伴TP53基因突变急性B淋巴细胞白血病的临床特征及预后分析

目的研究TP53基因突变阳性急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者的临床特征及预后。方法回顾性分析2016年1月至2019年12月在苏州大学附属第一医院治疗的479例初诊B-ALL患者的临床资料。结果479例B-ALL患者中，34例（7.1％）TP53基因突变阳性，共检测到36个TP53突变，其中移码基因突变10个（27.8％），错义突变23个（63.9％），无义突变3个（8.3％）。共有34个（94.4％）突变位于DNA结合结构域（第5～8号外显子）。伴TP53基因突变组患者平均突变基因数目（2.3个）与无TP53基因突变组（1.1个）差异有统计学意义（P<0.001）。Ph阳性和Ph-like阳性患者在TP53基因突变阴性组中的比例显著高于TP53突变阳性组，差异有统计学意义（P<0.001）。TP53基因突变阴性组3年总生存（OS）率、无事件生存（EFS）率显著高于TP53基因突变阳性组（χ²＝4.694，P＝0.030；χ²＝5.080，P＝0.024）。多因素分析中，1个疗程诱导化疗未完全缓解（CR）是影响患者OS的独立预后不良因素。34例伴TP53基因突变患者中16例在第1次CR（CR₁）状态行异基因造血干细胞移植（allo-HSCT），2例移植后复发输注供者来源的抗CD19嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞后获CR₂。11例巩固化疗过程中复发的TP53基因突变患者中6例行抗CD19 CAR-T细胞治疗，4例获得缓解且微小残留病（MRD）转阴，缓解后桥接allo-HSCT，其中2例持续CR。结论伴TP53基因突变B-ALL患者中错义突变最常见，突变位点主要分布于DNA结合结构域。伴TP53基因突变的B-ALL患者复发后CAR-T细胞治疗清除MRD后应尽早行allo-HSCT。伴TP53基因突变的B-ALL患者在allo-HSCT后仍有较高的复发率，输注供者来源的CAR-T细胞能获得较好的持续缓解。     

IKZF1基因缺失在急性B淋巴细胞白血病患者中的预后意义

目的分析IKZF1基因缺失在急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者中的预后意义。方法回顾性分析2016年3月至2019年9月南方医科大学附属南方医院收治的142例接受儿童样化疗方案的B-ALL患者的临床资料，分析IKZF1缺失患者的临床特征。无事件生存（EFS）和总生存（OS）的多因素分析使用Cox回归模型。将患者分为IKZF1缺失/单纯化疗组（A组）、IKZF1缺失/移植组（B组）、IKZF1非缺失/单纯化疗（C组）、IKZF1非缺失/移植（D组）四组比较患者生存。结果142例患者，50例（35.2％）检出IKZF1基因缺失，其中4～7号外显子缺失占44.0％；与非缺失型比较，IKZF1缺失组B-ALL患者初诊时白细胞计数升高比例更高（52.0％对28.3％，P＝0.005）、诱导治疗第14天微小残留病转阴率更低（MRD₁，40.0％对70.7％，P<0.001）以及Ph染色体阳性比例更高（52.0％对21.7％，P<0.001）。单因素分析显示，IKZF1缺失组3年EFS率、OS率明显低于IKZF1非缺失组［（37.1±7.3）％对（54.7±5.4）％，P＝0.025；（51.8±7.9）％对（73.9±4.7）％，P＝0.013］；多因素分析显示IKZF1缺失是影响B-ALL患者EFS（HR＝1.744，95％CI 1.082～2.812，P＝0.022）、OS（HR＝2.036，95％CI 1.119～3.705，P＝0.020）的独立危险因素。其中，A组的3年EFS、OS、无病生存率（DFS）均明显低于其他亚组。在IKZF1缺失患者中，接受异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）组3年OS率为（67.9±10.4）％，3年EFS率为（46.6±10.5）％，均明显高于非移植组的（31.9±11.0）％和（26.7±9.7）％（P值分别为0.005、0.026）。结论IKZF1基因缺失的B-ALL患者整体预后差，儿童样化疗方案不能完全纠正IZKF1缺失对预后的不良影响；儿童样方案联合allo-HSCT可显著改善IKZF1缺失B-ALL的整体预后。     

二代测序技术检测儿童急性淋巴细胞白血病的基因突变谱及其预后意义

目的分析儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的基因突变谱及其预后意义。方法回顾性分析2016年11月至2019年12月福建医科大学附属协和医院采用二代测序技术（NGS）行基因突变检测的141例初治ALL患儿的临床资料，分析基因突变谱及其对ALL患儿预后的影响。结果141例患儿中，83例（58.9％）检出体细胞突变，包括37个Ⅰ类及123个Ⅱ类突变位点。单核苷酸变异（SNV）为最常见的突变类型。KRAS（20/160，12.5％）为最常见的突变基因，其次为NOTCH1（11.9％）及NRAS（10.6％）。RAS通路（KRAS、FLT3、PTPN11）、PAX5及TP53突变仅在B-ALL患儿中检出，而FBXW7、PTEN突变仅在T-ALL患儿中检出；NRAS突变主要在B-ALL中检出，而NOTCH1突变主要在T-ALL中检出。每例T-ALL患儿检出的平均基因突变个数显著高于B-ALL患儿（4.16±1.33对2.04±0.92，P＝0.004）。按照有无遗传变异将患儿分为突变组和无突变组，两组的性别、年龄、初诊白细胞计数、微小残留病监测结果、预计3年无事件生存（EFS）率及总生存（OS）率差异均无统计学意义（P值均>0.05）；但突变组T-ALL以及融合基因阴性患儿的比例显著高于无突变组（P值分别为0.021和<0.001）。进一步亚组分析，在融合基因阴性的患儿中，有Ⅰ类突变的患儿预计3年EFS率显著低于无Ⅰ类突变的患儿（85.5％对100.0％，P＝0.039）；在B-ALL患儿中，伴TP53突变的患儿预计3年EFS率显著低于不伴有TP53突变的患儿（37.5％对91.2％，P<0.001）。结论体细胞突变在儿童ALL中较为常见，与临床表型及预后具有一定的相关性，NGS可作为传统MICM分型检查的重要补充。     

血管内外周T细胞淋巴瘤的临床病理特征

目的总结血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤的临床病理特点，增加对此类疾病的认识，以减少漏诊、误诊。方法回顾性分析1例原发于淋巴结内的血管内外周T细胞淋巴瘤，非特指型（IVPTCL，NOS）患者的临床及病理学特点，并复习相关文献资料。结果患者，男性，66岁，PET-CT示全身多发淋巴结肿大，活检示正常淋巴结结构消失，淋巴滤泡部分破坏。高倍镜下显示大量血管弥漫增生、扩张，其内见异型淋巴样细胞团局限生长于管腔内，部分浸润大血管壁，细胞中等偏大，胞质中等，核不规则，可见单个或多个核仁，染色质呈凝聚状，部分空亮，核分裂象可见。肿瘤细胞表达CD3、CD43、CD8、GrB、TIA-1及穿孔素等；原位杂交EBV-EBER（−）；TCR基因重排检测（+）。予CHOP联合西达本胺方案化疗，患者不足2个月因感染、心肺功能衰竭死亡。检索相关文献，收集到有明确分型的血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤56例，其中鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤47例（男性27例，女性20例），间变性大细胞淋巴瘤8例（男性3例，女性5例），仅有1例为原发于脑组织的IVPTCL，NOS。本例为第2例报道的IVPTCL，NOS，且为第1例原发于淋巴结内的病例报道。结论血管内T细胞和NK细胞淋巴瘤为高度侵袭性疾病，目前尚无有效治疗方案。此病累及淋巴结的报道少，尚需积累更多病例进一步研究。     

CART序贯二次异基因造血干细胞移植治疗移植后复发急性B淋巴细胞白血病41例临床分析

目的观察嵌合抗原受体T细胞（CART）序贯二次异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗移植后复发急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的疗效。方法回顾性分析2015年10月至2020年6月在河北燕达陆道培医院接受二次allo-HSCT的41例B-ALL患者的临床资料，入选患者均为移植后骨髓形态学或髓外复发且二次移植前接受CART治疗。结果全部41例患者中男21例、女20例，二次移植时中位年龄为16（3～46）岁。移植后骨髓复发31例（75.6％）、髓外复发5例（12.2％）、骨髓和髓外复发5例（12.2％）。复发后接受CD19-CART治疗35例（85.4％）、CD22-CART治疗2例（4.9％）、CD19-CART联合CD22-CART治疗4例（9.8％）。二次移植后预期3年总生存（OS）率为48.9％（95％ CI 23.0％～70.6％）、无白血病生存（LFS）率为41.8％（95％ CI 17.3％～64.9％），累积复发率（RI）为8.8％（95％ CI 2.9％～26.4％），非复发相关死亡率（NRM）为51.1％（95％ CI 31.2％～83.6％）。首次移植后复发时间≤6个月组（10例）二次移植后1年OS率低于复发时间>6个月组（31例）［45.0％（95％ CI 12.7％～73.5％）对75.0％（95％ CI 51.4％～88.8％），P＝0.017］。结论CART序贯二次allo-HSCT可使部分造血干细胞移植后复发B-ALL患者获得长生存，但NRM较高，移植方案有待进一步改进。     

免疫靶向治疗在复发/难治性急性B淋巴细胞白血病患者中的疗效分析

目的比较复发/难治（R/R）急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者以常规化疗和免疫靶向治疗为挽救治疗的疗效。方法回顾性分析2008年1月至2020年7月郑州大学附属肿瘤医院收治的212例R/R B-ALL患者的临床资料，分析传统化疗与针对CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）和CD3CD19双特异性抗体（blinatumomab，简称双特异性抗体）的免疫靶向治疗的缓解率及生存差异，并分析其相关影响因素。结果CAR-T细胞治疗组的完全缓解（CR）率为80.4％（45/56），双特异性抗体治疗组的CR率为62.5％（5/8），传统化疗组的CR率为38.6％（56/145），三种方法挽救治疗的CR率差异有统计学意义（P<0.001）。CAR-T细胞治疗组患者的1年总生存（OS）率和无进展生存（PFS）率分别为41.5％和30.1％，显著高于传统化疗组的10.3％和9.7％（P值均<0.001）。双特异性抗体治疗组的1年OS率和PFS率分别为14.3％和14.6％，均高于传统化疗组（P值分别为0.018和0.046）。CAR-T细胞治疗达CR后桥接异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者的中位OS及PFS时间（分别为18.5个月和17个月）较未接受allo-HSCT患者（分别为8个月和4个月）显著延长（P值均<0.05）。双特异性抗体治疗后桥接allo-HSCT患者的中位OS及PFS时间（分别为13个月和11个月）较未接受allo-HSCT患者（分别为9.5个月和6个月）延长。CAR-T细胞治疗的细胞因子释放综合征（CRS）的发生率为89.8％，其中≥3级CRS发生率为30.2％，双特异性抗体治疗组的CRS发生率为37.5％，且均为1级。结论CD19 CAR-T细胞及CD3CD19双特异性抗体治疗R/R B-ALL患者的缓解率及生存率均显著优于传统化疗。     

790例初诊急性早幼粒细胞白血病患者临床及遗传学特征的单中心回顾性研究

目的探讨初诊急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的临床及遗传学特征。方法纳入2004年2月至2020年6月期间于中国医学科学院血液病医院就诊的15岁及以上初诊APL患者，对其临床及实验室特征进行回顾性分析。结果共收集790例APL患者，男女比例为1.22∶1，中位年龄41（15～76）岁，以20～59岁为主。中低危组患者632例（80％），高危组患者158例（20％）。4.8％的初诊患者合并银屑病。初诊患者的WBC、PLT、HGB水平分别为2.3（0.1～176.1）×10⁹/L、29.5（2.0～1220.8）×10⁹/L、89（15～169）g/L。PML-RARα亚型以 L型最常见，占58％。初诊患者很少出现APTT延长（10.3％）和肌酐>14 mg/L（1％）。对715例患者进行核型分析，155例（21.7％）为t（15;17）伴附加染色体异常，其中以+8（5.5％）最常见。复杂核型见于64例（9.0％）患者。对178例患者进行二代测序检测，共检出113个突变基因，发生率>1％的突变基因有75个，以FLT3（44.9％）最常见；FLT3-ITD见于20.8％的患者。结论本中心APL患者以中青年为主，男女比例未见明显差异。危险分层以中低危患者为主。少部分患者伴附加的染色体异常，以+8最常见。PML-RARα 亚型以L型最常见。APL突变谱以FLT3最常见。     

非IgM型淋巴浆细胞淋巴瘤临床及生物学特征

目的探索非IgM型淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL）患者的临床及生物学特征。方法回顾性收集中国医学科学院血液病医院1993年7月至2020年8月收治的340例LPL患者的临床资料，其中23例为非IgM型LPL组，317例为华氏巨球蛋白血症（WM）组。比较两组患者的临床及生物学特征。结果23例非IgM型LPL患者中，2例分泌单克隆性IgA，14例分泌单克隆性IgG，7例不分泌单克隆性免疫球蛋白。非IgM型LPL和WM患者中位年龄均为62（35～81）岁。与WM组患者相比，非IgM型LPL组患者女性（56.5％对27.3％，P＝0.007）、脾大（60.1％对43.8％，P＝0.100）、结外侵犯（21.7％对12.3％，P＝0.672）比例更高。非IgM型LPL组18例患者进行了MYD88基因相关检测，阳性率55.6％。非IgM型LPL组17例患者接受了治疗，启动治疗的患者比例与WM组患者相当（94.4％对92.7％，P＝0.488）。非IgM型LPL组16例患者进行了疗效评价，一线治疗总体缓解率87.5％，中位随访时间33.9（3.5～125.1）个月，总体中位无进展生存（PFS）、总生存（OS）时间未达到，3年PFS率和OS率分别为71.4％和68.9％。WM组中位PFS、OS时间分别为66.2个月和78.1个月。两组PFS、OS的差异均无统计学意义（P值分别为0.340、0.544）。结论非IgM型LPL与WM患者的临床及生物学特征相似，但非IgM型LPL组女性、结外受累比例更高。非IgM型LPL患者的生存及预后与WM患者相似。     

四种预后评分系统在早期无症状慢性淋巴细胞白血病患者中评估价值比较

目的比较四种预后评分系统预测Binet A期中国慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者诊断到治疗时间（TTFT）的预后评估价值。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院（浦口慢淋中心）2009年6月至2020年1月诊断的110例Binet A期CLL患者的基线临床资料，采用无症状早期CLL国际预后评分（IPS-E）、CLL国际预后指数评分（CLL-IPI）、CLL1预后评分模型（CLL1-PM）与巴塞罗那预后评分（Barcelona-Brno）模型对患者进行危险度分层和预后评估。结果110例Binet A期CLL患者中位年龄58（25～84）岁，中位随访时间35（4～189）个月，其中57例（51.8％）患者因病情进展达到治疗指征启动治疗。对患者年龄、Rai分期、淋巴细胞绝对计数（ALC）、淋巴结大小、淋巴细胞倍增时间（LDT）、β₂-微球蛋白、IGHV突变状态、TP53缺失和（或）突变、11q缺失等9个因素进行Log-rank检验，其中RaiⅠ～Ⅲ期、ALC>15×10⁹/L、淋巴结≥1 cm、β₂-微球蛋白>3.5 mg/L、IGHV无突变、TP53缺失和（或）突变、11q缺失是影响TTFT的独立危险因素。使用一致性指数（C-index）和赤池信息准则（AIC）对上述模型进行预后评估效能评价，其中CLL1-PM C-index＝0.736，AIC＝777；CLL-IPI C-index＝0.722，AIC＝933；IPS-E C-index＝0.683，AIC＝1004；Barcelona-Brno C-index＝0.663，AIC＝986。结论四种预后评分模型均具有预测TTFT的效能。IPS-E因纳入指标的临床可及性高，价格较低，可作为指导临床检测的理想工具。对于完善FISH及二代测序检查的患者，使用CLL-IPI或CLL1-PM可进行更为全面的预后评价。     

163例弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后相关免疫表型研究

目的筛选并分析与弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）预后相关的免疫表型，探究其预后价值。方法选取天津医科大学肿瘤医院2011年1月至2016年12月收治的163例DLBCL患者，免疫组织化学染色检测DLBCL常见免疫表型，COX模型探索独立于国际预后指数（IPI）影响总生存（OS）与无进展生存（PFS）的免疫表型，并分析其两两联合表达对预后的影响。结果多因素分析显示BCL6阴性（PFS：HR＝1.652，95％ CI 1.030～2.649，P＝0.037）、P53阳性（OS：HR＝1.842，95％ CI 1.008～3.367，P＝0.047）、BCL2强阳性（OS：HR＝2.102，95％CI 1.249～3.537，P＝0.005；PFS：HR＝2.126，95％ CI 1.312～3.443，P＝0.002）是DLBCL中独立于IPI的预后不良因素。亚组分析显示，在年龄≤60岁组患者中BCL6阴性（PFS：HR＝2.042，95％CI 1.021～4.081，P＝0.043）、P53阳性（OS：HR＝3.069，95％ CI 1.244～7.569，P＝0.015）和BCL2强阳性（OS：HR＝2.433，95％ CI 1.165～5.082，P＝0.018；PFS：HR＝3.209，95％CI 1.606～6.410，P＝0.001）对预后影响显著；在IPI 0～2分亚组患者中，BCL6阴性（OS：HR＝2.467，95％CI 1.322～4.604，P＝0.005；PFS：HR＝2.248，95％CI 1.275～3.965，P＝0.005）和BCL2强阳性（PFS：HR＝2.045，95％CI 1.119～3.735，P＝0.020）对预后影响显著。BCL6和BCL2强阳性的联合表达与DLBCL的预后相关（P＝0.005和P<0.001），BCL6阳性/BCL2非强阳性（86例）预后最好［3年OS率（71.6±4.9）％，3年PFS率（67.0±5.1）％］，BCL6阴性/BCL2强阳性（10例）预后最差［3年OS率（20.0±12.6）％，3年PFS率（10.0±9.5）％］；BCL6、P53的联合表达与DLBCL的预后差异无统计学意义（P＝0.061和P＝0.089），但生存曲线显示BCL6阳性/P53阴性的病例（98例）预后较好［3年OS率（70.6±4.7）％，3年PFS率（64.6±4.9）％］；BCL2强阳性、P53的联合表达与DLBCL的预后显著相关（P<0.001和P<0.001），BCL2强阳性/P53阳性的病例（5例）预后最差（3年OS率和PFS率均为0）；无论BCL6与P53表达如何，BCL2强阳性的病例预后均比非强阳性病例差。结论BCL6阴性、P53阳性、BCL2强阳性三种免疫表型单独及联合表达对DLBCL尤其是年龄≤60岁和IPI 0～2分患者的预后预测具有一定价值。     

供者CD19 CAR-T细胞治疗急性B淋巴细胞白血病移植后复发九例临床观察

目的观察供者抗CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）（HI19α-4-1BB-ζ CAR-T）治疗急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发患者的疗效及安全性。方法对2017年7月至2020年5月期间9例allo-HSCT后复发B-ALL患者应用供者抗CD19 CAR-T细胞治疗，FCA方案（氟达拉滨+环磷酰胺+阿糖胞苷）预处理后回输供者CD3⁺T淋巴细胞，其中CAR-T细胞中位数1.79（0.86～3.53）×10⁶/kg，观察疗效和不良反应。结果①输注CAR-T细胞后28～42 d，9例患者均获得MRD阴性的完全缓解。②所有患者发生细胞因子释放综合征（CRS），其中3级2例、2级4例、1级3例；4例患者出现免疫效应细胞相关的神经毒性（ICANS），2级1例、1级3例；1例患者发生急性Ⅳ度移植物抗宿主病（GVHD），上述不良反应经治疗均控制。③4例患者再次复发，中位复发时间为CAR-T细胞治疗后8.6（4.6～19.3）个月，2例化疗后病情进展死亡，1例接受二次移植14个月后复发死亡，1例接受CD22 CAR-T细胞治疗后完全缓解，现6例患者无病存活，植入分析为完全供者嵌合体，中位无白血病生存（LFS）期18.1个月，预期1年、2年LFS率分别为63.5％、50.8％。④中位随访25.1（6.9～36.7）个月，预期2年、2.5年总生存（OS）率分别为87.5％、52.5％。结论供者抗CD19 CAR-T细胞治疗allo-HSCT后复发的B-ALL的缓解率高，不良反应可耐受，半数患者可无病生存2年以上，长期疗效有待进一步观察。     

全血EB病毒DNA载量对异基因造血干细胞移植后淋巴增殖性疾病的诊断价值

目的探讨全血定量PCR法检测EB病毒（EBV）DNA载量对于异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后淋巴增殖性疾病（PTLD）的诊断价值。方法对2004年4月至2019年4月于北京大学第一医院血液科行allo-HSCT的694例血液病患者进行回顾性分析。结果①694例allo-HSCT患者中29例（4.2％）发生PTLD，其中男22例，女7例，中位年龄22（1～52）岁，中位发病时间为移植后2.1（0.8～20.6）个月。②单因素分析显示年龄<30岁、再生障碍性贫血、HLA配型不合、预处理方案中含有ATG、EBV再活化是PTLD发生的危险因素，多因素分析显示EBV再活化为PTLD发生的独立危险因素。③对于EBV再活化病例进一步分析发现PTLD组中位EBV-DNA载量峰值明显高于非PTLD组（P<0.001），且随EBV-DNA拷贝增高PTLD发生率有增高的趋势。ROC曲线分析提示当EBV-DNA载量>1.19×10⁶拷贝/ml时诊断PTLD的可能性较大（灵敏度为0.800，特异度为0.768）。④全部PTLD病例均接受以利妥昔单抗为基础的治疗，总反应率为86.2％，总生存率为54.3％。结论allo-HSCT后PTLD的发生与EBV再活化高度相关，EBV-DNA载量越高发生PTLD的风险越大，动态监测EBV-DNA载量对预测PTLD发生有重要作用。     

靶向CD33抗原三特异性T细胞衔接器的制备及对白血病细胞的作用研究

目的研究靶向CD33抗原双特异性及三特异性T细胞衔接器对T细胞增殖及其抗白血病作用。方法构建抗CD33scFv-抗CD3scFv的双特异性T细胞衔接器（CD33-BiTE）及在BiTE基础上加入CD80胞外段的三特异性T细胞衔接器（CD33-TriTE）表达载体，使用真核细胞表达系统表达蛋白并进行亲和层析纯化。检测CD33-BiTE及CD33-TriTE对T细胞活化增殖功能及对白血病细胞杀伤功能活性的影响。结果①成功构建了CD33-BiTE及CD33-TriTE表达载体，在真核细胞中表达，纯化得到的融合蛋白能与相同靶抗原流式抗体竞争结合于靶细胞表面。②CD33-BiTE及CD33-TriTE分别与人T细胞共培养12 d后，T细胞数扩增至基线值的（33.89±19.46）倍和（81.54±23.62）倍，CD33-TriTE促T细胞增殖能力明显优于CD33-BiTE（P<0.05）。③体外实验证实CD33-BiTE和CD33-TriTE均可增强T细胞对表达CD33白血病细胞的特异性杀伤作用，且在一定浓度范围内，浓度越高，抗体的杀伤作用越强。④与CD33-TriTE相比，CD33-BiTE杀伤白血病细胞的同时增加其PD-L1表达，而TriTE对过表达PD-L1的Molm13细胞具有更强的杀伤作用。结论该研究构建了CD33-BiTE及CD33-TriTE表达载体，并在真核细胞表达了融合蛋白，体外实验证实其促T细胞增殖活化的特性，并具有促T细胞抗白血病作用。其中CD33-TriTE较CD33-BiTE促增殖效果更强，且对PD-L1高表达的白血病细胞杀伤效果更强。     

典型和不典型免疫表型慢性淋巴细胞白血病遗传学和分子生物学特征研究

目的探讨典型和不典型免疫表型慢性淋巴细胞白血病（CLL）在免疫表型、遗传学及分子生物学方面的差异及遗传学异常与基因突变的相关性。方法依据英国马斯登皇家医院免疫分型积分系统对2014年11月至2021年5月期间南京医科大学第一附属医院收治的488例初诊CLL患者进行分类，其中积分4～5分为典型免疫表型CLL（tCLL）（382例），积分3分为不典型免疫表型CLL（aCLL）（106例）。采用多参数流式细胞术对所有CLL患者外周血标本进行免疫表型检测，荧光原位杂交（FISH）技术检测359例CLL患者的遗传学异常，二代测序（NGS）技术检测330例CLL患者基因突变情况。结果aCLL患者CD10、CD22、CD49d、CD81和FMC7阳性表达率显著高于tCLL患者（P值分别为0.020、<0.001、<0.001、0.027和<0.001），CD5、CD23、CD148和CD200的阳性表达率显著低于tCLL患者（P值分别为<0.001、0.017、0.041和<0.001）。aCLL患者+12阳性率显著高于tCLL患者（P<0.001），del（13q14）阳性率显著低于tCLL患者（P<0.001），同时aCLL患者NOTCH1突变发生率高于tCLL患者（P＝0.038），其余基因突变发生率在两组间的差异均无统计学意义（P值均>0.05）。生存分析显示，tCLL和aCLL患者总生存（OS）率与无治疗生存（TFS）率的差异无统计学意义（P值均>0.05）。结论tCLL与aCLL患者的抗原表达特征、细胞遗传学及体细胞突变均存在差异，有助于tCLL与aCLL的诊断和鉴别诊断。     

一个伴CEBPA基因突变的急性髓系白血病家系调查及临床分析

目的探讨伴CEBPA基因突变的家族性急性髓系白血病（AML）的临床特征、病因及转归，提高对家族性白血病的认识。方法调查一个伴CEBPA基因突变AML家系患者的发病年龄、临床特征、转归及预后并绘制家系谱。对先证者采集骨髓及口腔黏膜细胞，与先证者有血缘关系的亲属，采集外周血，通过基因测序技术检测基因突变。结果该家系共有10人诊断为AML，其中男4例，女6例，中位年龄9（3～48）岁。10例患者中，6例死亡，其中4例未进行治疗，1例患者化疗后生存3年复发死亡，1例采取中药及支持治疗生存2年后死亡。4例患者生存，1例接受化疗患者生存达15年，3例患者接受化疗联合造血干细胞移植，至随访截止，生存时间分别为6、9、28个月。对先证者及8名与先证者有血缘关系的亲属进行基因测序，发现5例存在胚系CEBPA TAD p.G36Afs*124突变，其中4例确诊为AML，1例随访至今未发病。结论伴CEBPA基因突变的家族性AML多在儿童及青壮年期发病，具有完全或接近完全的外显率，通过积极治疗，大多预后良好。     

TPMT、NUDT15基因多态性对成人急性淋巴细胞白血病患者6-巯基嘌呤耐受性的影响

目的探讨TPMT*2 rs1800462、TPMT*3B rs1800460、TPMT*3C rs1142345和NUDT15 rs116855232基因多态性对成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者6-巯基嘌呤（6-MP）耐受性的影响。方法选取2015年9月至2019年12月于中国医学科学院血液病医院确诊并接受环磷酰胺、阿糖胞苷和6-MP（CAM方案）治疗的216例成人ALL患者，利用Taqman SNP基因分型方法检测患者的TPMT、NUDT15基因型。结合临床资料，分析基因多态性对ALL治疗中含6-MP方案耐受性的影响。结果216例患者中B-ALL 185例（85.65％）、T-ALL 31例（14.35％）。TPMT*2 rs1800462 CC型216例（100.00％）；TPMT*3B rs1800460 CC型216例（100.00％）；TPMT*3C rs1142345 TT型209例（96.76％）、TC型7例（3.24％），等位基因突变频率为1.62％。NUDT15 rs116855232 CC型166例（76.85％）、CT型48例（22.22％）、TT型2例（0.93％），等位基因突变频率为12.04％。TPMT*3C rs1142345突变型组（TC+CC型）悬浮红细胞的输注量少于野生型组（CC型）（P＝0.036）；TPMT*3C rs1142345突变型组出现肝损害（天冬氨酸转氨酶升高）的风险高于野生型组（OR＝9.559, 95％CI 1.135～80.475, P＝0.038）。NUDT15 rs116855232突变型组（CT+TT型）WBC<1×10⁹/L和中性粒细胞绝对计数<0.5×10⁹/L的持续时间均长于野生型组（CC型）（P＝0.005，P＝0.007）；突变型组单采血小板的输注量多于野生型组（P＝0.014）。结论TMPT、NUDT15基因多态性可以影响成人ALL患者对6-MP的耐受性。治疗前检测患者基因型，进而优化6-MP使用剂量，有助于缩短骨髓抑制时间和减少血制品输注量。临床试验注册：中国临床试验注册中心（ChiCTR-TNC-09000397）     

伴弥漫大B细胞成分的初诊滤泡淋巴瘤患者的临床特征及生存

目的探索初诊伴弥漫大B细胞成分的滤泡淋巴瘤（FL）患者的临床特征及生存。方法纳入国内11个医学中心2000−2020年间分级1～3a级、年龄≥18岁初诊FL患者1 845例，筛选伴弥漫大B细胞成分的患者。回顾性分析患者的临床资料及生存数据，应用单因素及多因素分析筛选影响预后的因素。结果146例（7.9％）初诊FL患者病理伴弥漫大B细胞成分，中位年龄56（25～83）岁，男79例（54.1％）。127例患者病理提示弥漫大B细胞成分比例，依据弥漫大B细胞比例是否≥50％将患者分为2组。研究发现，弥漫大B细胞成分≥50％患者较弥漫大B细胞成分<50％患者有更高的3级比例（94.3％对91.9％，P＝0.010）、Ki-67指数≥70％比例（58.5％对32.9％，P＝0.013）及PET-CT的SUVmax≥13比例（72.4％对46.3％，P＝0.030）。所有患者均接受CHOP或CHOP样±利妥昔单抗方案化疗，总反应率（ORR）为88.2％，完全缓解（CR）率为76.4％。在不同比例弥漫大B细胞成分组中，诱导治疗后缓解率及治疗后2年内疾病进展（POD24）发生率的差异均无统计学意义（P值均>0.05）。总体预计5年无进展生存（PFS）率为58.9％，5年总生存（OS）率为90.4％，POD24患者的5年OS率较非POD24患者下降（70.3％对98.5％，P<0.001）。与利妥昔单抗不维持治疗相比，利妥昔单抗维持治疗不能使患者的5年PFS率获益（57.7％对58.8％，P＝0.543），5年OS率具有获益趋势，但差异无统计学意义（100％对87.8％，P＝0.082）。多因素分析显示，诱导治疗后未达到CR是影响患者PFS的独立危险因素（P＝0.006），而LDH高于正常值是影响患者OS的独立危险因素（P＝0.031）。结论伴弥漫大B细胞成分≥50％的FL患者，临床及病理特征更具侵袭性，CHOP/CHOP样±利妥昔单抗方案可以改善患者的临床疗效，利妥昔单抗维持治疗不能使患者的PFS和OS获益，诱导治疗后未达到CR是影响患者PFS的独立危险因素。     

中国浆细胞白血病的患病率调查: 基于全国2016年城镇医疗保险数据的测算

目的分析我国城市人口中浆细胞白血病（PCL）的流行病学特征，并测算2016年PCL患病率。方法利用我国23个省2016年1月1日至2016年12月31日的城镇基本医疗保险数据进行测算。利用医疗保险数据中的疾病诊断名称和疾病诊断编码识别PCL患者。按性别、地区和年龄进行亚组分析，并通过敏感性分析考察结果的稳健性。基于我国2010年全国人口普查数据计算按年龄调整的标准化患病率。结果2016年我国城市人口中PCL患病率为0.11/10万（95％CI 0.05～0.19），其中男性和女性患病率分别为0.12/10万（95％CI 0.06～0.21），0.10/10万（95％CI 0.04～0.19）。PCL的患病率在70～79岁时达高峰。敏感性分析显示本研究结果具有稳健性。根据我国2010年全国人口普查数据所得的标化患病率为0.12/10万（95％CI 0.11～0.13）。结论本研究首次利用全国城镇医疗保险数据测算我国PCL的患病率，为PCL相关研究和政策制定提供依据。     

急性髓系白血病融合基因表达特点分析

目的分析初诊急性髓系白血病（AML）患者融合基因表达情况，进一步探讨不同融合基因家族患者的免疫表型及基因突变的特点。方法回顾性分析2016至2020年4192例初诊AML患者的多重融合基因筛查结果，并结合免疫表型分析以及高通量测序所获得的基因突变筛查结果，系统地进行差异性分析。结果①4192例AML患者中1948例(46.47％)检出融合基因，共检出29种不同的融合基因，其阳性率呈现为“幂律分布”。②随着AML患者年龄增长，融合基因的阳性率先上升而后逐步下降。儿童患者融合基因总阳性率及MLL相关融合基因（MLL-FG）阳性率均显著高于成人患者（69.18％对44.76％，15.35％对8.36％）。③MLL-FG及NUP98相关融合基因（NUP98-FG）阳性患者伴随的基因突变均以FLT3及RAS信号通路相关基因为主。④MLL-FG及NUP98-FG阳性患者未见特异性的免疫表型特点。结论采用多重PCR方法分析，近半数的AML患者伴有特异的融合基因表达，儿童和成人患者融合基因阳性类型构成比例存在差异。不同融合基因阳性AML患者常见的分子突变、免疫表型有一定规律。     

系别不确定的造血细胞肿瘤病理诊断与鉴别诊断要点

目的探究系别不确定的造血细胞肿瘤髓外肿块病理诊断与鉴别诊断要点，并提出诊断的建议。方法选取较常见的5例系别不确定的造血细胞肿瘤，分别为髓系肉瘤、混合表型急性白血病，B/髓系、T淋巴母细胞淋巴瘤合并急性髓系白血病、急性未分化白血病合并皮肤成熟浆样树突细胞增殖及早期前驱T细胞急性淋巴细胞白血病，收集其形态学、免疫组化检测、流式细胞术结果，探究系别不确定的造血细胞肿瘤诊断中存在的问题及鉴别诊断。结果5个病例提示系别不确定的造血细胞肿瘤准确的病理诊断和分型需要：①基于系别特异性标志物；②系别不确定的造血细胞肿瘤细胞具有多向分化潜能，不同部位或不同时期肿瘤细胞分化方向有所不同，初诊及病情变化时需多次活检并全面标记各系相关标志物以协助诊断；③常规病理形态学及组织的免疫表型检测在诊断系别不确定的造血细胞肿瘤时存在局限性，需要结合形态学、流式细胞术检查等综合分析。结论系别不确定的造血细胞肿瘤来源于具有多向分化潜能的造血干细胞，肿瘤细胞分化存在多样性，需要结合细胞形态学、流式细胞术、病理检查、临床特征、分子遗传学等进行诊断。