超高剂量率照射与常规照射后胶质瘤小鼠血浆代谢物时序性特征对比分析

目的探究超高剂量率照射(FLASH-RT)和常规照射(CONV-RT)对胶质瘤小鼠血浆代谢物的影响。方法胶质瘤模型雄性C57BL/6J小鼠21只, 按随机数表法分成健康对照组(3只)、CONV-RT组(9只)和FLASH-RT组(9只)。CONV-RT组以0.4 Gy/s的剂量率对小鼠头部进行单次24 Gy照射, FLASH-RT组以60 Gy/s的剂量率对小鼠头部进行单次24 Gy照射, 健康对照组以相同条件给予0 Gy假照射。两照射组照射后1、3、7 d分别收集小鼠眼内眦静脉血并分离血浆。健康对照组于假照射后7 d收集小鼠眼内眦静脉血并分离血浆。采取基于液相色谱质谱串联平台的非靶向代谢组学方法检测胶质瘤小鼠血浆代谢物的变化。结果胶质瘤小鼠受不同方式照射后, 血浆中代谢物均发生显著变化。FLASH-RT组和CONV-RT组3个时间点分别与健康对照组相比筛选出12和5种差异代谢物, 照后1 d血浆代谢物差异最大, 照后3和7 d血浆代谢物差异减小。FLASH-RT组筛选出的花生四烯酸与异戊酸也存在于CONV-RT组中, 其余10种差异代谢物仅存在FLASH-RT组, 主要涉及能量代谢和...     

高低剂量X射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的研究

目的 比较高低剂量X射线照射对基因表达影响的差异性,探讨不同剂量辐射生物效应的作用机制.方法 采用包含有45 033个基因的NimbleGen 12×135K芯片分析0.1和5 Gy照射正常人淋巴母细胞AHH-1培养6h后基因表达谱的改变,以差异为2倍以上且两组实验结果一致的标准确定为有效差异表达基因.用real-time PCR和Western blot方法验证了共同表达基因PERP的表达.结果 0.1 Gy照射后,有760个基因表达上调,1222个基因表达下调;5 Gy照射后,上调和下调基因分别是457和744个.在两个剂量照射条件下共同表达上调的基因有55个,同时下调的基因有339个.低剂量组差异表达基因主要参与细胞信号转导、DNA损伤反应等过程,高剂量组主要参与凋亡、细胞增殖分化等过程.real-time PCR和Western blot方法验证了PERP的表达与芯片结果相一致,均表达下调.结论 高低剂量照射后基因表达改变存在质和量的差异,可更好地阐释高低剂量电离辐射生物学效应的作用机制.     

C57小鼠受照后胸腺细胞基因表达谱的变化

目的 研究受1Gyγ射线照射后一个月,C57小鼠胸腺细胞细胞基因表达谱的变化。方法 使用Agilent小鼠oligo基因芯片技术,观察受照射小鼠和非受照射小鼠两组间的基因差异表达。结果 在所观察小鼠21319个基因中,107个基因在受照射小鼠胸腺组织中表达上调2倍以上(其中13个上调4倍以上),9个基因表达下调超过200%(其中2个下调超过400%),这些变化基因涉及细胞的一些基本代谢活动。结论 变化明显的基因功能涉及胚胎发育,组织形成与维持,免疫与应激、蛋白合成、凋亡、信号转导等,上调基因的数量远多于下调基因数量,其中编码角蛋白在胚胎发育中的作用值得注意。在变化明显的上调和下调基因功能中都涉及到PI3-K,也是一个值得继续关注的现象。     

不同剂量辐射诱导小鼠胸腺Th1-Th2-Th3型细胞相关基因的功能分析

目的 应用功能分类基因芯片技术,分析高、低剂量全身照射对小鼠胸腺细胞中Th1、Th2及Th3/Tr1各亚型功能相关基因的差异表达,探讨辐射免疫效应的分子机制.方法 健康ICR小鼠按随机数字表法分为低剂量组(0.075 Gy)、高剂量组(2.0 Gy)和假照组,于照射后16 h处死小鼠取胸腺组织,应用细胞因子与炎症反应PCR芯片技术进行Th1-Th2-Th3功能分类芯片分析.结果 低剂量(0.075 Gy)X射线全身照射后小鼠胸腺细胞中有8个基因表达上调,5个基因表达下调;高剂量(2.0 Gy)X射线全身照射后小鼠胸腺细胞中有54个基因表达上调,3个基因表达下调.具体有Th型细胞相关基因、Th2型细胞相关基因、Th3/Tr1型细胞相关基因、Th1/Th2型免疫应答基因以及转录因子相关基因.其中,低剂量辐射诱导胸腺中的Th1型细胞相关基因Stat4和Socs1的表达上调,而对Th2型和Th3/Tr型细胞相关基因IL-4ra、Cebpb、Gata3及Tgfb3下调,最终导致Th1型免疫应答基因Sftpd上调.高剂量辐射均可诱导Th1、Th2和Th3/Tr型细胞相关基因的上调,但Th1型免疫应答基因表达无变化,而Th2型免疫应答相关基因Cd86、IL-18、IL-10以及Irf4上调.结论 低剂量辐射诱导Th1型免疫应答,而高剂量辐射诱导Th2型免疫应答.     

放射性肺损伤小鼠晚期转录水平特征性基因标志物的研究

目的 研究不同剂量X射线照射小鼠肺部后的差异基因并进行转录水平分析,探讨小鼠放射性肺损伤（RILI）潜在的基因标志物。 方法 8周龄C57BL6雌性小鼠96只,X射线单次照射分为3组（12只/组）:对照组（未接受照射）、中等剂量组（MD组,10 Gy单次照射）、高剂量组（HD组,20 Gy单次照射）,余60只分为5组进行X射线全肺野梯度剂量照射。采用全基因组表达芯片对小鼠肺组织进行RNA检测并生成基因表达矩阵,使用R语言软件包进行基因表达数据转换,对特征性基因标志物表达水平进行验证与数学建模,对HD组小鼠基因表达水平进行基因本体论生物学功能基因集富集分析。采用经典贝叶斯检验方法进行组间基因表达差异的比较,采用线性回归模型分析2组独立数据的关联程度（关联系数为R2）。 结果 MD组和HD组小鼠照射后肺组织转录组学分析,共筛选出RILI差异表达基因539个,其中差异最显著的5个基因为Phlda3、Fgg、Kng1（上调基因）和Ptprb、Kit（下调基因）。梯度剂量X射线分次照射实验结果证实,3个上调基因均随X线剂量的增加而表达增强;2个下调基因则随剂量的上升而表达降低。上调基因的逻辑回归模型拟合程度较高（χ2=11.66, R2=0.88）;下调基因的表达值与剂量具有良好的相关性（R=?0.95,R2=0.89）。基因集富集分析结果显示,上调基因富集于p53信号通路、固有免疫反应等生物学过程,下调基因富集于细胞代谢、肺部发育等生物学过程。 结论 上调基因Phlda3、Fgg、Kng1与下调基因Ptprb、Kit可作为客观反应RILI严重程度的潜在基因标志物,为日后开展临床与辐射防护相关应用奠定前临床基础。     

γ线照射小鼠胸腺组织基因表达转录谱分析

目的 探讨6 Gy γ线照射后不同时间小鼠胸腺组织基因表达转录谱的动态变化。方法 应用快速高通量的cDNA基因芯片技术进行研究。结果 1随照射后时间推移,差异表达基因数目和种类逐渐减少,如照射后1、6、14和28 d差异基因数量分别为878、318、162和25;2辐射所诱导的胸腺组织差异表达基因广泛涉及细胞周期、免疫和应激、细胞凋亡、细胞信号转导、转录调节、DNA合成修复和重组、细胞骨架、离子通道和运输、代谢、蛋白翻译和合成、发育、细胞分化多个方面;3照射后对某些重要差异表达基因的分析表明,与细胞周期相关的基因有5个(上调3个:Cyclin G、Anxa1、Fgf1,下调2个:Cdc2a、Cdc25b);与免疫应激相关的5个(上调4个:IL-18、Casp1、IL-15、IL-7,下调1个:Cd28);与细胞凋亡相关的7个(上调4个:Casp1、Anxa1、Perp、IL-7,下调3个:Pten、Api5、Fas)。结论 6 Gy γ线照射后,小鼠胸腺组织差异表达基因随照射后时间延长不仅涉及多个靶点、多个层次,显示出多样性变化的特点,而且显示出时间上的明显差异;从基因水平上揭示了中等剂量照射小鼠胸腺组织损伤修复和重建基因的变化规律,为辐射免疫损伤与修复的分子机制和防治措施的研究提供了新的启示。     

光动力学疗法过程中小鼠皮肤蛋白质谱变化的研究

目的 寻找皮肤对血卟啉单甲醚光动力学疗法(hematoporphyrin monomethyl ether mediated photodyrnamic therapy,HMME-PDT)应答的蛋白质分子标志物.方法 雌性BALB/c小鼠尾静脉注射血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)10 mg/kg后即刻以532 nm的激光对其皮肤进行照射,功率密度50 mW/cm2,光斑直径1 cm,照光时间20 min;同时设立单纯照光组、单纯光敏剂组以及空白对照组.术后24 h从照射局部皮肤取材,以裂解液提取皮肤蛋白,然后用蛋白质芯片(WCX2)和SELDI蛋白质芯片阅读机检测小鼠皮肤差异蛋白质的表达.结果 HMME-PDT能够明显改变照射局部皮肤蛋白质谱的表达,在质荷比为相对分子质量(Mr)4949～18 828之间,共有7个蛋白质峰的强度发生了显著改变,其中2个蛋白质表达上调,另外5个蛋白质表达下调.单独照光组在Mrl4 927处有1个蛋白质的表达下调,与PDT处理组在该点的变化一致,且与正常对照相比有显著差异.结论 PDT照射能显著改变小鼠皮肤蛋白质谱的表达,单纯照光也能引起个别蛋白的表达发生改变,并且与PDT在该点的表达趋势一致,提示这些差异蛋白质的表达与皮肤对PDT所产生的氧化应激或照光引起的光热效应的应答机制有关.     

60Co γ射线急性照射对比格犬外周血淋巴细胞基因表达谱的影响

目的 探讨急性照射后比格犬外周血淋巴细胞基因表达谱的变化。方法 将20只雄性成年比格犬用单纯随机数字表法均衡分为4组：空白对照组和0.5、2.0、5.0 Gy 3个照射组,⁶⁰Co γ射线急性照射相应剂量,照后6 h采集外周血,分离淋巴细胞进行总RNA提取和基因芯片杂交以开展差异表达基因筛选,并对差异表达基因进行基因本体（GO）分析,以及京都基因与基因组百科数据库（KEGG）通路分析,以实时定量PCR（qRT-PCR）进行结果验证。结果 与空白对照组相比,3个剂量组受照后6 h共有308条基因差异表达2倍以上,其中61条表达上调,247条表达下调,主要涉及免疫反应、肿瘤发生等。共同差异表达基因的GO富集分析涉及细胞连接、信号转导、氧化还原及物质代谢等,共同涉及的KEGG通路包含肿瘤途径、p53信号通路和JAK-STAT信号通路、酪氨酸代谢等。通过qRT-PCR验证,凋亡增强核酸酶（AEN）和促分裂原活化蛋白激酶13（MAP3K13）基因表达结果与基因芯片结果一致。结论 不同剂量的γ射线急性照射均对比格犬外周血淋巴细胞的基因表达谱产生明显影响,共同差异表达基因涉及免疫系统、物质代谢及致癌效应等多项生物学功能及相关通路。     

2Gy和10Gyγ射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的比较

目的 了解中等剂量和大剂量辐照对基因表达影响的差异性，以此探讨不同剂量γ射线生物学效应的分子基础。方法 正常人淋巴母细胞经2和10Gy^60Coγ射线照射后培养4h（未照射为对照组）。用包含有14022个基因的人类cDNA芯片分析基因转录谱，每个剂量点重复一次芯片检测，照射组与对照组细胞的差异表达基因表达量比值大于2或小于0．5，并且2次检测结果一致的基因点为有效差异表达基因。结果 2Gy照射后共有32个基因表达下凋，46个基因表达上调；10Gy照射后共有219个基因表达水平下降，26个基因表达水平上升，在两个剂量照射条件下都表达下调的基因至少有11个，同时上调的基因有9个，这些基因大多与细胞信号转导、细胞周期调控、DNA损伤修复、细胞凋亡等相关。结论 观察到中等剂量和大剂量辐照的相同诱导表达变化基因，10Gy剂量照射使大量的基因表达抑制，将导致细胞多方面的生理功能障碍。     

中子照射后小鼠骨髓差异表达基因的研究

目的 探讨中子照射后小鼠骨髓差异表达的基因及其意义.方法 二级雄性BALB/c小鼠60只,随机均分为对照组和照射组(n=30).照射组动物采用3.0Gy中子进行全身均匀照射,并分别于照射后6、24、72h活杀,每时间点10只;对照组在相应时间点各处死10只动物.应用HE染色方法观察照射后小鼠骨髓的病理变化.采用小鼠全基因组寡核苷酸芯片技术分析照射后6h小鼠骨髓差异表达的基因谱,并采用RT-PCR对部分结果进行验证.结果 3.0Gy中子照射后,小鼠骨髓腔内造血细胞进行性减少,并有大量出血,至照射后72h,骨髓腔内呈血池状,几乎见不到造血细胞.照射后6h,小鼠骨髓差异表达基因共390个,包括上调和下调基因各195个,功能涉及代谢、生长和发育、细胞信号通路、应激反应、增殖和死亡、免疫应答、细胞连接、物质运输、细胞周期以及功能未知基因等,其中可能与中子辐射损伤密切相关的基因功能涉及细胞周期调控(ccng1、ccne2)、细胞增殖与凋亡调控(bax、bbc3、traf5)、细胞因子合成(psg18、zbtb32、mknkl、cdld1、id4、t2bp)等.RT-PCR验证了部分基因(ccngl、bax、bbc3、ccne2、traf5)的表达情况,其结果与芯片检测结果一致.结论 中子照射后小鼠骨髓出现大量差异表达基因,其中ccng1、bax、bbc3、cene2、traf5和irf4可能为中子辐射致骨髓损伤的敏感靶基因.     

基于基因表达综合数据库筛选调控急性T淋巴细胞白血病超高剂量率放疗敏感性的枢纽基因

目的 通过生物信息学方法对基因表达综合(GEO)数据库中超高剂量率(FLASH)放疗的数据进行分析,寻找参与调控急性T淋巴细胞白血病FLASH放疗敏感性的枢纽(Hub)基因。方法 从GEO数据库中下载和提取接受FLASH放疗恶性肿瘤基因表达谱芯片数据,采用R软件进行差异基因的筛选,并对这些基因进行生物学功能、信号传导通路等分析。通过STRING在线软件分析差异基因的蛋白质相互作用(PPI) 网络,Cytoscape插件筛选Hub基因。最后,应用肿瘤基因组图谱(TCGA)和GTEx数据库验证Hub基因在急性T淋巴细胞白血病中的表达情况。结果 自GEO数据库中获得GSE100718芯片数据,共有12 800个基因与急性T淋巴细胞白血病放疗敏感性相关。选择表达量显著改变的61个基因进行进一步分析,这些基因参与代谢、应激反应、免疫应答等生物学过程。主要涉及氧化磷酸化、未折叠蛋白应答、脂质代谢等信号转导通路。通过PPI分析筛选出的Hub基因及后续验证表明HSPA5及SCD参与调控FLASH放疗敏感性,且在合并TRD/LMO2融合基因的急性T淋巴细胞白血病中显著高表达。结论 通过生物信息学分析可以有效筛选出调控FLASH放疗敏感性的Hub基因,基因表达谱可用于指导肿瘤患者分层以实现精准放疗。     

辐射诱导lncRNA LOC102606465靶基因的筛选及生物信息学分析

目的 筛选电离辐射诱导的长链非编码RNA LOC102606465靶基因，探索其潜在生物学功能。方法 基因芯片检测LOC102606465下游差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs），qRT-PCR对部分DEGs进行验证。对DEGs进行GO和KEGG功能富集分析，构建PPI蛋白互作网络，以筛选显著模块及关键枢纽基因。结果 siRNA-447和siRNA-541的LOC102606465表达量显著低于siRNA-NC，差异具有统计学意义（t=29.095、13.751，P<0.01）。siRNA-447，siRNA-541共同变化的DEGs有374个（112个上调，262个下调）。qRT-PCR验证发现DEGs表达变化趋势与基因芯片结果一致。GO富集分析发现，下调DEGs显著富集于"氧化还原酶活性作用集群"（分子功能），"基底层" （细胞组分），"铵离子代谢过程" （生物过程）；上调DEGs显著富集于"蛋白磷酸酶抑制剂活性"（分子功能），"SNARE复合体" （细胞组分），"纤维蛋白溶解负调节" （生物过程）。KEGG分析发现，DEGs显著富集在外源物质细胞色素P450代谢通路，背腹轴形成信号通路，溶酶体信号通路，甘油酯代谢通路和P53信号通路。基于STRING数据库构建蛋白互作网络（包括194个节点与268个边缘），筛选出1个显著功能模块和5个关键枢纽基因ACTRT3、CDKN1A、DPYD、TMP4、PRKACB。结论 LOC102606465可能是调节电离辐射敏感性潜在的生物标志物，其表达下调在细胞响应辐射过程中发挥重要作用，并有望成为调节辐射敏感性的重要靶标。     

极低频磁场联合X线对人肝癌细胞株BEL-7402作用的机制研究

目的 研究极低频磁场联合X线对人肝癌细胞株BEL-7402的作用机制。方法 人肝癌细胞株BEL-7402经0、2、4、6、8、10 Gy X线照射后,用极低频磁场处理(100 Hz、0.7 mT、30 min、3 d)后,利用扫描电镜作形态观察,流式细胞仪、基因芯片研究细胞凋亡机制。结果 扫描电镜形态显示,极低频磁场联合X线组肝癌细胞株BEL-7402发生凋亡改变。流式细胞仪观察结果显示,当X线剂量是2、4、6、8、10 Gy, 极低频磁场联合X线凋亡率为10.0%、14.5%、4.3%、5.1%、7.1%,X线组凋亡率是0.1%、8.10%、0.1%、0.4%、 2.2% (P<0.05)。基因芯片结果显示,极低频磁场联合X线组共有1465条出现上调,1108条出现下调。其中比值≥2倍的基因共有336条,上调262条,下调74条。与凋亡相关基因共110条,上调基因71条,下调基因39条。涉及CDC25、CHK1、ATM、p38、PTEN、p53、G₁/S、Fas、G₂/M、Cell Cycle、Apoptosis、Caspase基因通路中的基因。极低频磁场加X线组差异表达结果中有13条同时出现在极低频磁场组。42条同时出现在X线组。结论 极低频磁场与X线通过不同的基因通路影响细胞凋亡。极低频磁场与X线对人肝癌细胞株BEL-7402凋亡有协同作用。     

超高剂量率照射后水分子的辐射化学效应研究

目的 对比分析超高剂量率(FLASH)照射和常规剂量率照射后水分子电离的辐射化学效应。方法 以超纯水为研究对象,分别实施常规照射和FLASH照射,采用电子顺磁共振法检测均相阶段的羟基自由基生成量,荧光探针法分析扩散期过氧化氢(H₂O₂)产量。构建脂质体常规照射和FLASH照射模型,分析水分子辐射化学效应诱发脂质过氧化情况。结果 照射可诱导水分子电离发生化学反应。其中,均相阶段,FLASH照射产生羟基自由基的水平与常规照射无明显差异(P>0.05)。扩散期,FLASH照射产生H₂O₂的水平明显低于常规照射(t=0.49~12.81,P<0.05)。构建脂质体模型证实,常规照射通过水分子辐射化学效应诱导脂质氧化应激较FLASH照射显著(t=0.31~11.73,P<0.05)。结论 FLASH照射后水分子的辐射化学效应明显弱于常规照射,这可能是FLASH效应的机制之一。     

超高剂量率照射诱导质粒DNA链断裂损伤的研究

目的 对比分析超高剂量率（FLASH）和常规剂量率电子线照射在诱导DNA链断裂损伤中的作用,探讨FLASH效应是否与照射诱导的DNA链断裂损伤减少有关。方法 在生理氧含量（4%）和空气氧含量（21%）条件下,对置于超纯水的pBR322质粒DNA分别实施FLASH （125 Gy/s）和常规（0.05 Gy/s）照射。通过琼脂糖凝胶电泳实验检测开环带DNA和线性带DNA发生情况。进一步应用自由基清除剂Samwirin A （SW）清除电离辐射产生的自由基,分析清除自由基对开环带DNA和线性带DNA形成的影响。最后,量化质粒DNA损伤并采用数学模型计算FLASH照射后产生开环带DNA和线性带DNA的相对生物效应（RBE）。结果 生理氧含量下,FLASH和常规照射所诱导DNA链断裂损伤呈现出剂量依赖性。其中,超纯水中,FLASH照射诱导的线性带DNA生成率较常规照射显著降低（t=5.28、5.79、7.01、7.66,P<0.05）。采用SW预处理后,FLASH和常规照射后质粒DNA链断裂损伤差异无统计学意义（P>0.05）。当氧含量为21%时,FLASH照射与常规照射导致DNA损伤效应无差别,且均较生理氧含量时明显增加。此外,FLASH照射每Gy诱导线性带DNA和开环带DNA的损伤速率分别为常规照射的（2.78±0.03）和（1.85±0.17）倍。结论 FLASH照射较常规照射减轻正常组织放射损伤主要与电离辐射后自由基产生有关,FLASH效应受氧含量的影响。     

Comparison of proton and electron radiation effects on biological responses in liver,spleen and blood

Purpose: To determine whether differences exist between proton and electron radiations on biological responses after total-body exposure.

Materials and methods: ICR mice (n = 45) were irradiated to 2 Gray (Gy) using fully modulated 70 MeV protons (0.5 Gy/min) and 21 MeV electrons (3 Gy/min). At 36 h post-irradiation liver gene expression, white blood cell (WBC), natural killer (NK) cell and other analyses were performed.

Results: Oxidative stress-related gene expression patterns were strikingly different for irradiated groups compared to 0 Gy (P < 0.05). Proton radiation up-regulated 15 genes (Ctsb, Dnm2, Gpx5, Il19, Il22, Kif9, Lpo, Nox4, Park7, Prdx4, Prdx6, Rag2, Sod3, Srxn1, Xpa) and down-regulated 2 genes (Apoe, Prdx1). After electron irradiation, 20 genes were up-regulated (Aass, Ctsb, Dnm2, Gpx1, Gpx4, Gpx5, Gpx6, Gstk1, Il22, Kif9, Lpo, Nox4, Park7, Prdx3, Prdx4, Prdx5, Rag2, Sod1, Txnrd3, Xpa) and 1 was down-regulated (Mpp4). Of the modified genes, only 11 were common to both forms of radiation. Comparison between the two irradiated groups showed that electrons significantly up-regulated three genes (Gstk1, Prdx3, Scd1). Numbers of WBC and major leukocyte types were low in the irradiated groups (P < 0.001 vs. 0 Gy). Hemoglobin and platelet counts were low in the electron-irradiated group (P < 0.05 vs. 0 Gy). However, spleens from electron-irradiated mice had higher WBC and lymphocyte counts, as well as enhanced NK cell cytotoxicity, compared to animals exposed to protons (P < 0.05). There were no differences between the two irradiated groups in body mass, organ masses, and other assessed parameters, although some differences were noted compared to 0 Gy.

Conclusion: Collectively, the data demonstrate that at least some biological effects induced by electrons may not be directly extrapolated to protons.     

氚水诱发血管内皮细胞差异表达lncRNAs和mRNAs的筛选和初步功能分析

目的探讨氚水诱发人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)lncRNAs和mRNAs的表达改变及其意义。方法 HUVEC细胞分为两组, 分别为对照组和氚水染毒组。对照组细胞用DMEM培养基培养, 氚水染毒组细胞在含有氚水的培养基中培养(氚水终浓度为3.7×103 Bq/ml)。两组细胞均持续培养48 h后收集细胞样本, 提取RNA, 采用高通量芯片技术筛选差异表达lncRNAs和mRNAs, 并进行数据分析。结果氚水染毒组与对照组相比, lncRNAs分析显示有1 717个lncRNA显著上调, 3 994个lncRNA显著下调;mRNAs分析显示, 有4 562个基因显著上调, 1 433个基因显著下调。差异mRNA与差异lncRNA通过共表达分析, 获取关键基因, 包括SQSTM1、CXCL8、ITPR1、GADD45A、NF-kB1和VDAC1等基因。结论氚水暴露可诱发血管内皮细胞发生多个mRNAs与lncRNAs的表达改变, 可能通过SQSTM1、CXCL8和ITPR1等关键基因的信号通路导致毒性效应。     

双向调控Cox-2表达对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨上调和下调Cox-2基因表达对食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法 构建针对Cox-2基因的siRNA载体及Cox-2基因真核表达载体,通过脂质体转染技术将其转入食管癌EC9706细胞,G418筛选得到稳定转染细胞系。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中Cox-2 mRNA和Cox-2蛋白表达水平;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调Cox-2表达联合X射线照射对食管癌的生长抑制作用。结果 Cox-2下调组食管癌EC9706细胞内Cox-2基因表达明显降低,Cox-2上调组明显升高。Cox-2下调组裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(F=34.26,P<0.05);Cox-2上调组的瘤体平均体积大于对照组(F=26.38,P<0.05)。20 Gy γ射线照射后Cox-2下调组瘤体平均体积较照射前明显减小(F=16.35,P<0.05);而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。结论 下调Cox-2表达能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性,上调Cox-2表达则使肿瘤辐射抗拒。