小鼠腹水型肝癌肺转移亚株与淋巴结转移亚株若干生物学特性的比较

本实验用小鼠腹水型肝癌(Hca) 分别经腹水→足垫→淋巴结→腹水……,与腹水→尾静脉→肺→腹水……循环传代10次,得到淋巴结筛选型(HcaSL_(10))和肺筛选型(HcaSP_(10))。将两者均分别向足垫和尾静脉注射,观察各自的淋巴结转移率和肺转移率。发现HcaSL_(10)淋巴结转移率明显高于HcaSP_(10);HcaSP_(10)肺转移率明显高于HcaSP_(10)并对两者进行了细胞形态学,细胞电泳率,促血小板聚集能力等方面的比较。其结果提示HcaSL_(10)与HcaSP_(10)细胞性质存在着差异。     

HGPRT缺陷型小鼠肝癌低淋巴道转移细胞的筛选

自细胞融合技术问世以来，已被广泛用于研究肿瘤细胞的恶性表型的表达与调控。这一技术的关键步骤是建立一个次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（ＨＧＰＲＴ）缺陷型并保持亲代特征的细胞系，这样才可以用ＨＡＴ培养液选择杂交瘤细胞。本文采用浓度梯度递增法从小鼠肝癌低淋巴道转移细胞ＨＣａ－Ｐ中选出８－氮鸟嘌呤（８－Ａｇ）抗性细胞，该细胞既对ＨＡＴ敏感又保持低淋巴道转移特征。     

汉族人肾透明细胞癌肺转移小鼠模型的建立及肺转移细胞亚株的筛选

目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础。方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-SCID小鼠颈背部皮下,成瘤后取出瘤组织接种于另外NOD-SCID小鼠的肾包膜下,待有肉眼可见瘤块后,处死小鼠并取出肿瘤组织接种于新NOD-SCID小鼠的肾包膜下,反复数轮,直至出现稳定的鼠肺转移模型。此时取模型鼠肺转移组织,一部分继续接种于新鼠肾包膜下,反复数轮,尝试以转移组织诱导肺转移;另一部分进行原代培养,细胞经体外扩增纯化后制成悬液接种于新鼠肾包膜,数轮循环至产生肺转移,筛选能产生稳定鼠肺转移的细胞亚株。整个筛选过程均观察记录原位成瘤、淋巴及肺转移形成情况,并对肿瘤组织进行病理组织学观察及CA9（肾癌标志）、CD133（干细胞标志）表达检测。结果:以RCC05-TXJ细胞株接种所致NOD-SCID小鼠颈背部皮下肿瘤组织作为移植瘤材接种鼠肾包膜在第2轮即出现鼠肺转移,此后3~6轮以鼠肺转移组织移植肾包膜下,均能成功诱导转移。以鼠肺转移组织原代培养RCC细胞均获成功,第6轮原代培养细胞扩增纯化后制成的细胞悬液（RCC05-TXJ-L）接种于鼠肾包膜下,出现特异性肺转移,重复2轮实验结果稳定。RCC05-TXJ-L细胞具有生长速度快（传代时间约为2 d）、原位成瘤时间短（1周左右）、接种后转移性较强、CA9及CD133表达升高等特点。结论:RCC05-TXJ在NOD-SCID小鼠体内多轮反复筛选可建立稳定的肾细胞癌鼠肺转移动物模型;在此基础上筛选出的肺转移性细胞亚株RCC05-TXJ-L可稳定诱导NOD-SCID鼠产生肺部转移。     

不同转移倾向肿瘤亚株细胞内的微核观察

为了探讨恶性肿瘤转移与微核现象间的关系,本实验首次运用微核试验(MT)检测了小鼠腹水型肝癌(N_(22))及其肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))、淋巴结转移倾向亚株(N_(22)SL_(10))。小鼠子宫颈癌(U_(14))及其肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))瘤细胞内的微核。比较了经活体筛选的上述亚株与未经筛选的原瘤株的微核细胞率(MNF)、总微核率,结果上述两项指标H_(22)SP_(10)及H_(22)SL_(10)均显著高于H_(22)(P值分别为<0.002、<0.005;<0.005、<0.001);U_(14)AP_(11)也显著高于U_(14)(P分别为<0.001、<0.001),而H_(22)SL_(10)与H_(22)SP_(10)(P>0.05、>0.05)。它表明在异质性N_(22)及U_(14)细胞群体中具有器官倾向性转移的细胞染色体畸变较重,可能为肿瘤演进的结果。     

两株转移能力不同的小鼠腹水型肝癌细胞免疫原性的比较研究

CFW系小鼠经β-榄香烯和丝裂霉素C处理的H_(22)/F_(23)瘤细胞腹腔免疫三次,末次免疫后两周分剐用H_(22)/F_0和H_(22)/F_(23)交叉进行攻击。实验结果表明:β-榄香烯及MMC瘤苗均能诱导不同程度的免疫保护效应,并以MMC瘤苗效果更佳。两种方法处理的H_(22)/F_(23)瘤苗免疫对H_(22)/F_(23)攻击的保护效应显著低于对H_(22)/F_0的保护效应,提示高淋巴道转移株H_(22)/F_(23)细胞的免疫原性较低。初步讨论了H_(22)/F_(23)免疫原性的改变与其转移能力增高的可能关系。     

615小鼠可移植性乳癌Ca761不同途径转移能力初步探讨

本文将第215代Ca761脚掌移植的同一小鼠所产生的腘窝或腹股沟淋巴结与肺转移瘤分别移植于两组健康小鼠脚掌,同时取第215代Ca761腋部皮下移植的肺转移瘤移植于第三组健康小鼠,如此循环5代以上,获得Ca761-FL、Ca761-FP、Ca76l-AP三个亚株。对照实验表明:淋巴结转移率,Ca761-FL高于Ca761-FP。肺转移率,Ca761-FP高于Ca761-FL。结果显示Ca761肿瘤细胞向淋巴道与血道转移途径的选择与瘤细胞本身生物学性质有关。此外,Ca761-AP_7脚掌移植组淋巴结转移高于Ca761-AP_7腋下移植组,提示移植部位对转移途径的选择有影响。本实验早期及晚期带瘤小鼠的肺和淋巴结转移灶可同时或单独出现,提示瘤细胞可自移植部位分别进入淋巴道或血道。转移早期,肺转移为肺泡间隔型和胸膜下型的微小病灶;晚期,肺泡间隔型和胸膜下型的病灶增大,并出现支气管肺动脉支周围转移灶。提示经血道到肺的转移瘤也可穿出肺泡壁毛细血管进入淋巴循环。     

颈淋巴结转移瘤的临床病理学分析

目的：分析颈淋巴结转移瘤的病理学特点，为判断颈淋巴结起源未明转移瘤（metastasis of unknownorigin，MUO）的可能原发部位提供参考性诊断思路。方法：对275例颈淋巴结转移瘤病人的临床资料进行一般性分析，对其中235例已知原发瘤部位病人的颈淋巴结侧住、转移瘤的组织学类型与原发瘤部位进行相关性分析。结果：（1）男性MUO率（19．01％）显著高于女性（9．77％）（P〈0．05）。（2）男、女性病人年龄分布均较广泛。（3）Ⅰ～Ⅴ组颈淋巴结转移瘤所在区域与其原发器官淋巴引流区基本相符，而Ⅵ组转移瘤的原发部位除一些常见部位（如肺、乳腺、甲状腺、肾、上消化道）外，还可来自腹、盆腔等远处引流区域且转移至左侧显著多于右侧（P〈0．01）。（4）男性有4个组织学类型，依次为鳞癌、腺癌、未分化癌、髓样癌，相对应的原发瘤部位有16个，女性除上述类型外，还有黑色素瘤共5个组织学类型，相对应的原发瘤部位有15个。结论：颈淋巴结转移瘤的原发部位十分复杂，在寻找其原发部位时除要想到每一区域淋巴结回流的常见部位，任何其他可能的原发灶位置也必须系统地回顾，尤其对左锁骨上淋巴结转移瘤。     

带瘤小鼠血浆和红细胞中cAMP含量的研究

本研究用昆明种小白鼠60只,随机分为两组,实验组经腹腔接种 Erh-lish腹水癌悬液0.2ml,对照组经腹腔注射生理盐水0.2ml,两组动物于实验开始后第5天、第8天和第12天分三批平行处理进行检查。结果表明:实验组小鼠体重逐渐减轻;腹水量进行性增多,在肿瘤生长的晚期为血性腹水;实验后第8天的带瘤小鼠红细胞中 cAMP 含量增高,实验后第12天的带瘤小鼠血浆和红细胞中 cAMP 含量则降低。     

小鼠子宫颈癌转移模型及形态学研究

小鼠子宫颈癌(U_(14))移植于成年鼠。新生鼠的背部及爪垫皮下、腹腔。分别于第12h～38d处死行组织学及电镜检查。结果:(1)新生鼠皮下组在移植后第12h已见淋巴管中癌细胞栓,第42h肺泡壁毛细血管中见癌细胞栓,第2～3d肺组织已见明显的癌转移。提示新生鼠皮下移植是癌转移最迅速的动物模型。(2)癌在新生鼠皮下组织侵袭过程中未见明显潜伏期。(3)宿主年龄是癌浸润与转移的重要因素。(4)针吸细胞学检查对腹水癌病例并不安全。     

不同免疫缺陷小鼠巨噬细胞功能的初步研究

本文着重检测了不同免疫缺陷的纯合子615-nu、615-bg、615-nu/bg、Ba1b/c-nu和表现型正常的杂合子615/PBI小鼠的巨噬细胞细胞毒活性、吞噬功能,并与它们的NK细胞活性和T、B细胞功能进行了对比分析。实验结果表明:这些不同免疫缺陷的615小鼠其相应的免疫缺陷的性质是确定的。615-nu、615-nu/bg、Ba1b/c-nu的巨噬细胞毒活性与615/PBI无明显差别,但吞噬指数较正常升高,而615-bg的巨噬细胞细胞毒活性和吞噬功能则都显著低于615/PBI的。     

EXPERIMENTAL STUDY OF INFLAMMATORY AND METASTATIC LYMPH NODES WITH DIFFUSION WEIGHTED IMAGING ON ANIMAL MODEL： COMPARISON WITH CONVENTIONAL METHODS

Objective To investigate the feasibility of magnetic resonance （MR） diffusion weighted imaging （DWI） in discriminating inflammatory from VX2 carcinoma metastatic lymph nodes in rabbit model.
Methods Twenty New Zealand white rabbits were randomly divided into 2 groups. Complete Freund＇s adjuvant was injected into the bilateral dorsal footpads to set up ipsilateral lymphadenitis model （n = 10）, and the other 10 rabbits received a subcutaneous implantation of VX2 tumor cell suspension （1.5×10^7 cells/mL） in both thighs to set up metastatic lymph node model. MR imaging scan covering the popliteal fossa and lilac fossa including short time inversion recovery echo-planar imaging DWI （STIR-EPI-DWI）, Tl-weighted imaging （T1WI） and T2-weighted imaging （T2WI） was performed 2 weeks after injection. T2WI signal intensity （SI）, DWI SI, long/short axial ratio （LSR） and apparent diffusion coefficient （ADC） values of the lymph nodes were evaluated in all cases. Right after MR imaging scan, popliteal and iliac fossa lymph nodes were collected for hematoxylin-eosin staining.
Results Totally 33 lymph nodes larger than 5 turn, including 22 inflammatory and 11 metastatic ones, were successfully isolated and taken into pathological analysis. LSR showed no significant difference between the inflammatory and malignant lymph nodes （P 〉 0.05）. Both benign and malignant lymph nodes appeared iso-intense on TlWI and hyperintense on both T2WI and DWI images with an even lower TlWI and higher T2WI SI core at the hilum. Both T2WI and DWI SI showed no significant difference between two pathological groups （P 〉 0.01） in popliteal fossa. The mean ADC value of inflammatory nodes [（1.199±0.281） ×10^-3 mm^2/s] was significantly higher than that of metastatic nodes [（0.858 ± 0.090） ×10^-3 mm^2/s, P 〈 0.01]. On ADC map, a high ADC value central area could be seen in most of the lymph nodes no matter benign or malignant. ADC value gave out the largest area under curve （AUCADC =     

不同转移倾向小鼠肝癌瘤株与冰切组织体外作用的实验研究

本实验利用小鼠腹水型肝癌(H_(22))的肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))与淋巴结转移倾向亚株(H_(22)SL_(10))和小鼠的心、肺、肝、肾、淋巴结冰切组织于体外混合培养,观察了不同转移能力的肿瘤细胞与正常组织间的相互作用。于混合培养24、48h后,计数冰切组织上粘附的肿瘤细胞,肝、肾、淋巴结上粘附的H_(22)细胞多于其它脏器。H_(22)SP_(10)主要粘附于肝、肾、肺,而H_(22)SL_(10)则主要粘附于淋巴结,几乎不粘附于肺组织。混合培养后的生长曲线表明加入的正常组织对三种瘤细胞生长具有不同作用,加入的五种组织对H_(22)生长均有促进作用,加入心、肝、肾组织使H_(22)SP_(10)细胞于培养48h之前呈递增趋势,而加入肺、淋巴结组织使H_(22)SP_(10)细胞生长数低于对照组,加入心脏组织96h后H_(22)SL_(10)细胞数开始高于对照组,而加入其它组织均使H_(22)SL_(10)细胞数低于对照组。该结果表明在活体中呈器官倾向性转移的瘤细胞在体外具有与相应组织特异性粘附的能力,而且这些细胞与不同宿主组织间存在不同相互作用。     

小鼠宫颈癌腹水瘤U_(14)及其亚株侵袭特性的初步研究

本文将小鼠宫颈癌腹水瘤u_(14)和经本教研室活体筛选出的倾向于肺转移的u_(14)A-P_(11)和倾向于淋巴转移的u_(14)-AL_(10)两亚株,用鸡胚绒毛尿囊膜接种的体内方法和与经胰酶不同处理的BALB/C小鼠腹膜组织共同培养的体外方法,对三种瘤细胞的侵袭特性进行研究。结果证明,三种瘤细胞体内转移倾向的差异与其对鸡胚绒毛尿囊膜基质和小鼠腹膜基质的侵袭能力成正相关,表明瘤细胞转移的器官倾向性与瘤细胞的侵袭力有一定的关系。     

复方华蟾胶囊抗小鼠肿中瘤作用的实验研究

目的了解复方华蟾胶囊抗小鼠移植性肿瘤的作用.方法以小鼠肝癌22(H22)、小鼠肉瘤180(S180)为瘤株,应用动物移植性肿瘤的体内试验法对药物进行抗癌药效学试验.结果复方华蟾胶囊灌胃4,2 g/kg@d,连续14 d,对小鼠移植性肝癌实体型生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为38.09%,30.95%.对小鼠移植性S180实体型生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为34.7%,30.08%.复方华蟾胶囊对荷瘤小鼠的胸腺和脾脏重量无影响.结论复方华蟾胶囊在试验条件下有一定抗肿瘤作用.