结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变

目的 探讨结晶型硫化镍(NiS)对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响.方法 分别以0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2结晶型NiS处理人支气管上皮细胞系(16HBE)24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理72 h的正常细胞为阳性对照.应用免疫荧光法和SssI甲基转移酶法定性、定量分析结晶型NiS处理细胞和恶性转化细胞(NSTC)基因组DNA总体甲基化的变化.结果 结晶型NiS处理细胞DNA甲基化免疫荧光的强度均有不同程度降低,转化细胞DNA甲基化免疫荧光的强度明显降低.定量分析结果显示,对照组基因组总体甲基化率(mCpG%)为(81.9±7.3)%,0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2的结晶型NiS处理3次的细胞(NiS0.25、NiS0.50、NiS1.00、NiS2.00)基因组总体mCpG%则分别为(77.9±6.2)%、(75.3±6.8)%、(59.5±4.9)%、(67.4±5.1)%.经单因素方差分析显示,不同组间总体mCpG%差异有统计学意义(F=124.95,P＜0.01),两两比较发现NiS1.00和NiS2.00组与对照组相比,差异均有统计学意义(t值分别为7.64、4.89,P值均＜0.01);恶性转化细胞(NSTC1、NSTC2)基因组总体mCpG%分别为(46.2 ±4.1)%、(43.6±4.3)%,低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为12.79、13.56,P值均＜0.01).结论 结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,整体基因组DNA甲基化水平降低.     

结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变

Objective To observe the effect of crystalline NiS on genome DNA methylation profile in in vitro cultured cells.Methods 16HBE Cells were treated with crystalline NiS at 0.25,0.50,1.00 and 2.00 μg/cm2 for 24 h and three times at total.DAC treatment was given at 3 μmol/L for 72 h.5-mC immunofluorescence and SssI emthyltrasferase assay methods were applied to investigate if the hypomethylation of genome DNA involved.Results The results of 5-mC immunofluorescence showed that the fluorescence intensity of NiS-treated cells were decreased in some degree, and transformed cells were decreased dramatically.By the SssI methylase assay, an average of (81.9 ± 7.3 )% methylated CpG were found in negative control cells.By contrast, ( 77.9 ± 6.2) %, ( 75.3 ± 6.8 ) %, ( 59.5 ± 4.9 ) %, ( 67.4 ±5.1 ) % methylated CpG were observed in cells treated with NiS for three times at dosage of 0.25,0.50,1.00and 2.00 μg/cm2 which were abbreviated as NiS0.25, NiS0.50, NiS1.00, NiS2.00 respectively.The ANOVA analysis results showed that there was a significant difference in the 5 groups above ( F = 124.95,P ＜0.01 ).The results of Dunnett-t test showed that the methylated CpG of both group NiS1.00 and NiS2.00were significantly decreased compared with the negative control group(t values were 7.64,4.89 respectively,P ＜0.01 ).For methylated CpG, (46.2 ±4.1 ) % and (43.6% ±4.3)% were observed in NiS-transformed cells (NSTC1 and NSTC2) which were dramatically decreased compared with the negative control group(t values were 12.79,13.56 respectively, P ＜ 0.01 ).Conclusion Genomic DNA methylation levels were decreased during NiS induced malignant transformation.     

结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变

Objective To observe the effect of crystalline NiS on genome DNA methylation profile in in vitro cultured cells.Methods 16HBE Cells were treated with crystalline NiS at 0.25,0.50,1.00 and 2.00 μg/cm2 for 24 h and three times at total.DAC treatment was given at 3 μmol/L for 72 h.5-mC immunofluorescence and SssI emthyltrasferase assay methods were applied to investigate if the hypomethylation of genome DNA involved.Results The results of 5-mC immunofluorescence showed that the fluorescence intensity of NiS-treated cells were decreased in some degree, and transformed cells were decreased dramatically.By the SssI methylase assay, an average of (81.9 ± 7.3 )% methylated CpG were found in negative control cells.By contrast, ( 77.9 ± 6.2) %, ( 75.3 ± 6.8 ) %, ( 59.5 ± 4.9 ) %, ( 67.4 ±5.1 ) % methylated CpG were observed in cells treated with NiS for three times at dosage of 0.25,0.50,1.00and 2.00 μg/cm2 which were abbreviated as NiS0.25, NiS0.50, NiS1.00, NiS2.00 respectively.The ANOVA analysis results showed that there was a significant difference in the 5 groups above ( F = 124.95,P ＜0.01 ).The results of Dunnett-t test showed that the methylated CpG of both group NiS1.00 and NiS2.00were significantly decreased compared with the negative control group(t values were 7.64,4.89 respectively,P ＜0.01 ).For methylated CpG, (46.2 ±4.1 ) % and (43.6% ±4.3)% were observed in NiS-transformed cells (NSTC1 and NSTC2) which were dramatically decreased compared with the negative control group(t values were 12.79,13.56 respectively, P ＜ 0.01 ).Conclusion Genomic DNA methylation levels were decreased during NiS induced malignant transformation.     

硫化镍对支气管上皮细胞中磷酸化细胞外信号调节蛋白表达的影响

目的通过结晶硫化镍在支气管上皮细胞(16HBE)中磷酸化细胞外信号调节蛋白(P-ERK1)的表达,探讨镍致癌的分子机制。方法用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹杂交(W estern b lot)法检测16HBE细胞中P-ERK1的表达。结果硫化镍不能明显激活P-ERK1的表达,染镍组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论镍不能激活P-ERK1的表达,其机制尚不清楚,硫化镍有可能激活P38和JNK通路,从而直接或间接发挥致癌作用。     

硫化镍转化人细胞翻译启动因子的异常表达

目的探讨结晶型硫化镍(NiS)在诱发人支气管上皮细胞(16HBE)恶变过程中蛋白质翻译启动因子(TIF3)的异常表达，以阐明不容性硫化镍的人类分子致癌机制。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，以及敏感先进的荧光定量PCR方法，对异常表达的蛋白质翻译启动因子TIF进行检测。结果相对于非转化对照细胞，RT-PCR实验初步显示，这些镍转化细胞和成瘤细胞的TIF3基因表达水平显著升高，平均分别是对照细胞的2和4倍，表明TIF3的异常表达水平与硫化镍诱发人支气管上皮细胞的恶变程度有关。结论不容性结晶型硫化镍在诱发人支气管上皮细胞恶变过程中，存在明显的蛋白质翻译启动因子TIF3异常表达现象，其表达水平与细胞的恶变程度密切相关，可能是结晶型硫化镍诱发人细胞肿瘤的重要分子致癌机制之一。     

谷胱甘肽过氧化物酶1和硫氧还蛋白还原酶2遗传变异与胃癌易感性的相关性

目的 探讨谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)第198位氨基酸Pro→Leu和硫氧还蛋白还原酶2(TXNRD2)第370位氨基酸Lys→Arg遗传变异单独或联合与胃癌易感性的关系.方法 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法,检测361例胃癌患者和363例无肿瘤正常对照的基因型,用logistic多因素分析计算各基因型以及基因-基因交互作用与胃癌易感性的相关性.结果 GPXl 198Pro→Leu和TXNRD2 370Lys→Arg变异单独与胃癌易感性无关.但GPX1和TXNR2基因型存在基因一基因交互作用,携带GPX1 198Pro/Pro和TXNRD2 370Arg/Arg这种保护基因型者患胃癌的风险比携带其他危险基因型者低62%(OR=0.38,95%C/:0.26～0.55,P＜0.001).结论 GPX1198Pro→Leu和TXNRD2 370Lys→Arg基因型可能与胃癌的易感性相关.     

硫氧还蛋白还原酶2基因抗砷作用

目的 研究硫氧还蛋白还原酶2(thioredoxin reductase,TrxR2)基因在抗砷细胞(As-ECV304)中的抗砷作用.方法 蛋白印迹法(Western Blot)检测As-ECV304和对照组细胞TrxR2蛋白水平,流式细胞仪检测细胞周期分布,化学合成TrxR2基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染As-ECV304细胞,Western Blot验证干扰效率,细胞急性毒性试验检测细胞抗砷性的改变.结果 As-ECV304细胞中TrxR2蛋白水平较对照组细胞高,As-ECV304细胞G0/G1期细胞所占比例高于对照细胞.3个siRNA中有一个能特异性抑制TrxR2基因表达,干扰组细胞的生存率低于阴性对照组和未干扰组,3组细胞的半数抑制率IC50>分别为9.13,15.88和18.52 μmol/L.结论 siRNA干扰TrxR2基因表达后能明显降低抗砷细胞的抗砷性,提示该基因在细胞抗砷机制中发挥了重要作用.     

双向电泳分析结晶型NiS诱发人支气管上皮细胞恶变后的蛋白表达差异

[目的]建立双向凝胶电泳分析方法，比较结晶型NiS诱发入支气管上皮细胞恶变后的蛋白表达差异。[方法]采用一步法分别提取人支气管上皮细胞系16HBE细胞和结晶型NiS诱发该细胞系的恶性转化细胞N-2细胞的可溶性总蛋白，经双向凝胶电泳分离、银染显色、用双向电泳凝胶图像分析软件ImageMaster2D3．10分析两者之间可溶性蛋白的差异表达。[结果]获得了分辨率和重复性较好的双向电泳银染图谱。图像分析显示在恶性转化细胞中检测到19个新的蛋白点，同时有47个蛋白点消失，有140个蛋白点在两种细胞中表达量有显著差异，其中89个蛋白点在N-2细胞中表达升高，51个蛋白点在N-2细胞中表达降低。[结论]双向电泳技术分析NiS诱发细胞恶性转化后蛋白质组发生了变化，这将为镍致癌相关的蛋白的研究和鉴定奠定基础。     

高碘对大鼠胸主动脉平滑肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨不同浓度碘对体外培养大鼠胸主动脉平滑肌(A7r5)细胞的凋亡及凋亡相关蛋白硫氧还原蛋白1(TRX-1)和凋亡信号调节激酶1(ASK-1)表达的影响。方法将处于对数生长期的细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、750、1 500、3 750、6 000、7 500 mg/L的含碘化钾培养液中培养24 h。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,采用蛋白杂交(Western-blot)法检测A7r5细胞内TRX-1和ASK-1蛋白的表达水平。结果与对照组相比,碘化钾暴露浓度为6 000~7 500 mg/L时,A7r5细胞的存活率均降低,差异均有统计学意义(P0.01);且A7r5细胞的存活率随着碘化钾暴露浓度的升高而下降。与对照组相比,不同浓度碘化钾暴露A7r5细胞内的TRX-1蛋白表达水平较低,ASK-1蛋白表达水平较高,差异均有统计学意义(P0.01);且随着碘化钾暴露浓度的升高,A7r5细胞内的TRX-1蛋白表达水平呈下降趋势,ASK-1蛋白的表达水平呈上升趋势。结论高浓度碘暴露可引起大鼠胸主动脉平滑肌细胞活性的下降,减弱抑凋亡蛋白TRX-1的表达,增强促凋亡蛋白ASK-1的表达,从而诱导大鼠胸主动脉平滑肌的凋亡。     

氧化损伤相关基因表达在镍致细胞转化中作用

目的 探讨氧化损伤相关基因硫氧还蛋白(TRX)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在镍致癌过程中作用。方法 采用Ni₂O₃分别处理人胚肺成纤维细胞(WI-38)24,48和72 h。通过RT-PCR的方法检测TRX、HIF-1和VEGF基因mRNA的表达。结果 Ni₂O₃处理24 h后,各浓度组(5,10和15μg/ml)VEGF基因mRNA表达((0.76±0.04),(0.78±0.06)和(0.69±0.01)(log cDNA/logβ-actin))均较对照组(0.58±0.02)上升(P<0.05)。48和72 h处理结果也较对照组升高。Ni₂O₃处理72 h后,各浓度组TRX基因mRNA表达((0.36±0.15),(0.31±0.07)和(0.31±0.02))均较对照组(1.06±0.09)下降(P<0.05)。5和10μg/ml Ni₂O₃组在作用48h后HIF-1基因mRNA表达水平((1.01±0.04)和(0.82±0.12))显著高于对照组((0.47±0.02),(P<0.05)),72 h后开始下降((0.66±0.10)和(0.69±0.13));15μg/ml Ni₂O₃组(处理24,48和72 h)与对照组比较,差异无统计学意义。结论 TRX、HIF-1和VEGF等与氧化损伤相关基因表达的改变可能在镍诱导细胞转化过程中起重要作用。     

煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞中心体及其调控蛋白的变化

目的 分析煤焦沥青烟提取物诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B恶变过程中细胞内中心体及其调控蛋白的变化,探讨中心体在煤焦沥青烟提取物致肺癌中的作用及机制.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B的恶性转化模型,作为煤焦沥青烟提取物染毒组(煤焦沥青组),设溶剂对照组和正常对照组平行传代培养,用细胞爬片间接免疫荧光法检测中心体改变,用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测相关基因的mRNA表达;细胞爬片免疫组化半定量法检测相关蛋白表达.结果 煤焦沥青组第20代细胞中心体总异常率为6.56％±1.01％,明显高于正常对照组(3.40％±0.86％)和溶剂对照组(3.14％±0.59％),差异有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组(4.34％±1.04％)和溶剂对照组(4.33％±1.20％)比较,煤焦沥青组第30代细胞中心体总异常比例(22.39％±9.5％)明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05).煤焦沥青组第20、30代细胞的P53、P21基因和蛋白表达明显降低,Cyclin E基因和蛋白表达明显升高,与正常对照组相和溶剂对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中,中心体异常出现在细胞恶性改变前.中心体异常可能是通过P53/P2 1/CyclinE通路异常而引起.     

煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞端粒蛋白的变化

目的 通过检测端粒保卫蛋白复合体中端粒保卫蛋白1 (POT1)、端粒重复序列结合因子1(TRF1)和TRF2在煤焦沥青烟致永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)癌变细胞中的表达变化,探讨其在煤焦沥青烟致肺癌发生中的作用。方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立BEAS-2B的恶性转化模型,用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测POT1、TRF1和TRF2基因mRNA表达水平;细胞爬片免疫组化半定量法检测其蛋白表达改变。结果 BEAS-2B恶性转化细胞POT1和TRF1基因mRNA表达水平（分别为：0.63-0.04,0.36-0.01）和蛋白表达水平(分别为：0.36±0.05,0.09±0.03)均下调,与正常对照组(mRNA：POT1：1.00±0.04,TRF1：1.01±0.16;蛋白：POT1:0.55±0.07,TRF1：0.27±0.07)和二甲亚砜溶剂对照组(mRNA:POT1:0.89±0.12,TRF1：0.90±0.08;蛋白：POT1:0.55±0.10,TRF1:0.26±0.04)相比,差异均有统计学意义(P＜0.05)。BEAS-2B恶性转化细胞TRF2基因mRNA表达水平( 1.45±0.07)和蛋白表达水平(0.88±0.06)均上调,与正常对照组(mRNA:1.00±0.07,蛋白：0.48±0.06)和二甲亚砜溶剂对照组（mRNA:1.00±0.06,蛋白：0.50±0.06）相比,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 在煤焦沥青烟致支气管上皮细胞恶性演化过程中,POT1、TRF1和TRF2基因和蛋白表达水平发生变化。     

氯化镉诱发人支气管上皮细胞系恶性转化

目的研究氯化镉诱发SV40 LargeT抗原永生化的人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化作用。方法体外用不同浓度氯化镉多次处理16HBE细胞,软琼脂集落形成和裸鼠成瘤试验鉴定转化细胞的恶性度。结果细胞培养至35代,发现氯化镉可诱导16HBE恶性转化。转化细胞排列紊乱、重叠生长,在软琼脂中的集落形成率显著高于对照组(P<0.01),并呈时间—剂量依赖关系;转化细胞在裸鼠体内成瘤,组织学证实为低分化鳞状细胞癌。结论氯化镉有较强的诱导16HBE恶性转化能力;该转化模型为镉致癌机制的分子水平提供了理想的研究系统。     

癌基因高表达人上皮细胞转化模型的构建及应用

目的 构建癌基因高表达人支气管上皮细胞模型并应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的检测.方法 在永生化人支气管上皮细胞株16HBE中依次导入人端粒酶催化亚基(hTERT)、癌基因H-RasV12或c-Myc或空白载体,构建细胞株16HBETR、16HBETM和16HBETV.检测所构建细胞株的生物学特性如细胞形态、细胞生长、染色体畸变等指标.用已知致癌物硫酸镍(NiSO4)和二氢二醇环氧苯并(a)芘(BPDE)多次染毒,利用软琼脂试验及荷瘤试验检测化学物诱导细胞转化的活性.结果 经过端粒酶活性测定以及蛋白印迹验证上述转基因16HBE细胞株均构建成功.癌基因H-Ras和c-Myc的表达分别使细胞的增殖加速30.3%和10.4%,但是细胞染色体的畸变率没有发生改变.癌基因高表达细胞株只在软琼脂中形成少数背景克隆,但不能在裸鼠皮下形成肿瘤.BPDE诱导16HBETR、16HBETM细胞发生恶性转化的间期分别为5周、11周,比对照组细胞16HBETV的20周分别提前了15周和9周;而硫酸镍诱导16HBETR、16HBETM细胞转化的间期分别为11周、14周.比对照组细胞的32周分别提前了21周和18周.结论 癌基因高表达的细胞转化模型可大大缩短试验间期,有望应用于环境致癌物的筛查及化学致癌机制的研究.     

细胞体外恶性转化过程中差异甲基化基因的筛选

目的 筛选细胞体外恶性转化过程中差异甲基化基因,为毒作用效应以及肿瘤化学预防、生物监测寻找潜在的表观遗传生物标志物.方法 利用苯并[a]芘[B(a)P]诱导水生化人支气管上皮细胞(HBER)转化模型和猿猴空泡病毒小T抗原(SV40 ST)诱导HBER转化模型,采用甲基化DNA免疫沉淀-全基因组扩增法富集基因组甲基化DNA,应用甲基化芯片技术和信息学分析方法,寻找不同作用因素诱导细胞转化的共同差异甲基化基因,通过RT-PCR法检测这些基因在B(a)P诱导HBER细胞转化过程中mRNA表达水平的变化.结果 芯片检测发现,HBER、染毒后末转化细胞株(HBERNT)和转化细胞株(HBERT)中甲基化基因的数目分别为733、661、738个,83个基因在染毒前呈非甲基化状态,而在转化前和转化后呈甲基化状态,在这83个基因中,有25个基因在SV40ST诱导HBER转化细胞株(HBERST)中同样发生高甲基化.其中,序列相似性家族178A(family with sequence similarity 178,member A,FAM178A)、视黄酸受体应答子(他扎罗汀诱导)[retinoic acid receptor responder(tazarotene induced),RARRES1]、泛素特异性肽酶28(ubiquitin specific peptidase 28,USP28)、Scm-like with four mbt domains 2(SFMBT2)、序列相似性家族59A(family with sequence similarity 59,member A,FAM59A)和核受体亚家族4组A3(nuclear receptor subfamily 4,group A,member 3,NR4A3)等6个基因在B(a)P诱导HBER细胞转化过程中mRNA表达水平下降.结论 细胞体外转化过程中筛查出来的特定基因高甲基化,可能成为化学毒物暴露监测及肿瘤预测的生物标志物.

Abstract：

Objective To explore potential epigenetic biomarkers for toxic effects, tumor-related chemical prevention and biological monitor by a genome-wide screening for differential DNA methylation during human cell malignant transformation in vitro. Methods The two in vitro cell transformation models included B( a)P-induced human bronchial epithelial cell introduced by H-Ras (HBER) cell transformation and simian vacuolating virus 40 small T antigen induced (SV40 ST-induced ) HBER cell transformation. Methylated genes were collected by methylated DNA immunoprecipitation and whole genome amplification (MeDIP-WGA) at three time points during cell transformation which represented different transformation stage. Then, CpG island microarray was used to screen differentially methylated genes. The mRN A levels of hypermethylated genes were also observed by RT-PCR. Results The CpG island microarray showed that the number of hypermethylated genes in HBER,HBERNT,HBERT cells were 733,661 and 738 respectively. 83 genes were hypermethylated in pre-transformed cell and transformed cell. Moreover, 25 of 83 genes were also hypermethylated in SV40 ST-transformed cell (HBERST). We further confirmed that the mRNA expression of six of these 25 genes, namely family with sequence similarity 178, member A ( FAM178A ), retinoic acid receptor responder ( tazarotene induced ) ( RARRES1 ), ubiquitin specific peptidase 28 (USP28) ,Scm-like with four mbt domains 2 (SFMBT2), family with sequence similarity 59,member A(FAM59A) and nuclear receptor subfamily 4 ,group A,member 3 (NR4A3) were supressed during B(a) P-induced transformation. Conclusion The abnormal hypermethylation of specific genes was a common event in the two kinds of human cell transformation models, which shed light on the study for chemical exposure monitor and tumor-related epigenetic biomarkers.     

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化研究

目的 研究潜在致癌化学物甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱发人支气管上皮细胞恶性转化的作用.方法 分别采用1、2、4、8μg/ml浓度的GMA多次处理人支气管上皮细胞(16HBE),连续动态地观察细胞形态学的改变,通过刀豆凝集素A(conA)试验、软琼脂集落形成试验、电镜扫描和裸鼠体内致瘤性试验观察细胞的恶性转化表型,并运用免疫化学方法对细胞和肿瘤组织来源特性进行鉴定.试验同时设二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组和三甲基胆蒽(MCA)阳性对照组.结果 1～8 μg/ml浓度范围的GMA多次攻击可使16HBE细胞发生恶性转化,转化率随染毒剂量的增加而升高,其中8μg/ml染毒组的转化率(8.48×10-6)与对照组(4.5×10-7)相比差异有统计学意义(P<0.01).转化细胞失去接触抑制呈交错重叠生长并能在软琼脂上形成集落,各剂量组的集落形成率随染毒剂量的增加而升高,其中2、4、8μg/ml染毒组的集落形成率分别为1.20‰、2.35‰和5.70‰,与溶剂对照组(0.30‰)相比差异有统计学意义(P<0.01).转化细胞对conA的凝集敏感性增加,扫描电镜下细胞表面微绒毛增多、变粗、变长.将转化细胞接种于裸鼠皮下可形成肿块,经病理组织学检查诊断为鳞状上皮细胞癌.16HBE细胞和肿块组织经免疫组织化学检测角蛋白呈阳性表达.结论GMA可在体外诱发16HBE细胞发生恶性转化.     

2型糖尿病患者血清视黄醇结合蛋白4水平及相关影响因素的研究

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)的变化及其相关影响因素.方法 根据体重指数(BMI)将80例T2DM患者分为肥胖T2DM组(BMI≥25 k/m~2)、非肥胖T2DM组(BMI<25 kg/m~2),将30例正常体重非糖尿病者设为对照组.检测其空腹血清脂联素(APN)、RBP4、胰岛素(FINS)水平,同时测定空腹血糖(FBG)、身高、体重、腰围、臀围、糖化血红蛋白(HbA_1c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),计算BMI、腰臀比(WHR)和稳态模式评估法胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).分析各组问RBP4水平的变化,并与上述其他指标进行相关分析.结果 RBP4在肥胖T2DM组和非肥胖T2DM组中显著高于对照组[分别为(30.02±5.32)、(20.10±5.45)、(12.02±3.45)mg/L](P<0.01),在肥胖T2DM组显著高于非肥胖T2DM组(P<0.01).单因素相关分析显示RBP4与TG、BMI、FBG、WHR、FINS、HOMA-IR呈正相关,与APN呈负相关(相关系数分别为0.225、0.697、0.323、0.557、0.272、0.461、-0.398).结论 血清RBP4在T2DM患者中显著升高,RBP4可能在胰岛素抵抗及T2DM的发生、发展过程中起了重要的作用.     

硫酸镍与亚砷酸钠联合致叙利亚地鼠胚胎细胞转化作用的实验研究

目的　探讨砷在镍冶炼工肺癌病因中的作用。方法　采用细胞灶法观察硫酸镍与亚砷酸钠联合致叙利亚地鼠胚胎 (SHE)细胞的形态学转化作用。结果　硫酸镍、亚砷酸钠及硫酸镍与亚砷酸钠联合染毒三个组均有细胞转化灶形成 ,其形成率均呈现剂量依赖关系。刀豆球蛋白A凝集试验进一步验证了细胞转化结果。联合作用分析显示 ,硫酸镍为 2 .5 μg/ml,亚砷酸钠分别为 0 .12 5、0 .2 5 0、0 .5 0 0和 1.0 0 0 μg/ml,两化合物联合作用转化率实测值分别为 1.44 %、2 .34 %、3.30 %和3.94% ,而预期转化率分别为 1.78%、2 .2 2 %、3.38%和 3.37%。说明在等剂量原则下 ,硫酸镍、亚砷酸钠单独染毒的转化细胞灶形成率之和与两化合物同时染毒的转化细胞灶形成率非常接近 ;析因分析未见两者间有交互作用 (P =0 .6 16 )。结论　Ni2 、As3 具有细胞转化活性 ,二者联合呈相加作用。