血必净注射液对脓毒症大鼠器官功能及死亡率的影响*

[目的]观察血必净注射液对脓毒症大鼠多器官功能及死亡率的影响。[方法]采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）模型。雄性Wistar大鼠96只按随机数字表法分为正常对照组（n=8）、假手术组（n=8）、模型对照组（n=40）,血必净治疗组（n=40）,后两组按观察时间点分为2、8、24、48和72 h亚组。另设实验观察血必净注射液对脓毒症大鼠的治疗效果,观察CLP术后7 d存活率。[结果]血必净治疗组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肌酸激酶（CK）及心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）水平呈不同程度降低;与模型未治疗组比较,血必净治疗组及联合治疗组动物死亡率显著降低。[结论]血必净注射液能够明显降低脓毒症大鼠的死亡率,并对重要器官功能具有保护作用。     

脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响

目的:通过超声心动图观察脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响.方法:将78只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=24)、盲肠结扎穿孔术(CLP)组(n=24)、血必净治疗(XBJ)组(n=24).假手术组开腹翻动盲肠后关腹,CLP组及XBJ组采用CLP建立脓毒症大鼠模型.假手术组及CLP组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射生理盐水4 mL/kg,XBJ组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射血必净注射液4mL/kg.各组于术后6、24、48、72h通过超声心动图观察实验大鼠心功能的变化.结果:与正常对照组及假手术组比较,CLP组左室舒张末内径(LVEDD)增大、心率(HR)明显升高(P＜0.05),室间隔运动幅度及左室后壁运动幅度有降低趋势,左室射血分数(LVEF)、二尖瓣环舒张期早期峰值速度(Ea)与舒张晚期峰值速度(Aa)比值(Ea/Aa)明显降低(P＜0.05).与CLP组比较,应用血必净注射液后,LVEDD及HR无显著变化,LVEF及Ea/Aa显著升高(P＜0.05).结论:脓毒症大鼠存在心功能障碍,血必净注射液对脓毒症大鼠心功能有改善作用.     

血必净注射液对脓毒症大鼠肠TLR4和NF-κB的影响

目的:探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肠的保护作用及机制。方法:Wistar大鼠80只,随机分成4组:正常对照组(N,n=8)、假手术组(S,n=8)、脓毒症组(C,n=32)、血必净治疗组(X,n=32),测定各组大鼠肠组织内TLR4和NF-κB表达,肠组织ICAM-1免疫组织化学染色及观察病理形态。结果:脓毒症组各时间点肠组织内TLR4、NF-κB和ICAM-1表达明显高于假手术组(P<0.01),血必净注射液可明显抑制这种变化(P<0.01)。结论:血必净注射液通过下调肠组织内TLR4、NF-κB和ICAM-1表达减轻脓毒症大鼠的肠损伤。     

血必净注射液及其药代标示物对脓毒症大鼠炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8和IL-10表达的影响

[目的]研究血必净注射液及其药代标示物对脓毒症大鼠炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)表达的影响。[方法]30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、血必净组、药代标示物组、左氧氟沙星组(阳性对照组),静脉注射给药后采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,并于给药后5 h于大鼠眼眦静脉取血,离心取上清液。将取得的上清液采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8和IL-10的含量。[结果]血必净组、左氧氟沙星组和药代标示物组在给药5 h后,脓毒症模型大鼠血清中炎性因子TNF-α、IL-1和IL-8有显著降低。[结论]血必净注射液以及其药代标示物能够显著抑制因炎症刺激造成的炎性因子的过度分泌。     

血必净注射液改善脓毒症大鼠心脏功能的作用

目的观察血必净注射液对脓毒症大鼠心脏功能的作用。方法将45只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)及血必净治疗组(XBJ组),每组15只。Sham组不结扎穿刺盲肠,余同CLP组;CLP组采用盲肠结扎并穿刺法造模;XBJ组造模后立即经阴茎静脉注射血必净注射液4mL/kg体重。12h后经右颈总动脉左心室内插管监测各组大鼠左心室功能变化,留取左心室心肌组织观察形态学改变,同时检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β的含量。结果①脓毒症状态下左心室收缩峰压(LVPP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力上升/下降最大速率(±dp/dtmax)均有不同程度改变,应用血必净注射液后可明显改善各项指标。②CLP组可见细胞变性、炎性细胞浸润,XBJ组上述改变减轻。③脓毒症状态下cTn-Ⅰ、TNF-α、IL-1β水平显著升高,应用血必净后明显降低。结论血必净注射液改善脓毒症状态下心功能障碍,其机制可能与减轻心肌损伤,下调TNF-α、IL-1β水平有关。     

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。     

血必净注射液对脓毒血症大鼠肺脏组织炎症反应的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒血症大鼠炎症反应的影响。方法 将100只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture, CLP)组、血必净组,每组25只大鼠,每组分为5个亚组。CLP组及血必净组大鼠均使用CLP建立脓毒血症大鼠模型。血必净组大鼠分别于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射血必净注射液(天津红日药业)4ml/kg,其余各组大鼠经阴茎背静脉注射生理盐水4ml/kg。术后6、12、24、48、72h,分别收集各组实验大鼠的双肺。取大鼠左全肺,测定肺湿干重比(W/D);取大鼠右肺,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠肺组织匀浆上清液中IL-17及IL-6浓度。结果 脓毒症组大鼠肺湿干重比、IL-17浓度在术后6h开始出现上升,至术后12h达到高峰,在术后12~72h维持在较高水平。肺湿干重比、IL-17浓度上升均有统计学意义(P<0.05) ,血必净组大鼠IL-17浓度在各个时间节点均低于脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血必净注射液可降低脓毒血症大鼠肺脏组织IL-17浓度,对脓毒血症具有一定的治疗作用。     

血必净注射液联合参附注射液治疗脓毒症的临床效果观察

目的:分析探讨血必净注射液联合参附注射液治疗脓毒症的临床效果。方法:选取2013年12月~2016年4月期间我院收治的150例脓毒症患者,随机分为观察组(n=75)和对照组(n=75)。对照组患者采用常规治疗,观察组患者采用常规+血必净注射液+参附注射液治疗。分析比较两组患者的相关临床及预后指标。结果:治疗后,两组患者的血压、平均动脉压(MAP)明显升高,心率(HR)、急性生理学及慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)评分明显降低,观察组患者的血压、MAP大于对照组,HR、APACHEⅡ评分小于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:血必净注射液联合参附注射液能显著改善脓毒症患者的循环功能和预后情况。     

参麦注射液对早期盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的 研究参麦注射液(Shenmai,SM)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症大鼠模型早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 96只SD大鼠随机分为A组(假手术组,n=32)、B组(生理盐水组,n=32)和C组(参麦注射液组,n=32),分别于CLP造模后1/2、12、24和36 h向A组、B组大鼠皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组大鼠皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12、24、36和48 h测量3组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平.结果 CLP造模后B、C两组血清IL-6、IL-8水平均明显升高,C组在各时点的IL-6、IL-8水平均显著低于B组(P<0.01).结论 参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8的水平,对早期脓毒症大鼠具有保护作用.     

血必净注射液联合持续血液净化在重症脓毒症患者中的应用及对炎症反应水平的影响

目的探讨血必净注射液联合持续血液净化在重症脓毒症患者中应用对炎性因子、肾功能等指标的影响。方法回顾性选取我院2014年2月～2018年10月期间因重症脓毒症需住院治疗患者140例,按入院时间分为观察组和对照组,每组70例,观察组予以血必净注射液联合持续血液净化治疗,对照组予以持续血液净化治疗,疗程为1周,比较两组治疗后炎性因子、肾功能、多器官功能障碍(MODS)发生率、脓毒症休克发生率。结果观察组治疗后白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于对照组,血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平低于对照组,MODS发生率和脓毒症休克发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论血必净注射液联合持续血液净化治疗重症脓毒症临床效果较好,减轻炎症反应,改善肾功能,降低MODS和脓毒症休克发生率,保护多器官功能,推荐临床推广应用。     

一种改良盲肠结扎穿刺致大鼠脓毒症模型的方法

目的 建立一种更符合临床脓毒症生理机制的盲肠结扎穿孔动物模型。方法 SPF级雄性SD大鼠96只,采用随机数字分组法分为假手术组(n=24)、置管组(n=24)、盲肠结扎穿刺(CLP)组(n=24)、CLP+置管组(n=24),观察造模后24 h各组病死率,造模后24 h开腹观察腹腔状况,观察大鼠心、肺、肝、肾组织的病理学形态改变及各组织损伤病理积分。取下腔静脉血检测全血白细胞(WBC)、血小板(PLT)值;检测血清白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,检测血清肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)水平。取主动脉血进行血气分析。结果 假手术组和置管组大鼠24 h无病死率,CLP组大鼠24 h病死率20.8%,CLP+置管组大鼠24 h病死率54.2%。CLP+置管组心、肺、肝、肾组织均呈现以肿胀、炎性细胞浸润为主的病理学改变,CLP组多数出现单个脏器炎性细胞浸润,假手术组和置管组各脏器未出现明显肿胀及炎性细胞浸润;大鼠心肌组织病理学评分、肺组织损伤病理学评分、肾组织损伤病理学评分假手术组和置管组均低于CLP组及CLP+置管组(P均=0.000);大鼠肝组织损伤病理学评分假手术组均低于置管组、CLP组及CLP+置管组(P均=0.000);TNF-α水平、PaO₂水平、CK-MB含量、cTnT含量、AST含量、TBIL含量、BUN含量、CREA含量等的两两比较结果显示,假手术组分别与置管组、CLP组、CLP+置管组比较,置管组分别与CLP组、CLP+置管组比较,差异均有统计学意义(P均=0.000);pH水平的两两比较结果显示,假手术组分别与置管组、CLP组比较,置管组分别与CLP组、CLP+置管组比较,差异均有统计学意义(P均=0.000)。结论 虽然CLP组和CLP+置管组模型都能较好地模拟脓毒症的病理生理机制,但CLP+置管组出现明显的多器官功能障碍,运用CLP+置管组可复制出更接近临床实际的腹腔感染诱发的脓毒症致多器官功能障碍的动物模型。     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血清HMGB1表达的影响及其作用的研究

目的观察δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血清HMGB1水平及器官功能的影响。方法 96只SD大鼠分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后腹腔内注射DADLE(5 mg/kg)],各32只。盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,制模后6、12、18、24 h各取8只处死取材。ELISA法检测血清HMGB1水平及24 h ALT、AST、BUN、Cr、CK及PaO2的变化。结果 HMGB1水平在SEP组、DADLE组12 h 18 h及24 h均较SO组高(P<0.05),DADLE组则显著低于SEP组(P<0.05)。24 h时DADLE组血ALT、AST、BUN、Cr、CK均较SEP组明显改善,PaO2明显升高(P<0.05),且各指标变化与HMGB1有显著相关性(P<0.05)。结论 DADLE抑制HMGB1释放,对脓毒症大鼠重要脏器功能有保护作用。     

大鼠血管生成素-2在脓毒症型急性肺损伤中的变化

[目的]了解血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)在脓毒症型急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的变化。[方法]SD大鼠45只随机分为对照组10只,采用假手术处理;实验组35只,采用盲肠结扎穿孔术(cecal liga-tion and puncture,CLP)制作盲肠结扎/脓毒症模型(ALI模型);于假手术及CLP术后24 h处死全部大鼠,取肺组织常规石蜡包埋,HE染色观察组织形态学变化及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清Ang-2的水平。[结果]与对照组相比,光镜下实验组动物肺泡部分萎陷,肺泡间隔增宽,期间可见较多中性粒细胞及少许巨噬细胞浸润。实验组血清Ang-2水平(10.72±1.49)ng/mL明显高于对照组(3.87±0.26)ng/mL(P<0.01);实验组中死亡鼠血清Ang-2水平(11.48±1.52)ng/mL显著高于存活鼠(7.69±1.83)ng/mL(P<0.05)。[结论]血清高Ang-2水平提示脓毒症型ALI病例预后较差。     

亚甲蓝对不同时期脓毒症大鼠心、肺功能的影响

目的 探讨亚甲蓝(MB)在大鼠脓毒症不同时期对心、肺功能的影响及其作用机制.方法 将56只SD大鼠随机分为早期组和晚期组.两组再分别分为假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)、亚甲蓝组(MB组),每组8只.使用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症模型.造模成功后在早期(造模后10 h,早期组)与晚期(造模后20 h,晚期组)分别给予MB 10 mg/kg治疗,10～12 h后测量大鼠血压、血气及血清一氧化氮(NO)水平.取心、肺组织做组织病理学检测.结果 CLP组和MB组大鼠的血压在脓毒症不同时期均较S组降低,差异有统计学意义(P<0.05).CLP组和MB组的MAP变化值在早期及晚期和S组比较变化幅度偏低,差异有统计学意义(P<0.05).CLP组和MB组的酸碱度(pH)在脓毒症晚期明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).氧分压(PO2)、血氧饱和度(SpO2)在脓毒症不同时期均较S组降低,差异有统计学意义(P<0.05).CLP组和MB组在早期和晚期的NO值均较S组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).晚期MB组和CLP组比较,NO值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).早期CLP组心、肺损伤较S组严重.晚期CLP组心、肺损伤较S组和早期CLP组严重.MB治疗后未明显改善损伤.结论 MB可明显改善脓毒症晚期大鼠的低血压,MB对脓毒症各期血气值影响不大.脓毒症不同时期使用MB治疗对组织损伤程度影响不大.     

氯胺酮对感染性休克大鼠脑组织中热休克蛋白70的影响

目的观察氯胺酮对感染性休克大鼠血流动力学、7d生存率以及脑组织中热休克蛋白70的影响。方法取健康成年雄性（SD）大鼠60只,随机分为对照组、CLP组和氯胺酮组,各组20只。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法复制感染性休克模型（CLP组）,氯胺酮组于制模前腹腔给予80mg/kg。采用颈总动脉穿刺置管,持续监测平均动脉压（MAP）;观察各组大鼠7d存活时间及存活率;用免疫组化法测定脑组织热休克蛋白70（HSP70）阳性表达。结果对照组各时间点的MAP趋于稳定,CLP组术后MAP进行性下降,氯胺酮处理能逆转MAP下降;CLP组大鼠存活率（0）显著低于对照组（100%）及氯胺酮组（40%）,差异均有显著性（P〈0.05）;CLP组HSP70阳性产物灰度值显著低于对照组,但显著高于氯胺酮组（P〈0.01）。结论氯胺酮可以提高大鼠7d生存率具有抗感染性休克作用,可能与增加脑组织中热休克蛋白70的表达有关。     

Effects of tetramethylpyrazine on cardiac function and mortality rate in septic rats

Objective:To study the effects of tetramethylpyrazine(TMP)on cardiac function and mortality rate in septic rats.Methods:Fifty male Sprague-Dawley rats were randomized into a sham-operation group (sham group,n=10),normal saline group(NS group,n=20),and TMP group(n=20).The rats in the NS and TMP groups underwent cecal ligation and puncture(CLP)to induce sepsis.Rats in the NS group were injected with NS(10 mL/kg)immediately after CLP and 6 h after CLP.Rats in the TMP group were injected with TMP (10 mg/kg)at the same time points.Twenty-four hours after modeling,the mortality rates were observed in each group.Cardiac function and serum concentration of tumor necrosis factorα(TNF-α)were also tested. The correlation between TNF-αand the ejection fraction(EF)was observed.Left ventricle specimens were reserved for histomorphologic study.Results:Compared with the sham group,the NS and TMP groups had decreased EF values and increased mortality rates and serum TNF-αlevels(P<0.05).The TMP group had a comparatively lower mortality rate and TNF-αlevel and a higher EF value compared with the NS group(P<0.05). Histomorphology indicated that myocardial inflammation in the TMP group was mild compared with that in the NS group.There was a negative correlation between TNF-αlevel and EF value(r=-0.583,P=0.000).Conclusion: TMP could reduce the mortality rate of septic rats and had certain protective effects on cardiac function.