心肌细胞凋亡的信号传导机制研究

细胞凋亡在心血管疾病发病机制中扮演了重要角色 ,细胞凋亡信号的异常表达使心肌细胞数量不断减少 ,其中含有 BH3( Bcl-2 Homology3 )结构域的凋亡促进分子 (如 Bax,Bid,BNIP3等 )在凋亡信号传导途径中发挥了重要作用。     

钙调神经磷酸酶信号通路与心肌细胞肥大

目的　探讨不同来源的细胞内Ca2 ([Ca2 ]i)在钙调神经磷酸酶 (CaN) 活化T细胞核因子 3 (NFAT3 )介导的心肌肥大中的作用。方法　分别用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )或雷尼丁刺激培养的大鼠心肌细胞外Ca2 跨膜内流或细胞内Ca2 释放 ,检测CaN、NFAT3、锌指转录因子 (GATA4)蛋白量、NFAT3定位以及氚 亮氨酸 (3H Leu)掺入量 ,环孢素A作为CaN特异抑制剂。结果　AngⅡ、雷尼丁刺激 1、3d ,心肌细胞CaN、NFAT3、GATA4蛋白表达及3H Leu掺入量较对照组明显增高(P值 <0 0 5或 <0 0 1)。AngⅡ和雷尼丁刺激第 1天 ,心肌细胞NFAT3表达由胞质转入胞核表达为主。环孢素A可抑制上述作用 ,与刺激组相比差异有显著性 (P <0 0 5或 <0 0 1)。结论　刺激心肌细胞Ca2 内流及Ca2 释放 ,均可激活CaN NFAT3信号通路。CaN NFAT3信号通路的激活与[Ca2 ]i增加有关 ,而与 [Ca2 ]i的来源无关。环孢素A能够抑制AngⅡ和雷尼丁介导的CaN NFAT 3 GATA 4表达的增加和蛋白质合成     

心肌细胞钙瞬变信号的研究进展

心肌细胞钙瞬变信号是指细胞动作电位或其他原因引起心肌细胞内游离Ca^2＋浓度迅速波动的现象,包括钙火花、钙波、钙震荡、钙星、钙空穴等。钙瞬变信号的幅度及时程受细胞膜L型钙通道、肌浆网膜钙释放通道、钙-ATP酶、瞬时受体电位蛋白、连接素等的影响。钙瞬变信号与心肌细胞的收缩性及传导性相关,并参与了心肌肥厚、心力衰竭等疾病发生发展过程。     

心肌细胞钙瞬变信号的研究进展

心肌细胞钙瞬变信号是指细胞动作电位或其他原因引起心肌细胞内游离Ca2+浓度迅速波动的现象,包括钙火花、钙波、钙震荡、钙星、钙空穴等.钙瞬变信号的幅度及时程受细胞膜L型钙通道、肌浆网膜钙释放通道、钙-ATP酶、瞬时受体电位蛋白、连接素等的影响.钙瞬变信号与心肌细胞的收缩性及传导性相关,并参与了心肌肥厚、心力衰竭等疾病发生发展过程.     

虎杖苷对严重烫伤大鼠心肌细胞钙信号调控的作用

目的：观察虎杖苷（polydatin,PD）对烫伤大鼠心功能损害的钙信号调控,并探讨其对烫伤大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：28只成年SD大鼠随机分为4组,即假手术组、烫伤组、PD组及烫伤＋PD组,每组7只大鼠（n=7）。 各实验组使用Power lab系统进行实时心功能监测。手术后5 min通过静脉给予PD（10 mg/kg）,12 h后分离心室肌细胞,通过激光共聚焦显微镜观测PD对烫伤大鼠心室肌细胞钙火花发放频率、钙库水平、钙瞬变的作用。结果：与烫伤组比较,烫伤＋PD组大鼠左室收缩压、左心室内压力上升的最大速率（±dP/dtmax）均显著增加、钙瞬变和心肌收缩力明显增强、使烫伤引起的钙库容量下降基本恢复到正常水平,烫伤引起的高频钙火花发放显著抑制（均P〈0.01）,钙火花时程的增加也明显抑制（P〈0.05）。结论： PD可以显著抑制烫伤引起的心肌细胞肌浆网钙漏流,恢复肌浆网钙库容量水平,增强收缩期钙瞬变和心肌收缩力,从而改善烫伤引起的心功能障碍。     

中药对心肌细胞钙通道作用研究现状

本文综述了近年来利用膜片钳技术研究中药对心肌细胞膜钙通道作用的现状 ,并对未来研究进行展望。心肌细胞膜上电压依赖性钙通道主要有 L 型和 T型两类 ,中药以钙通道拮抗剂居多 ;研究多集中于中药单体     

心肌细胞T型钙通道的研究进展

近年研究提示心肌细胞上T型钙通道与心肌增殖、分化、心律失常相关,阻断T型钙通道可以抑制心肌肥厚,预防心肌电重构,改善心功能,但其确切的机制有待进一步研究。     

维拉帕米对心肌细胞肥大的影响

目的研究维拉帕米对心肌细胞肥大的影响及其机制。方法测定培养的心肌细胞［Ｃａ２＋］ｉ和３Ｈ－亮氨酸（３Ｈ－Ｌｅｕ）参入。结果２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ维拉帕米对培养的心肌细胞［Ｃａ２＋］ｉ和３Ｈ－Ｌｅｕ参入无明显影响（Ｐ＞０．０５），２×１０－６～１０－５ｍｏｌ／Ｌ维拉帕米则可显著抑制培养的心肌细胞［Ｃａ２＋］ｉ和３Ｈ－Ｌｅｕ参入。与对照组相比，心肌细胞［Ｃａ２＋］ｉ和３Ｈ－Ｌｅｕ参入分别减低１０％～２７％（Ｐ＜０．０１）和１２％～２５％（Ｐ＜０．０５）。结论维拉帕米可以抑制培养的心肌细胞肥大，作用机制可能与其降低细胞内游离钙和细胞收缩性有关。     

MN9202对心肌细胞的收缩和舒张功能的影响

目的研究MN9202对心肌细胞收缩舒张功能的影响.方法采用IonOptix单细胞动缘检测系统(IonOptix Co.USA),测定心肌细胞收缩幅度和收缩/舒张速度等,这些指标均由计算机自动实时采集并记录.结果MN9202降低心肌收缩幅度(ph)、心肌细胞收缩幅度/单个心肌细胞的长度百分比(peak height/baseline×100%,ph/bl%)、最大收缩速率( dL/dt)和最大舒张速率(-dL/dt),ph在对照组、MN9202(3×10-6mol/L)组和拉西地平(lacidipine,3×10-6mol/L)组分别为(0.13±0.04)μm、(0.08±0.05)μm和(0.07±0.04)μm,ph/bl%分别为(8.6±2.8)%、(5.8±4.3)%和(5.6±3.3)%, dL/dt分别为(1.6±0.5)μm/s、(1.1±0.7)μm/s和(1.0±0.6)μm/s,-dL/dt分别为(1.2±0.4)μm/s、(0.8±0.3)μm/s和(0.7±0.3)μm/s.异丙肾上腺素(10-8mol/L,isoproterenol,Iso)增加ph、pl/bl%、 dL/dt和-dL/dt均有统计学意义,上述指标分别增加45%、47%、54%、78%.3×10-7mol/L的MN9202和拉西地平降低Iso引起ph、ph/bl%、 dL/dt和-dL/dt的升高,其中MN9202使 dL/dt和-dL/dt的降低较对照组有显著差异(P＜0.05),拉西地平使ph/bl%、 dL/dt和-dL/dt的降低较对照组有统计学意义.结论MN9202使心肌细胞收缩和舒张功能均降低;Iso所致心肌细胞收缩和舒张功能的增强,3×10-7mol/L MN9202和拉西地平有抑制Iso的作用.     

心肌细胞感染病毒后钙、钾通道电流及其表达改变和牛磺酸的作用

目的 观察心肌细胞感染病毒后心肌细胞钙，钾通道电流及通道表达改变和牛磺酸的作用。方法 （1）体外心肌细胞感染病毒；用胰蛋白酶和胶原酶消化法分别获得大鼠，乳鼠培养和分离的心肌细胞并感染柯萨奇B3病毒，用于检测Ca^2 跨膜内流，电压依赖性钙通道电流（Lca)和外向钾通道电流（Iout)。（2）在体小鼠感染病毒；BALB/c小鼠腹腔内注射柯萨奇B3病毒7d后取出心脏用于检测电压堆呀性钙通道α1亚单位抗原和电压调控性钾通道（Kv)mRNA的表达。相应各组加入不同剂量的牛磺酸并观察其作用。结果 （1）感染柯萨奇B3病毒后Ca^2 跨膜内流量及Ica增加，牛磺酸对其有抑制作用。（3）柯萨奇B3病毒感染out明显增大。牛磺酸可使病毒感染后的Iout趋于恢复正常。（3）柯萨奇B3病毒感染后小鼠心肌出现强电压依赖性钙通道α1亚基抗原阳性信号。Kv1.2,Kv2.1,Kv4.2mRNA与3种探针的杂交信号亦明显增强，牛磺酸可使增强的阳性信号减弱。结论 柯萨奇B3病毒感染后心肌细胞钙，钾离子通道电流及表达均增加，牛磺酸可通过抑制其改变而发挥对感染病毒心肌细胞的保护作用。     

心力衰竭家兔心肌细胞钙释放的异常

目的:探讨心力衰竭(心衰)家兔心肌细胞钙释放异常与收缩功能的关系。方法:22只家兔随机分为2组:假手术组(n=11)和心衰组(n=11);通过超容量负荷联合压力负荷制备家兔心衰模型,利用心脏多普勒观察手术前后家兔心功能的变化;采用常规酶解法分离心室肌细胞,经Fluo-3／AM负载后,利用激光共聚焦显微技术,观察咖啡因诱发钙瞬变过程中细胞内钙浓度的动态变化;采用Western blot法测定心肌组织L型钙通道α1亚单位(LTCCα1)、肌浆网钙释放通道(RyR2)的表达水平。结果:与假手术组相比,心衰组家兔射血分数明显降低(0．46±0．03 vs 0．73±0．05,P<0．01);咖啡因诱发的钙瞬变幅度明显下降(16．00±3．54 FI vs 43．50±6．22 FI,P<0．01)、峰值到达时间明显延长(129．8±14．5 s vs 52．2±7．4 s, P<0．01);LTCCα1(RLTCC-α1/actin:0．287±0．029 vs 0．624±0．009,P<0．01)和RyR2表达水平明显减少(RRyR2／actin:0．106±0．001 vs．0．203±0．011,P<0．01),均有极显著性差异。结论:LTCCα1亚单位和RyR2表达减少导致钙释放异常是心衰心肌收缩力降低的机制之一。     

Rho激酶信号通路与大鼠心肌细胞凋亡的关系

目的探讨Rho激酶信号通路在心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡组织中的表达变化及对心肌细胞凋亡的影响作用。方法选取健康雄性Wistar大鼠,通过结扎左前降支建立大鼠心肌梗死模型,将24 h后仍然存活的大鼠选取30只,随机分为模型组和治疗组(法舒地尔5 mg/kg,2次/d)各15只,并另外选取健康雄性大鼠15只作为假手术组,假手术组和模型组给予等量生理盐水处理,比较4 w后3组心肌梗死面积及Rho激酶mRNA、蛋白等指标的表达差异。结果 3组左心室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)差异均有统计学意义(P0.05),模型组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax显著低于治疗组和假手术组(P0.05),LVEDP显著高于治疗组和假手术组(P0.05),治疗组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax显著低于假手术组(P0.05),LVEDP显著高于假手术组(P0.05)。治疗组心肌缺血面积低于模型组但差异不显著(P0.05);治疗组心梗面积显著低于模型组(P0.05)。3组Rho激酶mRNA、Bax蛋白、Bcl-2蛋白表达差异有统计学意义(P0.05);组间差异均有统计学意义(P0.05)。结论心肌梗死大鼠心肌组织中的Rho激酶mRNA、Bax蛋白达显著增加,同时Bcl-2蛋白表达降低,法舒地尔能够降低Rho激酶mRNA表达,减少心肌细胞凋亡,减轻心肌梗死面积。     

心肌细胞钙波的影象观察

目的 :观察大鼠心肌细胞内钙波的影象及钙波在心肌细胞内及细胞间的传播。方法 :采用激光共聚焦显微镜及细胞内钙荧光染色的观测方法。结果 :1在激光共聚焦显微镜下观察了由钙荧光探针 Fluo- 3染色的心房肌及心室肌细胞的影象。 2观察了心肌细胞内钙在某一区域瞬时性增高的现象即钙波在心肌细胞内传播的动态影象 ,钙波的发生与细胞外钙浓度大小有关。3观察了钙波在心肌细胞与细胞间连接处的传播动态影象。结论 :心脏在静息时 （尤其高钙负荷时 ）出现钙波是钙信号的一种调节机制。钙波具有在细胞内区域性、瞬时性增高 ,并较快在细胞内传播 ,亦可在细胞间传播。     

糖尿病调控大鼠心肌细胞肌浆网钙离子通道表达的研究

目的 评价糖尿病对大鼠心室肌细胞肌浆网钙离子转运通道及其调控蛋白表达的影响。方法 以注射链脲佐菌素的方法制备1型糖尿病大鼠模型;动物分成4组(n=6):对照组、糖尿病4周组、糖尿病8周组和糖尿病12周组。分别以RT-PCR和Western blot的方法测定心室肌细胞肌浆网上主要钙转运通道及其调控蛋白的mRNA和蛋白的表达变化。结果 糖尿病程第4周,心肌细胞肌浆网上主要钙转运通道（雷诺定受体和Serca2ATPase）表达开始显著下降,并持续下降至病程12周。同时,调控蛋白FKBP12.6表达第8周显著下降、phospholamban表达同步上升。结论 随着病程的进展,糖尿病大鼠心肌细胞肌浆网钙离子转运通道及其调控蛋白的表达呈逐步和显著的下降趋势。     

心力衰竭家兔心肌细胞钙调控蛋白表达的异常

目的探讨心力衰竭(心衰)心肌细胞钙调控蛋白表达异常的临床意义。方法 16只家兔随机分为两组,假手术组和心衰组各8只。通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,利用心导管术和心脏多普勒观察手术前后家兔血流动力学及心脏结构和功能的变化。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法测定心肌组织 L 型钙通道(LTCC)、肌浆网钙释放通道(RyR2)、肌浆网钙泵(SERCA2a)以及钠钙交换体(NCX)表达水平。结果家兔心衰组与假手术组相比,左室/体重比值、心率、左室舒张末压明显增加(P<0.01);左室短轴缩短率[(21.3±4.00)%与(36.5±1.36)%]和左室射血分数(0.45±0.07与0.70±0.02)降低(P<0.01);心肌组织 LTCC、RyR2表达下降(R_(LTCC/actin):0.287±0.029与0.624±0.009,R_(RyR2/actin):0.106±0.001与0.203±0.011,P<0.01);SERCA2a、NCX 表达增加(R_(NCX/actin:0.497±0.015与0.221±0.014,R_(SERCA2a/actin:0.611±0.036与0.433±0.008,P<0.01)。结论 LTCC 和 RyR2表达下调是心衰心肌收缩力降低的因素之一,而心衰早期 SERCA2a、NCX 表达增加可能有利于心肌舒缩功能的保持。     

心肌细胞钠钙交换体研究进展

钠钙交换体是膜蛋白超家族的一员,广泛分布在心、脑、肾、肺、大肠、胰和脾,它在离子迁移过程中发挥重要作用。本文综述了钠钙交换体的家族成员、分子结构特征、转运特点、生物学功能、影响因素、病理状态下的表达及钠钙交换体抑制剂的研究进展和展望。     

缺血心肌细胞钙分布变化的细胞化学研究

本文报道用细胞化学的磷酸盐—焦锑酸盐(PPA)法观察大鼠心肌缺血时心肌细胞钙分布变化。用PPA法显示正常心肌细胞钙定位在肌膜包括T管及闰盘的肌膜。钙沉淀物分布在肌膜的胞质面,沉淀物大小不超过20nm。在冠状动脉结扎30min后,肌膜的结合钙沉淀物减少甚至消失。当缺血超过60min,心肌细胞损伤严重,肌膜结合钙消失,细胞内肿胀线粒体的基质内积聚了丝团状的钙沉淀物。说明肌膜和钙结合能力是心肌细胞生存的重要特性。     

外环境低钙对培养心肌细胞损伤的研究

目的 研究细胞外环境低钙对培养心肌细胞损伤的影响机制。方法 观察细胞外钙离子浓度为１．０ｍｍｏｌ／、０．８ｍｍｏｌ／Ｌ、０．６ｍｍｏｌ／Ｌ、０．２ｍｍｏｌ／Ｌ时对原代培养心肌细胞膜流动性、细胞内游离钙和肌酸磷酸激酶（ＣＫ）的影响。结果 钙离子浓度为０．６ｍｍｏｌ／Ｌ以下能明显引起膜流动性降低,细胞内游离钙增加,呈明显的量效关系。低钙能引起ＣＫ量增加,呈明显的量效关系。结论 细胞外环境钙离子浓度降低