桂枝茯苓胶囊通过MAPK信号通路介导T淋巴细胞下调ICAM-1、HE4表达抑制子宫肌瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探究桂枝茯苓胶囊对子宫肌瘤大鼠细胞增殖、迁移和侵袭、MAPK信号通路和T淋巴细胞水平的影响。方法：60只大鼠随机分为对照组、子宫肌瘤组和子宫肌瘤+GZFLc组（n=20）。通过注射苯甲酸雌二醇和黄体酮构建子宫肌瘤模型。桂枝茯苓胶囊灌胃干预,剂量为1 000 mg·kg^-1。检测各组小鼠激素水平、子宫系数、雌二醇（E2）、孕酮（P）、促卵泡激素（FSH）、细胞间黏附分子1（ICAM1）、附睾蛋白4（HE4）、Ki67、基质金属蛋白酶2（MMP2）、ERK1/2、p38 MAPK蛋白表达量。通过流式细胞术检测CD3⁺比例和CD4⁺/CD8⁺水平。结果：3组大鼠上述指标比较差异有统计学意义（P<0.05）。子宫肌瘤组大鼠血清中E2[（782.45±65.38） pg·mL^-1]、P[（57.11±5.84） ng·mL^-1]和FSH[（6.24±0.61） IU·L^-1]、子宫系数（15.36±1.92）、ICAM1（1.82±0.15）、HE4（1.19±0.12）、Ki67（0.74±0.07）、MMP2（0.62±0.06）、ERK1/2（1.28±0.11）、p38 MAPK（1.10±0.10）水平显著高于对照组,CD3⁺[（34.58±2.35）%]和CD4⁺/CD8⁺（1.17±0.22）水平显著低于对照组（P<0.05）。子宫肌瘤+GZFLc组的E2[（437.62±41.49） pg·mL^-1]、P[（46.52±4.57） ng·mL^-1]、FSH[（4.85±0.46） IU·L^-1]、子宫系数（8.25±1.04）、ICAM1（0.76±0.07）、HE4（0.71±0.07）、Ki67（0.32±0.03）、MMP2（0.27±0.03）、ERK1/2（0.52±0.05）和p38 MAPK（0.56±0.05）水平显著低于子宫肌瘤组,CD3⁺（42.44±3.76）和CD4⁺/CD8⁺（1.85±0.31）水平显著高于子宫肌瘤组（P<0.05）。结论：桂枝茯苓胶囊可抑制子宫肌瘤的增殖迁移和侵袭,抑制MAPK通路,提高CD3⁺、CD4⁺/CD8⁺的水平。     

青黛通过ERK/p38 MAPK/MEK信号通路对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响

目的 探讨青黛对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响,并探讨其机制。方法 60只大鼠随机分为6组,分别为对照组、模型组、青黛低剂量组、青黛中剂量组、青黛高剂量组以及柳氮磺胺吡啶(SASP)组、每组10只。青黛低、中、高剂量组分别ig 0.6、1.2、2.4 g/kg青黛悬浊液,SASP组ig 500 mg/kg柳氮磺吡啶悬浊液,对照组、模型组ig等体积生理盐水。检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-4、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分率;放射免疫法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;荧光实时定量PCR法检测蛋白激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和MEK mRNA相对表达;免疫印迹法检测ERK、p38 MAPK和MEK蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠血清中IL-4、IL-10降低,TNF-α升高,PBMC中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞含量降低,大鼠结...     

积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用以及MAPK通路的影响

目的：研究积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤及MAPK信号通路的影响。方法：构建大鼠心肌缺血再灌注模型,将大鼠分为对照组、模型组和积雪草苷低（12.5 mg·kg^-1）、中（25 mg·kg^-1）、高（50 mg·kg^-1）治疗组。心脏超声检测心脏功能,HE染色检测心脏组织损伤程度。免疫组化检测心脏组织中ki67阳性细胞率,Western blot检测Bax、Bcl-2、磷酸化-细胞外调节激酶1/2（phosphorylation-extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-ERK1/2）和p-p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38MAPK）的蛋白相对表达量。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测外周血液中肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、肌钙蛋白（cardiac troponin I,cTnI）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）和IL-1β的蛋白相对表达量。结果：与模型组相比,在积雪草苷治疗后,大鼠心率、射血分数、左室收缩压显著上调;心肌酶Mb、cTnl、CK-MB的表达量显著下调,ki67阳性细胞率上调,促炎细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达量下调,Bax/Bcl-2、p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38MAPK/p38MAPK的比率显著下调。结论：积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并抑制MAPK信号通路。     

甲氨蝶呤对炎性细胞因子及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的：探讨甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对类风湿关节炎（RA）发病起重要作用的炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的作用及其可能的机制.方法：用Ⅱ型胶原建立类风湿关节炎（CIA）动物模型,以MTX（0.2 mg/kg/W）进行处理,6周后处死大鼠,取血清进行IL-1β和TNF-α检测;分离大鼠膝关节取关节滑膜细胞（FLS）进行培养、鉴定,检测脂多糖（LPS）诱导的FLS培养上清中IL-1β和TNF-α的含量,并观察MTX对FLS分泌IL-1β和TNF-α的影响;在FLS的培养中加入不同剂量的MTX,用Westen Blot方法检测FLS中ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达.结果：关节炎指数评分、关节肿胀度测定及关节病理显示造模成功,分离关节滑膜细胞经流式细胞仪检测FLS的血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）的表达为85.5％.造模后,CIA大鼠血清IL-1β和TNF-α明显增加,与空白对照组比较有统计学差异（P＜0.05）,MTX能有效减少CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量（P＜0.05）,但未能恢复至正常水平.MTX能抑制LPS诱导的CIA大鼠关节FLS分泌IL-1β和TNF-α.Western Blot检测显示,不同浓度的MTX对CIA大鼠FLS中ERK蛋白的表达与模型对照组相比无统计学差异（P＞0.05）.CIA大鼠FLS中p-ERK蛋白的表达明显高于空白对照组（P＜0.01）,MTX干预后,低剂量组对p-ERK蛋白表达无明显影响,而中、高剂量组可降低p-ERK蛋白的表达（P＜0.05）.结论：MTX既有免疫抑制作用,同时还通过抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α而具有抗炎作用,其机制可能部分与其抑制MAPK信号通路中的ERK蛋白磷酸化有关.     

狐臭柴茎挥发油体外抗炎活性及基于NF-κB和MAPKs信号通路作用机制的研究

目的:探究狐臭柴茎挥发油的体外抗炎活性及其作用机制。方法:通过水蒸气蒸馏法制备狐臭柴茎挥发油,采用GC-MS对其化学成分进行分析。通过Griess法和ELISA法测定挥发油对LPS诱导RAW264.7细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平的影响;qRT-PCR检测iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达;Western blot测定挥发油对iNOS、COX-2、NF-κB和MAPKs信号通路蛋白的影响。结果:从挥发油中共鉴定出74种化学成分,其中主要的化学成分是茅术醇(13.50%)。挥发油显著抑制NO、TNF-α和IL-6的分泌(P＜0.01),同时降低了促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)和促炎酶(iNOS和COX-2)的mRNA表达水平(P＜0.01)。Western blot研究表明挥发油能下调NF-κB信号通路细胞核p65蛋白表达、p65和IκBα磷酸化(P＜0.05或P＜0.01)。此外,还降低了MAPKs信号通路p38、JNK和ERK蛋白的磷酸化(P＜0.01)。结论:狐臭柴茎挥发油对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型具有较好的抗炎效果,其内在的分子机制与下调NF-κB和MAPKs信号通路有关。     

炎调方通过PD-1/PD-L1通路抑制脓毒症大鼠T淋巴细胞衰竭的实验研究

目的 研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响。方法 SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组。盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各5只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4⁺及CD8⁺表面PD-1、PD-L1表达水平。结果 白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组12 h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组24 h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在12 h降低IL-6的水平(P<0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P<0.01)。模型组CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P<0.01);炎调方组在...     

黄芩苷对胶原诱导性关节炎大鼠抗炎作用研究

目的研究黄芩苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的抗炎作用并探讨其对白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和核因子(NF)-κB信号通路的影响,为其应用于类风湿关节炎临床治疗提供实验依据。方法 Wistar雌性大鼠制备CIA模型,将关节炎评分>2的CIA大鼠采用随机数字表法随机分为模型对照组(0.9%氯化钠注射液)、甲氨蝶呤组(1 mg/kg)、黄芩苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg),每组6只持续处理30 d。另外选取6只正常大鼠作为正常对照(0.9%氯化钠注射液)。检测大鼠关节炎症状,关节组织进行放射评估和组织病理检测。定量检测血清中TNF-α和IL-1β水平,蛋白质印迹法检测关节滑膜组织中NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65(Ser536)和乙酰化-NF-κB p65(Lys310)蛋白表达。结果黄芩苷能减轻CIA大鼠的关节肿胀,明显抑制关节滑膜炎症和关节软骨及骨破坏,明显降低血清中TNF-α、IL-1β含量,抑制关节滑膜组织中NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65(Ser536)和乙酰化-NF-κB p65(Lys310)蛋白水平表达。结论黄芩苷抑制CIA大鼠炎症可能是通过抑制炎性细胞因子的产生和NF-κB信号转导途径而发挥治疗作用的。     

通痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的观察通痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠血清和滑膜组织中炎性因子表达及p38MAPK/NF-κB信号通路的影响。方法 48只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、通痹胶囊不同剂量(375、750、1500mg·kg-1)组及雷公藤多苷片(10 mg·kg-1)组,除正常组外,其余各组均于右后足跖部注射弗氏完全佐剂造模。造模第8日,各组给予相应药物灌胃治疗,每日1次,连续4周。对大鼠关节炎指数进行监测,足容积法测量致炎侧足肿胀度;灌胃结束后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清及滑膜中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠滑膜组织中p38MAPK、NF-κB/P65、IκBα蛋白表达的。结果与正常组相比,造模后大鼠血清及滑膜组织中IL-1、TNF-α含量明显升高,p38MAPK、NF-κB/P65、IκBα表达显著增多(P <0.01);与模型组相比,通痹胶囊能够有效降低大鼠血清及滑膜组织中IL-1、TNF-α的含量,并抑制滑膜组织中p38MAPK、NF-κB及IκBα的蛋白表达(P <0.05,P <0.01)。结论通痹胶囊具有明显的抗炎作用,其治疗类风湿关节炎的作用机制之一可能为抑制p38MAPK/NF-κB信号通路的激活。     

白芍总苷对共培养诱生的破骨细胞的作用及机制

目的研究白芍总苷(TGP)对佐剂关节炎(AIA)大鼠滑膜成纤维细胞和单核细胞共培养诱生破骨细胞分化的干预作用及机制。方法分离AIA大鼠滑膜成纤维细胞和外周血单核细胞,共培养诱生破骨细胞;分别加入5、50、500、5 000 mg·L-1和50 g·L-1的TGP,检测细胞增殖、TRAP活性和骨吸收功能;ELISA法检测上清中IL-1、TNF-α、M-CSF、RANKL的水平;实时定量PCR测定细胞ERK、JNK和p38的表达。结果 TGP 50⁵ 000 mg·L-1可浓度依赖性地抑制破骨细胞的增殖能力、TRAP活性和骨吸收面积;降低上清中IL-1、TNF-α、M-CSF、RANKL的水平;不同程度抑制破骨细胞ERK、JNK和p38的表达。结论一定剂量的TGP可抑制类风湿关节炎破骨细胞的分化和活性,其作用与抑制滑膜成纤维细胞过度分泌细胞因子,进而阻止MAPKs信号途径的活化有关。     

重组人Ⅱ型TNF-α受体-抗体融合蛋白对胶原诱导性关节炎模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响。方法:将40只6周龄的雌性Wistar大鼠按照随机数表法随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松对照组和rhTNFR:Fc治疗组,每组10只。制备CIA模型,以Western blotting法检测关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα表达的情况。结果:rhTNFR:Fc治疗组和醋酸泼尼松对照组可下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα的表达,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:rhTNFR:Fc可通过降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα蛋白表达以达到缓解炎症的作用。     

达原饮对免疫调节的配伍合理性及其机制研究

目的 对达原饮进行拆方研究,探讨破结逐邪组、清热滋阴组、甘草组和全方组对大鼠免疫调节的作用机制,分析达原饮配伍合理性。方法 制备脂多糖(LPS)诱导的大鼠模型,通过流式细胞仪(FCM)检测不同组方配伍的达原饮对脾淋巴细胞CD28⁺、CD80⁺分子表达的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中白细胞介素-2,1β(IL-2,IL-1β)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹法(W B)检测脾淋巴细胞中PI3K mRNA和蛋白的表达。结果 达原饮及各拆方组均能升高CD28⁺水平、降低IL-2、PI3K mRNA水平;与对照组相比,除甘草组外,达原饮及各拆方组均能增强CD28⁺、CD80⁺的表达(P<0.05或P<0.01);与破结逐邪组、清热滋阴组及甘草组比较,全方组的IL-2、PI3K蛋白表达分别低于各拆方组(P<0.01),但在降低IL-1β、PI3K mRNA水平上,全方组只与清热滋阴组和甘草组有显著差异(P<0.01)。...     

免疫抑制剂在反复胚胎种植失败患者中的应用价值研究

目的： 观察免疫抑制剂环孢素A在反复胚胎着床失败患者中的临床疗效，探索免疫抑制剂在辅助生殖中的应用价值。方法： 回顾性分析2016年1月至2018年1月在某院行体外受精-胚胎移植助孕治疗的97例反复胚胎着床失败患者的临床资料，根据再次行胚胎移植时是否应用环孢素A将患者分为研究组54例，对照组43例。比较2组患者胚胎着床率、临床妊娠率，观察外周血淋巴细胞免疫表型变化，以及不良事件发生情况。结果： 采用χ²检验比较组间差异，研究组胚胎着床率（28.89%）、临床妊娠率（46.3%）均高于对照组（11.11%，23.26%），差异有显著性（P<0.05）；治疗后CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞占淋巴细胞的比率下降，但差异无显著性；治疗后活化的CD3⁺T细胞比率（CD3⁺HLA-DR⁺）、B淋巴细胞（CD3^-CD19⁺）较治疗前无显著性（P>0.05），CD8⁺T细胞占淋巴细胞的比率上升、CD4⁺/CD8⁺比值下降，NK细胞（CD3^-CD16⁺CD56⁺）占淋巴细胞的比率明显下降，差异有显著性（P<0.05）。2组患者治疗过程中均未出现严重不良事件。结论： 免疫抑制剂环孢素A能增加反复着床失败患者的胚胎着床率，提高临床妊娠率，促使外周血免疫细胞分布向有利于胚胎着床方向偏移，免疫抑制剂在辅助生殖中的应用值得进一步开展研究。     

基于JNK信号通路探讨缬草酸对癫痫孕鼠仔鼠海马神经元保护作用

目的:基于JNK通路探究缬草酸对癫痫仔鼠海马神经元保护作用。方法:18只大鼠建立癫痫模型并成功妊娠后,随机分为模型对照组及缬草酸低、高剂量组(各6只),另取6只大鼠成功妊娠后为正常对照组。其中缬草酸低、高剂量组灌胃60 mg·kg^-1·d^-1、180 mg·kg^-1·d^-1缬草酸溶液至孕20 d,模型对照组、正常对照组同时间灌胃等量0.9%氯化钠溶液。统计各组总仔鼠数及活仔鼠数;HE染色观察仔鼠海马组织病理学变化;TUNEL技术检测仔鼠海马CA1区神经元细胞凋亡情况;免疫印迹法检测仔鼠海马组织中JNK、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达变化。结果:与模型对照组相比,缬草酸低、高剂量组总仔鼠数、活仔鼠数均升高,海马CA1区神经元细胞AI、海马组织中p-JNK/JNK及p-p38 MAPK/p38 MAPK表达水平均降低(P均＜0.05)。结论:缬草酸对癫痫仔鼠海马神经元具有保护作用,可能是通过抑制JNK通路实现的。     

半枝莲黄酮对复合Aβ所致阿尔茨海默病大鼠神经炎症的抑制作用及其机制

目的: 探讨半枝莲黄酮(SBF)对脑室注射Aβ_25-35联合AlCl₃和RHTGF-β₁(复合Aβ)建立的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠神经炎症的影响及其机制。方法: SD大鼠脑室注射复合Aβ建立AD模型,Morris水迷宫进行AD模型筛选。模型成功大鼠随机分为模型组和3个剂量药物组。药物组灌胃35,70和140 mg·kg^-1SBF,连续38 d,硫堇染色观察神经元形态和尼氏小体,IHC和Western blot检测脑内小胶质细胞(MG)标志性蛋白CD11b的表达,IHC检测脑内nNOS和iNOS蛋白表达,qPCR检测脑内eNOS mRNA表达,ELISA测定脑内炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10的水平。结果: 脑室注射复合Aβ可引起大鼠神经病理学改变、神经元丢失和尼氏小体减少;脑内CD11b、iNOS蛋白及eNOS mRNA表达增加(P<0.01)、nNOS蛋白表达降低(P<0.01);脑内IL-1β和IL-10的水平降低(P<0.01)、TNF-α、IL-6和IL-8的水平升高(P<0.01)。然而,模型大鼠灌胃SBF 38 d不同程度地逆转复合Aβ所致大鼠脑内上述异常改变(P<0.05,P<0.01),抑制MG增殖,调节NOS,降低炎性因子,减轻神经炎症。结论: SBF抑制复合Aβ所致的神经炎症与其抑制MG增殖、调节NOS和炎性因子有关。     

柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响

目的:研究柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响。方法:将MFC胃癌细胞接种于小鼠右侧腋下以复制MFC胃癌荷瘤模型,造模成功后分为模型组、环磷酰胺组(阳性对照,25 mg/kg)和柠檬苦素高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组10只。除模型组小鼠灌胃0.5%羧甲基纤维素钠外,其余各组小鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14天。小鼠给药前及末次给药后均测定体质量,并在末次给药后取脾、胸腺、肿瘤组织以计算脾指数、胸腺指数及抑瘤率;采用流式细胞术检测小鼠CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分数和CD4⁺/CD8⁺比值;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中免疫功能相关指标[白细胞介素2(IL-2)、IL-10、干扰素γ(IFN-γ)]的表达水平;采用实时定量聚合酶链式反应法和Western blot法检测小鼠肿瘤组织中凋亡相关因子[细胞色素C(Cyt-C)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果:除环磷酰胺组小鼠体质量较模型组显著降低外(P<0.05),其余各组小鼠体质量的差异均无统计学意义(P<0.05)。环磷酰胺组和柠檬苦素高、中、低剂量组小鼠的抑瘤率分别为(58.16±7.07)%、(37.09±4.26)%、(27.30±3.64)%、(15.13±2.95)%。与模型组比较,环磷酰胺组小鼠脾指数、胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、血清中IL-2和IL-10的表达水平、肿瘤组织中Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平以及柠檬苦素各剂量组的IL-10表达水平、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著降低(P<0.05);环磷酰胺组IFN-γ表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平,以及柠檬苦素各剂量组的脾指数(低剂量组除外)和胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、IL-2和IFN-γ的表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:柠檬苦素能抑制MFC胃癌荷瘤模型小鼠肿瘤组织的生长,且毒副作用相对较小;其作用机制与提高免疫功能和诱导凋亡有关。     

毛蕊花糖苷通过下调CD44表达抑制胶质瘤细胞上皮间质转化和侵袭

目的： 探讨毛蕊花糖苷（verbascoside,VB）对胶质瘤细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和侵袭的影响及其分子调控机制。方法： 分别使用不同浓度（0,50,100,200 μmol·L^-1）的VB处理胶质瘤U87和U251细胞24 h。使用Jet Prime转染100 μmol·L^-1VB处理的细胞：对照组（转染空载质粒）、VB组（转染空载质粒+100 μmol·L^-1的VB）、oe-CD44组（转染CD44过表达质粒）、Both组（转染CD44过表达质粒+100 μmol·L^-1VB）。CCK-8法和Transwell试验分别检测VB对U87和U251细胞增殖、侵袭能力的影响。Western blot检测各组细胞的CD44和EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin的表达水平。结果： VB能呈浓度依赖性抑制胶质瘤U87和U251细胞的增殖和侵袭能力,下调CD44及EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin的表达水平。而CD44过表达时则明显上调以上蛋白表达水平,增加细胞增殖和侵袭能力。当CD44过表达并加入100 μmol·L^-1的VB时,能减弱VB下调CD44以及EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-cadherin表达水平的作用,同时能明显减弱VB所抑制的细胞增殖及侵袭能力。结论： VB通过下调CD44的表达而抑制胶质瘤细胞的上皮间质转化。     

基于FLS细胞ERK信号通路机制的THD抗CIA作用

目的:研究沙利度胺(thalidomide,THD)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型CIA大鼠血清炎症因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(vascular endo-thelial cell growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-1,-2,-9(matrix metalloproteinase-1,-2,-9,MMP-1,-2,-9)表达的影响,及对成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)ERK信号转导通路的影响,探讨THD治疗RA的可能机制。方法:采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,通过免疫组化观察大鼠关节滑膜血管新生(微血管密度,MVD)情况;THD治疗后用West-ern Blot法检测IL-1β、TNF-α、VEGF、MMP-1,-2,-9表达,并用胶原酶消化法分离培养正常大鼠及CIA大鼠原代FLS;用Western Blot法检测不同浓度的THD处理后的CIA大鼠FLS中ERK和p-ERK表达情况。结果:CIA大鼠造模成功,通过THD治疗能降低CIA大鼠血清炎症因子IL-1β、TNF-α的表达,较造模组分别降低了56%,48%;并能降低血管新生相关因子VEGF、MMP-1,-2,-9表达,较造模组分别降低了52%,52%,13%,33%。并减轻了CIA大鼠的关节炎症及关节滑膜的血管新生;在原代培养CIA大鼠滑膜细胞中THD对FLS中ERK蛋白表达无明显影响,不同浓度的THD作用于FLS,可使p-ERK表达降低(P<0.05),低、中、高浓度的THD组p-ERK分别降低了54%,70%,84%。结论:THD能够调节炎症因子和血管新生相关因子的表达,从而发挥抗炎及抗血管新生的作用,其机制可能与调节ERK信号转导通路有关。     

吉林省不同产地白屈菜药效学的比较

目的： 探讨吉林省不同产地白屈菜的药效成分含量及其止咳平喘作用,确定白屈菜的最优产地,指导临床更加合理的使用白屈菜。方法： 采用HPLC法测定9个产地白屈菜中白屈菜红碱的含量,通过观察诱咳模型小鼠咳嗽潜伏期、咳嗽次数、炎症因子IL-1、IL-6水平;哮喘模型豚鼠哮喘潜伏期、行为学评分、气道黏多糖含量、CD4⁺/CD8⁺变化及肺组织病理学改变,评价不同产地白屈菜的药效作用差异。结果： 9组不同产地的白屈菜浓缩液均能延长小鼠咳嗽潜伏期,降低3 min内咳嗽次数（P<0.05或P<0.01）,延长豚鼠哮喘潜伏期,降低行为学评分（P<0.05或P<0.01）;其中靖宇产白屈菜控制小鼠咳嗽发生的潜伏期、3 min内咳嗽次数、豚鼠发生哮喘潜伏期、哮喘发生的行为状态、气道黏多糖含量及CD4⁺/CD8⁺值明显优于其他8组（P<0.05或P<0.01）。结论： 不同产地的白屈菜均有止咳平喘作用,但作用效果不同,其中靖宇地区产白屈菜在治疗咳嗽、哮喘症状方面具有一定的优势。     

藏药臭蚤草不同提取部位对CIA大鼠的影响北大核心CSCD

目的明确藏药臭蚤草抗类风湿性关节炎的作用,筛选其抗类风湿性关节炎的活性部位,初步探讨其抗类风湿性关节炎作用机制。方法以牛Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂建立大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。观察臭蚤草总提物、大孔树脂不同浓度乙醇洗脱部位及雷公藤多苷(GTW)对类风湿性关节炎模型大鼠的足肿胀度的影响,检测大鼠血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和类风湿性因子(RF)的含量,借助滑膜组织病理学验证臭蚤草对类风湿性关节炎的治疗作用,利用Western blot法探究臭蚤草对类风湿性关节炎大鼠滑膜组织中MAPK/p38/NF-κB、TLR4/NF-κB炎症通路蛋白表达的影响,探讨臭蚤草抗类风湿性关节炎的作用机制。结果与模型组相比,臭蚤草总提取物和大孔树脂60%乙醇洗脱部位能够明显降低CIA大鼠关节肿胀度;有效改善大鼠滑膜的病理变化,并明显降低血清中炎症因子中大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和类风湿性因子(RF)水平;明显降低滑膜组织中(TLR4、NF-κB、Myd88、p-p38、p-IκBα、iNOS等)相关炎症蛋白的表达。结论(1)臭蚤草可以缓解类风湿性关节炎大鼠的关节炎症症状,且臭蚤草60%乙醇洗脱部位为臭蚤草抗类风湿性关节炎的有效活性部位;(2)臭蚤草总提物及不同极性提取物能抑制MAPK/p38/NF-κB、TLR4/NF-κB信号通路缓解CIA大鼠的关节炎症状。     

黄芩汤对非酒精性脂肪肝炎大鼠的作用及机制研究

目的:研究黄芩汤对非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的作用及机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(多烯磷脂胆碱,8 mg·kg^-1)、黄芩汤低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg^-1),采用高脂饮食饲喂12周造模。灌胃给药5周后,检测各组大鼠血脂、肝功能及炎性因子水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;RT-PCR和Western Blot法检测肝组织Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)、白介素6(IL-6)、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、IL-23和IL-17 mRNA和蛋白表达;免疫组化法检测肝组织中NF-κB p65表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平明显异常(P<0.01)。肝组织出现脂肪变性及炎性浸润;肝组织中TLR2、MyD88、NF-κB p65、IL-6、RORγt、IL-23和IL-17 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01);NF-κB p65阳性细胞表达明显提升(P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤组大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平得到明显恢复(P<0.05,P<0.01);肝组织脂肪变性和炎性浸润得到纠正;上述蛋白mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);NF-κB p65阳性细胞表达明显降低(P<0.01)。结论:黄芩汤可能通过抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路和IL-23/IL-17轴治疗NASH。