转运体（ABCA1）、蛋白激酶A（PKA）的表达而抑制巨噬细胞向泡沫细胞衍变、拮抗动脉粥样硬化（AS）的潜在药理作用机制。方法：乙醇回流提取获得金花茶叶醇提物,制备金花茶叶醇提物含药大鼠血清。体外测试金花茶叶醇提物含药血清对巨噬细胞经典活化、吞噬氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）并衍变为泡沫细胞以及caveolin-1、SR-B1、ABCA1、PKA表达的调节作用。高脂饲喂雄性ApoE^-/-小鼠建立AS小鼠模型,体内测试金花茶叶醇提物对小鼠主动脉弓AS斑块形成以及内膜caveolin-1、SR-B1、ABCA1、PKA表达的调节作用。结果：10%金花茶叶醇提物含药血清显著抑制巨噬细胞经典活化,阻止其衍变为泡沫细胞,上调caveolin-1、SR-B1、ABCA1、PKA表达。金花茶叶醇提物显著上调AS小鼠主动脉内膜caveolin-1、SR-B1、ABCA1、PKA表达,抑制AS斑块形成。结论：金花茶叶醇提物可阻止巨噬细胞向泡沫细胞衍变,抑制AS斑块形成,可能与其上调RCT关键蛋白caveolin-1、SR-B1、ABCA1、PKA表达有关。     

益肾排毒丸调节AMPK/ACC信号通路对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的：探究益肾排毒丸（YSPDW）对db/db小鼠肝损伤的保护作用及其对脂代谢通路的影响机制。方法：C57BL/6小鼠作为空白对照组、8周龄的db/db小鼠分为非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）模型组、益肾排毒丸治疗组和二甲双胍阳性对照组。给药8周后检测小鼠肝脏系数、随机血糖、肝功能（丙氨转氨酶ALT、谷草转氨酶AST）、血脂（总胆固醇TC、三酰甘油TG、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇LDL-C）、肝脏脂质（TC、TG）、肝脏抗氧化因子（谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽GSH、超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA、过氧化氢酶CAT）、肝脏炎性因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1）等指标的变化。HE和PAS染色评估小鼠肝脏形态变化、脂肪变性和糖原沉积。Western blot检测脂代谢AMPK/ACC信号通路相关蛋白表达。结果：与模型组相比,益肾排毒丸给药组和二甲双胍组小鼠随机血糖和肝脏系数显著降低。生化指标检测结果显示益肾排毒丸可显著降低NAFLD模型小鼠血清AST、ALT、TC、TG水平和肝组织TC、TG、MDA水平,升高HDL-C含量,发挥肝保护作用;ELISA结果表明益肾排毒丸能明显升高NAFLD小鼠肝组织GSH-Px、GSH和SOD活性,显著降低肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1的水平,表明益肾排毒丸可增加机体抗氧化能力,抑制炎症因子释放。HE和PAS结果显示益肾排毒丸可明显减轻肝组织脂肪变性和炎症细胞浸润,改善肝细胞的结构和形态完整。Western blot结果表明,益肾排毒丸能激活AMPK/ACC信号通路,显著增加模型小鼠肝脏p-AMPK和p-ACC蛋白表达。结论：益肾排毒丸可能通过促进AMPK/ACC信号通路来改善肝脏氧化应激、炎性反应,减少脂质合成,从而改善NAFLD的肝损伤。     

玳玳果黄酮提取物关键效应组分辨识及调控脂质代谢作用机制研究

目的 探究玳玳果黄酮提取物及其敲出目标组分对脂肪变性细胞调控脂质代谢作用及机制,辨识关键效应组分。方法 采用油酸诱导建立HepG2脂肪变性细胞模型,非诺贝特为阳性对照,油红O染色法及甘油三酯(triglycerides,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)为评价指标,考察玳玳果黄酮提取物、柚皮苷(目标组分)、新橙皮苷(目标组分)、其他相关组分(黄酮提取物敲除柚皮苷、新橙皮苷)、黄酮提取物敲除其他相关组分(柚皮苷-新橙皮苷6︰ 7)对脂肪变性模型细胞脂质集聚影响。基于AMPK/SREBP-1c及PPARα信号通路,采用qRT-PCR法、Western blotting检测大鼠肝脏相关基因、蛋白的表达。结果 预防性给药后,与模型组相比,玳玳果黄酮提取物、柚皮苷、新橙皮苷、提取物敲除其他相关组分的细胞脂质积聚、TG及TC含量均有明显的改善(P<0.01或P<0.05);玳玳果黄酮提取物及柚皮苷、新橙皮苷可使促腺苷酸激活蛋白激酶(ATP-activated protein kinase,AMPK)的mRNA及磷酸化蛋白表达水平明显升高(P<0.01或P<0.05);显著抑制并明显下调固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding protein,SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(fatty acidsynthase,FAS)、乙酰辅酶羧化酶(coenzyme carboxylase,ACC)的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05);可促进过氧化物酶增殖物激活受体(peroxidase proliferator-activated receptor ,PPARα)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(carnitinepalmitoyltransferase-1,CPT-l)的mRNA及蛋白表达水平明显上升(P<0.01或P<0.05);其他相关组分无明显差异。结论 玳玳果黄酮提取物及其关键效应组分柚皮苷、新橙皮苷可有效改善脂质积聚;其作用机制为激活AMPK促其蛋白磷酸化表达,从而抑制脂质合成,同时促进脂肪酸的氧化分解,由此减少脂肪沉积,发挥调控脂质代谢的作用。     

二甲双胍介导胆固醇逆转运抑制动脉粥样硬化

目的探讨二甲双胍通过对胆固醇逆转运抑制ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的分子机制。方法18只ApoE^-/-小鼠随机分为三组,对照组、模型组和二甲双胍组,每周监测体质量变化。取血检测血清血脂水平;小动物超声检测腹主动脉管壁厚度;HE和油红O染色评价肝脏脂肪病变程度;Western blot检测肝脏胆固醇逆转运相关蛋白LXRɑ、ABCA1的表达。结果与对照组比,模型组体质量、血清TC、TG、LDL升高,HDL降低(P<0.05),腹主动脉管壁增厚(P<0.05),肝脏脂肪沉积加重及LXRɑ、ABCA1的表达降低。二甲双胍组体质量、血清TC、TG、LDL降低,HDL升高(P<0.05),肝脏脂肪沉积及腹主动脉管壁厚度显著减轻(P<0.05),LXRɑ、ABCA1表达显著增高(P<0.05)。结论二甲双胍通过上调肝脏胆固醇逆向转运相关蛋白LXRɑ和ABCA1的表达,增强肝脏胆固醇逆转运能力,调节血脂代谢、减轻肝脏脂质沉积,从而延缓动脉粥样硬化的进展。     

滇黄芩黄酮的调脂保肝作用及其对肝组织HMGCR、CYP7A1活性影响的研究

目的 研究滇黄芩黄酮(Scutellaria amoena flavonoids,SAF)对高脂血症大鼠的调脂保肝作用及其对肝组织中羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-Co A reductase,HMGCR)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)活性的影响。方法 40只SD大鼠随机选取8只作为正常组,32只通过高脂饮食诱导建立高脂血症大鼠模型。8周后高脂血症大鼠随机分为模型组(生理盐水),非诺贝特组(20 mg·kg^-1),SAF高、低剂量组(100,20 mg·kg^-1),每天1次,连续给药4周。每周监测动物体质量变化,处死动物后测定其血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和肝脏中TC、TG的含量,HE染色法观察大鼠肝组织病理形态学变化,ELISA检测肝组织HMGCR、CYP7A1的活性。结果 与正常组相比,模型组大鼠的体质量、血清中TC、TG、LDL-C、ALT、AST显著升高,HDL-C显著降低(P<0.001),肝脏脂肪变性明显,肝组织中TC、TG含量和HMGCR活性显著升高、CYP7A1活性显著降低(P<0.001);与模型组相比,SAF高、低剂量组均能显著降低高脂血症大鼠体内TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平,升高HDL-C水平(P<0.05或P<0.001),肝组织病理学明显改善,肝组织中TC、TG含量和HMGCR活性显著降低,CYP7A1活性显著升高(P<0.01或P<0.001),其中高剂量组差异更为显著。结论SAF能显著降低高脂血症大鼠体内血脂水平,改善肝功能,其作用机制可能是通过下调HMGCR水平,提高CYP7A1活性抑制胆固醇的生物合成,进而调节脂质代谢紊乱。     

Evodiamine improves lipid profile in high-fat diet-fed mice by facilitating reverse cholesterol transport

OBJECTIVE Reverse cholesterol transport(RCT) is a pivotal pathway involved in transporting excess cholesterol from peripheral tissues to the liver for excretion in the bile and eventual y the feces. In the present study we identified the naturally occurring alkaloid evodiamine as alipid-lowing inducer by facilitating RCT in highfat diet(HFD)-fed mice. METHODS Hep G2 cells were first exposed to 0.6 m M FFA(palmitic acid/oleic acid, 1:2)for 24 h to induce the liversteatosis before treated with or without evodiamine foran additional 24 h. Atorvastatin was used as apositive control. Intracellular lipid deposition was analyzed by Oil Red O staining. Male ICR mice were fed HFD initially for 4 weeks to induce hyperlipidemia. After induction of hyperlipidemia, evodiamine was intragastrically administered in the dose of 10 mg · kg~(-1) per day for 4 weeks to the mice. The levels of triglyceride(TG), total cholesterol(TC), high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C) and low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)in the serum were determinedto evaluate the metabolic lipid profiles in the HFD-fed mice. Hematoxylin and eosin(H&E) staining was performed for fat accumulation examination. Western blotting and quantitative real time polymerase chain reaction(q RT-PCR) were used to assess the expression of proteins and m RNAs correlated with RCT in the liver and small intestine, including ATP-binding cassette transporter A1(ABCA1), ABCG1, ABCG5,ABCG8, scavenger receptor class B type 1(SR-B1) and Niemann-Pick type C1 Like 1(NPC1L1). RESULTS Oil Red O staining revealed that evodiamine markedly attenuated hepatic fat accumulation caused by FFA in HepG2 cells. In HFD-fed mice, evodiamine significantly reduced serum TG, TC and LDL-C but not HDL-C. Besides, evodiamine significantly decreased hepatic lipid accumulation revealed by H&E staining. Moreover, evodiamine increased ABCG1 expression in the liver and raised NPC1L1 expression in the small intestine. CONCLUSION Evodiamine improves lipid metabolic profile in HFD-fed mice by increasing expression of ABCG1 in liver and NPC1L1 in the small intestine.     

槲皮素调节SDF-1/CXCR4轴对下肢动脉硬化闭塞症大鼠的治疗作用

目的 探究槲皮素调节基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXC chemokine receptor-4,CXCR4)轴对下肢动脉硬化闭塞(arteriosclerosis occlusive disease of the lower extremities,ASOLE)大鼠的治疗作用。方法 取SD大鼠制备ASOLE模型48只,随机分为模型组、槲皮素低剂量(10 mg·kg^-1)组、槲皮素高剂量(20 mg·kg^-1)组、槲皮素(20 mg·kg^-1)+AMD3100(2.5 mg·kg^-1)组,另选12只大鼠做假手术组,药物干预后检测大鼠血脂三酰甘油(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,TC)水平;HE、EVG染色检测大鼠动脉血管组织病理形态改变,激光散斑血流成像系统检测下肢动脉血流速度;ELISA测定大鼠血清内皮素(serum endothelin,ET-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附蛋白-1(vascular cell adhesion protein-1,VCAM-1)水平及促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)水平;蛋白免疫印迹试验检测大鼠动脉血管组织SDF-1及CXCR4蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠动脉血管组织发生明显病理损伤改变,血清TG、TC、ET-1、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α、COX-2、IL-17水平显著升高(P<0.05),平均血流速度、SDF-1及CXCR4蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,槲皮素高、低剂量组大鼠动脉血管组织病理损伤减轻,血清TG、TC、ET-1、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α、COX-2、IL-17水平降低(P<0.05),平均血流速度、SDF-1及CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05);与槲皮素低剂量组相比,槲皮素高剂量组大鼠动脉血管组织病理损伤减轻,血清TG、TC、ET-1、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α、COX-2、IL-17水平降低(P<0.05),平均血流速度、SDF-1及CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05);与槲皮素高剂量组相比,槲皮素+AMD3100组大鼠动脉血管组织病理损伤加重,血清TG、TC、ET-1、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α、COX-2、IL-17水平升高(P<0.05),平均血流速度、SDF-1及CXCR4蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论 槲皮素可激活SDF-1/CXCR4信号,抑制炎症,改善血脂代谢,减轻ASOLE模型大鼠动脉血管组织损伤,保护血管内皮功能。     

基于Keap1-Nrf2/ARE信号通路研究牛磺酸对胰岛素抵抗模型大鼠氧化应激的影响

目的 通过研究牛磺酸对胰岛素抵抗大鼠模型的血糖、血脂、氧化应激指标以及Keap1-Nrf2/ARE信号通路重要靶点的影响,并探讨其分子调控机制。方法 建立胰岛素抵抗SD大鼠模型,测定连续灌胃给药7周后正常组、模型组、二甲双胍组、牛磺酸高剂量组以及牛磺酸低剂量组的空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素、甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,计算胰岛素抵抗指数;采用酶联免疫吸附试验法测定肝组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）,运用RT-PCR技术检测肝组织中Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 mRNA的表达量。结果 给药7周后,与模型组比,牛磺酸高剂量组胰岛素抵抗大鼠FBG、空腹胰岛素降低（P<0.05）,血清TC、TG水平也降低（P<0.05）;大鼠肝组织的SOD升高、MDA降低（P<0.05）;肝组织中HO-1、NQO1、Nrf2的mRNA水平上调（P<0.05）, Keap1 mRNA水平下调（P<0.01）。结论 牛磺酸可调节糖尿病大鼠的血糖、血脂,改善模型大鼠氧化应激状态,减轻胰岛素抵抗,可能与其调控Keap1-Nrf2/ARE信号通路中关键基因表达从而改善氧化应激有关。     

Improvement of lipid metabolic profile by natural piperine in high-fat diet-fed mice

OBJECTIVE To investigate whether piperine exerts the lipid-lowing effect by facilitating reverse cholesterol transport(RCT) that is a pivotal pathway involved in the transport of excess cholesterol from peripheral tissues to the liver for excretion in the bile and eventually the feces.METHODS HepG2 cells were exposed to 0.6 mmol·L~(-1) FFA(palmitic acid/oleic acid, 1:2) for 24 h for induction of steatosis before treated with or without piperine for an additional 24 h. Atorvastatin was used as apositive control.Intracellular lipid deposition was analyzed by Oil Red O staining. Male ICR mice were randomly divided into 4 groups(n=15 each group): normal diet(ND) group, high-fat diet(HFD) group, ND-piperine group, HFD-piperine group. Piperine(25 mg · kg-1) was administered by gavage for 8 weeks. Then levels of triglyceride(TG),total cholesterol(TC), high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C) and low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)in the serum were determined using their test kits, respectively. Hematoxylin and eosin(H&E) staining was conducted to evaluate intrahepatic lipid accumulation. Western blotting and quantitative real time polymerase chain reaction(q RT-PCR) were performed to assess the expression of proteins and m RNAs correlated with RCT in the liver and small intestine, including ATP-binding cassette transporter A1(ABCA1), scavenger receptor class B type 1(SR-B1),ABCG1, ABCG5, ABCG8 and Niemann-Pick type C1 Like 1(NPC1 L1). RESULTS Piperine markedly attenuated hepatic lipid deposition caused by FFA treatment in Hep G2 cells. Intragastric administration of piperine significantly reduced the plasma TG, TC and LDL-C, and slightly increased HDL-C(nostatistical significance) in HFD-fed mice. H&E staining revealed that piperine significantly decreased hepatic lipid accumulation compared with HFD group. In the liver, expression of SR-B1 was significantly increased in HFD-piperine group compared with the HFD group. In the small intestine, piperine treatment significantly increased ABCG8 m RNA and protein expression in HFD-fed mice, but had no effect on other gene expressions. CONCLUSION Natural piperine improves lipid metabolic profile in HFD-fed mice by increasing expressions of SR-B1 in liver and ABCG8 in the small intestine.